液相色谱串联质谱法测定动物源食品中氯霉素、氟甲砜霉素和五氯酚

本实验应用液相色谱串联质谱法建立了测定动物源食品中氯霉素、氟甲砜霉素、五氯酚的检测方法,本方法通过优化提取试剂,净化剂用量,色谱和质谱条件,在MRM负离子模式下分析定量,通过结果与讨论,3种目标物在不同基质中在各自浓度范围内线性良好,在低、中、高三个浓度水平添加下,平均回收率在64.0%~105.8%之间之间,相对标准偏差(RSD)为0.96%~7.10%,方法检测限为0.3~3 μg/kg,定量限为1~10 μg/kg。该方法简单快速、定量结果可靠,适合大批量样品的快速筛查和定量测定。

庆大霉素氟米龙治疗翼状胬肉切除联合角膜缘干细胞移植术后患者的疗效及对眼表功能的影响

目的 观察庆大霉素氟米龙治疗翼状胬肉切除联合角膜缘干细胞移植术后患者的疗效及对眼表功能的影响。方法 选取2020年1月—2022年12月福建省汀州医院收治的翼状胬肉行翼状胬肉切除联合角膜缘干细胞移植术患者80例为研究对象,按治疗方式不同将患者分为对照组和观察组,各40例。翼状胬肉切除联合角膜缘干细胞移植术后,对照组予以氟米龙滴眼液,观察组予以硫酸庆大霉素氟米龙滴眼液,2组患者均连续治疗1个月。比较2组临床疗效,术后眼部舒适度、角膜愈合时间,治疗前及治疗1个月后血清炎性因子[白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)以及白介素-2(IL-2)]、眼表疾病指数(OSDI)、泪膜破裂时间(BUT),随访6个月疾病复发情况、不良反应。结果 观察组治疗总有效率高于对照组(97.50%vs.75.00%,χ^(2)=8.538,P=0.003)。观察组术后6个月视觉清晰度、眼干涩感、眼红程度及角膜表面状态评分低于对照组,角膜愈合时间短于对照组(P<0.01)。治疗1个月后,2组血清IL-6、IL-1β及IL-2水平低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.01);2组OSDI评分低于治疗前,BUT长于治疗前,且观察组降低/延长幅度大于对照组(P<0.01)。观察组随访6个月疾病复发率为5.00%,低于对照组的22.50%(χ^(2)=5.165,P=0.023)。观察组不良反应总发生率低于对照组(2.50%vs.20.00%,χ^(2)=4.507,P=0.034)。结论 翼状胬肉切除联合角膜缘干细胞移植术后患者采用庆大霉素氟米龙治疗可增强疗效,减轻炎性反应,改善眼表功能,提高眼部舒适度,且可降低疾病复发率,安全性较高。

氟砜霉素的急性毒性和亚慢性毒性试验

氟砜霉素对大鼠的急性毒性试验结果表明 ,氟砜霉素对大鼠的经口 LD5 0 大于每千克体重 50 0 0 mg。亚慢性毒性试验的结果表明 ,按每千克体重 1 0 0 mg的剂量应用氟砜霉素 3 0 d以上 ,会减少大鼠的增重 ,降低骨髓的造血机能 ,损伤肝脏 ,严重损伤肾脏及睾丸 ,但对脾脏、肺脏、雌性生殖器官、大脑无损伤。氟砜霉素 50mg/ kg的剂量对肾脏有轻度的损伤 ,在 3 0 d时可减少大鼠的增重 ,但对其他组织器官以及骨髓造血机能均无影响。氟砜霉素 3 0 mg/ kg的剂量应用 60 d,对大鼠的增重。

