氧化槐果碱对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及机制

目的探究氧化槐果碱(oxysophocarpine,OSC)对大鼠MIRI的保护作用及其作用机制。方法超声心动图仪检测心脏功能指标;HE染色观察心肌组织病变;ELISA法检测心损标记物及血清炎症因子水平;试剂盒检测氧化应激标记物;蛋白质印迹检测相关蛋白表达水平。结果与sham组相比,I/R组大鼠出现明显心肌损伤,心脏功能明显降低,CK-Mb、Mb和cTnI水平显著上调;血清SOD水平明显降低,MDA和LDH水平升高;TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10水平均明显升高,p-ERK1/2和p-JNK表达显著上调。与I/R组相比,OSC处理后明显改善心肌损伤和心肌功能;抑制心肌氧化应激和促炎性因子释放;下调p-ERK1/2和p-JNK表达。结论OSC可改善大鼠I/R导致的心脏功能障碍,并抑制氧化应激和炎症反应,其作用机制与ERK/JNK通路下调有关。

RP-HPLC法同时测定复方苦参注射液中氧化槐果碱、氧化苦参碱和苦参碱的含量

目的建立复方苦参注射液中氧化槐果碱、氧化苦参碱和苦参碱的含量测定方法。方法Hypersil ODS2色谱柱（200mm×4．6mm，5μm），流动相为甲醇-乙腈-水-磷酸（体积比为10．00：30．00：65．00：0．05．含33mmo·L^-1的SDS）。检测波长为210nm，柱温为室温。结果氧化槐果碱质量浓度在2．52～50．4mg·L^-1内与峰面积呈良好线性关系，r=0．9999（n=6），平均回收率为98．2％。RSD为1．8％（n=9）；氧化苦参碱质量浓度在17．44-174．4mg·L^-1内与峰面积呈良好线性关系。r=0．9997（n=6），平均回收率为99．5％，RSD为2．2％（n=9）；苦参碱质量浓度在1．96～39．20mg·L^-1内与峰面积呈良好线性关系，r=0．9997（n=6），平均回收率为102．3％，RSD为2．0％（n=9）。结论测定方法可作为复方苦参注射液质量控制方法。

HPLC-MS法同时测定大鼠血浆中苦参碱、氧化苦参碱和氧化槐果碱的浓度及其药代动力学

建立同时测定大鼠灌胃给予三物黄芩汤后血浆中苦参碱、氧化苦参碱和氧化槐果碱含量的HPLC-MS分析方法,并计算了3种生物碱在大鼠体内的药代动力学参数。血浆样品经氯仿液-液萃取后,以乙腈-0.1%甲酸水溶液(10∶90)为流动相,用KromasilC18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm)分离,采用电喷雾离子化源(ESI)单重四极杆串联质谱,以选择离子检测(SIM)方式进行检测。苦参碱、氧化苦参碱和氧化槐果碱分别在10～5000ng.mL-1、2～1000ng.mL-1和2～1000ng.mL-1呈良好线性关系,提取回收率分别为89.1%～93.5%、83.9%～91.3%、85.4%～88.0%。日内及日间精密度均<15%。该法快速,灵敏,专属,适用于同时测定生物样本中苦参碱、氧化苦参碱和氧化槐果碱的血药浓度。

氧化槐果碱的提取分离工艺及其毒性研究

采用80％的酸性乙醇提取、硅胶柱层析分离、乙醚分级沉淀、丙酮重结晶的工艺方法，从苦参中分离得到氧化槐果碱单体。以小鼠为试鼠进行毒性测定，结果表明，试鼠的死亡时间主要集中在48h内，48h后无试鼠的死亡现象。试鼠对氧化槐果碱的耐受量为25-150mg·kg^-1，致死中量LD50为81．00mg·kg^-1，LD50标准误差3．68。氧化槐果碱毒性较低，致死中量适宜，可以作为杀鼠剂使用。

血浆中氧化槐果碱的气相色谱测定及其在兔体内的药代动力学

氧化槐果碱(oxysophocarpine)是从苦参(Sophora flavesecens Ait)中分离得到的一种生物碱。已报道的含量测定方法有薄层层析比色法和高效液相层析法。近年来临床发现苦参总碱有平喘、升高白细胞。

