^(19)F磁共振成像引导的化学动力学/饥饿/化疗协同治疗纳米探针构建及应用

利用油胺和赖氨酸铜共修饰的聚琥珀酰亚胺两亲高分子(PSI_(Lys-Cu-Lys/OAm)),实现对全氟冠醚(PFCE,作为氟源)、阿霉素(DOX)的自组装包封,并进一步通过聚赖氨酸(PLL)调节表面静电作用负载葡萄糖氧化酶(GOx),获得DOX/F@PSI_(Lys-Cu-Lys/OAm)@PLL-GOx(DFPPG)多功能纳米探针,成功将^(19)F磁共振成像(MRI)引导的化学动力学(CDT)/饥饿(ST)/化疗(CT)联合治疗整合于一个纳米平台。体外及活体实验结果表明,探针基于类GOx酶活性有效地催化消耗细胞内葡萄糖转化为H_(2)O_(2)和葡萄糖酸,不仅可以“饿死”肿瘤,而且原位自供应H_(2)O_(2)及酸性增强进一步促进了Cu介导的类芬顿反应,增强了CDT。与此同时,探针在肿瘤微酸性环境下响应性释放DOX,解决了化疗药物的生物利用率低问题且降低了探针对正常组织的毒副作用,优异的^(19)FMRI实现了探针(药物)代谢过程的示踪。

多功能^(19)F磁共振/CT成像及光热/化学联合治疗纳米平台用于肿瘤诊疗

开发具有多种成像模式指导的高效诊疗一体化纳米平台对于肿瘤精准诊断治疗和疗效评估具有广阔的应用前景,同时也面临着巨大挑战。光热疗法(PTT)是一种特异性强、副作用小的非侵入性癌症治疗方法,通过将Au与Cu_(7)S_(4)耦合制备而成的Cu_(7)S_(4)/Au异质结可以将吸收调节至808 nm的近红外窗口,使其具有优良的近红外光热效应,这有效避免了生物背景干扰,增大了组织穿透能力和深度,也减少了对正常组织的损伤。同时引入X射线衰减能力强的金赋予了异质结良好的CT成像功能。随后,利用油胺修饰的聚琥珀酰亚胺两亲高分子(PSI_(OAm))通过超声乳化实现对全氟冠醚(PFCE,作为氟源)、紫杉醇(PTX)以及Cu_(7)S_(4)/Au异质结纳米颗粒进行包封组装获得Cu_(7)S_(4)/Au-^(19)F-PTX@PSI纳米复合探针,因而将^(19)F磁共振(^(19)FMR)/CT成像和光热/化学药物联合治疗整合于一个纳米平台。^(19)FMRI、CT及PTT模式相互匹配,均有利并奏效于深部肿瘤成像或治疗。体外和小鼠活体实验结果表明,该纳米探针具有良好的生物相容性和出色的^(19)FMRI/CT及近红外光热成像能力,光热与化疗联合治疗显著抑制了实体肿瘤的生长。研究所展示的多功能诊疗一体化纳米平台为构建新型高效纳米诊疗试剂提供了有益的设计思路和合成策略,有望在将来癌症诊断和治疗中发挥潜力。

基于液相色谱-质谱联用及^19F核磁成像技术测定一种新型氟类化合物

(2-甲基丙烯酸乙酯)-N-(3,3,3-三氟丙基)-N-甲基甘氨酸(CBF3)是本团队新合成的一种19F核磁成像基团。本研究结合液相色谱-质谱联用方法对低浓度样品检测灵敏度高的特点,建立了CBF3液相色谱-质谱联用检测标准曲线,并进行了低、中、高3个浓度组CBF3的提取回收率和精密度等方法验证。结果表明采用液相色谱-质谱联用方法检测CBF3在浓度范围10μg/L^1000μg/L内线性关系良好,相关系数(R)大于0.995,方法定量限为10μg/L;日内精密度和日间精密度(RSD)、提取回收率均符合生物样品的分析要求。为研究CBF3在活体内的代谢情况,在小鼠给药后不同时间点,采用液相色谱-质谱联用方法进行血清CBF3浓度的定量分析,分析结果显示给药45min后血清CBF3浓度迅速下降;同时我们还采用19F核磁成像技术检测小鼠肝脏、肾脏和膀胱组织中的CBF3信号,并证明该化合物一部分可通过肝脏代谢,绝大部分经过肾脏代谢,随尿液形成蓄积在膀胱中,最终通过尿液排出体外的代谢途径。

