基于交叉学科的本科生综合性实验设计——槲皮素对髓过氧化物酶氯化活性的影响研究

介绍一个化学生物学交叉学科的综合实验。本实验紧密结合学科前沿,将科教深度融合。在体外生化反应体系中,运用化学和生物学的方法研究天然抗氧化物质槲皮素对生物体内髓过氧化物酶氧化还原循环的影响,通过分子对接方法和一系列的紫外-可见吸收光谱测试,阐明槲皮素影响髓过氧化物酶氯化活性的作用机制。该实验的实施有助于拓展学生视野、激发学生的科研兴趣和提高学生综合实验能力,为化学相关专业复合创新型人才培养提供有益的参考和借鉴。

髓过氧化物酶-463G/A基因多态性与彝族原发性高血压的相关性

目的研究髓过氧化物酶(MPO)-463G/A基因的多态性与云南彝族原发性高血压(EH)的相关性。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RELP)技术,检测2007年1月至2008年11月由昆明医科大学第一附属医院采自云南省双河乡彝族高血压患者(EH组,n=86)和彝族正常人(对照组,n=100)的MPO-463G/A基因多态性,并计算GG、GA、AA基因型频率及G、A基因频率,再进行关联分析。结果在EH组和对照组中,MPO基因-463G/A多态的基因型频率GG为66.28%、52.00%,GA+AA为33.72%、48.00%,等位基因G频率为79.65%、69.50%,等位基因A频率为20.35%、30.50%,2组基因型频率和基因频率分别相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。彝族女性EH组和女性对照组中GG和GA+AA基因型频率分别为74.50%、49.30%和25.50%、50.70%,等位基因G和A的频率分别为85.50%、69.00%和14.50%、31.00%,2组基因型频率和基因频率分别相比,差异均具有统计学意义(P<0.05),EH组A基因频率明显低于对照组。彝族男性EH组和男性对照组的基因型频率和基因频率分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论MPO基因-463G/A多态与云南彝族女性原发性高血压具有相关性,是彝族女性高血压的易感基因。该位点A基因的表达在彝族女性EH的发生过程中起保护性作用。

髓过氧化物酶响应的荧光探针脂质体的制备及体外细胞成像研究

目的:制备髓过氧化物酶响应的鲁米诺-Cy5荧光探针脂质体,优化制备工艺,并探究体外细胞成像效果。方法:以卵磷脂、胆固醇以及胶原蛋白为脂质体原料,通过薄膜水合法制备鲁米诺-Cy5荧光探针脂质体,采用单因素分析和响应面实验优化制备工艺,同时采用经LPS刺激后出现炎症反应的RAW264.7小鼠巨噬细胞为模型,探寻髓过氧化物酶响应的荧光探针脂质体的细胞成像效果。结果:当鲁米诺∶Cy5质量比为2∶1、膜材比为4∶1、水合温度为40℃时,荧光探针脂质体包埋效果最好,鲁米诺包封率为57.26%、Cy5包封率为60.22%。鲁米诺-Cy5荧光探针脂质体平均粒径为205.01 nm,Zeta电位为-30.41 mV。细胞成像结果显示,在经LPS刺激后出现炎症反应RAW264.7小鼠巨噬细胞中,荧光探针脂质体中的鲁米诺能够响应髓过氧化物酶活性发出蓝色荧光,同时,该蓝色荧光能够激发荧光脂质体中Cy5在677 nm发出红色荧光,实现深层炎症细胞的成像检测。结论:鲁米诺-Cy5荧光探针脂质体在体外能够响应髓过氧化物酶,并能通过生物发光共振能量转移(bioluminescence resonance energy transfer,BRET)实现对深层炎症细胞的成像检测,在肿瘤、癫痫等导致的炎症反应的评价和治疗中具有一定的应用价值。

