双嘧达莫与低分子肝素对肾病综合征患儿凝血功能、肾功能、内皮功能及β_(2)糖蛋白Ⅰ/氧化低密度脂蛋白复合物的影响

目的 研究双嘧达莫与低分子肝素对肾病综合征患儿凝血功能、肾功能、内皮功能及β_(2)糖蛋白Ⅰ(β_(2)-GPⅠ)/氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)复合物的影响。方法 选取广西中医药大学第一附属医院2021年4月至2022年6月收治的90例肾病综合征患儿,按照随机数字表法将其分为对照A组(30例)、对照B组(30例)和观察组(30例)。对照A组给予甲泼尼龙+低分子肝素治疗,对照B组给予甲泼尼龙+双嘧达莫治疗,观察组行甲泼尼龙+低分子肝素+双嘧达莫治疗,三组均连续治疗30 d。比较三组治疗效果;比较三组治疗前后凝血功能指标[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)],肾功能指标[尿素氮(BUN)、胱抑素C(CysC)、血肌酐(Scr)、24 h尿蛋白定量],内皮功能指标[内皮素1(ET-1)、血管性血友病因子(v WF)]及β_(2)-GPⅠ/ox-LDL复合物;观察组三组不良反应发生情况。结果 观察组与对照A组疗效比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组疗效优于对照B组(P<0.05)。治疗后,观察组APTT、PT水平长于对照A组和对照B组(P<0.05)。治疗后,观察组D-D、FIB、BUN、Cys C、Scr、24 h尿蛋白定量、ET-1、vWF、β_(2)-GPⅠ/ox-LDL复合物水平低于对照A组和对照B组(P<0.05)。观察组与对照A组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组与对照B组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 双嘧达莫联合低分子肝素可提高肾病综合征患儿临床疗效,改善凝血功能及肾功能,且用药安全性高。

β_2-糖蛋白Ⅰ/氧化型低密度脂蛋白复合物的研究进展

β2-糖蛋白Ⅰ与氧化型低密度脂蛋白结合形成2β-糖蛋白Ⅰ/氧化型低密度脂蛋白复合物,它在体内存在与否和高氧化应激状态、炎症有关。自身免疫性疾病以及一些伴有心血管病变的有慢性炎性反应的疾病患者血清β2-糖蛋白Ⅰ/氧化型低密度脂蛋白复合物水平明显升高,自身免疫性疾病患者血清中还可检测到复合物自身抗体的存在。体外实验显示,β2-糖蛋白Ⅰ/氧化型低密度脂蛋白复合物与其自身抗体形成的免疫复合物,通过Fcγ受体途径被巨噬细胞摄取,这可能是导致氧化型低密度脂蛋白被巨噬细胞摄取的主要路径之一。

肾病综合征患儿血清β_2-糖蛋白I/氧化低密度脂蛋白复合物水平升高的研究

目的在血循环中氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)易与β2-糖蛋白I(β2-glycoproteinI,β2-GPI)结合成稳定的β2-GPI/ox-LDL复合物,该复合物是血栓形成和动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)发生的新的危险因素。原发性小儿肾病综合征(nephritic syndrome,NS)患者伴有高脂血症和高氧化应急状态,具有肾小球硬化和血栓的危险性。文中检测NS患儿血清β2-GPI/ox-LDL复合物水平,分析其与NS病情的关系。方法以抗人β2-GPI抗体为包被抗体,酶标记抗载脂蛋白B(apo B)为检测抗体的血清β2-GPI/ox-LDL ELISA检测法,检测84例NS患儿和84例年龄、性别匹配的健康儿童(对照组)的血清。用ELISA法检测血清ox-LDL浓度,同时检测研究对象常规血脂水平和肾功能指标。结果 NS患儿血清β2-GPI/ox-LDL水平显著高于对照组[(1.08±0.47)U/ml vs(0.54±0.29)U/ml,P<0.001],ox-LDL浓度也明显升高[(143.76±64.55)mg/L vs(89.11±53.80)mg/L,P<0.01]。相关分析显示,β2-GPI/ox-LDL水平与ox-LDL(r=0.721)、LDL-C(r=0.518)、TC(r=0.503)、TG(r=0.380)以及尿蛋白(r=0.326)显著正相关(均为P<0.01),与血清清蛋白(Alb)显著负相关(r=-0.417,P<0.01)。进一步多因素分析显示,NS患儿β2-GPI/ox-LDL复合物水平49.5%的变化由ox-LDL(β=0.527,P<0.01)、尿蛋白(β=0.172,P=0.036)和LDL-C(β=0.203,P=0.037)决定。结论血清β2-GPI/ox-LDL水平升高与NS患儿病情有关。

