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苹果内根-贝壳杉烯氧化酶基因的克隆及序列分析 被引量:5
1
作者 田伟 田义轲 +3 位作者 王彩虹 宋伟 李节法 殷豪 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期1-7,共7页
内根-贝壳杉烯氧化酶(KO)是赤霉素合成代谢的关键酶。以苹果(Malus×domestica Borkh.)品种富士(Fuji)为供试材料,应用同源克隆和RACE方法从其茎尖中克隆到KO的cDNA全长序列,命名为MdKO,GenBank登录号:AY563549,其长度为1 859 bp。M... 内根-贝壳杉烯氧化酶(KO)是赤霉素合成代谢的关键酶。以苹果(Malus×domestica Borkh.)品种富士(Fuji)为供试材料,应用同源克隆和RACE方法从其茎尖中克隆到KO的cDNA全长序列,命名为MdKO,GenBank登录号:AY563549,其长度为1 859 bp。MdKO的开放性阅读框(ORF)编码514个氨基酸残基,推断其相对分子量为58.9 ku,等电点为7.63。氨基酸同源性分析表明,MdKO与已报道的其他植物的KO氨基酸序列具有较高的相似性;氨基酸聚类分析表明,苹果和梨首先聚类,其次是葡萄;序列结构分析表明MdKO属于细胞色素超家族P450系,具有细胞色素P450的血红素结构域FXXGXRXCXG和跨膜结构域;亚细胞定位分析发现MdKO可能位于内质网膜上。 展开更多
关键词 苹果 内根-贝壳氧化 赤霉素 序列分析
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草莓中贝壳杉烯氧化酶基因(STGA3)中两个不同编码序列的克隆 被引量:4
2
作者 石琰璟 孙仲序 束怀瑞 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期128-129,共2页
以保守氨基酸序列设计了简并性引物的方法,克隆‘丰香’草莓(Fragaria gradiflora‘Fengxiang’)贝壳杉烯氧化酶基因部分序列,发现叶片和花蕾中合成赤霉素的贝壳杉烯氧化酶的序列不同,Southern杂交方法检测在草莓基因组中存在3个拷贝的... 以保守氨基酸序列设计了简并性引物的方法,克隆‘丰香’草莓(Fragaria gradiflora‘Fengxiang’)贝壳杉烯氧化酶基因部分序列,发现叶片和花蕾中合成赤霉素的贝壳杉烯氧化酶的序列不同,Southern杂交方法检测在草莓基因组中存在3个拷贝的目标基因,表明在草莓中至少有两个不同基因共同编码贝壳杉烯氧化酶,以响应不同发育信号的调控。 展开更多
关键词 草莓 赤霉素 GA3基因 贝壳氧化 生物合成
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山核桃贝壳杉烯氧化酶基因CcKO的克隆和表达分析 被引量:1
3
作者 梁璧 张佳琦 +6 位作者 任飞 胡恒康 徐川梅 胡渊渊 黄有军 娄和强 张启香 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第10期70-82,共13页
【目的】内根-贝壳杉烯氧化酶(KO)是赤霉素(GAs)生物合成途径关键酶,也是植物GAs生物合成抑制剂多效唑的靶酶,若GAs生物合成途径中在KO基因位点发生阻塞,会影响植株的正常生长。本研究克隆山核桃CcKO基因(Caca0733S0131)及其启动子并进... 【目的】内根-贝壳杉烯氧化酶(KO)是赤霉素(GAs)生物合成途径关键酶,也是植物GAs生物合成抑制剂多效唑的靶酶,若GAs生物合成途径中在KO基因位点发生阻塞,会影响植株的正常生长。本研究克隆山核桃CcKO基因(Caca0733S0131)及其启动子并进行表达分析,以利于进一步探究山核桃CcKO基因在植物生长和发育过程中,尤其是与株高调控相关的生物学功能,从而助力山核桃优新种质的创制。【方法】以山核桃体细胞胚为试验材料,采用同源重组及PCR扩增技术,克隆获得山核桃KO的基因及启动子序列,并进一步构建了具有强启动子的35S∷CcKO∷GFP过表达载体和CcKOpro∷GUS启动子表达载体;利用BLAST在线工具得到该基因编码的氨基酸序列,并对其进行生物信息学分析和同源性分析;进一步通过农杆菌介导法将启动子表达载体及过表达载体转入核桃体细胞胚并进行植株再生试验,分别获得阳性再生植株,从而深入分析山核桃CcKO基因的生物学功能。【结果】通过克隆,获得1条山核桃CcKO开放阅读框,其全长为1563 bp,共编码520个氨基酸,相对分子量为59.076 kDa。氨基酸同源性分析表明,山核桃CcKO含有细胞色素P450核心功能域FXXGXRXCXG和氨基端的跨膜结构域。BLAST结果表明,山核桃CcKO氨基酸序列与核桃JrKO氨基酸序列同源性为96%,与白梨、苹果、板栗、欧洲栓皮栎的氨基酸同源性分别为71%、79%、77%、76%。对核桃体细胞胚进行遗传转化:启动子表达经GUS染色和PCR验证表明,CcKOpro∷GUS启动子表达载体被成功转入核桃体细胞胚中,且山核桃CcKO基因主要定位于维管束中;过量表达经荧光检测显示及PCR验证表明,35S∷CcKO∷GFP过表达载体被成功转入核桃体细胞胚中;表型分析结果显示,阳性再生植株株高显著高于对照,且山核桃CcKO基因的表达丰度越高,其株高越高;实时荧光定量PCR及相关分析表明,该基因表达具有空间差异,茎中表达量显著高于其他组织部位,且过量表达可使核桃阳性再生植株GAs合成通路下游GA20ox表达量升高而GA2ox表达量下降。【结论】山核桃CcKO基因编码区全长1563 bp,编码520个氨基酸,该基因所编码的氨基酸序列与核桃JrKO氨基酸序列同源性最高,同源性为96%;启动子表达载体定位结果表明该基因主要定位于维管束。过量表达山核桃CcKO基因的核桃再生植株中,KO mRNA表达量明显升高,植株表现出明显的伸长特征,并且CcKO过量表达可使其GA20ox表达量上调,GA2ox表达量下调。本研究结果可为进一步分析KO基因在山核桃及核桃生长发育过程中的作用提供参考。 展开更多