髓过氧化物酶在结直肠腺瘤组织的表达及临床意义

目的:通过测定结直肠腺瘤组织中髓过氧化物酶(MPO)的水平,探讨其在结直肠腺瘤发生发展及“腺瘤-癌”转变过程中的作用。方法:收集80例结直肠腺瘤患者的组织学标本,常规HE染色,采用免疫组织化学方法检测MPO表达。根据HE染色结果分为低级别管状腺瘤(A)组、管状绒毛状腺瘤(B)组、高级别上皮内瘤变和/或粘膜内癌(C)组;根据结肠镜检查腺瘤最大直径分为直径<10 mm(D)组、直径≥10mm(E)组。比较不同结直肠腺瘤癌变风险及不同结肠镜镜检腺瘤大小间MPO的表达水平。结果:腺瘤组织MPO阳性表达率为81.2%。A组呈弱阳性表达,阳性率66.0%;B组弱阳性表达率45.5%,中等强度阳性表达率45.5%;C组中等阳性表达率45.5%,强阳性表达率36.4%,各组两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。E组MPO阳性表达率及表达强度均高于D组(P<0.05)。结论:MPO在结直肠腺瘤组织阳性表达,MPO可作为监测疾病病程和严重程度评估的组织学指标。

髓过氧化物酶和脂蛋白相关磷脂酶A_(2)与急性冠状动脉综合征关系的研究进展

心血管疾病是全球死亡的主要原因。急性冠状动脉综合征(ACS)作为一种临床心脏急症,及时开通病变血管能够明显改善患者预后。对于胸痛患者,如果能够在初期尽早鉴别ACS并采取精准处理措施,将会极大地降低患者的死亡风险,同时改善患者预后。近年来,髓过氧化物酶(MPO)和脂蛋白相关磷脂酶A_(2)(Lp-PLA_(2))与ACS之间关系的研究取得了一定进展,这有助于深入理解ACS的发病机制,对ACS的发生、发展及预后评估有明显预测价值。未来深入研究MPO和Lp-PLA_(2)与ACS的关系将为ACS患者的治疗和预后提供临床借鉴。

外周血髓过氧化物酶水平与高血压及颈动脉斑块形成的相关性分析

目的观察高血压患者外周血髓过氧化物酶(MPO)水平变化情况,探析其与高血压的发生、分级和颈动脉斑块形成之间的关联性。方法回顾性选取芜湖市第一人民医院2023年12月~2024年3月收治的198例高血压患者(高血压组),另选取同期198例健康人群进行对照研究(健康对照组)。通过测定外周血MPO水平,分析其与高血压的发生和颈动脉斑块形成之间的关联性。结果高血压患者外周血MPO水平为(15.33±4.25)ng/L,明显高于健康组的(10.47±2.28)ng/L,差异有统计学意义(t=14.190,P<0.05)。高血压1、2、3级患者之间外周血MPO水平分别为(13.10±3.06)ng/L、(16.03±3.24)ng/L、(20.30±4.29)ng/L,差异有统计学意义(F=59.954,P<0.05),3级患者MPO水平明显高于1、2级患者,差异有统计学意义(q=15.214、8.540,P<0.05),2级患者MPO水平明显高于1级患者,差异有统计学意义(q=7.767,P<0.05)。有颈动脉斑块形成高血压患者外周血MPO水平(17.99±4.17)ng/L,明显高于无颈动脉斑块形成患者(14.48±3.92)ng/L,差异有统计学意义(t=5.322,P<0.05)。Spearman相关性显示,外周血MPO水平与高血压发生、分级及颈动脉斑块形成均成正相关(r=0.612、0.587、0.351,P<0.05)。logistic回归分析显示,年龄、糖尿病、高脂血症、吸烟、饮酒、MPO水平是影响高血压发生的风险因素(OR=1.675、2.192、2.815、1.939、1.423、1.206、2.440,P<0.05),糖尿病、高脂血症、MPO水平是影响颈动脉斑块形成的风险因素(OR=1.902、2.065、2.818,P<0.05)。ROC曲线显示,外周血MPO水平评估高血压发生风险的AUC为0.853,敏感度为0.768,特异性为0.818,95%CI=0.815~0.891;评估高血压存在颈动脉斑块形成的AUC为0.736,敏感度为0.875,特异性为0.513,95%CI=0.660~0.813。结论外周血MPO水平与高血压发生及颈动脉斑块形成均存在一定的关联性,且对高血压发生及颈动脉斑块形成具有一定的评估价值。

