神经细胞老化过程中细胞内脂质过氧化反应程度和超氧化歧化酶活性的动态变化

目的:观察体外培养的小鼠神经母细胞瘤细胞A2无血清培养条件下分化成神经细胞过程中,细胞内脂质过氧化的主要产物-丙二醛和自由基清除剂超氧化物歧化酶的变化,探讨脂质过氧化反应程度和抗氧化能力与细胞老化的相关性。方法:实验于2004-04/2005-02在上海第二医科大学附属仁济医院神经内科神经生物学实验室进行。①建立神经细胞老化实验模型:传代培养的小鼠神经母细胞瘤细胞A2中加入无血清培养液后,在37℃、含体积分数为0.05的CO2的空气中培养,24h后换培养液,以后每隔3d更换培养液;按不同的培养天数分为培养1,7和14d组,各组在培养至相应的天数后终止培养。②评估神经细胞变化的指标检测:采用显微荧光分光光度计测定细胞老化指标脂褐素水平(相对荧光值)反映细胞老化程度;以比色法测定细胞内丙二醛浓度评估细胞脂质过氧化程度,亚硝酸盐比色法得出超氧化物歧化酶活性反映细胞的抗氧化能力。结果:①细胞内脂褐素相对荧光值:培养1,7和14d组分别是(11.55±0.9)%,(22.41±1.99)%和(29.51±4.57)%,组间比较差异显著(F=478.04,P<0.01)。②丙二醛浓度:培养1,7和14d组分别是(0.90±0.20),(1.91±0.19)和(2.98±0.20)μmol/L;组间比较差异显著(F=148.31,P<0.01)。③超氧化物歧化酶活性:培养1,7和14d组分别是(685.30±107.85),(372.07±74.35)和(175.04±29.67)μkat/L:组间比较差异显著(F=66.10,P<0.01)。结论:①随着无血清培养天数的增加,小鼠神经母细胞瘤细胞A2细胞内脂褐素逐渐增多,细胞在不断衰老。②细胞内丙二醛浓度随细胞老化而不断增加,而超氧化物歧化酶活性却随着细胞老化而下降。说明神经细胞的老化与细胞内脂质过氧化反应呈正相关,与细胞的抗氧化能力呈负相关。③体外神经细胞老化实验研究模型是科学和客观的,具有很强的应用价值。

黄粉虫中提取纯化超氧化歧化酶的工艺研究

本研究以黄粉虫粉为原料,经盐析沉淀,DEAE-Sepharose FF阴离子交换柱层析和Sephadex G200凝胶过滤层析等纯化步骤,获得了其中的一种超氧化物歧化酶(SOD)。酶的纯化倍数为78.3倍。SDS-PAGE电泳显示为均一的蛋白谱带。经鉴定该酶为Cu.Zn-SOD。本研究为从黄粉虫中提取SOD提供了一种较好的工艺。

部分正常菌群分离菌株的超氧化歧化酶活性的测定

为了进一步研究部分正常菌群的生理和病理机制,我们测定了这些菌株的SOD活性和脂质过氧化物(LPO)变化,发现皮肤常住菌的分离株的混合培养时,SOD活性增加,说明它们具有协同作用。此外,对其它菌株SOD活性测定结果可知,类杆菌和双歧杆菌的SOD活性最低,其它菌株也有一定的SOD活性,如乳杆菌的SOD活性为47.47～98.98μg/ml,大肠杆菌的SOD活性为127.12μg/ml肠球菌的SOD活性为172.5μg/ml。

维生素E和硒对糖尿病肾病及高血压肾损害时丙二醛及超氧化歧化酶的作用观察

目的 研究维生素E、硒作为氧自由基清除剂对氧自由基脂质氧化物丙二醛 (MDA)和抗氧化防御系统的超氧化歧化酶 (SOD)的影响。方法 测定糖尿病肾病患者 2 7例、高血压肾损害患者 30例及糖尿病合并高血压伴肾损害患者 2 5例 ,测定维生素E和硒治疗前后的血清MDA、SOD的活力浓度。结果 3组患者治疗前MDA和SOD水平均高于正常值 ;治疗 3个月后MDA值均明显降低 ,与治疗前相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;SOD值均略有降低 ,与治疗前相比 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 维生素E和硒治疗后血清MDA水平降低 ,表明氧自由基清除剂能有效清除氧自由基 ,改善细胞代谢及功能。由于所选病例均为早期肾损害者 ,治疗前血清SOD出现代偿性增高 。

