新型复方氟苯尼考注射液中氟尼辛葡甲胺含量测定方法研究

为了建立新型复方氟苯尼考注射液中氟尼辛葡甲胺含量的高效液相色谱测定方法，选用Hypersi lODS2（250mm×4．6mm，5μm）色谱柱，流动相为甲醇-0．1％磷酸水（体积比为80：20），检测波长为254nm，柱温30℃，流速1mL／min进行测定。结果显示，氟尼辛葡甲胺在该色谱条件下，系统适应性良好；在27～889gg／mL的质量浓度范围内线性关系良好，回归方程为Y=9596．7X＋32979，R2=0．9999；总平均回收率为（97．16±2．05）％，RSD为2．11％；对5批样品中的氟尼辛葡甲胺进行含量测定，RSD为1．14％。表明该方法可用于新型复方氟苯尼考注射液中氟尼辛葡甲胺含量的测定。

新型复方氟苯尼考注射液中氟苯尼考HPLC测定方法的建立

为了建立该新型复方氟苯尼考注射液中氟苯尼考的高效液相色谱含量测定方法,采用Hypersil ODS2(5μm,4.6mm×250mm)色谱柱,流动相乙腈-0.5mL/L磷酸水(25∶75,V/V),检测波长224nm,柱温30℃,流速1mL/min为色谱条件。氟苯尼考在该色谱条件下系统适应性好;在5μg/mL^332μg/mL的浓度范围内线性关系良好,回归方程为A=22 390C+17 227,R2=1.000 0;总平均回收率为96.09%±1.79%,RSD为1.87%;5批样品的氟苯尼考含量测定结果的RSD为0.75%。该方法准确可靠、选择性好、简便、快速,可用于新型复方氟苯尼考注射液中氟苯尼考含量的测定,并为该注射液的质量评价奠定基础。

HPLC-PDA法测定氟苯尼考注射液、柴胡注射液中非法添加培氟沙星、洛美沙星

建立了氟苯尼考注射液、柴胡注射液中非法添加培氟沙星、洛美沙星的HPLC-PDA检查方法。采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸溶液-乙腈-甲醇(85.5∶7.0∶7.5)为流动相;二极管阵列检测器,提取波长为277 nm。通过液相色谱保留时间、峰纯度检查和光谱相似度检查对非法添加物进行确证。结果表明,该色谱条件下培氟沙星、洛美沙星与其他物质分离良好。培氟沙星在氟苯尼考注射液、柴胡注射液中的平均回收率分别为101.4%(RSD=0.2%)、100.0%(RSD=0.4%),洛美沙星在氟苯尼考注射液、柴胡注射液中的平均回收率分别为101.2%(RSD=0.1%)、99.8%(RSD=0.5%)。本方法简便、准确、可靠,可用于检查氟苯尼考注射液、柴胡注射液中非法添加的培氟沙星、洛美沙星。

新型复方氟苯尼考注射液的安全性评价

按照2010版《中国兽药典》和《兽药及添加剂安全性毒理学评价程序》的要求，对新型复方氟苯尼考注射液进行安全性评价，相应进行了热原检查、注射途径LD50测定、皮肤刺激试验和肌肉刺激试验等。结果表明：新型复方氟苯尼考注射液制剂热原检查符合药典规定；腹腔注射对小鼠的LD50为1888．73 mg/kg，95％可信限为1575．90～2263．65 mg/kg；该注射液对皮肤有轻度刺激性；对股四头肌有轻微刺激，但在给药后7 d可以完全恢复。说明新型复方氟苯尼考注射液安全可靠，可应用于兽医临床。

氟苯尼考注射液热稳定性的研究

氟苯尼考注射液为氟苯尼考与适宜溶剂制成的灭菌溶液,对其进行热加速稳定性研究,证实本品对热稳定。

多西环素、氟苯尼考注射液的稳定性试验

多西环素、氟苯尼考注射液，内含多西环素与氟苯尼考。体外抑菌试验表明：多西环素、氟苯尼考注射液对鸡大肠杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、马链球菌兽疫亚种（ATCC35246株）有较好的抑制效果，均优于单方；从临床治疗试验上看．多西环素、氟苯尼考注射液能有效控制猪链球菌病。