气相色谱-质谱联用法测定动物组织中氯霉素、氟甲砜霉素和甲砜霉素的残留量

建立了气相色谱-负离子化学电离源质谱同时测定动物组织中氯霉素（CAP）、甲砜霉素（TAP）和氟甲砜霉素（FF）残留量的方法。样品用乙酸乙酯提取，正己烷分配去脂肪。再用Florisil柱进一步净化。甲苯作为反应介质，用N，O-双（三甲基硅基）三氟乙酰胺（BSTFA）-三甲基氯硅烷（TMCS）（体积比为99：1）进行硅烷化处理，用间硝基氯霉素（m—CAP）作为内标进行测定。CAP的检测限可达到0．03μg／kg，TAP和FF的检测限可达到0．2μg／kg；上述3种药物的标准曲线的线性相关系数均大于0．99。CAP，FF和TAP的批内测定的精密度（以相对标准偏差表示）依次为5．5％，10．4％和8．8％；批间测定的精密度依次为7．4％，20．7％和19．1％。回收率为80．0％-111．5％。相对标准偏差为1．2％-15．4％。该方法前处理步骤简单，处理后杂质干扰少。灵敏度高。适用性强。可用于猪肉及禽类、水产品等多种动物组织中氯霉素类药物残留的检测。

不同水温下氟甲砜霉素在斑点叉尾体内的药代动力学研究

研究不同水温(18℃和28℃)条件下,单剂量(10mg/kg b.w)强饲氟甲砜霉素,在斑点叉尾(Ictalurus punc-tatus)体内药代动力学特征。采用高效液相色谱紫外检测法可以同时检测血浆中氟甲砜霉素及其代谢物氟甲砜霉素的浓度。用3p97药代动力学软件处理药时数据。结果表明:在不同水温条件下氟甲砜霉素在斑点叉尾体内的药时数据均符合一室开放式模型。药时规律符合理论方程C血浆=7.921(e-0.036t-e-0.18t)和C血浆=9.061(e-0.081t-e-0.301t)。18℃和28℃的条件下,主要药代动力学参数:吸收半衰期T1/2ka分别为3.845h和2.301h,消除半衰期T1/2ke分别为19.118h和8.519h,达峰时间Tpeak分别为11.136h和5.953h,最大血药浓度Cmax分别为4.074μg/mL和4.226μg/mL,曲线下面积AUC分别为174.547(μg/mL)/h和81.279(μg/mL)/h,平均驻留时间MRT分别为27.581h和12.290h,相对表观分布容积V/F(c)分别为1.580L/kg和1.5121L/kg。采用氟甲砜霉素防治斑点叉尾细菌性疾病,建议在18℃左右口服10mg/kg体重剂量的氟甲砜霉素,2d给药1次;在28℃左右口服10mg/kg体重剂量的氟甲砜霉素,1d给药1次。试验过程中在斑点叉尾血浆样品中未检测到氟甲砜霉素的主要代谢物氟甲砜霉素胺。

高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱测定乳品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素残留的研究

本实验建立了乳制品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素残留的高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用测定方法。该方法采用多反应监测负离子模式,可一次对氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素进行定性和定量。该方法的检出限0.3～1.0μg/L,测定低限牛奶0.3～1.1μg/L,乳粉为3.0～11.0μg/kg,线性范围1.0～30.0μg/L,加标回收率77.9%～96.6%,相对标准偏差为7.7%～14.0%。该法具有样品预处理简单,灵敏度高,分析时间短等优点。

氟甲砜霉素(Florfenicol)在猪体内的药物动力学

健康猪 6头 ,体重 ( 2 4 .7± 1 .0 ) kg,单剂量静注、肌注、内服氟甲砜霉素 ( Florfenicol) 2 0 mg/ kg,用高效液相色谱法测定其血药浓度 ,实验所得的血药浓度 -时间数据采用非房室模型统计矩原理分析处理。静注给药的主要药物动力学参数为 :AUC 90 .1 3mg/ ( L· h) ,MRT 6.84 h,Cl B0 .2 3L/ ( kg· h) ,Vd(SS) 1 .53L/ kg,t1 / 2β 6.72 h。肌注给药的主要药物动力学参数为 :AUC 84 .31 mg/ ( L· h) ,MRT 2 6.88h,t1 / 2β 1 7.1 8h,F96.86% ,校正 F* 4 2 .50 %。内服给药的主要药物动力学参数为 :AUC1 32 .0 8mg/ ( L· h) ,MRT1 4 .2 3h,t1 / 2β 9.98h,F 1 4 8.53% ,校正 F* 1 0 8.51 %。试验结果表明 ,氟甲砜霉素在猪体内的主要药动学特征为 :静注给药表观分布容积大 ,消除半衰期长 ,血药浓度高 ;肌注给药吸收不规则 ,吸收和消除缓慢 ;内服给药吸收迅速完全 。