氧化槐果碱对人结肠腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的观察氧化槐果碱（OSC）对人结肠腺癌细胞株SW480的增殖抑制及诱导凋亡的作用，探讨其作用机制。方法体外培养SW480细胞，使用OSC（作用浓度分别为0．5～2mg／mL）和阳性对照药5-氟尿嘧啶（作用浓度10μg／mL）作用于细胞12～48h；采用MTT法测定SW480细胞增殖情况，荧光双染观察细胞形态变化，计数凋亡细胞所占比例，流式细胞仪分析细胞周期变化及细胞凋亡率，Real—timePCR检测凋亡基因Caspase-3和Bcl-2的表达。结果MTT结果显示，各浓度OSC对体外培养的SW480细胞增殖具有明显抑制作用，该作用呈一定的时间和剂量依赖性；OSC作用后细胞的体积变小变圆，核变形、皱缩，凋亡细胞所占比例显著增加；流式细胞仪分析结果表明，随着OSC作用时间的延长，G0／G1期细胞比例增加，同时S期细胞比例也相应增加；凋亡基因Caspase-3mRNA表达上调，Bcl-2mRNA表达下调。结论OSC可抑制体外培养的SW480细胞生长增殖，其作用机制与阻滞细胞周期进程、诱导细胞凋亡有关。

氧化槐果碱对小鼠炎症性疼痛的镇痛作用研究

目的研究氧化槐果碱对二甲苯和角叉菜胶诱导的小鼠炎症性疼痛的影响,以探索其可能的机制。方法 ICR小鼠50只,随机分为模型组、ASP治疗组、氧化槐果碱高、中、低剂量组,各组分别给予对应药物1 h后,采用二甲苯致小鼠耳肿胀实验和角叉菜胶诱导的小鼠足趾肿胀实验,研究氧化槐果碱对小鼠各种炎症性刺激的影响。结果与生理盐水组相比,氧化槐果碱各剂量组能明显抑制二甲苯致小鼠耳肿胀程度和角叉菜胶致小鼠足趾肿胀程度;小鼠足组织的TNF-α,IL-1β,IL-6和PGE2水平显著降低。结论 OSC对角叉菜胶诱导的炎性疼痛具有明显的镇痛作用,可能与其抑制炎性因子的分泌有关。

槐果碱、氧化槐果碱的药代动力学与药效动力学

以QTc延长率为效应指标,用药代动力学-药效动力学结合模型对槐果碱、氧化槐果碱ⅳ后在兔体内的处置和效应动力学作定量分析。两药的血浓时程均符合二房室模型,两药的效应与效应室浓度之间的关系均符合S形Emax模型。两药彼此的药动学和药效学性质均有明显差异,但它们各自的药动学和药效学性质均为非剂量依赖性。

不同提取方法对苦豆子中氧化槐果碱与槐果碱含量的影响

目的研究不同提取方法对氧化槐果碱与槐果碱含量变化的影响。方法采用HPLC法测定不同产地、不同提取条件的苦豆子样品中氧化槐果碱和槐果碱的含量。结果饱和氢氧化钠溶液能使氧化槐果碱转化,对槐果碱无影响。结论为苦豆子及制剂的质量控制以及氧化槐果碱的综合利用提供依据。

HPLC测定狼牙刺种子氧化苦参碱和氧化槐果碱含量

建立了分析测定狼牙刺中氧化苦参碱和氧化槐果碱含量的高效液相色谱法:色谱柱为ZORBAX-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:0.04 mol/L磷酸(pH值1.8)-甲醇(体积比91∶9);流速1.0 ml/min;检测波长220 nm;柱温20℃;试样进样量10μl;检测时间10 min。用该方法能有效分离氧化苦参碱、氧化槐果碱与其他组分,说明该方法能够用于狼牙刺中氧化苦参碱和氧化槐果碱含量的分析测定。

HPLC测定狼牙刺不同组织器官中氧化槐果碱含量

建立了采用高效液相色谱法测定狼牙刺Sophra viciifolia中氧化槐果碱含量的方法:色谱柱为ZORBAX-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相0.04 mol/L磷酸溶液(pH值1.8)-甲醇(体积比90∶10);流速1.0 mL/min;检测波长220 nm;柱温20℃。测定了狼牙刺不同组织器官中氧化槐果碱含量,结果表明:狼牙刺植物花蕾中氧化槐果碱含量最高,达2.114%,其次是幼果、种子、花、叶、当年生幼茎,氧化槐果碱含量分别为1.735%、1.651%、1.615%、0.540%和0.244%,多年生茎含量最低,只有0.045%。该结果对狼牙刺资源的开发利用及生态保护具有积极意义。