关键词 山核桃 核桃 内根-贝壳氧化 启动子 遗传转化 基因表达
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La-Ba-Sm体系催化剂上的甲烷氧化偶联 被引量:1
4
作者 朴红 毕颖丽 甄开吉 《催化学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1996年第3期217-221,共5页
用甲烷氧化偶联反应评价了不同方法制备的La-Ba-Sm体系催化剂.结果表明,用机械混合La2O3,Ba(OH)2·8H2O和Sm2O3三组分及高温焙烧方法制备的催化剂,从C2收率和选择性总体看,较其它方法优越.在... 用甲烷氧化偶联反应评价了不同方法制备的La-Ba-Sm体系催化剂.结果表明,用机械混合La2O3,Ba(OH)2·8H2O和Sm2O3三组分及高温焙烧方法制备的催化剂,从C2收率和选择性总体看,较其它方法优越.在催化剂(Ⅳ)上进行了500h的稳定性实验,在整个过程中,催化剂的活性和选择性基本稳定;催化剂的起动温度较低,在较宽的温度范围内易于控制,对工业生产意义较大.通过XRD,XPS,IR,SEM和元素分析等表面及体相结构分析方法,揭示了催化剂在薄层固定床反应器中甲烷氧化偶联反应的特点. 展开更多
关键词 甲烷 氧化偶联 氧化 氧化杉 催化剂
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乙酸在SmO_x/Rh(100)模型表面上的吸附和分解
5
作者 马运生 姜志全 +4 位作者 周维平 谭大力 翟润生 包信和 庄叔贤 《催化学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期219-222,共4页
用高分辨电子能量损失谱 (HREELS)和热脱附谱 (TDS)研究了乙酸在SmOx/Rh(10 0 )模型表面上的吸附与分解 .结果表明 :低温下吸附乙酸时 ,SmOx 的加入明显促进了乙酸分子中O H键的断裂 ,从而有利于乙酸根的形成 ;升高表面温度 ,SmOx 的存... 用高分辨电子能量损失谱 (HREELS)和热脱附谱 (TDS)研究了乙酸在SmOx/Rh(10 0 )模型表面上的吸附与分解 .结果表明 :低温下吸附乙酸时 ,SmOx 的加入明显促进了乙酸分子中O H键的断裂 ,从而有利于乙酸根的形成 ;升高表面温度 ,SmOx 的存在促进了乙酸根中C C键的断裂 ,有利于乙酸根的进一步分解 .12 0K时 ,乙酸在SmOx/Rh(10 0 )上主要以乙酸根的形式存在 .2 2 5K时 ,乙酸根即可发生以生成CO为主的脱羧反应 .在 4 17和 4 77K观察到受表面脱羧反应控制的CO2 和H2 的脱附峰 . 展开更多
关键词 分解 乙酸 氧化杉 热脱附谱 高分辨电子能量损失谱 表面吸附 负载型催化剂 氧化 加氢反应
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梨贝壳杉烯氧化酶基因PpKO的克隆及生物信息学分析 被引量:23
6
作者 李节法 田义轲 +3 位作者 王彩虹 田伟 宋伟 殷豪 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1575-1582,共8页
以黄金梨(Pyrus pyrifolia Nakai)茎尖为试材,应用同源克隆和RACE方法从梨茎尖中克隆到赤霉素合成代谢的关键酶:内根-贝壳杉烯氧化酶(KO)基因cDNA的全长序列,命名为PpKO,GenBank登录号为:HM003112,其长度为1752bp。PpKO的开放阅读框(ORF... 以黄金梨(Pyrus pyrifolia Nakai)茎尖为试材,应用同源克隆和RACE方法从梨茎尖中克隆到赤霉素合成代谢的关键酶:内根-贝壳杉烯氧化酶(KO)基因cDNA的全长序列,命名为PpKO,GenBank登录号为:HM003112,其长度为1752bp。PpKO的开放阅读框(ORF)编码515个氨基酸,相对分子量为59.007kD,等电点为7.19。氨基酸同源性分析表明,PpKO与已报道的其它植物的KO氨基酸序列具有59.4%~95.9%相似性;氨基酸聚类分析表明,梨和苹果首先聚类,其次是草莓;生物信息学分析表明:PpKO含有细胞色素P450核心功能域FXXGXRXCXG和氨基端的跨膜结构域。 展开更多
关键词 贝壳氧化酶基因(PpKO) 生物信息学分析
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梨贝壳杉烯酸氧化酶基因PcKAO1的克隆与表达分析 被引量:12
7