益气化瘀补肾法对颈椎病动物超氧化歧化酶活力的影响

目的 :观察中医益气化瘀补肾法对颈椎病模型动物相关组织成分超氧化歧化酶 (SOD)的影响。方法 :用健康成年新西兰大白兔 42只 ,随机分为益气化瘀补肾组 ,益气化瘀组 ,补肾组 ,消炎痛组 ,模型对照组 ,正常对照组 7组 ,按静力平衡失调造模方法造成颈椎病模型 ,按组给药 ,到期后分别取动物血清、颈椎间盘组织血清、颈椎间盘组匀浆用黄嘌呤氧化酶法测定其中的SOD的变化。结果 :益气化瘀补肾法能明显提高颈椎病动物血清、颈椎间盘组织匀浆SOD活力 ,与模型组相比有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :中医益气化瘀补肾法有提高颈椎病模型动物血清、颈椎间盘组织匀浆SOD活力的作用。

冠心病患者选择素P、L、E、一氧化氮及超氧化歧化酶水平变化及其相关性

目的 观察冠心病患者选择素 P、L、E(SP、SL、SE) ,一氧化氮 (NO)及超氧化歧化酶 (SOD)的变化及 SP、SL、SE与 NO、SOD之间的关系。方法 70例冠心病患者 (男 5 5例 ,女 15例 )分为四个亚组 :非心绞痛组 30例 ,陈旧性心肌梗死组 10例 ,心绞痛组 2 0例 ,缺血性心肌病组 10例。对照组 2 0例 ,比较两组选择素 P、L、E及 NO、SOD水平 ,并作相关性分析。结果 缺血性心肌病组、心绞痛组、陈旧性心肌梗死组、非心绞痛组 SP、SL、SE、NO、SOD均显著高于对照组 (P<0 .0 5～ P<0 .0 1) ;缺血性心肌病组、心绞痛组 SP、SL、SE及 NO、SOD显著高于非心绞痛组(P<0 .0 1) ;陈旧性心肌梗死组 SE、NO及 SOD明显高于非心绞痛组 (P<0 .0 5～ P<0 .0 1) ;与心绞痛组比较 ,缺血性心肌病组 SP、SL、SE、NO明显升高 (P<0 .0 1) ,SOD则无明显差异 (P>0 .0 5 ) ,与陈旧性心肌梗死组比较 ,缺血性心肌病组 SP、SL、SE、NO、SOD均有显著升高 (P<0 .0 1)。SP、SL、SE分别与 NO、SOD正相关 (r=0 .6 0、0 .6 2、0 .5 9P<0 .0 1;r=0 .5 4、0 .5 8、0 .5 1,P<0 .0 1)。

中药茵栀清肝汤对急性病毒性肝炎患者血清C-反应蛋白、超氧化歧化酶及丙二醛的影响

目的研究中药茵栀清肝汤对急性病毒性肝炎患者的治疗作用和对C反应蛋白、超氧化歧化酶及丙二醛的影响。方法80例急性病毒性肝炎患者随机分为对照组、还原型谷胱甘肽组和中药治疗低、高剂量组,中药组分别予以茵栀清肝汤1 g/kg、2 g/kg,1/d口服,共15 d。对照组、还原型谷胱甘肽组和中药治疗组均给予护肝治疗。治疗前后留取血清标本,检测肝功能;测定血清CRP、SOD及MDA的含量。结果中药茵栀清肝汤治疗组患者血清AST、ALT水平较对照组显著降低(P<0.05),对急性病毒性肝炎患者血清SOD活性有明显的升高作用(P<0.05),并降低血清CRP、MDA的含量(P<0.05)。上述各项指标在中药茵栀清肝汤高剂量治疗组与还原型谷胱甘肽组之间对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论茵栀清肝汤具有治疗急性病毒性肝炎患者的作用,其机制可能和抗氧化应激反应,维护体内CRP、SOD及MDA平衡有关。

