ERK等激酶途径介导五味子提取物激活Nrf2信号通路的研究

【目的】考察细胞外信号调节激酶(ERK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)等不同激酶途径在五味子提取物(FSE)激活核因子相关因子(Nrf2)信号通路中的作用。【方法】给予不同的蛋白酶抑制剂预处理2 h后再以FSE干扰24 h;采用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Nrf2及下游靶基因HO-1、NQO1、P-gp、MRP2 mRNA的表达;Western blotting法检测蛋白水平及Nrf2核转位。【结果】RT-PCR结果显示:PD98059、SB203580、Rottlerin处理可抑制FSE对HO-1、NQO1、P-gp、MRP2 mRNA的诱导作用,但仅SB203580、Rottlerin处理可抑制FSE对Nrf2 mRNA的表达。Western blotting结果显示:PD98059、SB203580、Rottlerin处理可抑制FSE对HO-1、P-gp蛋白的诱导作用;各抑制剂处理后均能诱导胞浆中Nrf2蛋白的表达,但PD98059、SB203580处理可抑制Nrf2核转位。【结论】FSE激活Nrf2信号通路机制可能与ERK、p38MAPK直接磷酸化Nrf2,促进Nrf2入核增加其核聚积有关。