气相色谱法测定氟苯尼考中二乙胺和三乙胺残留

建立气相色谱法测定氟苯尼考中二乙胺和三乙胺残留的方法。采用Inert Cap for Amines毛细管胺类测试柱,经惰性处理的衬管,载气为氮气,流速3.0 mL/min,分流比为5∶1,检测器为FID。结果表明:该方法中二乙胺、三乙胺与其相邻峰完全分离;对照峰面积RSD均小于2%;二乙胺的检测限浓度为1.84μg/mL,定量限浓度为3.67μg/mL,在3.67~13.76μg/mL浓度范围内线性相关系数r为0.995 9;三乙胺的检测限浓度为0.50μg/mL,定量限浓度为1.50μg/mL,在1.50~374.63μg/mL浓度范围内线性相关系数r为0.998 6;二乙胺的回收率90.7%~103.0%,三乙胺的回收率90.8%~97.3%;小幅改变色谱条件,耐用性良好。方法操作简单、准确度高、重复性好,适用于氟苯尼考中二乙胺、三乙胺残留的测定。

动物可食性组织中甲砜霉素、氟苯尼考胺及氟苯尼考残留的测定

建立高效液相色谱法测定动物可食性组织中氟苯尼考、氟苯尼考胺和甲砜霉素残留量。试样经过乙腈-乙酸乙酯-氨水(体积比5∶15∶80)混合提取液提取,4%氯化钠溶液和正己烷液分配净化,再经HLB固相萃取柱净化,高效液相色谱仪测定,外标法定量。结果表明,甲砜霉素在25~5000 ng/mL、氟苯尼考胺和氟苯尼考在5~500 ng/mL浓度范围内呈现良好的线性关系,甲砜霉素检测限为10μg/kg,氟苯尼考及氟苯尼考胺检测限为2.0μg/kg,回收率均值为73.6%~91.2%,批内、批间RSD值均小于20%。本方法专属性强,灵敏度高,适用于动物可食性组织中甲砜霉素、氟苯尼考胺及氟苯尼考残留的测定。

蛋鸡产蛋前用药后氟苯尼考在鸡蛋中的残留代谢规律研究

【目的】旨在研究蛋鸡产蛋前用药后氟苯尼考在鸡蛋中的残留代谢规律,探明其在蛋鸡产蛋前的休药时间,为指导鸡蛋的安全生产提供科学依据。【方法】以378只健康的罗曼粉壳蛋鸡为试验对象,对蛋鸡产蛋前进行氟苯尼考混饲给药,采集鸡蛋样品,采用液相色谱-串联质谱对鸡蛋样品中的氟苯尼考和氟苯尼考胺残留量进行定量分析,利用代谢残留模型和休药期软件(WT 1.4)计算出氟苯尼考在蛋鸡产蛋前用药的休药时间。【结果】蛋鸡产蛋前使用氟苯尼考后,鸡蛋中氟苯尼考和氟苯尼考胺残留量随用药时间增加逐渐增大,到停药第1天时,药物残留量达到峰值,约为307.64μg/kg;然后随着停药时间的增加而逐渐下降。至停药第10天,鸡蛋中药物残留总量降至10μg/kg以下;至停药第12天,残留量降至检出限以下。利用残留消除规律模型和WT1.4软件计算的氟苯尼考在蛋鸡产蛋前的休药时间分别是9.70 d和10.26 d。验证试验结果显示,停药第9天后,所有鸡蛋样品中药物残留量均降至10μg/kg以下,结合休药期计算结果,建议氟苯尼考在蛋鸡开产期前用药的安全间隔期为10 d。而试验期间鸡群从第1枚鸡蛋生产到理论开产期的时间间隔为32 d。【结论】由于蛋鸡在理论开产期前产蛋的不规律性,为保障消费者的健康,建议将蛋鸡产蛋前使用氟苯尼考粉后的休药时间定为理论开产期前的42 d。

