糖皮质激素调控哮喘大鼠气道重塑中TGF-β_1/Smad信号通路的研究

目的观察糖皮质激素对哮喘大鼠气道重塑中转换生长因子β1(TGF-β1)/Smad信号通路的作用。方法以卵清白蛋白(OVA)致敏与激发建立哮喘大鼠气道重塑模型。SPF级♂SD大鼠40只分为对照组(A组)、哮喘组(B组)、布地奈德组(C组)和地塞米松干预组(D组),每组10只。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中TGF-β1的浓度,免疫组化法检测肺组织TGF-β1、P-Smad2、P-Smad3、Smad6和Smad7蛋白的表达。结果与A组比较,B组支气管壁厚度(Wat)、平滑肌厚度(Wam)、血清、BAFL中TGF-β1的浓度、P-Smad2和P-Smad3的蛋白表达均增高,Smad6、Smad7的蛋白表达低于A组,经布地奈德组和地塞米松干预后,Wat、Wam、血清、BAFL中TGF-β1的浓度、TGF-β1、P-Smad2和P-Smad3的蛋白表达均下降,Smad6、Smad7的蛋白表达增强。C组和D组Wat、Wam、血清、BAFL中TGF-β1的浓度、TGF-β1P-Smad2、P-Smad3、Smad6和Smad7的蛋白表达比较无明显差异。免疫组化显示TGF-β1和Smad6蛋白表达于胞质,Smad7、P-Smad3和P-Smad2蛋白表达于胞质和胞核,主要表达于支气管上皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞及散在的炎性细胞。大鼠肺组织中Smad6蛋白和Smad7蛋白表达呈正相关,P-Smad2蛋白和P-Smad3蛋白表达呈正相关。结论糖皮质激素可通过调控TGF-β1/Smad信号通路而拮抗哮喘气道重塑。

支气管哮喘患者血清25-(OH)D_3、TGF-β_1水平与气道重塑的关系

目的探讨支气管哮喘患者血清25羟维生素D_3[25-(OH)D_3]、转化生长因子β_1(TGF-β_1)水平与气道重塑的关系。方法选择97例支气管哮喘患者为观察组,58例健康体检者为对照组。采用ELISA法检测两组血清25-(OH)D_3、TGF-β_1;两组均行高分辨率胸部CT扫描,检测支气管管壁厚度与外径比值(T/D)、气道壁面积占气道总截面积百分比(WA%)。采用Pearson法分析支气管哮喘患者血清25-(OH)D_3、TGF-β_1与T/D、WA%及第1秒用力呼气容积(FEV_1%)、第1秒用力呼气容积占用力肺活量百分比(FEV_1/FVC%)的相关性。结果与对照组相比,观察组血清25-(OH)D_3及FEV_1%、FEV_1/FVC%下降(P均<0.05),血清TGF-β_1及T/D、WA%升高(P均<0.05)。支气管哮喘患者血清25-(OH)D_3水平与FEV_1%和FEV_1/FVC%呈正相关(r分别为0.686、0.699,P均<0.05),与TGF-β_1、T/D和WA%呈负相关(r分别为-0.731、-0.691、-0.712,P均<0.05);血清TGF-β_1水平与T/D、WA%呈正相关(r分别为0.703、0.716,P均<0.05),与FEV_1%和FEV_1/FVC%呈负相关(r分别为-0.708、-0.722,P均<0.05)。结论支气管哮喘患者血清25-(OH)D_3下降、TGF-β_1升高,二者的水平变化与患者气道重塑有关。

射干麻黄汤对慢性哮喘小鼠气道重塑和TGF-β_1的影响

目的:探讨射干麻黄汤对慢性哮喘小鼠气道重塑和转化生长因子-β_1(TGF-β_1)的影响。方法:健康清洁级BALB/c小鼠40只,每组10只,随机分为A组:正常对照组;B组:哮喘模型组;C组:地塞米松组;D组:射干麻黄汤组。建立慢性哮喘小鼠模型后,分别予以不同干预,取材后采用HE染色、病理图像分析、ABC-ELISA法、免疫组化、实时定量PCR技术等方法检测气道重塑及TGF-β_1的变化情况。结果:与A组比较,B、C、D组小鼠血管管壁厚度、气管平滑肌层厚度、气道旁和血管旁胶原纤维含量、BALF中TGF-β_1含量、肺组织TGF-β_1及TGF-β_1mRNA表达强度均明显增加,具有显著性差异(P<0.05);与B组比较,C组、D组上述指标均明显降低,具有显著性差异(P<0.05);C组与D组比较无显著性差异。结论:射干麻黄汤可抑制BALB/c哮喘小鼠气道重塑的发生,其机制有可能是通过降低TGF-β_1的表达而实现的。

