氢核磁共振定量法测定盐酸伊托必利片含量

以马来酸作为内标物质,氢核磁共振定量法(qHNMR)测定盐酸伊托必利片中盐酸伊托必利的含量。选择盐酸伊托必利δ7. 31~7. 40处为定量峰,马来酸δ6. 31处为内标峰,在恒温300K,弛豫延迟时间15 s,采样时间4. 01 s,扫描次数为64次条件下采集盐酸伊托必利片的qHNMR图谱。比较HPLC法与qHNMR法测定盐酸伊托必利片含量的结果。qHNMR法在2. 31~18. 66 mg·mL^-1的范围内线性关系良好。低、中、高浓度的平均回收率分别为98. 52%、99. 72%、101. 11%,RSD为1. 17%(n=9),检测限(LOD)为50. 0 ng·mL^-1,定量限(LOQ)为120. 0 ng·mL^-1。盐酸伊托必利片的qHNMR法含量测定结果与HPLC法的测定结果基本一致。qHNMR法可用于测定盐酸伊托必利片中盐酸伊托必利含量的测定。

氢核磁共振定量法测定伊立替康中间体含量

目的建立测定伊立替康中间体盐酸1-氯甲酰基-4-哌啶基哌啶含量的氢核磁共振定量法。方法试验条件:内标为盐酸吉西他滨,内标峰为盐酸吉西他滨δ7.99,δ6.26,δ6.21处质子峰,定量峰为待测物δ2.38处质子峰,溶剂为重水;测定温度为22℃,激发脉冲角度为30°,采样32次,脉冲延迟时间为20 s,脉冲宽度为9.42μs,采样时间为3.2768 s,扫描宽度为10000 Hz,线宽因子为0.3 Hz,观测频率为500.11 MHz。结果待测样品和内标物质的量比在0.5106~1.9169范围内与待测样品和内标的峰面积比值线性关系良好(r=0.9973,n=6);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于0.6%。氢核磁共振定量法测定的3批样品含量分别为98.38%,98.19%,98.25%,与质量平衡法结果的98.09%,97.70%,97.88%接近。结论所建立的方法专属性良好,可用于测定盐酸1-氯甲酰基-4-哌啶基哌啶的含量。

核磁共振氢谱法测定注射用微球专用溶剂中硅油的含量

目的:建立测定注射用微球专用溶剂中硅油含量的定量核磁共振氢谱(qHNMR)法。方法:采用Bruker Avance NEO 600型核磁共振波谱仪测定核磁共振氢谱(^(1)H NMR),脉冲序列zg30,弛豫延迟时间15 s,采样次数16,测定温度25℃,以咖啡因为内标,不加四甲基硅烷(TMS)的氘代氯仿为溶剂,对注射用微球专用溶剂中的硅油进行定量研究,以硅油定量峰与内标定量峰面积之比对其含量(μg)绘制标准曲线,计算注射用微球专用溶剂中硅油含量。结果:硅油含量在6~100μg范围内线性关系良好,r=0.9999,低、中、高浓度的平均回收率为97.8%(n=9),重复性RSD为9.8%。结论:该方法操作简单快捷、灵敏度高、结果准确,可用于注射用微球专用溶剂中硅油含量的测定。

定量核磁共振氢谱法测定枸橼酸托法替布片的有效含量

建立了枸橼酸托法替布片中有效含量的定量核磁共振氢谱测定方法。以托法替布化学位移δ7.13为定量峰,3,5-二甲基吡唑化学位移δ5.73为内标峰,氘代二甲亚砜(DMSO-D_(6))为溶剂,使用核磁共振谱仪采集混合物的氢谱,对枸橼酸托法替布片中的有效成分进行定量测定。该方法专一性强,在0.793~7.925 mg/mL范围内呈现良好的线性关系(r^(2)=0.9984)。精密度、重复性和稳定性的相对标准偏差(RSD)分别为0.82%、1.7%和0.67%。该方法测得的枸橼酸托法替布片中托法替布的质量分数为2.25%,其结果与高效液相色谱法基本一致。定量核磁共振氢谱法具有操作方便简单,可同时进行定性与定量,检测时间短,无需对照品等优势,可用于枸橼酸托法替布片有效含量的测定。