高效液相色谱法测定氟苯尼考原料药

本研究建立了氟苯尼考药的液相色谱测定方法。通过研究色谱柱分离、定性波长、流动相选择等条件确定检测方法。并通过检出限、定量限、回收率和重复性实验评价方法。结果表明,选择TC-C18柱作为分离柱,最佳波长为223 nm,最佳流动相为25%乙腈水溶液,氟苯尼考线性达到0.99975,检出限为0.05μg/mL,定量限为0.15μg/mL,添加量为0.5~3μg时回收率达到88.7%~100%,重复性RSD达到0.64%。此方法高效准确,能为氟苯尼考药主含量测定提供参考,也能为其他兽药氟苯尼考的测定提供思路。

氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺在肉鸡中残留消除规律

目的评估氟苯尼考(florfenicol,FF)及其代谢物氟苯尼考胺(florfenicol amine,FFA)在不同品种肉鸡中的残留消除规律。方法选用AA肉鸡、WOD168肉鸡(快速型)、雪山鸡和狼山鸡(慢速型)为试验对象,于出栏前3周开始按FF 25 mg/kg体重饮水给药,连用5 d,于停药后1、3、5、7、10、14 d采集肌肉、肝脏、肾脏、皮脂,检测其中的FF和FFA残留量,并利用WT1.4软件计算休药期。结果FF及其代谢物FFA可迅速残留于肉鸡肌肉、肝脏、肾脏和皮脂中,残留物以FF为主。停药后第1 d残留量达到峰值,肾脏组织中的残留量最大;停药后第3 d,各组织中FF和FFA的残留量进入快速消除期,均低于最大残留限量值;停药后第14 d已基本消除完全。AA肉鸡、WOD168肉鸡、雪山鸡和狼山鸡休药期分别至少为3.22、3.82、4.49和4.32 d。结论FF在慢速型肉鸡体内的休药期要长于快速型肉鸡,但都小于5 d。

猪尿中多西环素、氟苯尼考和其代谢物氟苯尼考胺残留的快速检测方法及消除规律研究

通过向生猪给药盐酸多西环素可溶性粉和氟苯尼考粉,建立了基于液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)测定猪尿样中多西环素、氟苯尼考及其代谢物(氟苯尼考胺)的检测方法。用80%乙腈水溶液提取,经Cleanert MAS-Q净化管净化,用LC-MS/MS测定,基质匹配标准曲线定量。结果表明,多西环素在1~2 500μg/L、氟苯尼考在0.5~4 000μg/L、氟苯尼考胺在0.5~1 000μg/L范围内线性关系良好,相关系数大于0.995;检出限分别为2.7、 1.3、 1.3μg/L,定量限分别为8.0、 4.0、 4.0μg/L;在40、 800、 8 000μg/L加标水平下,平均回收率为72.5%~114.0%,批内和批间相对标准偏差均小于15%。将方法用于检测给药后的猪尿样,并初步研究了多西环素、氟苯尼考(以氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺之和计)在猪尿中的残留消除规律。结果表明,所采集的样品均检出两种药物残留,多西环素在猪尿中的消除时间为19 d,氟苯尼考在猪尿中的消除时间为13 d。

氟苯尼考在泰和乌鸡可食性组织中残留消除规律研究

为研究氟苯尼考可溶性粉在泰和乌鸡体内可食性组织的残留变化规律,试验选择64只110日龄健康泰和乌鸡(公母各半),按推荐剂量0.5 g可溶性氟苯尼考粉/L饮用水连续给药5 d。在停药后第0.16、1、3、5、7、9、12、15天随机屠宰4只公鸡和4只母鸡,分别采集肌肉、肝脏、肾脏、皮脂样本,采用超高效液相色谱-串联质谱联用法测定组织中氟苯尼考和氟苯尼考胺残留量,并利用WT1.4软件计算氟苯尼考在泰和乌鸡体内的休药期。结果显示,氟苯尼考和氟苯尼考胺在泰和乌鸡肌肉、肝脏、肾脏组织内残留消除较为迅速,而在皮脂组织消除相对缓慢;氟苯尼考可溶性粉在泰和乌鸡肌肉、肝脏、肾脏、皮脂中的休药时间分别为4.36 d、0.00 d、0.00 d、9.81 d。研究表明,为保证泰和乌鸡产品质量安全,氟苯尼考在泰和乌鸡体内的推荐休药期应大于10 d。