降气化痰推拿法对慢性哮喘幼鼠气道重塑及TGF-β1、Smad3表达的影响

目的探讨降气化痰推拿法对慢性哮喘幼鼠气道重塑的治疗作用及潜在机制。方法将50只SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为对照组(A组)、模型组(B组)、推拿组(C组)、地塞米松组(D组)、推拿+地塞米松组(E组),每组10只。其中除A组外,其余小鼠均制备哮喘模型。第16天开始,C、D、E组进行相应推拿、地塞米松、推拿+地塞米松治疗,B组注射等量生理盐水;第22天开始,各组连续激发7 d。比较各组的肺功能、血清白介素4(interleukin 4,IL-4)水平、肺组织病理改变以及肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3 mRNA和蛋白表达水平。结果肺能功方面,与A组相比,各组给药后的气道狭窄指数明显升高、肺顺应性下降,且C、D、E组的气道狭窄指数低于B组,肺顺应性高于B组。在高浓度乙酰胆碱(6.250 g·L^(-1),12.500 g·L^(-1),25.000 g·L^(-1))给药时,E组的气道狭窄指数明显低于C、D组,且C组低于D组,C组肺顺应性低于D组(P<0.05);炎性水平方面,与A组相比,各组IL-4水平、炎症细胞浸润程度均升高,且C、D、E组均低于B组,E组低于C、D组,差异具有统计学意义(P<0.05);HE染色结果显示,A组肺组织无明显炎性改变,B组炎性细胞浸润严重,C组、D组、E组轻微炎症浸润,且E组浸润程度低于C、D组;与A组相比,各组气道壁厚度和气道平滑肌厚度升高,且、D、E组均低于B组,E组低于C、D组;与A组相比,各组TGF-1β、Smad3 mRNA和蛋白水平均升高,且C、D、E组均低于B组,E组低于C、D组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论降气化痰推拿法能够有效改善慢性哮喘幼鼠的气道重塑,降低炎性反应水平,减轻炎性浸润,其机制可能与下调TGF-β1/Smad3通路表达相关。

COPD患者肺组织中Smad蛋白、TGF-β_1表达与气道重塑的关系

目的观察COPD患者肺组织中Smad蛋白、TGF-β1的表达及与气道重塑的相关性。方法标本取自48例因肺部孤立性结节行肺叶切除术患者的肺组织,按术前肺功能分为非COPD组(A组,24例)及COPD组(B组,24例)。所取肺组织HE染色后光镜下观察肺组织的病理形态学改变,以半定量图像分析法测量小气道管壁和平滑肌层厚度。用Western blot法检测肺组织中Smad2、Smad3、Smad7及TGF-β1的表达。结果 (1)B组Smad2、Smad3及TGF-β1表达均高于A组,Smad7的表达均高于A组,差异有统计学意义(均P<0.05),且Smad2、Smad3蛋白与TGF-β1表达呈正相关(均P<0.05),而Smad7蛋白与TGF-β1表达呈负相关(P<0.05);(2)肺组织Smad2、Smad3、TGF-β1的表达与单位长度的管壁面积(WAt/Pi,μm2/μm)及单位长度的平滑肌层面积(WAsm/Pi,μm2/μm)表达均呈正相关(均P<0.05);Smad7蛋白与单位长度的管壁面积(WAt/Pi,μm2/μm)及单位长度的平滑肌层面积(WAsm/Pi,μm2/μm)表达呈负相关(均P<0.05)。结论在COPD肺组织气道重塑中,TGF-β1/Smads信号转导途径是关键,其中Smad3、Smad2发挥调节作用,而Smad7表现出抑制作用。