吗替麦考酚酯联合小剂量糖皮质激素对IgA肾病患者血清离子及β_2-糖蛋白I/氧化低密度脂蛋白复合物水平的影响

目的探讨吗替麦考酚酯联合小剂量糖皮质激素对IgA肾病血清离子及β_2-糖蛋白I/氧化低密度脂蛋白复合物(β_2-GPI/ox-LDL)水平的影响。方法选取IgA肾病患者68例,随机分为2组各34例。对照组在常规治疗基础上予以小剂量糖皮质激素治疗,研究组在常规治疗基础上予以吗替麦考酚酯联合小剂量糖皮质激素治疗。测定血清学指标,记录不良反应状况。结果 2组治疗后血磷及血清β_2-GPI/ox-LDL复合物水平显著降低,血钙水平显著升高,肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清胱抑素C(CysC)及24 h尿蛋白水平显著降低,血清转化生长因子β_1(TGF-β_1)、白细胞介素4(IL-4)水平显著降低,γ干扰素(IFN-γ)水平显著升高,血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、内皮素-1(ET-1)水平显著降低(P<0.05);与对照组比较,研究组治疗后血磷及β_2-GPI/ox-LDL水平显著较低,血钙水平显著较高,Scr、BUN、CysC及24 h尿蛋白水平显著较低,血清TGF-β_1、IL-4水平显著较低,IFN-γ水平显著较高,血清VEGF、ET-1和MMP-9水平显著较低(P<0.05)。结论吗替麦考酚酯联合小剂量糖皮质激素对IgA肾病疗效确切,能降低血清离子及β_2-GPI/ox-LDL水平。

氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体复合物促进人脐静脉内皮细胞活性氧生成并诱导其凋亡

目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/aβ2GPI)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的影响以及ROS活性氧(ROS)在其中的作用。方法分别用β2GPI、 aβ2GPI、β2GPI/aβ2GPI复合物、 oxLDL、 oxLDL/β2GPI复合物、 oxLDL/β2GPI/兔IgG(R-IgG)复合物、 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物刺激HUVEC,利用Western blot法检测凋亡相关蛋白BAX、 Bcl2和裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)的蛋白水平;异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡率、二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)标记结合流式细胞术检测细胞ROS水平; CCK-8法检测各处理组对HUVEC活力的影响;采用抗氧化剂罗布麻宁(apocynin)或二苯基碘氯化物(DPI)预处理后观察ROS水平的改变以及对oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物诱导的HUVEC凋亡的影响。结果 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物能显著降低HUVEC的活力,增加细胞BAX、 c-caspase-3蛋白水平,降低Bcl2蛋白水平,促进HUVEC凋亡; oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物引起细胞ROS水平升高,抗氧化剂处理后,细胞内ROS水平降低,细胞凋亡减少。结论 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物可以通过提高ROS来诱导HUVEC凋亡。

β_2-糖蛋白I与氧化脂蛋白复合物的研究进展

β2-糖蛋白-I(beta2-glycoprotein I,β2-GPI)在体内与氧化低密度脂蛋白、氧化脂蛋白(a)结合形成复合物,在伴有高动脉粥样硬化风险的自身免疫性疾病及心脑血管疾病等患者血清中水平显著升高,且与体内高氧化应激状态和炎症反应相关,是预测动脉粥样硬化发生、发展的新的危险因素。本文就近年来有关β2-GPI与氧化脂蛋白复合物的检测和临床意义研究作一综述。