作者 欧春青 姜淑苓 +3 位作者 王斐 王志刚 马力 李连文 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期849-858,共10页
以梨矮化砧木‘中矮1号’新梢叶片为试材,根据苹果基因组中相关序列信息设计特异引物,通过RT-PCR的方法克隆了梨赤霉素合成过程中关键酶——贝壳杉烯酸氧化酶(KAO)基因的编码框全长序列。该序列全长1568bp,开放阅读框(ORF)编码503个氨基... 以梨矮化砧木‘中矮1号’新梢叶片为试材,根据苹果基因组中相关序列信息设计特异引物,通过RT-PCR的方法克隆了梨赤霉素合成过程中关键酶——贝壳杉烯酸氧化酶(KAO)基因的编码框全长序列。该序列全长1568bp,开放阅读框(ORF)编码503个氨基酸,相对分子量为57.59kD,等电点为9.47,氨基酸序列与其它物种已知的KAO序列具有53.14%~98.61%的相似性,且具有细胞色素P450家族蛋白典型的功能结构域和跨膜结构域,将该基因命名为PcKAO1,GenBank登录号为KC153027.1。用同样的方法克隆了对照梨品种‘早酥’(乔化)和‘锦香’(半矮化)的PcKAO1基因,通过比对分析发现3个品种的PcKAO1基因间仅有个别碱基差异,其编码的蛋白序列完全一致。RT-PCR半定量分析表明:PcKAO1基因在‘中矮1号’各个检测的器官组织中均有表达,其中以种子和子房中的表达量最高;在3个品种的新梢叶片中,除新梢生长初期(5月10日)之外,其他时期矮化砧木‘中矮1号’均低于乔化和半矮化的对照品种‘早酥’和‘锦香’,而在这些时期‘中矮1号’新梢生长逐渐减缓乃至停长。 展开更多
关键词 贝壳烯酸氧化酶基因(KAO) 基因表达 矮化
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黄瓜贝壳杉烯氧化酶基因CKO的克隆及其表达分析 被引量:5
8
作者 胡宏敏 蒋芳玲 +2 位作者 曹雪 吴震 王广龙 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1131-1140,共10页
以‘戴多星’黄瓜为试材,应用同源克隆和RACE技术从茎尖中得到赤霉素合成的关键酶——贝壳杉烯氧化酶(KO)基因cDNA全长序列,命名为CKO,GenBank登录号为JN792591,其长度为1 895 bp,开放阅读框(ORF)编码519个氨基酸,相对分子量为59.211 kD... 以‘戴多星’黄瓜为试材,应用同源克隆和RACE技术从茎尖中得到赤霉素合成的关键酶——贝壳杉烯氧化酶(KO)基因cDNA全长序列,命名为CKO,GenBank登录号为JN792591,其长度为1 895 bp,开放阅读框(ORF)编码519个氨基酸,相对分子量为59.211 kD,等电点(PI)8.45。氨基酸同源性分析发现,CKO与苦瓜的KO同源性最高,达84%;序列结构分析表明,CKO属于细胞色素超家族P450系,具有细胞色素P450的血红素结构域FXXGXRXCXG和跨膜结构域。实时荧光定量分析表明,CKO在遮荫的徒长苗中表达量最高,是正常苗的5.18倍,在遮阴条件下喷施多效唑可降低期表达。 展开更多
关键词 黄瓜 贝壳氧化 基因 克隆 表达分析
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梨茎尖中PpKO基因表达量的实时荧光定量PCR分析 被引量:10
9
作者 田义轲 李节法 +2 位作者 王彩虹 殷豪 白牡丹 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2012年第3期62-66,共5页
以黄金梨不同发育时间的新梢茎尖为试材,应用实时荧光定量PCR技术,对18S rRNA、Actin、GAPDH和S19这4个常用内参基因在梨茎尖组织中的表达稳定性进行了评估。GeNorm软件分析显示,它们表达稳定度的平均值(M)依次是0.365,0.392,0.457和0.5... 以黄金梨不同发育时间的新梢茎尖为试材,应用实时荧光定量PCR技术,对18S rRNA、Actin、GAPDH和S19这4个常用内参基因在梨茎尖组织中的表达稳定性进行了评估。GeNorm软件分析显示,它们表达稳定度的平均值(M)依次是0.365,0.392,0.457和0.517,即表达稳定性从高到低的排序是:Actin>18S rRNA>GADPH>S19。选择Actin作为校正内参基因,对处于不同发育时期的新梢茎尖组织中贝壳杉烯氧化酶基因PpKO的表达量进行研究,发现该基因在新梢生长过程中出现2次表达高峰,基本与春梢、秋梢的快速生长期吻合,且秋梢中的表达量远高于春梢。 展开更多
关键词 内参基因 梨贝壳氧化酶基因(PpKO) 定量表达
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基于梨贝壳杉烯氧化酶基因PpKO序列的功能性SNP标记 被引量:6
10
作者 田义轲 王彩虹 +2 位作者 白牡丹 殷豪 李节法 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1876-1884,共9页