槐果碱和氧化槐果碱与溶菌酶的作用机制及构效关系研究

在模拟人体生理条件下,采用紫外光谱、荧光光谱和同步荧光光谱法相结合,研究槐果碱(SC)和氧化槐果碱(OSC)与溶菌酶(LYSO)的相互作用机制,并探讨其构效关系。紫外光谱显示,SC和OSC可与LYSO发生相互作用;荧光光谱表明,SC和OSC对LYSO的内源荧光均有显著的猝灭作用,猝灭机制主要为静态猝灭和非辐射能量转移。SC和OSC均可与LYSO形成1∶1复合物,在温度为310K下二者与LYSO的结合常数K分别为0.922×105、2.81×105 L·mol-1,结合距离r分别为3.81、4.39nm,其作用力主要为氢键和范德华力。OSC与LYSO的结合能力明显强于SC;同步荧光光谱表明,OSC与LYSO相互作用后,LYSO的构象发生改变,而SC与LYSO相互作用后,LYSO的构象基本不变。Fe3+、Mg2+、Cu2+、Zn2+四种金属离子的存在增强了SC和OSC与LYSO的结合能力,四种金属离子均以"离子架桥"模式介导SC和OSC与LYSO的相互作用,且其强弱顺序为:Mg2+>Cu2+>Fe3+>Zn2+。

RP-HPLC法测定苦豆子总碱中苦参碱与氧化苦参碱、槐果碱与氧化槐果碱含量

目的:建立测定苦豆子总碱中氧化型生物碱与还原型生物碱含量的反相高效液相色谱法。方法:采用C18键合硅胶反相柱,以乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾水溶液(三乙胺2.0 m L/L)为流动相,梯度洗脱,检测波长205 nm,柱温30℃,流速1.0 m L/min。结果:氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱分离良好,氧化苦参碱平均回收率为99.10%,RSD为1.15%;苦参碱平均回收率为98.76%,RSD为1.64%;氧化槐果碱平均回收率为100.12%,RSD为1.86%;槐果碱平均回收率为98.35%,RSD为2.01%。结论:所建立的测定苦豆子总碱中氧化型与还原型生物碱含量方法专属性强,灵敏度高,能有效控制苦豆子总碱质量。

氧化槐果碱抗惊厥和抗炎作用实验研究

目的观察氧化槐果碱的抗惊厥、抗炎作用。方法构建异烟肼和尼可刹米致小鼠惊厥模型,观察氧化槐果碱的抗惊厥作用;采用二甲苯致小鼠耳肿胀法和角叉菜胶致大鼠足跖肿胀法,观察氧化槐果碱的抗炎作用。结果氧化槐果碱（20,40,80mg/kg）可显著延长异烟肼所致惊厥小鼠的惊厥潜伏时间（P〈0.05）,减少惊厥小鼠例数与死亡小鼠例数,对尼可刹米所致的惊厥无对抗作用;氧化槐果碱（40,80mg/kg）可显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀（P〈0.05）;氧化槐果碱（60mg/kg）可显著抑制角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀（P〈0.01）,氧化槐果碱（30mg/kg）对致炎后2-4h的大鼠足跖肿胀有抑制作用。结论氧化槐果碱具有抗惊厥、抗炎作用。

氧化槐果碱对离体大鼠胸主动脉环的舒张作用及其机制研究

目的:研究氧化槐果碱(OSC)对离体大鼠胸主动脉环的舒张作用及其机制。方法:取大鼠胸主动脉环(简称“血管环”),以舒张率为指标,以K-H营养液为空白对照,分别考察不同质量浓度的OSC(0.2~1.0 mg/mL)对基础状态的正常血管环,以及经去甲肾上腺素(PE,1×10^-6 mol/L)预收缩的正常或去内皮血管环的舒张作用;分别以一氧化氮合酶抑制剂L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)、环氧合酶抑制剂吲哚美辛(INDO)预孵育大鼠正常胸主动脉环,以4种钾通道阻滞剂[氯化钡(BaCl2)、四乙基胺(TEA)、4-氨基吡啶(4-AP)、格列本脲(Gli)]预孵育去内皮血管环,同法考察不同质量浓度的OSC(0.2~1.0 mg/mL)对上述血管环的舒张作用。结果:与空白对照比较,不同质量浓度的OSC对基础状态的正常血管环的舒张率无显著影响(P>0.05),但0.4~1.0 mg/mL的OSC能显著提高经PE预收缩的正常或去内皮血管环的舒张率(P<0.01),且呈浓度依赖趋势。经L-NAME、INDO、4-AP、BaCl2预孵育后,不同质量浓度的OSC对经PE预收缩的正常或去内皮血管环的舒张率均无显著影响(P>0.05);而经TEA、Gli预孵育后,0.4~1.0 mg/mL的OSC可显著降低经PE预收缩的去内皮血管环的舒张率(P<0.01)。结论:OSC在试验剂量(0.2~1.0 mg/mL)范围内对基础状态的大鼠胸主动脉环无明显舒张作用,但0.4~1.0 mg/mL的OSC对经PE预收缩的正常或去内皮大鼠胸主动脉环均有明显舒张作用;其血管舒张的作用机制为非内皮依赖性,可能与受体操纵性钙通道、钙激活钾通道和ATP敏感钾通道有关。