超高效液相色谱法测定水产品中甲砜霉素和氟甲砜霉素残留

建立了一种同时测定水产品中甲砜霉素和氟甲砜霉素药物残留的超高效液相色谱（UPLC）方法。样品经乙酸乙酯提取,正己烷液-液分配除脂,过HLB固相萃取小柱,用3mL10%甲醇淋洗,5mL100%甲醇洗脱,洗脱液用氮气吹干,残渣用1mL10%乙腈水溶液定容。采用超高效液相色谱分离,二极管阵列检测器检测,外标法定量。甲砜霉素在0.05~2.0mg/L,氟甲砜霉素在0.025~1.0mg/L范围线性关系良好,相关系数分别为0.9996、0.9999;样品加标平均回收率分别为80.0%、95.8%;相对标准偏差分别为5.6%、11.2%,甲砜霉素、氟甲砜霉素检出限分别为10μg/kg、5μg/kg。

气相色谱法同时测定水产品中氯霉素、氟甲砜霉素和甲砜霉素残留量

以尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）和南美白对虾（Penaeus vannamei）为实验材料，建立了测定水产品中氯霉素、氟甲砜霉素和甲砜霉素残留量的毛细管电子捕获气相色谱（GC-ECD）法。用乙酸乙酯同时提取水产品中的待测物，提取液浓缩至干后溶于甲醇／氯化钠溶液，正己烷脱脂，过C18柱净化，乙腈洗脱，加BSTFA-TMCS在65℃下衍生反应30min，正己烷定容后进样分析，外标法定量。本方法氯霉素在1.0～500．0μg／L，氟甲砜霉素和甲砜霉素在5．0～500．0μg/L浓度范围内呈线性相关，相关系数r≥0．9983，加标水平在0．2～10．0μg/kg时，回收率为83.30％～101．22％，相对标准偏差为1．36％～12．57％。氯霉素、氟甲砜霉素和甲砜霉素的检测限分别为0．1、0．2、0．2μg/kg。

猪饥饿和喂饲后内服氟甲砜霉素的药动学比较

报道了猪饥饿及喂饲后 5min单剂量 (2 0mg/kg)内服氟甲砜霉素的药动学比较的研究 .用高效液相色谱法测定血药浓度 .试验所得的血浆浓度 时间数据采用非房室模型统计矩原理分析处理 .猪饥饿后内服给药的主要药物动力学参数 :AUC =(91 40± 7 5 1)mg·h/L ,MRT =(7 15± 0 5 8)h ,t1/ 2 β=(5 99± 0 2 6 )h .猪喂饲后 5min内服给药的主要药物动力学参数为 :AUC =(88 47± 2 2 1)mg·h/L ,MRT =(10 94± 1 0 6 )h ,t1/ 2 β=(6 44± 0 90 )h .试验结果表明 ,猪喂饲后内服氟甲砜霉素的生物利用度与饥饿后的相似 ,但峰浓度显著小于饥饿后的峰浓度 ,两者的消除半衰期相似 .