β2GPI/aβ2GPI通过激活TLR4抑制THP-1巨噬细胞对氧化型低密度脂蛋白的摄取

目的探讨β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体复合物(β2GPI/aβ2GPI)对巨噬细胞脂质摄取功能和B型清道夫受体CD36表达的影响,以及Toll样受体4(TLR4)在该过程中的作用。方法用100 ng/mL佛波酯(PMA)将THP-1人单核细胞诱导为THP-1巨噬细胞,通过形态学变化和1,1'-二十八烷基-3,3,3',3'-四甲基吲哚碳花菁高氯酸盐标记的氧化低密度脂蛋白(DiI-oxLDL)吞噬试验加以鉴定。用RPMI1640培养液、β2GPI、抗β2糖蛋白I抗体(aβ2GPI)和β2GPI/aβ2GPI处理THP-1巨噬细胞,实时荧光定量PCR和Western blot法检测TLR4 mRNA和蛋白水平。用RPMI1640培养液、氧化低密度脂蛋白(oxLDL)、oxLDL联合β2GPI/aβ2GPI和oxLDL联合LPS处理THP-1巨噬细胞,油红O染色观察胞内脂质积累,免疫荧光细胞化学染色法检测CD36的表达,实时荧光定量PCR检测CD36 mRNA水平,Western blot法检测CD36蛋白水平。利用TLR4阻断剂TAK-242(1μg/mL)预处理THP-1巨噬细胞,观察抑制TLR4对上述刺激下THP-1巨噬细胞脂质积累和CD36表达的影响。结果PMA处理后,THP-1细胞呈现巨噬细胞形态并具备脂质吞噬能力;与RPMI1640相比,β2GPI/aβ2GPI处理可显著增加THP-1巨噬细胞TLR4表达;与单独oxLDL处理相比,oxLDL联合β2GPI/aβ2GPI能够抑制THP-1巨噬细胞的脂质积累和CD36表达,阻断TLR4可以部分逆转这一现象。结论β2GPI/aβ2GPI能激活TLR4抑制巨噬细胞对oxLDL的摄取和CD36表达。

β_2-糖蛋白I/ox-LDL免疫复合物与抗磷脂综合征血管疾病关系的研究进展

β_2-糖蛋白I(β_2-GPI)是抗磷脂综合征(APS)患者体内的主要自身抗原,其可以同氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)等阴性物质结合形成稳定的β_2-GPI免疫复合物。β_2-GPI免疫复合物以及抗β_2-GPI免疫复合物抗体的免疫机制显著促进抗磷脂综合征患者动脉粥样硬化斑块损伤和血栓形成。本文从β_2-GPI/ox-LDL免疫复合物及其抗β_2-GPI/ox-LDL免疫复合物抗体的形成和病理作用进行综述,并重点介绍β_2-GPI-DⅤ阻断β_2-GPI/ox-LDL复合物形成的机制,为β_2-GPI/ox-LDL免疫复合物引起的动脉粥样硬化等心血管疾病提供可能的药物靶点和治疗思路。

oxLDL-β_2 GPⅠ复合物与冠心病病情的相关性

目的探讨冠心病(CAD)患者血清中氧化型低密度脂蛋白-β2糖蛋白Ⅰ复合物(oxLDL-β2GPⅠ)水平以及与病情的相关性。方法应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测210例CAD患者及180例对照者血清中oxLDL-β2GPⅠ水平,并作与病情的相关性分析。结果轻、中、重及超重度CAD患者血清中ox-LDL-β2GPⅠ水平分别为(1.91±0.76)U/mL、(2.27±0.93)U/mL、(4.65±1.28)U/mL和(8.04±3.12)U/mL,均明显高于对照组,并且CAD患者的血清oxLDL-β2GPⅠ水平与其冠状动脉狭窄程度呈正相关(r=0.387,P<0.05)。结论 CAD患者血清oxLDL-β2GPⅠ水平的增高能反映CAD的严重程度,可用于CAD的病情评估。