基于基因序列的功能性标记是基因分型、图谱定位和相关性状标记辅助选择的理想标记。以'矮生梨'×'茌梨'的梨杂交分离群体和9个梨栽培品种为试材,以梨赤霉素合成代谢途径的关键酶基因--贝壳杉烯氧化酶基因(PpKO)的c... 基于基因序列的功能性标记是基因分型、图谱定位和相关性状标记辅助选择的理想标记。以'矮生梨'×'茌梨'的梨杂交分离群体和9个梨栽培品种为试材,以梨赤霉素合成代谢途径的关键酶基因--贝壳杉烯氧化酶基因(PpKO)的cDNA序列为基础,设计5对PCR引物,通过高通量熔解曲线(high resolution melting,HRM)分析,筛选到可对基因进行良好分型的1对引物。通过对杂种后代和测试品种的测序分析表明,此对引物的扩增子是一个位于PpKO第8外显子上的长度为200bp的序列,从中共检测到两处单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)变化,且均为非同义cSNP。这两处SNP标记均可以作为适合高通量分析的遗传标记在遗传作图、基因定位或资源鉴定中加以利用。 展开更多
关键词 单核苷酸多态性 功能性标记 贝壳氧化酶基因
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雷公藤贝壳杉烯酸氧化酶基因的全长cDNA克隆与表达分析 被引量:2
11
作者 张逸风 苏平 +4 位作者 胡添源 周家伟 关红雨 高伟 黄璐琦 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期88-93,共6页
贝壳杉烯酸氧化酶(kaurenoic acid oxidase)是二萜赤霉素生物合成途径上的关键酶,参与植物生长发育等重要生物学过程。该文根据雷公藤转录组数据设计特异性引物,采用PCR技术克隆得到贝壳杉烯酸氧化酶全长c DNA序列,并进行生物信息学分析... 贝壳杉烯酸氧化酶(kaurenoic acid oxidase)是二萜赤霉素生物合成途径上的关键酶,参与植物生长发育等重要生物学过程。该文根据雷公藤转录组数据设计特异性引物,采用PCR技术克隆得到贝壳杉烯酸氧化酶全长c DNA序列,并进行生物信息学分析;使用实时定量PCR(qRT-PCR)研究基因的诱导表达水平。克隆得到Tw KAO长度为1 874 bp,编码487个氨基酸,蛋白相对分子质量56.02 k Da,理论等电点8.89;经茉莉酸甲酯(Me JA)诱导后,Tw KAO基因相对表达量在12 h达到峰值;经植株组织表达分析证实,Tw KAO基因在雷公藤的叶中表达量最高,根中最低。该研究首次克隆得到雷公藤KAO基因,并分析其mRNA表达特征,为深入研究雷公藤生长发育以及萜类活性成分次生代谢研究奠定基础。 展开更多
关键词 雷公藤 贝壳烯酸氧化酶(KAO) 克隆 生物信息学分析 表达分析
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利用SMART RACE克隆STGA3 cDNA的5′末端 被引量:1
12
作者 石琰璟 《青岛科技大学学报(自然科学版)》 CAS 2006年第1期16-19,共4页
阐述了SMART RACE的原理,克隆了草莓贝壳杉烯氧化酶基因(STGA3)5′端未知序列。所得到的STGA3 cDNA的5′末端共有1 474 bp,其中非编码区共34 bp,编码区1 440 bp,编码氨基酸480个,此序列在NCBI的注册号为:AY462247。它与已克隆到的同源... 阐述了SMART RACE的原理,克隆了草莓贝壳杉烯氧化酶基因(STGA3)5′端未知序列。所得到的STGA3 cDNA的5′末端共有1 474 bp,其中非编码区共34 bp,编码区1 440 bp,编码氨基酸480个,此序列在NCBI的注册号为:AY462247。它与已克隆到的同源基因拟南芥GA3和南瓜CYPT01A1之间的同源性分别为56.9%和59.2%。 展开更多
关键词 RACE 克隆 反转录酶 贝壳氧化
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丹参类贝壳杉烯氧化酶(SmKOL)基因全长克隆及其生物信息学分析 被引量:1
13
作者 胡雅婷 高伟 +4 位作者 刘雨佳 程琪庆 苏平 刘玉忠 陈敏 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第21期4174-4179,共6页
根据丹参转录组数据提供的基因片段设计特异引物,采用RACE方法克隆类贝壳杉烯氧化酶(Sm KOL)全长c DNA,并进行生物信息学分析;采用实时定量PCR检测茉莉酸甲酯(Me JA)诱导丹参毛状根不同时期的Sm KOL表达水平。克隆得到的Sm KOL全长c DNA... 根据丹参转录组数据提供的基因片段设计特异引物,采用RACE方法克隆类贝壳杉烯氧化酶(Sm KOL)全长c DNA,并进行生物信息学分析;采用实时定量PCR检测茉莉酸甲酯(Me JA)诱导丹参毛状根不同时期的Sm KOL表达水平。克隆得到的Sm KOL全长c DNA由1 884个核苷酸组成,具有完整编码框,编码519个氨基酸,蛋白相对分子质量约为58.88 k Da,等电点p I 7.62;实时定量PCR结果表明该基因受Me JA诱导后,表达水平在36 h时达到最大值。从丹参毛状根中克隆得到1条Sm KOL全长c DNA,为进一步研究该基因的功能和丹参次生代谢调控机制提供了靶基因。 展开更多
关键词 丹参 类贝壳氧化 CDNA末端快速扩增 生物信息学分析
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Soil Enzyme Activity Changes in Different-Aged Spruce Forests of the Eastern Qinghai-Tibetan Plateau 被引量:48