高效液相色谱法测定土壤和畜禽粪中的氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素

采用高效液相色谱法研究了土壤、猪粪和鸡粪中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素3种氯霉素类抗生素残留。分别采用乙酸乙脂、氨化乙酸乙脂和甲醇3种有机溶液超声提取,浓缩脱脂后经固相萃取小柱纯化,Xbridge C18色谱柱分离后用紫外检测器检测。在0～10mg/L浓度范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数r均达到0.9999。氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素的检出限分别为10、4、7μg/L。乙酸乙脂对3种抗生素的加标回收率在76.0%～102.6%之间,相对标准偏差为0.3%～7.3%,氨化乙酸乙脂次之,甲醇的综合提取效果最低。

高效液相色谱-电喷雾电离三级四极杆质谱测定鸡肉中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素的残留量

建立了鸡肉中3种氯霉素类抗生素残留的高效液相色谱 电喷雾电离三级四极杆质谱(HPLC ESI MS MS)测定法。该方法采用多反应监测(MRM)负离子模式,可一次对鸡肉中的氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素进行定性和定量。该方法仅需1g样品,并省去固相萃取步骤,具有操作简便、有机试剂消耗量少、测定周期短等优点。方法的检出限为0 010μg/kg,测定低限为0 100μg/kg,线性范围为0 050～1 00μg/L,加标回收率为69 0%～92 8%,相对标准偏差为6 3%～12 9%。

饲料中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素含量的HPLC测定方法

采用微量化样品处理技术,用乙酸乙酯提取饲料样品中的氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素,并经液-液分配净化后,用反相液相色谱梯度洗脱双波长对3种组分进行同时分离测定,外标法定量。检出限为0.020m g/kg,回收率大于70%,RSD小于17.2%。

高效液相色谱-串联质谱法同时测定饲料中氯霉素、甲砜霉素与氟甲砜霉素残留量

建立了饲料中氯霉素(CAP)、甲砜霉素(TAP)、氟甲砜霉素(FF)3种抗生素残留量的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定方法。样品经碱化乙酸乙酯提取,蒸发浓缩,提取物经正己烷脱脂,液-液分配净化后,采用电喷雾电离源(ESI)负离子多反应监测(MRM)模式检测,内标法定量。氯霉素、氟甲砜霉素和甲砜霉素的线性范围分别为0.2～10.0、0.2～10.0、1.0～50.0μg/L,相关系数(r2)不低于0.990 0;其检出限分别为0.1、0.1、0.5μg/kg,定量下限分别为0.3、0.3、1.5μg/kg。3种抗生素药物的平均回收率为77%～108%,相对标准偏差(RSD)不大于10.9%。

水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素残留量高效液相色谱-串联质谱内标测定方法的研究

建立了水产品中3种氯霉素类抗生素残留的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定法。以氘代氯霉素(d5-CAP)为内标,样品在碱性条件下用乙酸乙酯提取,提取液氮气吹干,正己烷液液分配脱脂后,采用配有ESI源的LC-MS/MS选择反应监测(SRM)负离子模式测定,可同时对水产品中的氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素进行定性和定量测定。方法简化了样品前处理过程,省去固相萃取步骤,具有操作简便、有机试剂消耗量少、测定周期短和定量更准确等优点。方法的检出限:氯霉素为0.01μg/kg,甲砜霉素和氟甲砜霉素为0.03μg/kg。

氟砜霉素和氯霉素与抗菌增效剂的体外联合抑菌效果比较

应用试管二倍稀释法测定了氟砜霉素、氯霉素、TMP和 OMP对 1 5株畜禽常见病原菌的最小抑菌浓度 ( MIC)。结果表明 ,氟砜霉素的体外抗菌活性强 ,优于或等于氯霉素 ;TMP和 OMP的体外抗菌活性偏低 ,但 OMP优于 TMP。氟砜霉素和氯霉素与 TMP、OMP对 1 4株细菌的联合药敏试验经肉汤稀释棋盘法测定 ,结果表明 ,氟砜霉素和氯霉素分别与 TMP、OMP体外联合 ,抑菌效果相同 ,呈协同作用的均占 5 0 %与2 8.6 % ,即 TMP或 OMP对氟砜霉素和氯霉素的增效作用相等 ,但 TMP优于 OMP。在 1 4株细菌对氟砜霉素和氯霉素分别与 TMP、OMP的总共 5 6组体外联合试验中 ,呈协同作用的占 39.3% ,主要为大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、沙门氏菌及金黄色葡萄球菌 ;无关作用的占 6 0 .7% ;无拮抗现象。故临床联合用药前 ,仍需进行联合药敏试验 。

