支气管哮喘患者诱导痰中血管内皮生长因子的研究

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在支气管哮喘发病中的作用,以及诱导痰技术在哮喘气道炎症与气道重塑检测方面的应用价值。方法:利用ELISA法检测哮喘患者诱导痰中VEGF的浓度并检测各种炎症细胞的数量。结果:中重度哮喘患者与健康对照组相比痰中VEGF的水平有显著性差异(P(0.05)。嗜酸性粒细胞数与VEGF水平呈正相关。结论:诱导痰中嗜酸性粒细胞、血管内皮生长因子检测可用于评价支气管哮喘气道炎症与气道重塑。

去整合素金属蛋白酶33对气道血管内皮细胞增殖和管腔形成的影响及作用机制

目的探索沉默气道血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSMCs)的去整合素金属蛋白酶33(adisintegrin and metalloproteinase-33,ADAM33)基因表达对共培养体系中气道血管内皮细胞(Vascular endothelial cell,VECs)增殖、管腔形成的影响和作用机制。方法构建人主动脉平滑肌细胞(Human aortic smooth muscle cells,HASMCs)和人肺微血管内皮细胞(Human pulmonary microvascular endothelial cells,HPMECs)的共培养体系。通过慢病毒转染技术沉默ADAM33基因表达,将实验对象分为内皮细胞空白组、共培养组、共培养+shRNA阴性对照组、共培养+ADAM33-shRNA组。ELISA方法检测共培养体系sADAM33、VEGFA、VEGER2、ang-1和ang-2的表达;CCK-8、Transwell实验观察HPMECs的增殖、管腔形成能力;Western-blotting方法检测Tie2/PI3K/Akt/mTOR信号通路关键分子Tie2、PI3K、AKT、mTOR的蛋白表达和AKT、mTOR磷酸化水平。结果:(1)与共培养组(0.851±0.036)和共培养+shRNA阴性对照组(0.828±0.047)相比,共培养+ADAM33shRNA组OD值(0.699±0.038)显著减低(P<0.05);(2)与共培养组(159.169±15.740)和共培养+shRNA阴性对照组(157.357±21.612)相比,共培养+ADAM33shRNA组的成管长度(120.812±2.791)也显著减低(P<0.05);(3)沉默共培养体系中HASMCs的ADAM33基因表达后,VEGFA、VEGFR2、ang-1和ang-2等促血管生成因子表达含量明显减低(P<0.05),同时Tie2、PI3K、p-Akt、p-mTOR的表达水平下降(P<0.05)。结论沉默ADAM33的基因表达能够减少sADAM33从气道VSMCs的细胞膜上脱落释放,通过降低VEGF/VEGFR的表达、抑制Tie2/PI3K/Akt/mTOR通路活性而调控气道VECs的增殖和管腔形成能力,进而参与哮喘气道血管重塑。