2型糖尿病患者血清β_2-GPI/ox-LDL复合物水平

目的检测分析2型糖尿病(T2DM)患者血清β2-糖蛋白I/氧化低密度脂蛋白(β2-GPI/ox-LDL)复合物水平。方法以抗人β2-GPI抗体为包被抗体、酶标记抗apoB为检测抗体的血清β2-GPI/ox-LDLELISA检测法,对42例T2DM患者和41例年龄、性别匹配的健康对照者检测分析。用ELISA方法检测血清ox-LDL水平,同时对受检者进行常规血脂水平测定。结果 T2DM组β2-GPI/ox-LDL水平显著高于对照组[(0.89±0.15)U/mlvs(0.81±0.09)U/ml,P<0.05],ox-LDL浓度也明显升高[(48.10±60.40)mg/Lvs(27.06±12.25)mg/L,P<0.05]。相关分析显示,β2-GPI/ox-LDL水平与总胆固醇(TC)、LDL-胆固醇(LDL-C)以及ox-LDL呈显著正相关。结论 T2DM患者血清β2-GPI/ox-LDL复合物水平增高,患者高浓度的血清LDL-C、ox-LDL和机体的高氧化应激状态是β2-GPI/ox-LDL升高的主要原因。

血清ox-LDL/β_2-GPI复合物在2型糖尿病合并冠心病中的作用研究

目的探讨血清氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)/β2-糖蛋白Ⅰ(β2-GPI)复合物水平与2型糖尿病(T2DM)合并冠心病(CHD)的关系及其临床意义。方法选取T2DM合并CHD患者68例、单纯T2DM患者69例、单纯CHD患者65例、门诊健康体检者60名。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清ox-LDL/β2-GPI复合物水平,并测定空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、糖化血红蛋白(HbA1C)和空腹血清胰岛素(FINS)、计算体重指数(BMI)及腰臀比(WHR),并作相关分析。结果 T2DM合并CHD组血清ox-LDL/β2-GPI复合物水平均显著高于单纯T2DM组、单纯CHD组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05);T2DM合并CHD组ox-LDL/β2-GPI复合物水平均与TG和HOMA-IR呈正相关(r=0.219、0.228,P均<0.01);TG和ox-LDL/β2-GPI复合物是T2DM危险因素,ox-LDL/β2-GPI复合物和HbA1C是T2DM合并CHD的危险因素。结论血清ox-LDL/β2-GPI复合物与T2DM合并CHD的发病有一定联系。

他克莫司对儿童难治性肾病综合征患儿微炎症状态及血清β2-GPI/ox.LDL复合物水平的影响研究

目的探讨他克莫司对儿童难治性肾病综合征患儿微炎症状态及血清β2-糖蛋白I/氧化低密度脂蛋白复合物(β2-GPI/ox.LDL)复合物水平的影响。方法将2018年7月1日至2020年6月30日在本院接受治疗的106例难治性肾病综合征患儿,按抽签法分为对照组和研究组,各53例,对照组患儿采用环磷酰胺+糖皮质激素,研究组采用他克莫司+糖皮质激素,两组均治疗3个月后,对比两组患儿临床效果、微炎症状态、血清β2-GPI/ox.LDL复合物水平。结果研究组总有效率高于对照组(P<0.05);治疗后研究组白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-6(IL-6)、C-反应蛋白(CRP)均低于对照组(P<0.05);治疗后研究组β2-GPI/ox.LDL、血磷均低于对照组(P<0.05),血钙高于对照组(P<0.05)。结论他克莫司治疗儿童难治性肾病综合征,对其微炎性状态改善明显,临床效果较好,且能减低血清β2-GPI/ox.LDL复合物水平。