14
作者 ZHANGYong-Mei ZHOUGuo-Yi +1 位作者 WUNing BAOWei-Kai 《Pedosphere》 SCIE CAS CSCD 2004年第3期305-312,共8页
Activities of selected soil enzymes (invertase, acid phosphatase, proteinase,catalase, peroxidase and polyphenoloxi-dase) were determined under different spruce forests withrestoration histories of 5, 13, 18, 23, 27 y... Activities of selected soil enzymes (invertase, acid phosphatase, proteinase,catalase, peroxidase and polyphenoloxi-dase) were determined under different spruce forests withrestoration histories of 5, 13, 18, 23, 27 years and an old growth forest over 400 years old in theeastern Qinghai-Tibetan Plateau, China, and their possible use as indicators of ecosystems healthwere analyzed. Plots 10 X 10 m with 4 replications were established to investigate three hypotheses:soil enzyme activities a) would increase with the restoration process; b) would be greater insurface soils than at lower depths; and c) would be correlated to selected physicochemicalproperties. Results showed that as the forests developed after restoration, invertase and peroxidaseactivities usually increased up to the 23 year point. Also soil enzyme activities were associatedwith surface soils and decreased with depths, suggesting that in earlier restoration stages surfaceaddition of organic fertilizer to soils might be more effective than additions at depth. In the 0-20cm soil, there were significant correlations (P < 0.01 or < 0.05) between some soil enzymeactivities and some selected chemical properties. Therefore, temporal changes in enzyme activitiesshould be included as an indicator when evaluating sustainable forest management practices. 展开更多
关键词 acid phosphatase CATALASE INVERTASE PEROXIDASE spruce forest (picea spp.)
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一类新型植物生长延缓剂的作用机理及其应用
15
作者 吴锜 何钟佩 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第S1期100-108,共9页
含有降冰片烯二氮杂环丁烯、三唑、嘧啶、吡啶和咪唑类结构的一类新型植物生长延缓剂,其共同的特征是在分子内杂环中的 sp^2杂化 N 上具有一对孤对电子。这对孤对电子作为第六配体结合到细胞色素 P-450内血红素铁上,代替了催化反应中所... 含有降冰片烯二氮杂环丁烯、三唑、嘧啶、吡啶和咪唑类结构的一类新型植物生长延缓剂,其共同的特征是在分子内杂环中的 sp^2杂化 N 上具有一对孤对电子。这对孤对电子作为第六配体结合到细胞色素 P-450内血红素铁上,代替了催化反应中所需的氧,导致某些依赖细胞色素P-450的单氧酶失活,并因此影响与 GA,ABA 和甾醇等有关的代谢途径,进而调节植物的生长和发育过程。因此,这类植物生长延缓剂在农林和园艺等方面具有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 植物生长延缓剂 贝壳氧化作用抑制剂 GA 甾醇