氟苯尼考残留对海洋小球藻生长及抗氧化系统的影响

随着水产养殖业的集约化发展,养殖尾水中抗生素残留可能对水生生态系统造成严重威胁,已引起全球性的关注。笔者以水产养殖中常用的饵料微藻——海洋小球藻为研究对象,探究氟苯尼考对其可能的作用效应。分析不同质量浓度氟苯尼考暴露72 h后,海洋小球藻细胞生长、色素含量、活性氧含量、丙二醛及抗氧化酶活性的响应变化。试验结果显示,海洋小球藻在氟苯尼考暴露72 h后藻细胞表现出“低促高抑”现象,藻细胞的叶绿素含量随氟苯尼考质量浓度增加呈倒“U”型趋势,0.100 mg/L组叶绿素含量最高,与对照组相比提高了74.6%;氟苯尼考胁迫会对微藻细胞膜产生氧化损伤,20 mg/L氟苯尼考暴露导致藻细胞丙二醛含量升高,是对照组的2.45倍,诱导合成类胡萝卜素,参与抵抗氧化损伤。试验质量浓度下,谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性受到显著抑制作用。与球等鞭金藻相比,海洋小球藻对氟苯尼考表现出较高的耐受性。本试验结果可为养殖尾水中抗生素残留的处理提供理论依据。

畜禽组织中甲氧苄啶和氟苯尼考的同时免疫层析检测方法研究

针对动物源性食品中甲氧苄啶(TMP)和氟苯尼考(FF)复配使用残留的问题,以乳胶微球作为示踪信号探针,建立了同时检测鸡肉和猪肉样品中甲氧苄啶和氟苯尼考的乳胶微球侧流免疫层析方法(LMs-LFIA)。基于特异性单克隆抗体7E6和SF15,通过逐步优化策略考察了探针制备条件、试纸条工作缓冲液以及样品垫处理液缓冲体系等对LMs-LFIA性能的影响。结果表明:在优化条件下,所建立的LMs-LFIA对鸡肉和猪肉样品中甲氧苄啶和氟苯尼考的可视化检出限分别为8 ng/g和12 ng/g,检测时间为8 min,且与甲氧苄啶和氟苯尼考的结构及功能类似物无明显交叉反应,方法特异性良好。所建方法对鸡、猪肉盲样的检测结果与超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)仪器确证方法一致,适用于畜禽组织样本中甲氧苄啶和氟苯尼考残留的同时检测。

基于G-四链体/硫黄素T无标记荧光适配体传感器快速检测氟苯尼考

硫黄素T(ThT)通过非共价相互作用与G-四链体结合,形成G-四链体/ThT复合物,呈现出较强荧光强度,而游离ThT荧光十分微弱。当存在氟苯尼考(FF)时,具有G-四链体结构的适配体(Apt)对靶标的高亲和力,使得Apt/FF复合物形成并释放ThT,荧光强度降低。基于这一特点,本研究设计一种灵敏快速的现场检测体系,用于检测氟苯尼考,即基于G-四链体/硫黄素T的无标记荧光适配体传感器。该适配体传感器的检测范围为0.0128~200 ng/mL,实际检出限0.0128 ng/mL,检测总时长10 min。同时,对实际加标样品(牛奶和鸡蛋)进行回收率计算,加标回收率在91.2%~117.1%之间。所建立的无标记荧光适配体传感器具有高特异性、成本低、耗时短等优点,可用于实际样品的现场检测。