氧化槐果碱结构的测定及其振动圆二色谱研究

采用傅里叶红外光谱仪(FTIR)和振动圆二色谱仪(VCD)测量氧化槐果碱固体的红外光谱和振动圆二色谱。采用密度泛函方法(DFT)分别在B3LYP/cc-PVTZ和B3LYP/6-311+G(d,p)水平下,对气相中氧化槐果碱分子结构进行了优化,然后在相同水平下计算了氧化槐果碱的红外光谱(IR)以及振动圆二色谱(VCD)。将实验谱图与理论计算谱图进行对照,以确定氧化槐果碱的实际构象以及构象分布。由对比结果可知:采用B3LYP/6-311+G(d,p)水平下,以吉布斯自由能进行玻尔兹曼加权平均后的理论IR和VCD谱图与实际光谱图最为接近,说明在常温下氧化槐果碱具有A/B-trans C/D-trans和A/B-trans C/D-cis两种优势构象,且玻尔兹曼分布显示两种构象均以一定比例共存,且通过对氧化槐果碱的两种优势构象分析,发现A/B环的立体结构为:椅式-椅式,C/D环的立体结构为:椅式-沙发式。

氧化槐果碱对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的观察氧化槐果碱(OSC)对酒精诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法将50只昆明种小鼠随机分为5组,分别为正常对照组、模型组、OSC低、中、高剂量(10、20、40 mg·kg^(-1))组。OSC各剂量组采用灌胃方式提前预防给予OSC(10、20、40 mg·kg^(-1))2 d,2 d后用56°白酒灌胃(6 g·kg^(-1))以建立急性酒精性肝损伤模型。造模6 h后眼静脉丛取血,检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量,肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性以及丙二醛(MDA)的含量,观察小鼠体质量、肝脏指数和肝脏组织形态学结构的变化。结果各组小鼠初始体质量和终末体质量比较差异无统计学意义;不同剂量OSC(10、20、40 mg·kg^(-1))均可降低肝脏指数,减少血清肝损伤标志酶(ALT、AST)和肝组织脂质过氧化物(MDA)的含量,提高肝组织抗氧化酶(SOD、CAT和GSH-Px)的活性。组织病理学检查结果显示,OSC(10、20、40 mg·kg^(-1))可显著减轻小鼠肝脏组织病理学结构的异常改变。结论OSC对酒精致小鼠肝脏的结构和功能改变具有保护作用,其作用机制与OSC抑制酒精诱导的肝组织发生氧化应激、脂质过氧化和维持肝细胞膜稳定性有关。

氧化槐定碱和氧化槐果碱的中枢抑制和神经保护作用

氧化槐定碱和氧化槐果碱具有中枢抑制和神经保护作用,其作用机制可能具有氧化苦参碱激活大麻素2型受体和上调电压门控钙离子N型通道表达,促进抑制性神经递质(γ-氨基丁酸、甘氨酸)合成和释放,下调γ-氨基丁酸转运体-1表达,使突触间隙γ-氨基丁酸浓度升高以及上调γ-氨基丁酸-A受体表达,从而增强γ-氨基丁酸能神经功能。γ-氨基丁酸能神经功能的增强可抑制兴奋性神经递质谷氨酸过度表达并下调天冬氨酸(NMDA)受体和蛋白激酶C-γ表达,使NMDA受体磷酸化减弱,降低NMDA受体对谷氨酸的兴奋性,从而下调电压门控钙离子L型通道的表达,抑制钙离子内流,阻滞钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ/cAMP反应元件结合蛋白(CaMKⅡ/CREB)通路,抑制炎症反应,产生中枢抑制和神经保护作用。综述氧化槐定碱和氧化槐果碱的中枢抑制和神经保护作用文献,并对其研究进展做了分析。

槐果碱和氧化槐果碱的药动学研究进展

槐果碱和氧化槐果碱属苦参碱类生物碱。苦参碱类生物碱具有广泛的生物活性,如保护心、肝、肺、肾、脑、血管作用,对心脏有正性肌力、负性频率、抗心律失常作用,还有升高白细胞、平喘、抗溃疡、抗肝纤维化以及镇静、催眠、镇痛等中枢神经药理作用,也具有抗肿瘤、免疫调节、抗菌、抗病毒、抗炎等药理作用。文中综述槐果碱和氧化槐果碱的药动学参数及其体内过程文献,并对其药动学的研究进展做了分析,为合理用药提供参考。