血清髓过氧化物酶与脑小血管病患者认知障碍的相关性分析

目的探讨血清髓过氧化物酶(MPO)与脑小血管病(CSVD)患者认知障碍的相关性。方法选取该院2021年3月至2022年12月收治的125例CSVD患者作为研究组。同期纳入在该院体检的健康人群125例作为对照组。使用简易精神评估量表(MMSE)和蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评估研究组患者认知功能,并分为认知障碍组与认知正常组。检测各组血清MPO水平。采用Spearman相关分析血清MPO水平与CSVD患者认知障碍的相关性,采用Logistic回归分析CSVD患者认知障碍的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清MPO对认知障碍的预测价值。结果125例CSVD患者的认知障碍发生率为38.40%(48/125)。研究组血清MPO水平[(265.60±34.39)μg/L]较对照组[(241.36±27.58)μg/L]高,差异有统计学意义(P<0.05)。认知障碍组血清同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、MPO水平较认知正常组高,差异有统计学意义(P<0.05)。Hcy、hs-CRP、MPO水平与CSVD患者认知障碍呈正相关(r s=0.430、0.345、0.448,P<0.001)。Logistic回归分析结果显示,血清Hcy、hs-CRP、MPO是CSVD患者发生认知障碍的影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清Hcy、hs-CRP、MPO单独及联合检测预测CSVD患者发生认知障碍的曲线下面积(AUC)分别为0.752、0.669、0.778、0.867。结论血清MPO水平对CSVD患者发生认知障碍具有预测价值,可作为辅助预测的指标。血清MPO水平升高则提示CSVD患者发生认知障碍风险较高。

抗髓过氧化物酶抗体-抗中性粒细胞胞浆抗体相关肥厚性硬脊膜炎1例

肥厚性硬脑膜脊膜炎(HP)可分为肥厚性硬脑膜炎(HCP)和肥厚性硬脊膜炎(HSP)。相较于HCP,HSP的发病率更低。本文报道1例抗髓过氧化物酶(MPO)抗体-抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)相关HSP患者如下。1 病例患者,女性,75岁,因“双下肢麻木无力5个月,行走不能2个月”于2021年3月10日入住复旦大学附属华山医院神经内科。患者于2020年10月开始无明显诱因出现双下肢无力,走路有踩棉花感。

纤维蛋白原、抗髓过氧化物酶抗体及凝血功能指标在自身免疫性溶血性贫血诊断中的临床意义

目的:探究纤维蛋白原(Fbg)、抗髓过氧化物酶(MPO)抗体及凝血功能指标在自身免疫性溶血性贫血诊断中的应用价值。方法:选取2021年1月—2022年12月郑州市中医院收治的156例自身免疫性溶血性贫血患者(其中原发性91例、继发性65例)作为研究对象,并选同期70例健康体检者为对照组,分别设为原发组、继发组、对照组,比较三组受检者Fbg、抗MPO抗体及凝血功能指标[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)]情况。结果:对照组受检者Fbg为(2.46±0.31)g/L,原发组患者Fbg为(1.88±0.34)g/L,继发组患者Fbg为(1.58±0.29)g/L,Fbg在原发组、继发组、对照组中依次降低,差异有统计学意义(F=136.423,P<0.05);对照组受检者PT、APTT、TT为(11.07±1.25)s、(29.30±2.97)s、(16.03±0.87)s,原发组患者PT、APTT、TT为(12.00±1.09)s、(34.81±3.55)s、(17.52±1.15)s,继发组患者PT、APTT、TT为(12.94±0.98)s、(41.47±4.08)s、(19.74±1.38)s。PT、APTT、TT在继发组、原发组、对照组中依次降低,差异有统计学意义(F=47.597、198.462、178.271,P<0.05)。对照组受检者抗MPO抗体阳性检出率为4.29%(3/70),原发组患者抗MPO抗体阳性检出率为85.71%(78/91),继发组患者抗MPO抗体阳性检出率为66.15%(43/65),抗MPO抗体阳性检出率在原发组、继发组、对照组中依次降低,差异有统计学意义(χ^(2)=110.634,P<0.05)。结论:在对自身免疫性溶血性贫血患者鉴别诊断中,可利用Fbg、抗MPO抗体及凝血功能指标进行原发性或继发性诊断评估。