GC/MS法同时测定水产品中氯霉素、氟甲砜霉素及甲砜霉素残留量

建立了气相色谱-负离子化学电离源质谱同时测定水产品中氯霉素(CAP)、氟甲砜霉素(FF)和甲砜霉素(TAP)残留量的方法。通过优化色谱条件,实现了氯霉素、甲砜霉素及氟甲砜霉素三甲基硅(TMS)衍生物的良好分离,检测模式采用选择离子检测(SIM),监测离子为:氯霉素(m/z376、378、466、468),氟甲砜霉素(m/z339、341、429、431)及甲砜霉素(m/z409、411、499、501),分别选择466、339、409作为定量离子。方法建立的基质添加标准曲线,有效地消除了基体效应的影响,其衍生物的峰面积与其浓度在CAP为2.0～200.0ng/ml,FF和TAP在5.0～200.0ng/ml时呈良好线形关系,线性相关系数均大于0.998。基质加标实验表明,方法的准确度和精密度满足水产品中药残检测的要求。CAP的测定低限为0.3μg/kg,FF和TAP的测定低限为1.0μg/kg。

氟甲砜霉素(florfenicol)对禽败血支原体病的药效学

以试管两倍稀释法测得体外氟甲砜霉素 (florfenicol)及对照药物恩诺沙星对禽败血支原体 (MG)的最小抑菌质量浓度分别为 1.2 5、0 .0 195 mg/ L。体内药效试验表明 ,氟甲砜霉素以 30 0、40 0、5 0 0 mg/ kg饲料混饲给药 ,连用 5 d,对实验性感染 MG的鸡具有显著的保护作用 ,与感染对照组的死亡率 (2 5 %)差异显著 (P<0 .0 1)。氟甲砜霉素及对照药物的增重效果显著高于感染对照组 (P<0 .0 1) ,中、高剂量组还能显著减少气囊损伤率 (P<0 .0 1) ,但氟甲砜霉素各用药组都不能减少抗体反应的阳性率。

液相色谱荧光检测法检测水产品中甲砜霉素、氟甲砜霉素及代谢物氟甲砜霉素胺残留

建立了以带荧光检测器的液相色谱检测水产品中甲砜霉素、氟甲砜霉素与氟甲砜霉素胺残留的新方法。采用碱性乙酸乙酯-乙腈提取试样中残留的化合物，凝胶渗透色谱（GPC）净化，荧光检测器的激发与发射波长分别为225nm与295nm，可疑样品以液相色谱-质谱／质谱进行确证。在添加浓度为0．050-2．0mg／kg时，平均回收率在86．4％-96．8％之间，相对标准偏差（RSD）在5．63％-9．71％之间（n=5）；甲砜霉素、氟甲砜霉素在0．20—5．0mg／L范围内、氟甲砜霉素胺在0．10-5．0mg／L范围内有良好的线性关系，甲砜霉素与氟甲砜霉素的检测限达0．020mg／kg、氟甲砜霉素胺的检测限达0．010mg／kg。

氟甲砜霉素对鸭大肠杆菌病的药效研究

为了探讨氟甲砜霉素对鸭大肠杆菌病的疗效进行了本研究。用试管2倍稀释法测定氟甲砜霉素及对照药氯霉素对大肠杆菌的最小抑菌浓度,然后用氟甲砜霉素、氯霉素进行混饲给药5d的疗效试验。试验结果表明,氟甲砜霉素、氯霉素对大肠杆菌O78株的最小抑菌浓度分别为6mg/L,8mg/L。100,200,400mg/kg氟甲砜霉素混饲给药对鸭大肠杆菌病的有效率分别为30.3%,93.9%,100%;400mg/kg氯霉素的有效率为93.9%。试验各组之间鸭的增重差异不显著。氟甲砜霉素是新一代的动物专用氯霉素类广谱抗生素,具有较好的抗菌活性,毒副作用小,本试验在应用其对鸭的大肠杆菌病的治疗中,效果显著,并得出适宜剂量。