流动注射-鲁米诺-KMnO_(4)化学发光抑制法测定鸡蛋中氟苯尼考残留含量

在碱性条件下,基于氟苯尼考会抑制鲁米诺-KMnO4化学发光,并且随着氟苯尼考浓度的增加,其抑制化学发光强度随之增强,从而建立流动注射-鲁米诺-KMnO4化学发光体系检测氟苯尼考的方法。分别探讨试剂用量、蠕动泵流速等参数条件对该发光强度的影响。优化条件下,在1.0×10^(-6)℃~1.0×10^(-4)g·mL^(-1)质量浓度范围内,氟苯尼考质量浓度与相对化学发光强度呈良好的线性关系,方法检出限(3σ)3.0×10^(-7)g·mL^(-1);对质量浓度8.0×10^(-5)g·mL^(-1)的氟苯尼考平行测定11次,RSD为4.88%。结果表明,建立的流动注射-化学发光分析方法简单快速,并将该方法应用于动物源性食品鸡蛋样中兽药氟苯尼考残留的分析,方法灵敏、准确、可靠,结果令人满意。

玉米烯酮与氟苯尼考对雏鸡免疫功能和生长性能的影响

玉米烯酮(zearalenone,ZEN)为常见的环境污染物,而氟苯尼考(florfenicol,FFC)则是兽医临床上应用非常广泛的抗菌药,二者极有可能同时暴露,对动物产生毒副作用,但目前尚未见相关研究报道。为探究ZEN和FFC单独与共同暴露对雏鸡生长性能和免疫功能的影响,将40只1日龄雏鸡适应性饲养2 d,于3日龄时随机分为4组,每组10只,公母各半,分别为对照组、ZEN组(按1 mg·kg^(-1)日粮剂量染毒ZEN 21 d)、FFC组(按100 mg·L^(-1)饮水给药FFC,连续5 d)和ZEN+FFC组(按1 mg·kg^(-1)日粮连续染毒ZEN 21 d的同时,前5 d连续按治疗剂量100 mg·L^(-1)饮水给药FFC),试验周期为21 d。测定雏鸡的平均日增重、脏器指数和料重比,并采用ELISA试剂盒检测血清中细胞因子和新城疫抗体水平。结果表明,即使是低水平的ZEN也可抑制白细胞介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)的分泌从而抑制雏鸡免疫功能,并可能通过促进白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的释放诱发炎症反应;早期使用治疗剂量的FFC不仅可抑制雏鸡的生长,还能使IL-2和IFN-γ分泌下调从而产生免疫抑制。二者共同暴露虽然可减轻其对IL-2和IFN-γ的抑制作用,并控制玉米烯酮诱导的炎症反应,但可抑制雏鸡的体液免疫应答水平。因此,应加强雏鸡饲料中ZEN污染的监控,慎重使用FFC作为开口药,尽量避免在二者同时存在时对雏鸡进行疫苗接种,以防免疫失败。

氟苯尼考/二甲基-β-环糊精包合物的制备及评价

目的 以2,6-二甲基-β-环糊精(DM-β-CD)为包合材料制备氟苯尼考(florfenicol,FF)包合物FF/DM-β-CD,以改善FF的溶解度和溶出速度,提高其生物利用度。方法 在应用分子对接结合相溶解度法筛选合适的环糊精(CD)后,采用加热搅拌法制备FF/DM-β-CD,并使用DSC、PXRD、FT-IR对包合物进行物相鉴别,对其溶解性、溶液稳定性和体外溶出进行考察,同时进行了FF/DM-β-CD在鸡体内的药动学研究。结果 FF与HP-β-CD、DM-β-CD和SBE-β-CD对接后的模型较稳定,DM-β-CD改善FF溶解度的效果最好。选择DM-β-CD作为包合材料,加热搅拌法制备了FF/DM-β-CD,DSC、PXRD和FT-IR结果证实FF/DM-β-CD的形成。FF/DM-β-CD可显著增加FF的溶解度,在标准硬水、自来水、去离子水和纯化水中的溶解度均大于FF的55.0倍。FF/DM-β-CD溶液在25℃放置1 d后,自来水中无析出,标准硬水、纯化水和去离子水中有微量析出;随着时间增加,析出逐渐增多,7 d后,以自来水中析出最少;FF含量无明显变化。FF/DM-β-CD在不同水质水中的溶出无明显差异,25℃、5 min时均已完全溶出,为FF原料药的17.09倍。与FF相比,FF/DM-β-CD能明显提高FF在鸡体内的生物利用度(Fr=165.24%)。结论 以DM-β-CD为包合材料制备FF/DM-β-CD,可显著提高FF的溶解度、溶出度和生物利用度。