三氧化二砷对实验性小鼠支气管哮喘气道重塑及TGF-β_1、VEGF表达的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对支气管哮喘气道重塑的影响。方法将实验BALB/c小鼠40只随机分为正常对照组、模型组、地塞米松治疗组和As2O3治疗组,模型组通过腹腔注射卵白蛋白(OVA)致敏及反复雾化OVA吸入激发8周,建立支气管哮喘气道重塑动物模型,地塞米松和As2O3治疗组每次雾化吸入前分别给予地塞米松2 mg/kg和As2O34 mg/kg腹腔内注射。应用HE染色,观察支气管、肺组织的病理形态改变,应用图像分析系统测定气道重塑指标,应用免疫组化法检测各组小鼠肺组织中的转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组肺组织中的TGF-β1和VEGF mRNA表达水平。结果模型组小鼠经过8周过敏原激发后,肺组织病理学发生了较典型的哮喘样改变;地塞米松组和As2O3组小鼠的肺部组织病理学改变较模型组为轻,两组之间无显著差异。模型组小鼠肺组织中TGF-β1、VEGF的蛋白和mRNA表达均增强;与模型组相比,地塞米松组和As2O3组肺组织中TGF-β1、VEGF的蛋白和mRNA的表达均较弱,但仍强于正常对照组。结论致敏后给予8周过敏原激发可成功建立小鼠哮喘气道重塑模型;地塞米松和As2O3治疗均可抑制哮喘的气道重塑过程,其作用机制可能与抑制TGF-β1、VEGF的表达有关。

麻黄碱调控TGF-β1/Smads通路对支气管哮喘小鼠气道重塑的影响

目的 探究麻黄碱对支气管哮喘小鼠气道重塑的影响及对转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads通路的调控作用。方法 将所有小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组、麻黄碱低剂量组、麻黄碱高剂量组、麻黄碱高+TGF-β1激活剂组,每组12只。除对照组,其余组小鼠腹腔注射含有40μg卵清蛋白(OVA)和2 mg 10%氢氧化铝的致敏液诱导哮喘模型。8周后,检测各组小鼠气道高反应性;对支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞进行计数;ELISA检测BALF中白细胞介素(IL)-4、IL-5和IL-13的水平;苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察小鼠肺组织的病理学变化及胶原纤维面积;免疫组织化学检测小鼠肺组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;Western blot检测小鼠肺组织中TGF-β1/Smads通路相关蛋白的表达。结果 与对照组相比,模型组小鼠不同乙酰甲胆碱剂量下的气道高反应性、气道壁的总面积(Wat)/基底膜的周长(Pbm)比值、胶原纤维面积、嗜酸性粒细胞及IL-4、IL-5、IL-13含量、α-SMA、TGF-β1表达及p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3比值均升高(P<0.05),Smad7表达降低(P<0.05);与模型组相比,地塞米松组和麻黄碱低、高剂量组小鼠不同乙酰甲胆碱剂量下的气道高反应性、Wat/Pbm比值、胶原纤维面积、嗜酸性粒细胞及IL-4、IL-5、IL-13含量、α-SMA、TGF-β1表达及p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3比值均降低(P<0.05),Smad7表达升高(P<0.05);与麻黄碱高剂量组相比,麻黄碱高+TGF-β1激活剂组小鼠不同乙酰甲胆碱剂量下的气道高反应性、Wat/Pbm比值、胶原纤维面积、嗜酸性粒细胞及IL-4、IL-5、IL-13含量、α-SMA、TGF-β1表达及p-Smad2/Smad2、pSmad3/Smad3比值均升高(P<0.05),Smad7表达降低(P<0.05)。结论 麻黄碱可以改善支气管哮喘小鼠的气道重塑,其机制与调控TGF-β1/Smads信号通路有关。

与TGF-β_1相关的干预哮喘气道重塑的方法研究进展

转化生长因子TGF-β(主要是TGF-β1)是引起哮喘气道重塑的重要细胞因子,针对TGF-β1研究干预哮喘气道重塑的方法可能取得新的突破。糖皮质激素、干扰素-r、一些中医药如川芎嗪、雷公藤、银杏叶等可能通过干预TGF-β1的表达来干预气道重塑。