2型糖尿病微血管并发症患者血清miR-152,β_(2)-GPI/ox-LDL和β2-GPⅠ-Lp(a)水平联合检测的价值研究

目的探讨血清miR-152,β_(2)-糖蛋白I氧化低密度脂蛋白复合物(β_(2)-GPI/ox-LDL)和β_(2)-糖蛋白I脂蛋白a复合物[β_(2)-GPⅠ-Lp(a)]水平联合检测对2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)微血管并发症(type 2 diabetes associated microvascular complications,T2DMC)的诊断价值。方法选取经临床确诊的T2DM患者79例,T2DMC患者78例及体检健康者78例,应用实时荧光定量PCR技术检测血清miR-152的水平,ELISA法检测血清β_(2)-GPI/ox-LDL和β_(2)-GPⅠ-Lp(a)水平,评价上述指标单独或联合检测对于T2DMC的诊断价值。结果血清miR-152,β_(2)-GPI/ox-LDL和β_(2)-GPⅠ-Lp(a)在T2DM患者中分别为44.99(25.71,77.97)fmol/L,0.574(0.376,1.040)U/ml和0.536(0.198,1.056)U/ml,T2DMC患者分别为65.27(43.7,118.1)fmol/L,0.829(0.591,1.138)U/ml和0.597(0.186,1.139)U/ml,均高于健康对照组[13.68(8.14,21.63)fmol/L,0.497(0.196,0.677)U/ml和0.156(0.078,0.476)U/ml],差异有统计学意义(U=616~2192,均P<0.05)。ROC曲线显示,血清miR-152,β_(2)-GPI/ox-LDL和β_(2)-GPⅠ-Lp(a)对T2DMC诊断的曲线下面积(AUC)分别为0.899(95%CI:0.847~0.950),0.785(95%CI:0.716~0.855)和0.718(95%CI:0.637~0.798);三者联合检测对T2DMC的AUC为0.963(95%CI:0.934~0.992)。Spearman秩相关分析显示,血清miR-152,β_(2)-GPI/ox-LDL和β_(2)-GPⅠ-Lp(a)组合与LDL水平呈正相关(r=0.188,P<0.05)。结论血清miR-152联合β_(2)-GP1-ox-LDL,β_(2)-GP1-Lp(a)对于T2DMC诊断具有较高的灵敏度和特异度,可有效弥补单指标检测不足,是T2DMC潜在的辅助诊断标志物。

ox-LDL/β2GPI/aβ2GPI复合物促进小鼠RAW264.7细胞凋亡和炎症因子表达

目的 探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(ox-LDL/β2GPI/aβ2GPI)复合物对小鼠RAW264.7细胞凋亡和炎症因子表达的影响及机制。方法 分别用培养基、ox-LDL、β2GPI/抗β2GPI抗体复合物、ox-LDL/β2GPI复合物、ox-LDL/抗β2GPI抗体复合物和ox-LDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物处理细胞。用TAK-242阻断Toll样受体4(TLR4)、雷帕霉素(rapamycin)阻断哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)探究相关通路的作用。最后,用不同浓度的TNF-α刺激细胞。用凋亡试剂盒检测细胞的凋亡,实时定量PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的mRNA表达,Western blot法检测TNF-α、IL-1β、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)的蛋白水平。结果 ox-LDL/β2GPI/aβ2GPI复合物能够诱导细胞凋亡、Bcl2表达降低、c-caspase-3表达增加,还可促进TNF-α和IL-1β表达,通路抑制剂可部分减轻凋亡水平和炎症因子表达;一定浓度的TNF-α可促进细胞凋亡。结论 ox-LDL/β2GPI/aβ2GPI复合物通过TLR4、mTOR通路诱导RAW264.7细胞表达炎症因子,促进细胞凋亡。