QuEChERS-超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱联用法快速测定羊肉中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考的残留量

目的建立QuEChERS-超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱法测定羊肉中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考残留量的分析方法。方法样品经研磨机匀浆后用乙腈提取,提取液经QuEChERS-1010,QuEChERS-0101净化,采用电喷雾负离子扫描,多反应监测模式,内标法定量。结果氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考在4~50μg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数均大于0.998,3种药物在5.0,10.0,30.0μg/kg浓度水平加标回收率在93.17%~109.91%范围内,相对标准偏差(RSD)为2.33%~6.14%。方法的检出限为0.01~0.03μg/kg,定量限为0.02~0.09μg/kg。结论该方法具有操作简单,准确度和灵敏度高等特点,满足测定羊肉中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考残留量的检测要求。

人工胃/肠液和大鼠肠道菌群对氟苯尼考磺胺噻唑稳定性的影响

为新型偶联化合物-氟苯尼考磺胺噻唑(FST)研制和开发口服制剂提供数据支持,采用高效液相色谱法,对FST在5种溶液介质(无蛋白酶人工肠液、人工肠液、无蛋白酶人工胃液、人工胃液及大鼠肠道菌群培养液)中不同时刻的含量进行了研究,判断其稳定性差异。结果表明,FST在人工胃液和无蛋白酶人工胃液0~6 h含量保持基本稳定;在人工肠液和无蛋白酶人工肠液中孵育30 min已完全降解,且新出现的色谱峰在相同色谱条件下与氟苯尼考和磺胺噻唑对照品出峰时间相同。由此可知,FST的代谢产物为氟苯尼考和磺胺噻唑;FST在肠道菌群中发生了降解,0~8 h,FST含量迅速下降,而8~12 h趋于平稳,降至50%。说明FST在人工肠液中有明显的降解,在人工胃液中趋于稳定,肠道菌群对其稳定性也有一定的影响。

二硫化钼负载泡沫镍铁电极降解水中氟苯尼考的研究

以二硫化钼(MoS_(2))为载体,通过水热法负载泡沫镍铁制备MoS_(2)负载泡沫镍铁电极(MoS_(2)@Ni-Fe-Foam)并用于降解水中的氟苯尼考(FLO)。利用X-射线衍射仪(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)和X-射线光电子能谱仪(XPS)对电极的表面形貌和元素分布进行表征,采用循环伏安法和电化学阻抗谱对其电化学性能进行表征,通过电子顺磁共振检测(EPR)、高效液相色谱-三重四极杆质谱仪、离子色谱及电化学检测研究了不同条件对FLO降解效果的影响,并对降解产物和降解机理进行了分析。结果表明,当FLO质量浓度为25 mg/L、电流密度为30 mA/cm^(2)、初始pH为3、Na_(2)SO_(4)浓度为30 mmol/L时对FLO的降解速率最快,降解率达到96%。自由基淬灭实验表明,·O_(2)^(-)在降解过程中发挥主要作用,其次是^(1)O_(2),而·OH的影响较弱。最后,通过三重四极杆质谱仪分析得到4种FLO降解产物,并提出FLO的降解机理。