^(19)F-NMR测定甲磺酸帕珠沙星样品中的氟

研究了19F-NMR技术测定甲磺酸帕珠沙星药物样品中氟的检测条件。优化了实验参数,选用三氟乙酸钠作为内标,重水与去离子水混合液作为溶剂的内标绝对法进行定量分析。测定了甲磺酸帕珠沙星药物样品中氟含量。实验表明,氟的加标回收率在99.2%—100.9%之间,标准偏差为0.00446%—0.0652%,相对标准偏差小于1.459%。

基于硼酸酯的^(19)F磁共振分子探针的设计合成及活体深组织活性氧物种的激活响应成像

活性氧簇(ROS),如过氧化氢,在生物体内的各种生理和病理过程中发挥着重要作用.生物体内活性氧簇水平的异常与多种疾病(炎症、肿瘤和器官损伤等)密切相关,使ROS监测成为研究和诊断这些疾病的重要工具.目前,实现活体内深组织中的活性氧簇成像仍然面临挑战.本文设计并合成了一种响应型的^(19)F磁共振成像(MRI)探针(Gd-DPBF),并将其用于实现对活体内通用活性氧簇的检测和成像.该探针由钆螯合物通过活性氧簇响应的芳香硼酸酯键与含氟砌块相连接构成.体外和体内成像实验结果证实,该探针可以实现在活体荷瘤小鼠中针对肿瘤中高表达的活性氧进行检测和成像,展示了其在生物体内对活性氧簇相关生理过程进行深组织、零生物背景成像方面的潜力.

^(19)F-NMR定量检测1-氰基-2,2,2-三氟-1-乙酸苯乙酯的参数优化

建立了核磁共振氟谱法测定氰化物的氟化衍生化合物1-氰基-2,2,2-三氟-1-苯乙基乙酸酯(CTPA)含量的方法。以乙酸3-氟苄酯为内标,采用5mm Auto XBB探头,探头温度298.2K,考察了不同浓度化合物的定量条件;通过比较化合物样品定量峰与内标物质响应峰面积,计算化合物的含量。结果该化合物的19 F-NMR检测方法在0.5~50μg/mL具有良好的线性(r2=0.9966),该方法的定量限0.5μg/mL,检出限0.2μg/mL;同时考察了该化合物在不同浓度下的测量准确度。

一种新型高灵敏氟-19磁共振成像分子的全合成

以儿茶酚为起始底物,通过七步反应高效简便地合成了含有72个氟原子的化合物9,化合物9以四苯并24-冠-8为母核,高度对称且具有单一的、强的氟信号,这为该分子在低浓度下的氟-19磁共振成像(fluorine-19 magnetic resonance imaging,^(19)F MRI)提供了条件。该项工作提高了各步反应的产率,优化了反应步骤,大大缩短了反应时间,得到的终产物化合物9不仅具有结构上的新颖性,同时在氟-19磁共振成像方面具有非常好的应用前景。

肿瘤微环境响应型^(19)F-MR分子成像纳米探针

肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)与肿瘤的发生、转移及其所在组织的结构、功能密切相关。在体研究肿瘤细胞与TME之间的相互作用机制,是基础和临床研究癌症发生发展、研发肿瘤精准诊断新技术以及开发有效抑制肿瘤新策略的迫切需求。分子影像学(molecular imaging)着眼于生物过程的分子水平变化,对早期TME中分子改变及环境变化的研究具有重要意义。现已研制出多种针对TME响应的19F-MR纳米分子成像探针,这类探针可在复杂TME中的某些特定刺激下,使含氟小分子核团暴露,19F-MR信号明显增强。利用探针这一环境响应特性,结合19F-MR成像,可在分子水平早期可视化TME中的恶性生物学行为,为实现肿瘤早期诊断及精准治疗提供有利支持。该综述从基础及临床研究需求出发,对已研发的TME响应型纳米分子成像探针展开评述,以期为新型纳米探针的设计、制备及临床转化提供研究思路及理论依据。