低分子肝素联合泼尼松治疗小儿肾病综合征的临床疗效及其对患儿肾功能和血清β2-GPⅠ/ox-LDL的影响

目的探讨低分子肝素联合泼尼松治疗小儿肾病综合征(NS)的临床疗效及其对患儿肾功能、血清β2-GPⅠ/ox-LDL的影响。方法选取中山大学附属第五医院2015年6月—2017年6月收治的NS患儿106例,采用随机数字表法分为对照组和观察组,各53例。对照组患儿采用泼尼松治疗,观察组患儿在对照组基础上加用低分子肝素治疗,两组患儿均持续治疗1个月。比较两组患儿的临床疗效、治疗前后肾功能[尿素氮(BUN)、胱抑素C(CysC)、血肌酐(Scr)、24 h尿蛋白(24 h Upro)]、内皮功能[内皮素1(ET-1)、血管性血友病因子(vWF)]及血清β2-GPⅠ/ox-LDL改善情况,并观察两组患儿不良反应发生情况。结果观察组患儿临床疗效优于对照组(P<0.05)。治疗前,两组患儿BUN、CysC、Scr、24 h Upro比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组患儿BUN、CysC、Scr、24 h Upro低于对照组(P<0.05)。治疗前,两组患儿ET-1、Vwf、β2-GPⅠ/ox-LDL比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组患儿ET-1、Vwf、β2-GPⅠ/ox-LDL低于对照组(P<0.05)。两组患儿均未出现严重不良反应。结论低分子肝素联合泼尼松治疗NS的临床疗效确切,其可有效改善患儿肾功能,保护血管内皮功能,降低血清β2-GPⅠ/ox-LDL水平,且安全性高。

阿托伐他汀对Ox-LDL/β2GPⅠ/anti-β2GPⅠ诱导的血管内皮功能紊乱的改善作用及其机制

目的:探讨阿托伐他汀(ATO)对氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)/β2糖蛋白Ⅰ(β2GPⅠ)/抗β2糖蛋白Ⅰ抗体(anti-β2GPⅠ)复合物引发的血管内皮细胞损伤的改善作用以及对TRAF3-相互作用蛋白2(TRAF3IP2)/Ikappa B激酶(IKK)/核因子κB(NF-κB)信号通路的影响,阐明ATO改善抗磷脂综合征(APS)背景下血管内皮细胞损伤的可能分子机制。方法:通过给予人脐静脉内皮细胞(HUVECs)β2GPⅠ(100 mg·L^(-1))、Ox-LDL(50 mg·L^(-1))、β2GPⅠ/anti-β2GPⅠ(100 mg·L^(-1))、Ox-LDL/β2GPⅠ和Ox-LDL/β2GPⅠ/anti-β2GPⅠ复合物建立血管内皮细胞损伤模型。实验分为对照组、β2GPⅠ组、Ox-LDL组、β2GPⅠ/anti-β2GPⅠ组、Ox-LDL/β2GPⅠ组、Ox-LDL/β2GPⅠ/anti-β2GPⅠ组、ATO(10μmol·L^(-1))+Ox-LDL/β2GPⅠ组和ATO+Ox-LDL/β2GPⅠ/anti-β2GPⅠ组。采用MTT法检测HUVECs存活率,化学荧光探针法检测各组HUVECs中活性氧(ROS)荧光强度,ELISA法检测各组HUVECs中内皮素1(ET-1)水平,Western blotting法检测各组HUVECs中TRAF3IP2、p-IKKγ和p-NF-κB p65蛋白表达水平。结果:与对照组比较,Ox-LDL/β2GPⅠ组和Ox-LDL/β2GPⅠ/anti-β2GPⅠ组HUVECs存活率明显降低(P<0.01);与Ox-LDL/β2GPⅠ组和Ox-LDL/β2GPⅠ/anti-β2GPⅠ组比较,ATO预处理1 h后,ATO+Ox-LDL/β2GPⅠ组和ATO+Ox-LDL/β2GPⅠ/anti-β2GPⅠ组HUVECs存活率明显升高(P<0.05)。与对照组比较,Ox-LDL/β2GPⅠ组和Ox-LDL/β2GPⅠ/anti-β2GPⅠ组HUVECs中ROS荧光强度和ET-1水平均明显升高(P<0.01),HUVECs中TRAF3IP2、IKKγ及Phospho-NF-κB p65蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与Ox-LDL/β2GPⅠ组和Ox-LDL/β2GPⅠ/anti-β2GPⅠ组比较,ATO预处理HUVECs 1 h后,ATO+Ox-LDL/β2GPⅠ组和ATO+Ox-LDL/β2GPⅠ/anti-β2GPⅠ组HUVECs中ROS荧光强度,ET-1水平,TRAF3IP2、IKKγ和Phospho-NF-κB p65蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。结论:降血脂药物ATO可改善Ox-LDL/β2GPⅠ/anti-β2GPⅠ诱导的血管内皮功能紊乱,其机制与下调TRAF3IP2/IKK/NF-κB信号通路有关。