氟苯尼考注射液在大鼠体内代谢及生物利用度研究

研究了剂量30 mg·kg-1的氟苯尼考注射液在SD大鼠体内的代谢及生物利用度.静注后药动学特性符合二室开放模型,主要动力学参数:Cmax为36.51±3.25μg·mL-1;AUC(0-t)为51.75±0.21μg·mL-1·h.肌注后药动学特性符合一室开放模型,氟苯尼考及氟苯尼考胺的主要动力学参数:肌注组t1/2β为12.63±0.02 h及21.32±1.02 h;tmax为1.0±0.03 h及8.0±0.02 h;Cmax为6.70±0.12及3.50±0.20μg·mL-1;AUC为45.22±0.21及34.35±1.15μg·mL-1·h.氟苯尼考注射液肌注后在大鼠体内吸收好,分布快,消除缓慢,药动学行为与对照品纽弗罗注射液相似.

氟苯尼考注射液中非法添加二氧丙嗪的检测方法研究

建立氟苯尼考注射液中非法添加二氧丙嗪的检测方法。对1批氟苯尼考注射液照《中国兽药典》2010版HPLC法进行含量测定时,发现未知物质峰。采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UHPLC-Q/TOF MS)对该批检品进行筛查,发现该添加物疑似二氧丙嗪,并采用高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)对二氧丙嗪进行定性和定量检测。结果显示,高效液相色谱法二氧丙嗪在1~100μg/m L浓度范围内的线性良好(r=1.0000),平均回收率为99.5%,RSD为0.3%。本方法专属性强,灵敏度高,重现性好,适用于氟苯尼考注射液中非法添加二氧丙嗪的检测。

2种氟苯尼考注射液在鸡体内的药动学和生物等效性研究

[目的]比较先灵葆雅动物保健公司生产的氟苯尼考注射剂(参比制剂)和国内某厂家生产的氟苯尼考注射剂(受试制剂)在鸡体内的药代动力学特征,并评价2种制剂间的生物等效性。[方法]选用24只快大型白羽肉鸡,分为2组,按0.067 mL/kg的剂量分别给予受试制剂和参比制剂。采用液质联用法测定血药浓度,使用WinNonlin软件计算2种制剂的药代动力学参数和生物等效性。[结果]受试制剂和参比制剂的峰浓度(C_(max))分别为(4.85±0.57)和(4.83±0.43)μg/mL,达峰时间(T_(max))分别为(39.58±23.68)和(41.67±16.06)min,曲线下面积(AUC_(0-24 h))分别为(1561.32±497.38)和(1529.25±444.88)(μg·min)/mL。双单侧t检验法和置信区间法结果均表明2种制剂生物等效。[结论]国产氟苯尼考注射液与先灵葆雅动物保健公司生产的氟苯尼考注射液生物等效。

氟苯尼考注射液中非法添加多西环素检查方法的建立

为建立氟苯尼考注射液中非法添加多西环素高效液相检查方法,研究使用C18（4.6 mm×150 mm,5μm）色谱柱,以醋酸盐缓冲液[0.25 mol/L醋酸铵溶液-0.1 mol/L乙二胺四醋酸二钠-三乙胺（100∶10∶1）,调节p H值至8.8]-乙腈（85∶15）为流动相,采用二极管阵列检测器,波长采集范围为200~400 nm,记录色谱图波长为269 nm,流速为1 m L/min,进样量为10μL。结果表明,多西环素进样浓度在0.015~0.96 mg/m L范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=1.0000）;平均回收率为99.4%（n=9）,RSD为0.3%。本方法简便、准确、可行,适用于氟苯尼考注射液中非法添加多西环素的检测。