^(19)F-MRI纳米探针设计及其肿瘤诊疗应用

磁共振成像在肿瘤诊疗中扮演着重要角色,其中氢质子(^(1)H)是MRI时最常用的原子核,但存在对比度不足、敏感度较低等问题,而利用^(19)F原子核进行成像具有无内源性背景干扰的独特优势和能选择性成像的巨大潜力。近年来,纳米技术与分子影像技术充分融合使得基于^(19)F的MRI纳米探针在癌症精准诊疗中凸显成效。本文概述了^(19)F纳米探针的多功能制备策略,归纳其作为理想纳米诊疗探针应具备的材料性能,重点阐述其介导癌症诊疗的最新研究进展,并分析了该领域中存在的一些挑战和前景展望,旨在加深对^(19)F MRI纳米诊疗探针研究现状的认识,推动探针分子设计和功能修饰进一步优化,使其早日实现临床转化。

氟代指示剂在核磁共振检测细胞内钙离子中的应用

细胞内游离Ca2 + 在生理功能中起重要作用 ,本文简介了利用19FNMR测定细胞内游离Ca2 + 浓度的方法 ,该方法所具有的优越性以及氟代指示剂的改进和应用。

新型^(19)F核磁共振定量技术测定氟哌利多含量

目的:建立用19F核磁共振定量技术测定氟哌利多含量的方法。方法:以4-溴-2-氟乙酰苯胺为内标,CDCl3为溶剂测定19F核磁共振谱,通过比较氟哌利多样品定量峰与内标物质响应峰面积,计算氟哌利多的含量。结果:同一样品在相同条件下测定6次,定量峰与内标响应峰比值的RSD为1.04%;将图谱重复积分5次,定量峰与内标峰比值的RSD为1.01%;平行配制3份样品,依据定量峰与内标响应峰比值计算的氟哌利多平均含量为95.7%,RSD为0.53%,19F核磁共振定量结果与质量平衡法测定结果 95.2%一致。结论:19F核磁共振定量法内标选择广泛,图谱解析简单,可以准确快速测定氟哌利多含量。

^(19)F核磁共振定量法测定吉非替尼的含量

目的:建立一种利用^(19)F谱核磁共振技术测定吉非替尼含量的方法。方法:采用^(19)F核磁共振定量法,以4-氟肉桂酸为内标物,使用500 M核磁共振波谱仪,在25℃恒温下采集样品的^(19)F NMR(氟核磁共振)谱。结果:测得吉非替尼含量结果为99.07%,与质量平衡色谱法所得结果(99.29%)基本一致,验证了所建立的氟核磁共振定量法的精密度与重复性良好。结论:本研究建立的测定吉非替尼绝对含量的新方法准确、高效、经济,为含氟药物快速准确的含量测定方法建立奠定了基础。

^(1)H和^(19)F核磁共振定量法测定诺氟沙星标准品的绝对含量

采用^(1)H和^(19)F核磁共振定量法测定诺氟沙星标准品的绝对含量。^(1)H核磁共振定量法以DMSO-d6为溶剂,诺氟沙星峰(δ7.9)为定量峰,马来酸峰(δ6.3)为内标峰。在脉冲程序zg30,采样时间4.09 s,延迟时间20 s,扫描次数为16的条件下采集氢谱。^(19)F核磁共振定量法以利培酮为内标物,诺氟沙星峰(δ-121.3)为定量峰,利培酮峰(δ-109.9)为内标峰。在脉冲程序zgfhigqn.2,延迟时间7 s,扫描次数为16的条件下采集氟谱。^(1)H和^(19)F核磁共振定量法测定结果接近,且与质量平衡法测定结果一致。核磁共振定量法可用来测定诺氟沙星绝对含量,快速、简单高效、且不需要对照品。

^(19)F qNMR定量法测定五氟利多的含量

目的:采用19F核磁共振定量法(19F qNMR法)测定五氟利多的绝对含量。方法:以4-氟肉桂酸为内标,以二甲基亚砜为溶剂,采用Bruker AvanceⅢ400型核磁共振谱仪,脉冲序列zgfhigqn.2在恒温25℃下获取19F核磁共振谱(19F NMR谱),测定五氟利多的含量,驰豫延迟时间(D1)为10 s。结果:以五氟利多的峰(δ-117.4)及4-氟肉桂酸(δ-110.9)峰作为定量峰;同一样品连续测试5次,测得精密度RSD为0.34%;平行配制6份供试溶液,其结果的重复性RSD为0.38%;将样品与内标的NMR峰面积比对其质量比绘制标准曲线,五氟利多的线性范围为6.58~22.85 mg,相关系数为0.999 9;定量限为4.06mg。19F qNMR法测得样品的含量为99.89%,与质量平衡法结果 99.96%基本一致。结论:经方法学验证,19F qNMR法可用于测定五氟利多的绝对含量。