血浆糖蛋白β_2-GPI分子结构域与ox-LDL结合机制

通过酵母重组P.rβ_2-GPI-DV(β2糖蛋白I第5结构域)蛋白的荧光、圆二色谱及分子对接模拟,分析血浆糖蛋白β2-GPI-DV分子结构域与ox-LDL的结合机制。SDS-PAGE、Western blotting验证重组蛋白P.rβ_2-GPI-DV表达正确性及纯度;荧光、圆二色光谱、分子对接模拟解析重组蛋白与oxLDL、oxLDL配体oxLig-1可能存在的结合机制和位点。SDS-PAGE、Western blotting显示,在12 kDa大小处有目的蛋白存在且与特异性抗体结合;荧光、圆二色谱的发色基团、二级结构的变化趋势及分子对接模拟结果揭示,P.rβ_2-GPI-DV的Cys281-Lys-Asn-Lys-Glu-Lys-Lys287和Leu313-Ala-Phe-Trp316区域组成的活性口袋与oxLig-1的ω-COOH羧基是实现二者结合的关键。以上结果表明,β2-GPI通过其第5结构域(DV)的赖氨酸阳性区域与ox-LDL的ω-COOH基团识别结合,为血清中β2-GPI特异性结合ox-LDL的机制研究提供理论依据。

不同分期糖尿病肾病患者血HO-1和ox-LDL/β_(2)-GPI的变化及临床意义

目的探讨血清血红素氧合酶-1(HO-1)和氧化低密度脂蛋白/β_(2)-糖蛋白I(ox-LDL/β_(2)-GPI)在不同分期糖尿病肾病患者中的水平变化及可能临床意义。方法选取2018年1月-2019年1月邢台市人民医院收治的2型糖尿病患者70例作为研究对象,依据尿白蛋白/肌酐比值(ACR)分为尿蛋白阴性组(20例)、微量白蛋白尿组(25例)、显性蛋白尿组(25例),另选取同期我院体检中心的健康体检者20例作为健康对照组。比较四组血HO-1、ox-LDL/β_(2)-GPI、丙二醛(MDA)、同型半胱氨酸(Hcy)、ACR水平及阳性率,并分析各指标与ACR的关系。结果显性蛋白尿组、微量白蛋白尿组、尿蛋白阴性组血MDA、HO-1、ox-LDL/β_(2)、Hcy水平高于健康对照组(P<0.05),且随着肾病分期进展逐渐升高;显性蛋白尿组BUN、SCr高于微量白蛋白尿组、尿蛋白阴性组、健康对照组(P<0.05),其余指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。联合检测MDA、HO-1、ox-LDL/β_(2)-GPI、Hcy阳性率高于各指标单项检测阳性率(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血HO-1、MDA、ox-LDL/β_(2)-GPI、Hcy与ACR呈正相关(r=0.501、0.457、0.434、0.429,P<0.05)。结论氧化应激参与糖尿病肾病的发展,血HO-1、ox-LDL/β_(2)-GPI与ACR有良好相关性,为发现早期糖尿病肾病及病情进展的良好预测因子。联合检测MDA、HO-1、ox-LDL/β_(2)-GPI、Hcy可提高早期糖尿病肾病诊断的敏感性。