氢定量核磁共振法测定光甘草定含量

目的建立氢定量核磁共振法(^(1)H qNMR)法测定光甘草定的含量。方法采用Bruker AVANCE NEO 600 MHz核磁共振仪,以氘代甲醇为溶剂,磺胺多辛为内标,以磺胺多辛δ_(H)8.04(^(1)H,s)、δ_(H)7.73(2H,d)处的峰为内标定量峰,光甘草定δ_(H)6.87(^(1)H,d)、δ_(H)6.79(^(1)H,d)、δ_(H)5.56(^(1)H,d)处的峰为样品定量峰,用内标法进行测定。测定条件:脉冲序列为zg30,弛豫延迟时间为30 s,温度为298 K,扫描次数为16次,采集时间为2.5 s,增益为63.32。结果建立的方法重复性好,精密度高,线性范围广。最终测得本批样品含量为99.42%,与HPLC法所得结果基本一致。结论本文建立的^(1)H qNMR法预处理简单、检测快速高效、结果稳健可靠,为光甘草定的质量控制及对照品的赋值提供了新方法。

氢核磁共振定量法在化学对照品定值中常见问题分析

氢核磁共振定量(1H-qNMR)技术已经广泛应用于化学对照品的定值,是常用的赋值佐证方法,但在具体试验过程中会受多种因素影响。结合实际工作积累,本文讨论了内标与外标定量方法的差异,建议优先选择内标定量方法。探讨了内标选择的考虑因素,要保证内标物质的纯度以及溶解性等;称样方式及称样量对结果的潜在影响;溶剂选择以及温度影响,低温下应注意二甲亚砜的凝固点,升温时不用三氯甲烷等易挥发溶剂。对于弛豫延迟时间等关键仪器参数设置进行讨论,提出解决方法。举例阐述数据处理时的适宜积分方式以及在手动积分时的关注点。同时,依据《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)2020年版四部9101中分析方法验证指导原则,分析氢核磁共振定量试验方法学应考察的具体内容,充分保障其测定结果的准确性。

核磁共振定量法测定利培酮含量

采用氢核磁共振定量法和氟核磁共振定量法测定利培酮含量。氢核磁共振定量法以利培酮δ7.29~7.35处质子峰为定量峰,马来酸δ6.02处为内标峰,在恒温300 K,采样时间4.0 s,弛豫延迟时间15 s,扫描次数为32次条件下采集氢谱。氟核磁共振定量法以4-溴-2-氟-乙酰苯胺为内标,在恒温300 K,谱宽12 500.0 Hz,中心频率-43 662.7 Hz下采集氟谱。测试结果显示,利培酮氢核磁共振定量法和氟核磁共振定量法的含量测定结果基本与质量平衡法的结果一致。因此,核磁共振法可用于利培酮绝对含量的测定,具有快速、简单、准确的优势。

核磁共振定量法测定恩曲他滨绝对含量

分别采用氢核磁共振定量法和氟核磁共振定量法测定恩曲他滨绝对含量。氢核磁共振定量法以恩曲他滨δ8.32-8.40处质子峰和对苯二甲酸二甲酯δ8.12处为定量峰,在恒温27℃,采样时间4.01 s,弛豫延迟时间10s,扫描次数为64条件下采集氢谱。氟核磁共振定量法以4′-溴-2′-氟-乙酰苯胺为内标,在恒温27℃,谱宽为29 296.87 Hz,中心频率为-54 667.50 Hz下采集氟谱。结果显示,氢核磁共振定量法和氟核磁共振定量法测定结果基本与质量平衡法结果一致。因此,核磁共振法测定恩曲他滨绝对含量具有专属性高、准确、快速等优势。

核磁共振氢谱定量法分析樟树籽油的甲酯化率

采用核磁共振氢谱定量法(q1H-NMR)研究樟树籽油的甲酯化率。以氘代三氯甲烷为溶剂、四甲基硅烷为内标,对不同质量浓度的月桂酸甲酯和甘油三月桂酸酯混合标准品的核磁共振氢谱(1H-NMR)进行分析,根据定量关系,建立标准曲线;并对不同反应时间的樟树籽油甲酯化率进行测定。结果表明:以月桂酸甲酯特征峰(δ=3.67)为定量峰时,甲氧基(-OCH3)峰面积与月桂酸甲酯含量的线性回归方程为y=-0.97+0.61x(R2=0.9991);以甘油三月桂酸酯特征峰(δ=4.13~4.18和δ=4.28~4.34)为定量峰时,甘油骨架上亚甲基(-CH2-CH-CH2-)峰面积与月桂酸甲酯含量的线性回归方程为y=34.6-0.35x(R2=0.9998)。樟树籽油甲酯化衍生过程中,随着衍生时间增加,-CH2-CH-CH2-信号峰强度逐渐减弱,-OCH3信号峰强度逐渐增强;当衍生时间为10 min时,甲酯化率达到99.1%。q1H-NMR法的定量分析结果与GC-MS法基本一致,无显著性差异(P>0.05),因此可用于樟树籽油衍生过程中甲酯化率的分析,且本方法具有前处理简单、分析时间短、准确度高等优点。