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Solubility of Paclitaxel in Mixtures of Dichloromethane and Supercritical Carbon Dioxide 被引量:3
16
作者 LUO Nin LU Yingmei JIANG Yanbin 《Chinese Journal of Chemical Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2011年第4期558-564,共7页
Phase behavior of paclitaxel in solvent mixtures of dichloromethane and supercritical carbon dioxide was investigated using a supercritical phase monitor.Cloud point pressures were determined as a function of temperat... Phase behavior of paclitaxel in solvent mixtures of dichloromethane and supercritical carbon dioxide was investigated using a supercritical phase monitor.Cloud point pressures were determined as a function of temperature,pressure and paclitaxel content from 313.1 to 343.1K and pressures up to 33.52 MPa.The ternary mixtures exhibit a typical lower critical solution temperature behavior.When paclitaxel content increases,the single-phase region shrinks in size.Three cubic equations of state(Redlich-Kworng,Soave-Redlich-Kwong and Peng-Robinson equation of state) coupled with the van der Waals one-fluid mixing rules were selected to correlate the experimental data.The results indicate that SRK EOS coupled with two binary interaction parameters kij and lij can predict paclitaxel solubility for the best fit of experimental data. 展开更多
关键词 supercritical CO2 PACLITAXEL DICHLOROMETHANE SOLUBILITY data correlation
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石榴赤霉素合成相关基因PgKO的克隆及表达分析
17
作者 黄蓉 刘娜 +2 位作者 王琦 熊枫 张水明 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期631-636,共6页
该研究以‘红玉石籽’(Punica granatum cv.Hongyushizi)石榴为试验材料,采用RT-PCR和RACE技术,从石榴花中克隆得到赤霉素合成关键酶——内根贝壳杉烯氧化酶(KO)基因,命名为PgKO(GenBank登录号为MG208017)。PgKO全长cDNA为1 729bp,包含1... 该研究以‘红玉石籽’(Punica granatum cv.Hongyushizi)石榴为试验材料,采用RT-PCR和RACE技术,从石榴花中克隆得到赤霉素合成关键酶——内根贝壳杉烯氧化酶(KO)基因,命名为PgKO(GenBank登录号为MG208017)。PgKO全长cDNA为1 729bp,包含1 542bp开放阅读框(ORF),编码513个氨基酸,相对分子量为141.16kD,理论等电点为4.9。多重序列对比显示,PgKO与苹果MdKO、白梨PcKO、葡萄VvKO的相似性分别为61.28%、64.56%和73%,并且具有CYP450结构域(脯氨酸富含域、氧还原位点和血红素结合域)。系统进化树分析表明,PgKO与其他物种的起源相同,并与桉树EgKO的亲缘关系最近。荧光定量PCR发现,在石榴蕾期和盛花期,PgKO基因的表达量均为筒状花高于钟状花,且PgKO基因在两种花型的子房、花药、花萼中均有表达,但筒状花中子房的表达量最高,花萼的表达量最低;钟状花中花药的表达量最高,子房的表达量最低。 展开更多
关键词 石榴 内根-贝壳氧化酶(KO) 基因克隆 基因表
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鞘蕊苏贝壳杉烯酸氧化酶基因的克隆及表达载体的构建
18
作者 马朝芝 黄晓 +3 位作者 余坤 尤朋涛 刘焱文 但汉雄 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期3919-3925,共7页