^(19)F qNMR法用于测定草酸艾司西酞普兰及其杂质对照品含量的方法研究

目的:建立用^(19)F qNMR技术测定草酸艾司西酞普兰及其杂质对照品含量的方法。方法:以4-氟肉桂酸为内标,DMSO为溶剂,采用Bruker Avance NEO 600型核磁共振谱仪,进行氟谱测定,计算草酸艾司西酞普兰及其杂质的含量。结果:该方法用于测定草酸艾司西酞普兰及其杂质线性关系良好,精密度高,重复性好。^(19)F qNMR测定草酸艾司西酞普兰及其杂质Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅳ对照品的含量结果分别为99.40%、99.35%、96.59%、97.02%、90.36%。结论:^(19)F qNMR法可用于测定草酸艾司西酞普兰及其杂质的含量,且方法准确、简单、高效、经济、环保。

19FNMR定量法测定氟康唑

目的采用^19FNMR定量法测定氟康唑的含量。方法以4-溴-2-氟乙酰苯胺为内标,氘代二甲基亚砜为溶剂,测定^19FNMR谱,通过比较样品定量峰与内标物质响应峰峰面积,计算氟康唑的含量。结果同一样品在相同条件下测定6次,定量峰与内标响应峰比值的RSD=0.49%;平行配制5份样品溶液,定量峰与内标响应峰比值的RSD=0.41%;平行配制5份样品,氟康唑的平均含量为98.35%,RSD=0.41%,^19FNMR的定量结果与质量平衡法的测定结果(98.23%)基本一致。结论文中所用的^19FNMR定量法可以准确快速测定氟康唑的含量。

^19FNMR定量测定盐酸莫西沙星

目的采用^19FNMR定量方法检测盐酸莫西沙星的含量。方法以4,4’-二氟二苯甲酮为内标,氘代二甲基亚砜为溶剂,测定盐酸莫西沙星核磁共振氟谱,比较样品定量峰与内标物质响应峰峰面积,计算盐酸莫西沙星的含量。结果进样精密度RSD=1.83%,重复性RSD=1.47%,溶液在8 h内稳定,RSD=1.19%;3批盐酸莫西沙星的平均含量分别为99.04%、98.95%、98.93%,RSD分别为0.31%、0.25%、0.41%。结论建立的19F核磁共振定量法适用于盐酸莫西沙星的含量测定。

多种手段测定来氟米特含量研究

分别通过质量平衡法（MB）19F核磁共振定量法（^19F-qNMR）以及差式扫描量热法（DSC）测定来氟米特的含量及纯度。^19F-qNMR法测得来氟米特的含量为100．2％0，与MB法测定来氟米特含量（99．79／6）接近；DSC法测定来氟米特的纯度为99．92％，与HPLC测得纯度（99．78％）一致。3种方法均能准确地测定来氟米特的含量或者纯度，可以相互补充，用于来氟米特的质量控制。

丸剂中非法添加环丙沙星的快速检测方法研究

目的建立一种丸剂中非法添加环丙沙星的快速检测方法。方法通过19F-核磁共振定量(19F-qNMR)法对添加入当归苦参丸中的环丙沙星进行检测,以4,4’-二氟二苯甲酮为内标,以氘代DMSO为溶剂,采集δ−120.3处环丙沙星信号和δ−104.8处内标信号面积,计算环丙沙星的含量。结果以环丙沙星和内标信号面积比为纵坐标,环丙沙星和内标质量比为横坐标,得到线性回归方程为:Y=3.3841X+0.1148,R2=0.992,环丙沙星在5~30 mmol/L具有良好的线性,检出限为7.798×10-2mg/mL,定量限为0.260 mg/mL。建立的19F-qNMR法精密度、重复性、稳定性、加样回收率均符合检测要求。结论所建立的19F-qNMR法样品制备简单,检测时间短,灵敏度高,适合对丸剂中非法添加的环丙沙星进行含量测定。