氟苯尼考注射液治疗鸭疫里默氏杆菌病的疗效试验

通过氟苯尼考注射液、蒽诺沙星注射液、庆大霉素注射液、磺胺间甲氧嘧啶钠注射液对鸭疫里默氏 杆菌病治疗,结果表明:氟苯尼考注射液的有效率为 97.7%,优于蒽诺沙星注射液、庆大霉素注射液、磺胺 间甲氧嘧啶钠注射液的疗效,并且,与蒽诺沙星注射液、磺胺间甲氧嘧啶钠注射液的疗效比较,差异显著( < 0.05),与庆大霉素比较差异极显著( <0.01)。氟苯尼考注射液对鸭疫里默氏杆菌病治疗效果确切可 靠,可在临床上应用。

复方氟苯尼考注射液对猪链球菌病的治疗效果研究

目的 研究复方氟苯尼考治疗猪链球菌病的最佳剂量。方法 试验通过人工感染45日龄健康的杜洛克、长白、约克夏三元杂交仔猪,分为空白对照组、感染对照组、试验1组、试验2组、试验3组;试验1组复方氟苯尼考注射液注射剂量为0.04 mL/(kg体重),试验2组注射剂量为0.08 mL/(kg体重),试验3组的注射剂量为0.12 mL/(kg体重);试验期间对猪只的始末体重和体温进行记录,同时观察可视黏膜颜色、精神食欲、咳嗽等状况。结果 处理2组和处理3组的在第3天和第4天的体温显著低于感染对照组(P<0.05);相对增重率处理1组显著高于感染对照组(P<0.05),处理2组和处理3组极显著高于感染对照组(P<0.01);处理2组和处理3组治疗有效头数和治愈率极显著高于感染对照组(P<0.01)。结论 复方氟苯尼考注射液对猪链球菌病具有治疗效果,注射剂量0.08 mL/(kg体重)处理组和0.12 mL/(kg体重)处理组在治疗猪链球菌病上的效果优于0.04 mL/(kg体重)处理组,综合成本和药物的毒理因素,0.08 mL/(kg体重)为最佳注射剂量。

复方氟苯尼考注射液对人工感染猪链球菌病的治疗试验

氟苯尼考被广泛应用于动物抗生素治疗,其特有的胚胎毒性特点,为保证注射液可以长期有效、功能成分缓速释放,该文选用氟苯尼考、氟尼辛葡甲胺作为主成分,添加相应辅料物质,并调整各有效成分的配比,进而研制出复方氟苯尼考注射液。为客观评估该注射液的临床药效,全面判断其在兽医临床治疗过程中的安全性与可行性,着重开展了此项试验。试验方法为开展注射液临床感染试验,观察其对猪的临床治疗效果。结果显示,高剂量、中剂量、低剂量组复方氟苯尼考注射液对治疗猪链球菌病均有效。结论:复方氟苯尼考注射液能有效治疗猪链球菌病,具有开发潜力,可推广使用,建议使用中剂量1 mL/7.5 kg的复方氟苯尼考注射液治疗猪链球菌病。

海俘莱氟苯尼考注射液在我国注册

据农业部网站消息．农业部批准西班牙海博莱生物大药厂生产的氟苯尼考注射液在我国注册。核发《进口兽药注册证书》。批准美国爱德士生物科技有限公司等2家公司生产的鸡传染性支气管炎病毒ELISA抗体检测试剂盒等2种兽药产品在我国再注册，核发《进口兽药注册证书》，并发布修订后的产品质量标准、说明书和标签．自发布之日起执行。