急性重型颅脑损伤患者血清超氧化歧化酶及丙二醛检测

目的:通过检测急性重型颅脑损伤患者在不同时值的血清超氧化歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,来间接观察其氧自由基在体内堆积程度。方法:选择住院的颅脑损伤后,临床诊断属急性重型颅脑损伤的患者,在伤后24、48、72h抽血进行检测,所得结果与正常参考值比较。结果:发现SOD值渐低于正常参考值,而MDA值即渐高于正常值,且于伤后72h较显著(P<0.05)。结论:间接反映出氧自由基在急性重型颅脑损伤后渐有增加的反应,也证明了急性重型颅脑损伤(原发、继发)的程度,并对观察临床治疗效果及对预后判断有实用意义。

退变椎间盘组织匀浆超氧化歧化酶的变化

为研究退变椎间盘组织匀浆超氧化歧化酶 (SOD)的变化 ,运用静力平衡失调造模方法制造颈椎病椎间盘退变动物模型 ,通过黄嘌呤氧化酶法测定造模组与正常组的同一节段椎间盘组织匀浆SOD活力值。结果显示模型组动物椎间盘组织匀浆SOD活力值与正常对照组相比有明显降低趋势 (P <0 .0 5 )。表明椎间盘组织匀浆SOD活力值与颈椎病椎间盘退变有重要关系。

超氧化歧化酶对运动训练的反应和适应

综述了运动训练对抗氧化系统中超氧化歧化酶影响的研究进展 ,并对其机制作了简单的综合分析 ,旨在为运动性疲劳和自由基代谢关系的研究提供一些参考。

冠心病与高心病的超氧化歧化酶及丙二醛的改变

冠心病与高心病的超氧化歧化酶及丙二醛的改变黄新平，谭留明，吴昌元，王家翠，邹文萍，刘一波新近研究揭示，心肌缺血产生氧自由基（ＯＦＲ）进一步分解生成丙二醛（ＭＤＡ）而自由基清除剂超氧化歧化酶（ＳＯＤ）的浓度则降低，从而进一步损伤心肌细胞，加重心肌缺血，...

不同施肥水平及微肥对木瓜超氧化歧化酶活性的影响

以不同施肥处理和不同微肥的木瓜为原料,用磷酸缓冲液提取超氧化歧化酶(SOD),采用四氮唑蓝(NBT)光还原法测定SOD酶活性。研究结果表明,在温度25℃、光照强度4000 lx、光照时间15 min时,SOD酶活性最强,为1460 U。不同施肥处理对SOD酶活性均有提高,最大提高了19.7%。不同微肥对SOD酶活性也有一定的促进作用,Fe微肥的促进作用最强,为12%。

鹿茸中粘多糖和超氧化歧化酶的研究

从鹿茸中分离得到有强烈抑制邻苯三酚自氧化的超氧化物歧化酶和酸性粘多糖。测定了多糖的理化性质,是由氧基半乳糖、糖醛酸、中性糖和硫酸根组成,比较了鲜茸和传统方法加工的干茸,冻干的鹿胎粉和烘干的鹿胎粉,鹿茸蛋白和鹿茸精中超氧化物歧化酶及粘多糖的活性和含量。

梅花鹿超氧化歧化酶的克隆与原核表达

目的:利用分子生物学的方法克隆梅花鹿超氧化歧化酶(Cu,Zn-SOD)基因,并将其于大肠杆菌(E.coli)中表达。方法:通过设计扩增引物及RT-PCR技术从梅花鹿肝细胞中克隆出Cu,Zn-SOD基因,将其构建于表达质粒pET21a(+)并转入E.coli Rosetta(DE3)。结果:通过IPTG诱导表达,在Rosetta(DE3)中成功表达出具Cu,Zn-SOD活性的梅花鹿超氧化物歧化酶,三角摇瓶发酵水平约257U/ml发酵液;经过纯化后得到比活3092U/mg的梅花鹿超氧化物歧化酶。结论:获得了梅花鹿的Cu/Zn-SOD基因的全序列,并使其得到表达,对研究鹿茸的功效和保护梅花鹿这一物种具有一定意义。