咳喘平冲剂对幼龄哮喘大鼠气道重塑TGF-β_1和IL-1_2的影响

目的:探讨咳喘平冲剂对幼龄哮喘大鼠气道重塑TGF-β1和IL-12的影响。方法:将SD大鼠40只随机分为模型组、空白对照组、咳喘平冲剂组,通过对大鼠采用卵蛋白致敏,并反复雾化吸入卵蛋白建立哮喘气道重塑模型。肺组织石蜡切片行免疫组化染色,计算机图像处理软件测定TGF-β1表达(以染色吸光度值表示)。ELISA法检测血清IL-12的含量。结果:模型组大鼠TGF-β1、IL-12含量与空白对照组比较差异具有极显著性(P<0.01);咳喘平冲剂组大鼠TGF-β1、IL-12含量与模型组大鼠比较差异具有显著性(P<0.05)。结论:咳喘平冲剂能够降低哮喘大鼠肺组织TGF-β1含量,升高血清IL-12含量,从而减轻气道炎症,干预气道重塑。

基于TGF-β1/Smads通路探讨龟鹿补肾丸对COPD大鼠气道重塑的影响

目的探究龟鹿补肾丸对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠气道重塑的干预作用及其机制。方法将60只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组,模型组,龟鹿补肾丸低、中、高剂量(1.8 g/kg、3.6 g/kg、7.2 g/kg)组和氨茶碱(30.0 mg/kg)组,每组10只。采用气管内滴注脂多糖联合烟熏法复制COPD模型,自第29天起给予正常对照组、模型组灌胃生理盐水,其余各治疗组分别给予相应药物,连续给药28 d。实验第57天检测肺功能、肺组织病理学变化;ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中MMP-9、MMP-12、TIMP-1含量;IHC法检测肺组织TGF-β1、COL-I、α-SMA的表达;Western blot法检测肺组织TGF-β1、p-Samd2、p-Samd3的表达。结果与正常对照组相比,模型组大鼠呼气峰流速(PEF)、吸气峰流速(PIF)、每分钟通气量(MV)、呼出50%潮气量时呼气流速(EF50)下降,肺组织炎性细胞浸润明显,平均肺泡数(MAN)减少、肺平均内衬间隔值(MLI)增加,气道胶原纤维沉积明显增多,肺泡灌洗液(BALF)中MMP-12、TIMP-1含量升高,肺组织TGF-β1、p-Samd2、p-Samd3、COL-I、α-SMA表达上调。经龟鹿补肾丸干预后,可升高PIF、PEF、MV、EF50,减轻肺组织炎性细胞浸润,MAN值增加,MLI值减少,抑制胶原沉积,降低MMP-12、TIMP-1含量,下调肺组织TGF-β1、p-Samd2、p-Samd3、COL-I、α-SMA的表达。结论龟鹿补肾丸可以改善COPD模型大鼠的肺功能,减轻气道重塑程度,其机制可能与调节TGF-β1/Smads信号通路有关。

针刺对气道重塑小鼠TGF-β1/Smads通路的影响

目的探讨针刺对气道重塑小鼠肺组织TGF-β1/Smads信号通路的调控作用。方法将30只SPF级小鼠随机分为空白组、模型组、针刺组,10只/组。模型组、针刺组制作小鼠哮喘模型。针刺组自造模之日起第10天行针刺操作,穴取肺俞、大椎、足三里(两侧),每次留针20 min,隔日针刺1次,共治疗7次。并于最后1次针刺结束后24 h行1%卵蛋白雾化吸入3 d,最后1次激发后24 h于不同浓度乙酰甲基氯化胆碱(Mch)吸入下通过无创体积描计器检测小鼠肺阻力,然后采用HE染色法观察小鼠肺组织的病理变化,ELISA检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)及血清中TGF-β1的表达,Western blot对各组气道平滑肌中差异蛋白进行检测。将针刺组分离提取气道平滑肌细胞,空白组加入PBS液,抑制组加入TGF-β1抑制剂(LY2157299)分别进行培养,然后Western blot检测两组细胞type-I及Smads蛋白表达相对量。结果模型组小鼠气管痉挛明显,管腔狭窄,支气管黏膜增厚,部分上皮细胞脱落,肺泡隔增厚,气道平滑肌明显增厚;针刺组较模型组有明显改善;不同浓度Mch激发后模型组小鼠肺阻力最高,较其它两组均差异有统计学意义(P<0.05)。且3组小鼠的肺阻力都随着Mch的浓度加大而增加。模型组血清中TGF-β1阳性表达OD值较空白组增加(P<0.05);针刺组阳性表达低于模型组(P<0.05)。针刺组BALF中TGF-β1含量低于模型组(P<0.05)高于空白组(P<0.05)。模型组气道平滑肌中α-SMA、TGF-β1及Smads蛋白表达相对量均高于针刺组及空白组(均P<0.05),抑制组细胞中type-I及Smads蛋白表达相对量较空白组高(P>0.05)。结论针刺能通过抑制气道TGF-β1的表达,下调Smads及α-SMA的表达来抑制气道重塑,减轻哮喘气道炎性反应,且抑制TGF-β1后,type-I及Smads蛋白表达相对量较高,针刺可以通过TGF-β1/Smads通路来控制哮喘进展,为临床上哮喘的治疗提供理论依据。