为提高鞘蕊苏有效成分的含量,开展Coleus Ent-kaurenoic acid oxidase(KAO)基因的克隆以及表达载体构建方面的研究。提取鞘蕊苏叶片的总RNA,利用套式PCR技术克隆获得KAO基因全长,将该基因连接到克隆载体p MD-18T,经测序鉴定正确后,再... 为提高鞘蕊苏有效成分的含量,开展Coleus Ent-kaurenoic acid oxidase(KAO)基因的克隆以及表达载体构建方面的研究。提取鞘蕊苏叶片的总RNA,利用套式PCR技术克隆获得KAO基因全长,将该基因连接到克隆载体p MD-18T,经测序鉴定正确后,再将该基因连接到p ET-28a表达载体中。结果显示,成功克隆出的鞘蕊苏KAO基因大小为1 500 bp,对克隆基因进行测序及酶切鉴定,均得到正确大小的DNA片段,说明表达载体构建成功。本研究成功克隆得到鞘蕊苏贝壳杉烯酸氧化酶基因并构建其表达载体,为提高鞘蕊苏有效成分含量提供了基础。 展开更多
关键词 鞘蕊苏 贝壳烯酸氧化 PCR 表达载体
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Trial of the correlation between cytochrome oxidase CYP3A4 with the susceptibility of paclitaxel-based regimen for advanced gastric cancer
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作者 Jianwei Yang Yan Meng +5 位作者 Ying Su Zeng Chen Wei Gao Jinyuan Lin Jing Jia Huamei Lin 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2014年第10期451-456,共6页
Objective: The aim of the study was to investigate the relationship between susceptibility of paclitaxel-based regimen and gene polymorphisms of cytochrome oxidase CYP3A4 for advanced gastric cancer. Methods: Peripher... Objective: The aim of the study was to investigate the relationship between susceptibility of paclitaxel-based regimen and gene polymorphisms of cytochrome oxidase CYP3A4 for advanced gastric cancer. Methods: Peripheral venous blood sample of 53 advanced gastric cancer patients were enrolled to test the mutation of CYP3A4 gene by denaturing high performance liquid chromatography(DHPLC) and DNA sequencing. The relation between the efficacy of paclitaxel-based regimen and CYP3A4 gene polymorphisms was further analyzed. Results: DHPLC indicated that among the 53 patients, 21 cases showed biomodal type(mutation) and 32 cases were of unimodal type(wild-type). Sequencing results showed that the deletion mutation was found at the 27 th basic group of C in exon 10 of CYP3A4 gene. The response rate(RR) and disease control rate(DCR) of wild-type group were 40.6% and 84.4%, while in mutation group they were 33.3% and 85.7%, respectively, with no significances between the two groups(P > 0.05). Of all 53 cases, the median progression-free survival(PFS) was 6.5 months(95% CI: 3.576–9.424 months), and the median overall survival(OS) was 11.0 months(95% CI: 6.955–15.045 months). The median PFS and OS in wild-type group had no differences compared