氢定量核磁共振法测定金丝桃苷标准物质纯度

基于核磁谱峰的积分信号与产生此信号的原子核数成正比的原理,建立准确的氢定量核磁共振法(1H-qNMR)测定金丝桃苷标准物质(CRMs)纯度,并评估不确定度。实验以二甲基亚砜(DMSO-d6)为氘代溶剂,尼泊金乙酯GBW(E)100064为内标物,谱宽为16 ppm,激发偏置为5.23 ppm,弛豫延迟时间为12 s,扫描次数为32次,采用金丝桃苷化学位移(δ6.21)为定量峰,尼泊金乙酯化学位移(δ4.24)为内标峰,定量金丝桃苷纯度。1H-qNMR测得金丝桃苷纯度为91.86%,精密度RSD为0.085%,重复性RSD为0.53%,质量浓度在9.85~32.02 g/L范围内的线性关系为:y=6.3355x-0.1556(R^2=0.9988,y、x分别代表金丝桃苷与尼泊金乙酯的质量比和积分信号比),评估不确定度为0.55%。1H-qNMR测定结果与质量平衡法一致,表明氢定量核磁共振法适用于金丝桃苷的定量分析。

核磁共振定量法测定盐酸莫西沙星的含量

采用氢核磁共振定量法和氟核磁共振定量法测定盐酸莫西沙星的含量。氢核磁共振定量法以盐酸莫西沙星δ=8.66处为定量峰,3,5-二甲基吡唑δ=5.74处为内标峰,对应测定条件为恒温25℃、脉冲宽度14.8 s、扫描次数16次、采样时间4 s、弛豫延迟时间15 s。氟核磁共振定量图谱在恒温25℃、谱宽12500 Hz、中心频率-43662.7 Hz的条件下采集,并以三氟乙酸作为内标。结果表明:使用氢核磁共振定量法和氟核磁共振定量法测定出盐酸莫西沙星的含量与使用质量平衡法的结果基本一致。由此可知,核磁共振定量法可用于盐酸莫西沙星含量的测定,并且具有快速、准确以及操作简单等优势。

定量核磁共振法测定甲磺酸伊马替尼质量分数

采用定量核磁共振法(qNMR)测定甲磺酸伊马替尼原料质量分数。采用Bruker AVANCEⅢ600 MHz核磁共振波谱仪测定核磁共振氢谱,对甲磺酸伊马替尼原料进行质量分数测定,并与高效液相色谱法测定结果相比较。当m(甲磺酸伊马替尼)∶m(马来酸)为0.92~5.77时与定量峰面积比线性关系良好,精密度、重复性和稳定性的相对标准偏差(Relative standard deviation,简称RSD)分别为0.93%,1.6%,1.08%。qNMR法测得甲磺酸伊马替尼原料质量分数为98.6%,与高效液相色谱法的测定结果(98.2%)基本一致。建立的qNMR方法操作简单、准确,可用于甲磺酸伊马替尼质量分数测定。

核磁共振波谱法测定依非韦伦含量

分别采用氢核磁共振定量法和氟核磁共振定量法测定依非韦伦含量。氢核磁共振定量法以依非韦伦δ1.58～1.65处质子峰为定量峰,马来酸δ6.22处为内标峰。氟核磁共振定量法以δ-80.58处作为定量峰,4-溴-2-氟-乙酰苯胺δ-121.70作为内标峰。通过比较依非韦伦的定量峰与内标物质内标峰峰面积,计算依非韦伦的含量。测试结果显示,氢核磁共振定量法和氟核磁共振定量法的含量测定结果基本一致。因此,核磁共振法可用于依非韦伦绝对含量的测定,具有快速、准确的优势。