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ在神经病理性疼痛中作用的研究进展

神经病理性疼痛(NP)由躯体感觉神经系统的损伤或疾病引起,其病理机制复杂,主要与神经结构及功能异常有关,现有治疗手段难以取得满意效果。随着对过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)的深入研究,其在神经炎症、氧化应激、离子通道、线粒体功能、神经保护等方面的作用陆续被发现,并有望成为疼痛预防与治疗新靶点。本文就PPAR-γ在NP中的作用及机制作一综述,以期为NP的临床治疗提供新思路。

青年脑卒中病人血清抗髓过氧化物酶抗体及补体C3、C4水平与神经功能缺损程度的相关性

目的:分析血清抗髓过氧化物酶抗体及补体C3、C4水平与青年脑卒中病人神经功能缺损程度的相关性。方法:选取2020年1月—2021年6月于我院住院治疗的青年脑卒中病人107例作为脑卒中组,采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分评估病人神经功能缺损程度,将病人分为轻型组40例,中型组35例,重型组32例;选取同期本院健康体检者104名作为对照组。收集收缩压、舒张压等一般资料,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清抗髓过氧化物酶抗体水平,采用免疫透射比浊法检测补体C3、C4水平。采用Pearson法分析青年脑卒中病人血清抗髓过氧化物酶抗体及补体C3、C4水平与神经功能缺损程度的相关性。采用多因素Logistic回归分析法分析影响青年脑卒中病人神经功能缺损程度的因素。结果:脑卒中组血清抗髓过氧化物酶抗体阳性率、补体C3、补体C4、收缩压、舒张压水平及高血压比例高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。重型组血清抗髓过氧化物酶抗体阳性率及补体C3、C4水平高于中型组、轻型组,中型组血清抗髓过氧化物酶抗体阳性率及补体C3、C4水平高于轻型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。青年脑卒中病人血清抗髓过氧化物酶抗体及补体C3、补体C4水平与NIHSS评分均呈正相关(r值分别为0.523,0.509,0.547,P<0.05)。抗髓过氧化物酶抗体及补体C3、补体C4是青年脑卒中病人神经功能缺损的独立影响因素(P<0.05)。结论:抗髓过氧化物酶抗体、补体C3、补体C4在青年脑卒中病人血清中高表达,且均与神经功能缺损程度呈正相关。

白藜芦醇激活过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α缓解脂多糖诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎性损伤和细胞凋亡