with those in mutation group(7.0 months vs. 7.0 months, P > 0.05; 10.0 months vs. 14.0 months, P > 0.05). Between wild-type and mutation groups, the median PFS of patients applied with oxaliplatin containing regimen and the median OS in patients applied with/without oxaliplatin had no significant differences(P > 0.05), while the median PFS in patients received non-oxaliplatin regime had statistical differences(P = 0.024). The median PFS and OS in patients receiving 3-drug or 2-drug regimes had no correlation with CYP3A4 gene polymorphisms. The adverse effects in the two groups were mild, mainly in grades 1–2. The common adverse effects were anorexia, nausea/vomiting and leucopenia. Conclusion: Deletion mutation was located in the 27 th basic group of C in exon 10 of CYP3A4 gene. Paclitaxel-based regime has a trend to prolong the OS of advanced gastric cancer with mutation type. 展开更多
关键词 denaturing high performance liquid chromatography(DHPLC) CYP3A4 gastric cancer PACLITAXEL
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Purification Effect of Potted Taxus for Indoor Sulfur Dioxide Pollution
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作者 李青 李荣华 +1 位作者 梁军 袁晓 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2017年第11期2064-2066,共3页
The aim was to explore the purification ability of potted taxus for indoor sulfur dioxide pollution. Three taxus cultivars were placed in different rooms. The air in the rooms was sampled continuously at the flow rate... The aim was to explore the purification ability of potted taxus for indoor sulfur dioxide pollution. Three taxus cultivars were placed in different rooms. The air in the rooms was sampled continuously at the flow rate of 0.5 ml/min, and the content of sulfur dioxide was determined by formaldehyde absorbing-pararosaniline spectrophotometry. The obtained linear equation for sulfur dioxide was as follows: y=0.030 1 x+0.023 5, F=0.999 7. The content of sulfur dioxide in the three rooms placed with different taxus cultivars all declined, suggesting that potted taxus has a certain ability to purify sulfur dioxide. Among the taxus cultivars, Taxus yunnanensis showed the highest purification rate, followed by Taxus chinensis vat. mairei and Taxus media cv. Hicksii. 展开更多
关键词 TAXUS Indoor air Sulfur dioxide PURIFICATION
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