定量核磁共振氢谱法测定4种盐酸莫西沙星杂质对照品的含量

目的建立测定4种盐酸莫西沙星杂质A、B、C、D对照品含量的定量核磁共振氢谱法(quantitative proton nuclear magnetic resonance,qHNMR)。方法采用核磁共振波谱仪采集4种盐酸莫西沙星杂质对照品的一维定量氢谱(^(1)H-NMR),以1,3,5-三甲氧基苯作为内标物,氘代二甲亚砜(DMSO-d6)或氘代氯仿(CDCl_(3))作为溶剂,脉冲程序为noesyigld1d,扫描次数(NS)为32次,弛豫延迟时间(D1)为30 s,测试温度为25℃,对4种盐酸莫西沙星杂质对照品进行定量研究。结果4种盐酸莫西沙星杂质对照品定量峰和1,3,5-三甲氧基苯定量峰信号在核磁共振氢谱上分离度良好,在线性范围内线性关系良好(r^(2)>0.9994),进样精密度和重复性良好。qHNMR法测定含量结果与质量平衡法测定含量结果基本一致。结论建立的qHNMR法准确可靠、简便快速,为该类杂质含量测定提供了新的方法,也可作为该类化学对照品采用质量平衡法定值结果的验证方法。

定量核磁共振氢谱检测右佐匹克隆片的含量

目的:建立定量核磁共振氢谱(qHNMR)测定右佐匹克隆含量的方法。方法:以1,3,5-三甲氧基苯δ6.08处质子信号为内标峰,以右佐匹克隆δ8.54、8.38、8.12、7.78处质子信号为定量峰,以DMSO-d_(6)为溶剂,在恒温298 K,弛豫延迟时间10 s,扫描次数32次条件下采集氢谱。结果:定量核磁共振氢谱法测定右佐匹克隆片中右佐匹克隆平均含量为2.94%,即平均每片中含右佐匹克隆3.00 mg,RSD为0.15%,与药物说明标示的量基本一致。结论:定量核磁共振氢谱可用于药物中右佐匹克隆含量的测定,并且具有快速、准确以及操作简单等优势。

核磁共振氢谱法对3种低相对分子质量肝素中残留溶剂乙醇的定性和定量分析

目的 建立测定达肝素钠、依诺肝素钠、那屈肝素钙3种低相对分子质量肝素中残留溶剂乙醇含量的定量核磁共振氢谱法(quantitative proton nuclear magnetic resonance, qHNMR)。方法 采用Bruker AVANCE NEO 600 MHz核磁共振波谱仪,采集3种低相对分子质量肝素的核磁共振氢谱(^(1)H-NMR),以2,2,3,3-d4-3-(三甲基硅基)丙酸钠盐(TSP-d4)作为内标物,重水(D2O)为溶剂,90°脉冲,采样次数(NS)为32次,测试温度25℃采样时间(AQ)为4.59 s,弛豫延迟时间(D1)为40 s,对3种低相对分子质量肝素中的残留溶剂乙醇进行定性和定量分析。结果 样品的^(1)H-NMR谱在化学位移δ 1.18和δ 3.65分别出现甲基和亚甲基质子信号,结合耦合常数可以确定样品中含有残留溶剂乙醇。同时,乙醇和TSP-d4定量峰信号在^(1)H-NMR谱上分离度良好,乙醇在线性范围内线性关系良好(r>0.999 9),方法精密度和重复性良好,平均回收率(n=9)为101.55%,3种低相对分子质量肝素中的乙醇含量为0.025%~0.493%,测定结果与顶空气相色谱法测定结果基本一致。结论 建立的qHNMR方法可以准确识别低相对分子质量肝素样品中是否含有乙醇,同时可以对其进行准确定量,相比于经典的气相色谱方法更加简便快速,并且不破坏样品,拓宽了残留溶剂的检测手段,可为不同低相对分子质量肝素产品中残留溶剂乙醇测定提供参考。

定量核磁共振氢谱法测定那屈肝素钙中钙离子的含量

目的:建立采用定量核磁共振氢谱法(qHNMR法)测定那屈肝素钙中钙离子含量。方法:采集核磁共振氢谱(1H NMR),zg 30脉冲,弛豫延迟时间为15 s,选择乙二胺四乙酸(EDTA)与钙离子络合物Ca-EDTA的信号峰作为钙离子的定量峰,以马来酸为内标物,对那屈肝素钙中钙离子进行定量分析。结果:Ca-EDTA和马来酸定量峰信号在1H NMR谱上分离度良好,样品与内标物的质量比在0.546~12.238,与其定量峰面积比呈线性关系(r=0.999 9),精密度RSD为0.65%,重复性RSD为0.77%,平均加样回收率为99.7%(RSD为1.3%),采用qHNMR测定9批那屈肝素钙样品中钙离子含量为9.54%~9.99%,测定结果与电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-AES)测定结果基本一致。结论:建立的qHNMR法操作简便、快速、准确,可用于那屈肝素钙中钙离子含量的测定。