TGF-β1/Smads通路在哮喘大鼠气道重塑模型中的动态变化

目的探讨TGF-β1/Smads通路在哮喘大鼠气道重塑模型中的动态变化,及其在哮喘发病中的可能机制。方法以卵蛋白雾化复制哮喘模型,在激发哮喘2、4、8周后处死,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1、α-SMA的mRNA表达水平,用免疫组织化学染色法检测支气管肺组织TGF-β1、α-SMA、Smad3、Smad4、Smad7的蛋白表达,同时用图像分析法测量大鼠气道形态学参数。结果大鼠哮喘激发后2周开始出现气道平滑肌增厚,并随着激发时间的延长逐渐增厚。同时,哮喘大鼠支气管肺组织TGF-β1、α-SMA、Smad3、Smad4的蛋白表达以及TGF-β1、α-SMA的mRNA表达水平逐渐升高,而Smad7的蛋白表达逐渐下降,呈现一定的动态变化。结论哮喘气道重塑的改变是一个动态的过程,TGF-β1/Smads通路在哮喘大鼠气道重塑模型中呈现动态变化过程,其中TGF-β1、α-SMA、Smad3、Smad4与气道重塑呈正相关,而Smad7则与气道重塑呈负相关。

基于TGF-β1/Smads信号通路中医药防治哮喘气道重塑研究进展

小儿支气管哮喘是儿科临床常见性、难治性疾病,中医药在治疗小儿支气管哮喘方面具有显著优势,但其作用机制目前尚未完全阐明。国内外研究发现TGF-β1/Smads信号通路与哮喘气道重塑具有密切关系。该文对TGF-β1/Smads信号通路的信号转导途径和生物学功能进行了详细的阐述,综述了TGF-β1/Smads信号通路与小儿支气管哮喘气道重塑之间的相关性以及中医药通过对TGF-β1/Smads信号通路的调控作用治疗小儿支气管哮喘的机制。同时,对TGF-β1/Smads信号通路在中医药中的研究进行了展望。

黄芪在哮喘大鼠气道重塑模型中对TGF-β1/Smad3信号通路的调控

目的:研究转换生长因子β1(TGF-β1)/Smad3信号通路在哮喘气道重塑中的作用,探讨黄芪对TGF-β1/Smad3信号通路及哮喘气道重塑的调控作用。方法:SPF级雄性SD大鼠30只随机分为3组,分别为对照组(A组)、哮喘组(B组)、黄芪组(F组),每组10只。用卵白蛋白(OVA)致敏与激发建立大鼠哮喘模型。应用图像分析技术测定肺内支气管壁厚度(Wat)及平滑肌厚度(Wam)等重塑指标;免疫组化法及RT-PCR法检测肺组织TGF-β1、P-Smad3蛋白及mRNA的表达。结果:哮喘组大鼠Wat、Wam较对照组显著增加(均P<0.01),黄芪组与哮喘组比较有显著降低(均P<0.01),但仍高于对照组(P<0.01);免疫组化染色阳性结果呈棕黄色,TGF-β1蛋白表达于胞浆,P-Smad3蛋白表达于胞浆和胞核,主要表达于支气管上皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞及散在的炎性细胞。哮喘组TGF-β1和P-Smad3的蛋白表达均显著高于对照组(均P<0.01);黄芪组TGF-β1、P-Smad3的蛋白表达均显著低于哮喘组(均P<0.01),但仍高于对照组(均P<0.01)。肺组织中TGF-β1 mRNA及Smad3 mRNA表达:哮喘组TGF-β1和P-Smad3的蛋白表达均显著高于对照组(均P<0.01);黄芪组TGF-β1、P-Smad3的蛋白表达均显著低于哮喘组(均P<0.01),但仍高于对照组(均P<0.01)。结论:TGF-β1/Smad3信号通路参与了哮喘气道重塑过程,黄芪可通过调控TGF-β1/Smad3信号通路而拮抗气道重塑。