蒙药阿那日-4散对实验性胃溃疡大鼠血清超氧化歧化酶活力及一氧化氮、丙二醛含量的影响

目的:观察蒙药阿那日-4散对实验性胃溃疡大鼠血清超氧化歧化酶活力及一氧化氮、丙二醛含量的影响,探讨其治疗胃溃疡的可能作用和机制。方法:利用10%醋酸制备实验性胃溃疡大鼠模型,予蒙药阿那日-4散及枸橼酸铋钾治疗15d后观察胃黏膜大体标本,计算溃疡面积,测量血清超氧化歧化酶活力及一氧化氮、丙二醛含量。结果:胃黏膜大体标本观察发现,治疗组和对照组均溃疡愈合良好;与模型组相比,高剂量的蒙药阿那日-4散可明显促进溃疡愈合,减少溃疡面积(P<0.01),提高血清超氧化歧化酶活力(P<0.05),降低血清一氧化氮和丙二醛含量(P<0.01)。结论:蒙药阿那日-4散对大鼠实验性溃疡具有良好的治疗作用,其治疗作用和机制可能与清除氧自由基,提高血清超氧化歧化酶活力,降血清一氧化氮,丙二醛含量有关。

糖皮质激素联合特布他林治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的临床疗效及其对过氧化脂质和超氧化歧化酶的影响

目的观察糖皮质激素联合特布他林治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者的临床疗效及其对外周血过氧化脂质(LPO)、超氧化歧化酶(SOD)的影响。方法选取2019年6月—2020年8月永安市立医院收治的96例AECOPD患者作为研究对象,采用随机数字表法分为对照组(n=46)和研究组(n=50)。患者入院后均采用常规治疗,在此基础上,对照组采用特布他林雾化吸入治疗,研究组在对照组基础上联合糖皮质激素治疗,2组均持续治疗1周。比较2组治疗前及治疗后1周临床症状(气促、咳痰、咳嗽)积分、炎性因子[C反应蛋白(CRP)、白介素6(IL-6)]水平、肺功能指标[用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、呼气峰流速(PEF)]及LPO、SOD水平,不良反应发生情况。结果治疗后1周,2组气促、咳痰、咳嗽积分低于治疗前,且研究组低于对照组(P<0.01)。治疗后1周,2组血清CRP、IL-6水平低于治疗前,且研究组低于对照组(P<0.01)。治疗后1周,2组FVC、FEV_(1)、PEF高于治疗前,且研究组高于对照组(P<0.01)。治疗后1周,2组LPO水平低于治疗前,SOD水平高于治疗前,且研究组LPO水平低于对照组,SOD水平高于对照组(P<0.01)。2组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用糖皮质激素联合特布他林治疗AECOPD可有效缓解患者的临床症状,减轻炎性反应,改善患者的肺功能指标及LPO、SOD水平,且安全性较高。

辅酶Q10对自然衰老小鼠皮肤超氧化歧化酶活性及病理学变化的影响

目的通过观察辅酶Q10对自然衰老小鼠皮肤超氧化歧化酶活性和组织病理学变化的影响,探讨辅酶Q10延缓衰老,减轻对皮肤细胞损伤的作用,为其研究开发提供实验依据。方法将35只8月龄的SPF级昆明种雌性小鼠随机分为空白溶剂组、维生素E组、辅酶Q10低剂量组、辅酶Q10高剂量组、维生素E与辅酶Q10低剂量联合组,每组7只。采用经口灌胃法给药,1日1次,连续灌胃10周。实验终末用试剂盒法测定小鼠皮肤中的超氧化歧化酶(SOD)活性,光镜观察皮肤组织的病理学变化。结果与空白溶剂组相比,辅酶Q10各剂量组的SOD活性不同程度升高,病理学观察可见辅酶Q10各剂量组小鼠皮肤表皮厚度增加,真皮纤维排列整齐。结论辅酶Q10对自然衰老小鼠皮肤有保护作用,增加表皮厚度,改善真皮纤维结构,延缓皮肤的衰老。