核磁共振波谱法对维莫非尼的定性和定量分析

目的:建立定量核磁共振氢谱法(qHNMR)测定维莫非尼含量的方法。方法:首先采用质谱、核磁共振方法对维莫非尼结构进行确证,然后采用Bruker ANANCE NEO 600型核磁共振波谱仪测定一维定量氢谱,90°脉冲,弛豫时间(D1)15 s,扫描次数(NS)32次,测定温度25℃,以对苯二酚为内标,氘代二甲基亚砜(DMSO-d_(6))为溶剂,对维莫非尼进行定量研究。结果:对维莫非尼核磁共振氢谱和碳谱数据进行归属,利用qHNMR对维莫非尼进行定量分析,测得含量为98.78%,与质量平衡法测得的结果(98.91%)基本一致。结论:建立的qHNMR法操作简单、快速、准确,可用于维莫非尼含量测定。

基于定量核磁共振氢谱的神曲加工炮制过程中葡萄糖量变规律研究

建立基于定量核磁共振氢谱(quantitative proton nuclear magnetic resonance,qHNMR)的神曲中葡萄糖含量的测定方法,对市售神曲中葡萄糖的含量进行分析,并探究神曲加工炮制过程中葡萄糖含量的变化规律。以重水为溶剂,2,2,2,3-d4-3-(三甲基硅基)丙酸钠盐为内标,以化学位移δ4.65、5.24处葡萄糖端基质子双峰信号作为定量峰,对神曲中葡萄糖含量进行定量。经方法学评价,葡萄糖在0.10~6.44 mg·mL-1呈现良好的线性关系,精密度、稳定性、重复性和加样回收率试验的RSD均小于2.3%。市售神曲中葡萄糖含量波动明显,推测与神曲的发酵天数、麸面比及炮制方式等有关。神曲中葡萄糖含量随发酵天数增加呈先增加后降低的趋势;全麦麸或全面粉发酵的神曲中葡萄糖含量明显低于麦麸和面粉混合发酵的神曲;麸炒神曲较生神曲葡萄糖含量略有降低,而焦神曲中葡萄糖含量显著降低。该实验建立的qHNMR方法简单快捷,准确度高,为神曲中葡萄糖含量测定提供了新的方法。此外,该研究阐明了神曲加工炮制过程中葡萄糖的量变规律,对判断神曲发酵程度具有指示意义,为揭示神曲的发酵机制,完善神曲的质量控制方法提供了科学依据。

定量核磁共振氢谱法测定5种N-亚硝胺类化合物的含量

目的:建立了测定N-亚硝基二正丙胺(N-nitrosodipropylamine,NDPA)、N-亚硝基二正丁胺(N-nitrosodibutylamine,NDBA)、N-亚硝基二异丙胺(N-nitrosodiisopropylamine,NDIPA)、N-亚硝基-N-甲基苯胺(N-nitroso-N-methylphenylamine,NMPA)和N-亚硝基-N-乙基苯胺(N-nitroso-N-ethylphenylamine,NEPA)5种N-亚硝胺类化合物含量的定量核磁共振氢谱法(quantitative proton nuclear magnetic resonance,qHNMR)。方法:采用BRUKER ANANCE NEO 600型核磁共振波谱仪采集一维核磁共振定量氢谱,以1,3,5-三甲氧基苯为内标,氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)为溶剂,90°脉冲,采样次数为32次,采样时间为2.75 s,弛豫延迟时间(D1)为30 s,对5种N-亚硝胺类化合物进行定量研究。结果:5种N-亚硝胺类化合物qHNMR法的结果与质量平衡法结果基本一致。结论:本文建立的qHNMR法简单快捷,准确性高,为N-亚硝胺类化合物含量测定提供了新的方法,同时作为该类化学对照品质量平衡法定值结果的有力佐证,使质量平衡法赋值更加准确可靠。