氟苯尼考原料药及制剂在大鼠体内的药代动力学及绝对生物利用度研究

对氟苯尼考制剂不同给药方式在大鼠体内的药动学特征和体内生物利用度进行了研究,以评价β-环糊精包合工艺对氟苯尼考体内生物利用度的影响。选取15只健康大鼠平行随机分为3组,分别静脉注射氟苯尼考原药,口服灌胃氟苯尼考物理混合物,口服灌胃包合工艺氟苯尼考粉,采用高效液相色谱法测定大鼠血浆中氟苯尼考的浓度,利用药代动力学软件PKSovler软件中非房室统计矩分析模型,计算药动学参数并进行药动学数据分析。结果显示,静脉注射组药物消除为半衰期(t_(1/2))为(367.04±159.85)min、平均药时曲线下面积AUC_(0-)为6622.16±927.55。包合工艺氟苯尼考组达峰时间(T max)为(40.00±14.14)min、达峰浓度(C_(max))为(28.82±4.00)μg/mL、半衰期(t_(1/2))为(378.40±226.34)min,平均药时曲线下面积AUC_(0-)为5627.60±1442.41。物理混合物组达峰时间(T max)为(68.00±30.33)min、达峰浓度(C_(max))为(15.64±4.40)μg/mL、半衰期(t_(1/2))为(288.29±52.25)时曲线下面积AUC_(0-)为4543.56±761.34。氟苯尼考粉物理混合组体内绝对生物利用度为68.6%,包合工艺氟苯尼考组在体内绝对生物利用度为85.0%。综上可判定包合工艺法氟苯尼考组能显著提高氟苯尼考达峰浓度和氟苯尼考体内吸收程度,生物利用度高。

高铁酸钾与过氧化氢联用对水体中氟苯尼考的降解作用

[目的]考察高铁酸钾与过氧化氢联用对水体中氟苯尼考的降解效果。[方法]以高铁酸钾与氟苯尼考的摩尔比、过氧化氢与高铁酸钾的摩尔比、反应体系的pH值以及反应时间作为考察因素,设计4因素5水平正交试验,采用高效液相色谱法测定氟苯尼考浓度,以氟苯尼考降解率作为指标,筛选最佳降解条件。[结果]通过正交试验获得的最佳降解条件:高铁酸钾与氟苯尼考的摩尔比为45∶1、过氧化氢与高铁酸钾的摩尔比为1∶1、反应体系的pH值为7、反应时间为45 min。[结论]高铁酸钾与过氧化氢联用可有效降解水体中的氟苯尼考。

氟苯尼考可溶性粉含量测定的不确定度分析

为分析评定氟苯尼考可溶性粉含量测定的不确定度,通过高效液相色谱(HPLC)法进行测定,选用C_(18)色谱柱,乙腈-水-冰醋酸(100∶197∶3)为流动相,224 nm波长下检测,并建立HPLC法测定氟苯尼考可溶性粉含量的数学模型。分析各因素引入的标准不确定度,评定置信概率95%时测定结果的扩展不确定度,给出不确定度评定报告。测定结果表明,含量测定的不确定度主要源于称量、溶液配制及峰面积测定过程。含量测定的标准不确定度为1.16%,扩展不确定度为2.32%。含量测定结果表示为(97.3±2.32)%,包含因子k=2。该方法适用于HPLC法测定氟苯尼考可溶性粉含量的不确定度评定,可为氟苯尼考可溶性粉的质量控制和客观评价提供参考。

1例牛投喂氟苯尼考引发急性瘤胃鼓气的诊治

本文是1个典型的滥用抗生素,导致牛瘤胃微生物群失调,影响消化功能,导致急性瘤胃鼓气的病例。瘤胃鼓气原因是瘤胃体积不断增大,各个脏器受到瘤胃的挤压,可能会压迫微循环系统,造成梗死,进而引发死亡。一旦发生急性瘤胃鼓气,建议采取的治疗原则为排出气体、强心补液、健胃消导、恢复瘤胃蠕动。由该病例引发的反刍动物抗菌用药注意事项:未断奶的幼畜可口服抗菌药物,断奶后的反刍动物使用抗菌药物时尽量不口服,而应采取注射给药的方法,同时可配合口服中成药。确需口服给药的,可待病愈后立即给予益生菌类制剂或接种健康畜瘤胃胃液,使瘤胃微生物群尽早恢复正常。