姜辛夏颗粒对哮喘大鼠气道重建TGF-β_1表达的影响

目的研究姜辛夏颗粒对卵蛋白致敏哮喘SD大鼠肺组织中TGF-β1水平变化的影响。方法雄性SD大鼠52只随机分为4组。以卵蛋白(OVA)致敏激发制备大鼠哮喘模型,并用地塞米松、姜辛夏颗粒灌胃分别治疗,与哮喘模型组、地塞米松组比较。主要测定各组大鼠肺组织中TGF-β1表达及各组支气管管腔内周长、平滑肌面积以及厚度变化。结果地塞米松组、姜辛夏颗粒治疗组与哮喘模型组比较,肺组织中TGF-β1水平表达明显降低(P<0.01);姜辛夏颗粒治疗组能有效降低肺组织中TGF-β1水平表达,与地塞米松组相比无明显差异(P>0.05);与哮喘模型组比较,地塞米松组、姜辛夏颗粒组的WAt/Pbm、WAi/Pbm与WAm/Pbm显著低于哮喘模型组(P<0.01)。结论 TGF-β1在调节哮喘气道重建中起重要作用;姜辛夏颗粒可以下调TGF-β1的表达,阻止哮喘气道重建的发生发展。

哮喘豚鼠气道TGF-β1重塑及黄芪的干预研究

目的观察黄芪对慢性哮喘豚鼠模型气道重塑的影响及机制。方法 SPF级雄性豚鼠40只随机分成:对照组、模型组、黄芪注射液组、地塞米松组,每组10只。采取HE染色观察气道重塑,图像分析仪分析肺组织气道重塑情况,免疫组化方法测气道中TGF-β1蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组气道壁结构发生改变,支气管管腔变窄,气道上皮细胞脱落,平滑肌增生/增殖肥大。经黄芪或地塞米松治疗后上述改变明显减轻。模型组支气管壁厚度、支气管壁平滑肌厚度、支气管壁平滑肌细胞核数量分别较对照组显著增加。模型组TGF-β1蛋白的积分光密度值(IOD)均较正常组明显增高,黄芪治疗后TGF-β1 IOD值显著下降。结论黄芪注射液能够抑制慢性哮喘模型的气道重塑,其机制可能通过抑制TGF-β1的表达有关。

平喘颗粒对哮喘大鼠气道重塑及TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的观察平喘颗粒对哮喘大鼠气道重塑及TGF-β1/Smads信号通路的影响。方法40只Wistar大鼠,随机分为对照组、哮喘组(OVA)、平喘颗粒组(OVA+平喘颗粒)、地塞米松组(OVA+地塞米松),每组10只。应用OVA致敏液[10 mg OVA+100 mg Al(OH)_(3)]制备慢性哮喘大鼠模型。采用Masson染色观察肺组织病理变化,计算机图像分析系统(Image-Pro Plus Version 6.0)检测气道病理变化,蛋白质印迹法(Western blotting)检测肺组织TGF-β1、Smad2和Smad3蛋白表达。结果与对照组比较,哮喘组大鼠WAm/Pbm、WAi/Pbm明显增高(P<0.05),肺组织中TGF-β1、Smad2和Smad3的表达水平明显增高(P<0.05);与哮喘组比较,平喘颗粒组和地塞米松组大鼠WAm/Pbm、WAi/Pbm明显下降(P<0.05),肺组织中TGF-β1、Smad2和Smad3的表达水平明显下降(P<0.05)。结论平喘颗粒可以改善哮喘气道重塑,其机制可能与调控TGF-β1/Smads信号通路有关。