为揭示白藜芦醇(RES)是否通过介导过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α(PGC-1α)起到缓解奶牛乳腺上皮细胞(bMECs)炎性反应,本试验对PGC-lα进行干扰(si-PGC-lα),采用单因素随机试验设计方法,设置si-NC+LPS组(含10μg/mL LPS配制的饥饿培养基)、si-PGC-lα+LPS组(si-PGC-lα干扰片段+含10μg/mL LPS配制的饥饿培养基)、si-NC+RES+LPS组(含10μg/mL LPS以及15μmol/L RES共同配制的饥饿培养基)、si-PGC-lα+RES+LPS组(si-PGC-lα干扰片段+10μg/mL LPS以及15μmol/L RES共同配制的饥饿培养基)。结果发现:si-PGC-lα后加入LPS可显著或极显著上调炎性因子白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的mRNA相对表达水平和含量(P<0.05或P<0.01),极显著上调氧化因子丙二醛(MDA)的mRNA相对表达水平(P<0.01),显著或极显著上调促凋亡因子B-细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(BAX)的mRNA相对表达水平和bMECs凋亡率(P<0.05或P<0.01),极显著降低抗氧化基因谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的mRNA相对表达水平(P<0.01);而RES可逆转这一反应。当si-PGC-lα后再用RES处理则无法缓解LPS诱导的bMECs产生的氧化应激、炎性反应和细胞凋亡,说明RES是通过激活PGC-1α起到缓解LPS诱导的bMECs炎性损伤和细胞凋亡。由此可见,外源添加RES可通过激活PGC-1α起到缓解LPS诱导的bMECs线粒体损伤、氧化应激、炎性反应并抑制细胞凋亡。

血清髓过氧化物酶及内皮型一氧化氮合酶水平与慢性脑缺血的相关性研究

目的探讨血清髓过氧化物酶(MPO)、血清内皮型一氧化氮合酶(eNOS)水平与慢性脑缺血(CCH)的相关性。方法纳入2022年2~7月在我院门诊就诊的CCH患者50例(CCH组),同期健康体检者30例为对照组,比较两组血清MPO和eNOS的表达量以及其他临床特征,同时采用多因素Logistic回归分析CCH的危险因素。结果CCH组eNOS表达量低于对照组,总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、non-HDL-C及MPO表达量显著高于对照组(P<0.01)。Logistic回归分析显示,eNOS低表达与MPO高表达是CCH的发生独立危险因素(P<0.01)。结论血清MPO在CCH患者中明显升高,eNOS在CCH患者中明显下降。血清MPO、eNOS可能作为CCH的一个有效的生物标志物。

血清髓过氧化物酶作为稳定型冠心病标志物的可行性

目的探讨血清髓过氧化物酶作为稳定型冠心病标志物的可行性。方法选取非冠心病患者、稳定型冠心病患者和不稳定型冠心病患者各100例,检测3组低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、C-反应蛋白和血清髓过氧化物酶水平,用心脏超声心动图评价患者心脏射血功能,使用冠脉造影术判断冠脉狭窄程度。结果3组冠脉狭窄程度、血清髓过氧化物酶水平差异有统计学意义(均P<0.05)。R语言分析血清髓过氧化物酶水平与冠脉狭窄程度存在关联。结论髓过氧化物酶可作为稳定型冠心病的血清标志物。

个体化阿托品治疗急性有机磷农药中毒的效果及血清髓过氧化物酶与胆碱酯酶、肌酸激酶水平的相关性

目的观察个体化阿托品治疗急性有机磷农药中毒(AOPP)的效果及血清髓过氧化物酶(MPO)与胆碱酯酶(ChE)、肌酸激酶(CK)水平的相关性。方法84例AOPP患者随机分为个体化和足量阿托品组,比较两组疗效及血清MPO、ChE、CK、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白(cTnI)、C反应蛋白(CRP)的变化,分析MPO与ChE、CK的相关性。结果个体化组疗效优于足量组(P<0.05);治疗后两组血清MPO、ChE、CK、LDH、cTnI、CRP较治疗前有明显改善(P<0.01),其中个体化组MPO、ChE、CK改善更显著(P<0.01)。MPO与ChE呈正相关(r=0.68,P<0.05),与CK呈负相关(r=-0.11,P<0.05)。结论个体化阿托品治疗AOPP比足量阿托品治疗更具优势,MPO可作为判定AOPP恢复的指标之一。