新疆南疆地区表皮葡萄球菌对氟苯尼考注射液的药物敏感性研究

为了探索新疆南疆地区表皮葡萄球菌对氟苯尼考注射液的敏感性,试验采用微量肉汤稀释法测定了氟苯尼考注射液对表皮葡萄球菌ATCC 35984和临床分离株的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC),对表皮葡萄球菌生长、生物被膜形成的抑制作用及表面疏水性的影响,测定了氟苯尼考注射液的体外抑菌效果及其对表皮葡萄球菌细胞膜完整性的影响。结果表明:氟苯尼考注射液对表皮葡萄球菌ATCC 35984和临床分离株的MIC值分别为4,2μg/mL,MBC值分别为16,8μg/mL。与未加氟苯尼考注射液的菌液相比,0.5μg/mL氟苯尼考注射液可显著抑制表皮葡萄球菌生长,0.25μg/mL氟苯尼考可显著抑制其生物被膜的形成(P<0.05),浓度>2μg/mL时抑制效果极显著(P<0.01),呈浓度依赖性;氟苯尼考注射液可降低表皮葡萄球菌细胞表面疏水性,呈浓度依赖性。当氟苯尼考注射液浓度为1/2 MIC时,可在体外显著抑制表皮葡萄球菌ATCC 35984生长(P<0.05);当浓度高于1 MIC时,可极显著抑制表皮葡萄球菌ATCC 35984和临床分离株生长(P<0.01)。当氟苯尼考注射液浓度>1/2 MIC时,其可损伤表皮葡萄球菌的细胞膜完整性。说明新疆南疆地区表皮葡萄球菌对氟苯尼考注射液的药物敏感性较好,氟苯尼考可能是通过降低表皮葡萄球菌细胞表面疏水性和损伤表皮葡萄球菌的细胞膜完整性来发挥抑菌和杀菌作用的。

复方氟苯尼考注射液的临床应用试验

氟苯尼考注射液临床应用较普遍，多为单方制剂。因耐药性的出现，临床为达到良好的治疗效果，往往采用高浓度（20％或30％）氟苯尼考注射液，造成应用成本过高，影响了该制剂的实际使用。有资料表明，氟苯尼考与三甲氧苄氨嘧啶配伍可明显增强氟苯尼考的体外抑菌效果，且对猪源大肠杆菌、鸭疫里默氏杆菌有效。

复方氟苯尼考注射液体外抑菌试验及对人工感染巴氏杆菌仔猪的保护效果

为了研究复方氟苯尼考注射液的体外抗菌活性及对人工感染巴氏杆菌仔猪的保护效果。本研究采用体外抑菌试验采用试管二倍稀释法,测定复方氟苯尼考注射液和单方氟苯尼考注射液对多杀性巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌及链球菌的最小抑菌浓度(MIC)。体内治疗试验是将复方氟苯尼考注射液分为20、40、60mg/kg 3个剂量组与氟苯尼考对照组(40mg/kg)以及氟尼辛葡甲胺对照组(3.65mg/kg)以颈部肌肉注射治疗人工感染多杀性巴氏杆菌的仔猪。体外抑菌试验结果显示,复方氟苯尼考注射液对多杀性巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌及链球菌的MIC分别为0.59、1.09、0.59、2.12mg/L;氟苯尼考注射液对多杀性巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌及链球菌的MIC分别为1.12、6.13、17.86、17.86mg/L。保护性试验结果显示,复方氟苯尼考注射液低、中、高剂量组增重率分别为(10.19±4.84)、(14.33±4.07)、(15.53±5.38)kg,死亡率分别为10%、10%、0,好转率分别为60%、90%、100%,治愈率分别为20%、90%、100%;氟苯尼考组的增重率为(9.90±4.25)kg;氟尼辛葡甲胺组的增重率为(8.02±3.83)kg。结果表明,复方氟苯尼考注射液对多杀性巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌及链球菌的抑菌效果强于单方氟苯尼考注射液;复方氟苯尼考注射液对人工感染多杀性巴氏杆菌仔猪的保护作用也优于氟苯尼考注射液。建议本品的治疗剂量为颈部肌肉注射40mg/kg,每7d给药1次,连用2次,如症状严重可2d给药1次,连用2次。

紫外分光光度法测定氟苯尼考及其注射液的含量

采用紫外分光光度法测定氟苯尼考原料药及其注射液的含量。实验结果表明，在0．05～0．5mg／mL浓度范围内，氟苯尼考的吸光度与浓度呈现良好的线性关系（r=0．9997，n=6）；与法定的高效液相色谱法检测结果无差异。