TGF-β1在COPD气道重塑中的作用及抗胆碱能药物干预效应实验研究

目的通过分析TGF-β1在COPD小鼠气道重塑中的作用及抗胆碱能药物对其的干预作用,进一步探讨COPD形成及治疗机制。方法采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)滴入小鼠气管内制作COPD模型。30只小鼠采用数字表法随机均分为4组:对照组(生理盐水气道滴入)、COPD模型组及噻托溴铵(雾化吸入)、山莨菪碱(雾化吸入)两组干预组。经过6周的造模+干预治疗之后,处死小鼠,右下肺用以病理切片,左肺下叶与右肺中叶制作成肺匀浆液。ELISA法检测肺组织匀浆TGF-β1的含量;Western blot法检测肺组织中Smad-2、pSmad-2及α-SMA的表达;肺组织切片观察:Masson染色观察肺组织胶原沉积及平滑肌层增厚情况;HE染色观察气道炎症情况。结果 COPD模型组出现TGF-β1、pSmad-2/Smad-2、α-SMA显著增高现象。此外,还出现气道管壁胶原沉积、平滑肌层增厚、气道炎症反应等改变。干预组较模型组,TGF-β、pSmad-2/Smad-2、α-SMA无明显增高且炎症反应轻微、气道管壁胶原沉积、平滑肌增生情况不明显。结论 TGF-β1在气道重塑上有着重要作用,抗胆碱能药物可干预上述现象。提示抗胆碱能药物除了传统观念的支气管扩张作用,在一定程度上还起到抗炎及抑制气道重塑的作用。

哮喘大鼠血清、支气管肺泡灌洗液及肺组织中转化生长因子-β_1与哮喘气道重塑

目的观察哮喘大鼠模型血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)中转化生长因子-β_1(TGF-β_1)的含量及肺组织中TGF-β_1的表达,分析其相关性及与哮喘气道重塑的关系,为临床哮喘的诊断和治疗提供理论依据。方法Wistar大鼠随机分为2组,正常对照组和哮喘模型组,每组20只。用卵蛋白(OVA)致敏和激发制成哮喘大鼠模型,用Elisa法测定血清及BALF中TGF-β_1的含量,免疫组化法测定肺组织中TGF-β_1的表达,Masson染色观察胶原沉积的情况,计算机图像分析系统评价呼吸性细支气管平滑肌厚度及上皮损伤程度评分等气道重塑指标。结果造模后,与对照组相比模型组血清中TGF-β_1的含量明显减低(P<0.05);BALF中TGF-β_1的含量增加(P<0.01);肺组织中TGF-β_1的表达增多(P<0.01)。哮喘大鼠气道黏膜上皮损害、气道平滑肌厚度、气道胶原蛋白的沉积较对照组明显增加。结论BALF中TGF-β_1的含量增加、肺组织中TGF-β_1的表达增加,加重了哮喘气道重塑;血清中TGF-β_1含量减少,提示可以通过检测血清中TGF-β_1为哮喘的诊断提供依据、间接了解气道重塑。

血管活性肠肽对哮喘气道重塑小鼠肺组织转化生长因子β_1表达的影响

目的探讨血管活性肠肽对哮喘气道重塑小鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法 SPF级雌性Balb/c小鼠30只,随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、血管活性肠肽组(C组),每组10只。B组、C组动物建立哮喘气道重塑模型。HE染色观察各组小鼠支气管及肺组织病理改变,以病理图像分析测量小鼠肺组织中支气管基底膜周长(Pbm)、支气管壁面积(WAi)和平滑肌层面积(WAm);实时定量PCR方法检测各组小鼠肺组织TGF-β1 mRNA表达,Western blot方法检测各组小鼠肺组织TGF-β1蛋白表达。结果 B组小鼠肺组织病理改变:胶原沉积和炎性细胞浸润,平滑肌层增厚,其WAi/Pbm及WAm/Pbm较A组明显增加(P<0.05);C组上述指标较A组增加,但较B组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。B组TGF-β1mRNA和蛋白表达水平均高于A组,差异有统计学意义(P<0.05);C组TGF-β1 mRNA和蛋白表达水平均低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血管活性肠肽有抑制气道重塑作用,其机制可能与减少TGF-β1表达有关。