髓过氧化物酶抑制剂的研究进展

髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)是血红素过氧化物酶⁃环氧化酶超家族的重要成员。MPO在多种炎症细胞,包括中性粒细胞、活化的小胶质细胞和单核/巨噬细胞等,以及星形胶质细胞和神经元中表达,在免疫监视和宿主防御机制中起着重要作用。然而,研究发现MPO的表达和活性的增加与包括帕金森病、阿尔茨海默病、脑卒中、心血管疾病等多种重大疾病的发生和进展相关。多年来,多家医药公司和科研单位在MPO抑制剂的研发中取得大量进展,文章综述了MPO蛋白的结构、催化机制、抑制剂的研发进展等,旨在为MPO抑制剂的研发提供参考。

美沙拉嗪联合蒲公英多糖治疗溃疡性结肠炎中炎症因子及髓过氧化物酶相关性的研究

目的:观察蒲公英多糖对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型大鼠炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-4、IL-8、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平以及结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)水平的影响。方法:采用2,4,6-三硝基苯磺酸复合50%乙醇溶液建立大鼠UC模型,以水提醇沉法提取得到蒲公英精制多糖。50只雄性大鼠随机分为5组:正常对照组、模型对照组、美沙拉嗪组、蒲公英多糖组和美沙拉嗪联合蒲公英多糖治疗组(联合治疗组),每组10只。利用酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清中炎性因子即IL-6、IL-4、IL-8、IL-10、TNF-α的含量,以及结肠组织中MPO表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组、蒲公英多糖组血清IL-6、IL-8、TNF-α水平、结肠组织中MPO的含量升高,IL-4和IL-10水平降低(P<0.05),美沙拉嗪组血清IL-6和TNF-α水平升高,IL-4和IL-10水平降低(P<0.05),联合治疗组各因子水平差异无统计学意义(P>0.05);与模型对照组比较,美沙拉嗪组、蒲公英多糖组和联合治疗组血清IL-6、IL-8、TNF-α水平、结肠组织中MPO的含量降低,IL-4和IL-10水平升高(P<0.05);与美沙拉嗪组、蒲公英多糖组比较,联合治疗组血清IL-6、IL-8、TNF-α水平、结肠组织中MPO的含量降低,IL-4和IL-10水平升高(P<0.05)。IL-6、IL-8、TNF-α表达水平和MPO水平呈正相关关系,IL-4和IL-10表达水平和MPO水平呈负相关关系(P<0.05)。结论:美沙拉嗪联合蒲公英多糖治疗UC效果优于单用美沙拉嗪和蒲公英多糖。细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α与结肠组织中MPO的水平、炎症的进展呈正相关,而细胞因子IL-4和IL-10与MPO的水平、炎症的进展呈负相关。

髓过氧化物酶抗中性粒细胞胞质抗体相关血管炎患者的预后及其影响因素

目的 探讨髓过氧化物酶抗中性粒细胞胞质抗体(MPO-ANCA)相关血管炎(AAV)患者的预后(患者生存和肾脏生存)及其相关影响因素。方法 纳入2020年1月至2020年12月于郑州大学第一附属医院确诊为MPO-ANCA相关血管炎(AAV)的58例患者。随访至2022年5月1日或结局事件[患者死亡或进入维持性血液透析(MHD)]发生,收集患者的临床资料,经单因素分析及多因素分析患者生存预后及肾脏预后的相关因素。结果 至随访结束,58例患者中44例(75.9%)存活。多因素Cox回归分析结果显示:年龄≥70岁、伯明翰血管炎活动度评分(BVAS)评分≥20分、血清肌酐(Scr)水平≥353.6μmol·L~(-1)、血液净化治疗为患者生存预后的独立影响因素(P<0.05)。最终进入MHD的患者有25例(43.1%),多因素logistic回归分析结果显示:肾脏穿刺活检、Scr水平≥353.6μmol·L~(-1)、尿红细胞计数≥20μL~(-1)为患者肾脏预后的独立影响因素。结论 年龄、BVAS评分、Scr水平、血液净化治疗是影响MPO-AAV患者生存预后的因素;Scr水平、尿红细胞计数、肾脏穿刺活检是影响患者进入MHD的因素。