酮康唑抑制氧化亚油酸代谢物介导的外周炎性疼痛机制

目的探讨细胞色素P450(CYP)抑制剂酮康唑抑制氧化亚油酸代谢物(OLAM)介导的外周炎性疼痛的机制。方法通过弗罗因德佐剂(CFA)模型研究OLAM在炎症过程中作用,CYP酶在OLAM对热痛觉过敏过程中的影响进行研究。结果培养的三叉神经节(TG)神经元在使用递质进行预处理后,随后进行亚油酸(LA)刺激,[Ca2+]i呈现3倍的增长,至(0.156±0.01)。酮康唑的预处理消除LA对[Ca2+]i增强的影响(P<0.05)。再悬浮的提取物引起降钙素与基因相关肽(CGRP)释放增至(980.39±21.04)%,与瞬时受体电位香草酸亚型-1(TRPV1)拮抗剂I-RTX共同处理提取物的CGRP释放减弱至(200.31±10.01)%,CFA/酮康唑+递质处理提取物的CGRP释放减弱至(498.03±13.02)%。在对照组(未发炎)后足中注射LA不显著延长自发性伤害性反应行为的时间。在CFA炎症建立后24 h,足底注射LA产生剂量依赖的伤害性镇痛效应,自发性伤害性反应行为时间上调至(148.92±13.42)s。使用阻断剂的预处理可减少被唤起的非综合行为。与野生型小鼠相比,在基因敲除TRPV1的小鼠中,LA-激发的疼痛行为显著减少,非综合行为的时间为(5.31±0.41)s。与接受对照抗山羊IgG抗体(HBSS)组比较,足底注射抗9和抗13-HODE抗体对LA诱导的伤害性行为减少约72%。注射LA前30 min用酮康唑预处理大鼠发炎后足,酮康唑对LA的抑制作用达到70%,伤害性行为时间下调至(11.28±4.10)s。结论OLAM对外周产生炎症性痛觉,而CYP酶在调节OLAM对炎症性热痛觉过敏的作用方面起着至关重要的作用。

氢过氧化亚油酸钠在洗涤用品中的应用研究

将氢过氧化亚油酸钠与市售的5种洗涤剂进行复配,使其在发挥漂白作用的同时可兼作具有洗涤效果的皂。采用咖啡污布、绿茶污布和红酒污布对配方的漂白效果进行了研究,结果表明氢过氧化亚油酸钠适合与粉状配方洗涤剂配伍,能起到协同增效作用,而与3种皂基肥皂配方的协同作用较差。

玉米醇溶蛋白肽的制备及其对亚油酸自氧化的抑制作用

以乙醇从脱脂玉米蛋白粉中萃取所得的醇溶蛋白为底物，以碱性蛋白酶为催化剂，通过水解反应制备玉米醇溶蛋白肽，经精制冻干后得到肽含量为85．73％的玉米醇溶蛋白肽固体。以α-生育酚为阳性对照，研究了玉米醇溶蛋白肽及其分离纯化组分对亚油酸自氧化的抑制作用。结果表明，玉米醇溶蛋白肽及其分离组分都具有抑制亚油酸自氧化的作用，抑制效果随其质量浓度的增大而增强。经Sephedax G—15葡聚糖凝胶层析分离所得组分2抑制亚油酸自氧化的效果最好，相对分子质量主要集中在200—800Da之间。

亚油酸氢过氧化物氧化修饰对大豆蛋白热变性和聚集的影响

以亚油酸氢过氧化物代表脂质氢过氧化物氧化修饰大豆分离蛋白,采用圆二色光谱、内源荧光光谱、粒径分析以及相对分子质量分布研究氢过氧化物氧化修饰对大豆蛋白热变性和聚集的影响。结果发现亚油酸氢过氧化物氧化修饰使得大豆蛋白热稳定性下降,热变性过程中形成聚集体粒径随着蛋白质氧化程度的升高呈现先增加后减小的趋势,热变性大豆蛋白冷却后的粒径和聚集体含量则随着蛋白质氧化程度的增加而下降。

类胡萝卜素对亚油酸甲酯氧化的抑制作用

研究溶液中类胡萝卜素对2 ,2’ -偶氮二 (2 ,4短杠二甲基戊腈 ) (AMVN)引发的亚油酸甲酯氧化的抑制作用及色素的消耗变化。表明 β-胡萝卜素 ,叶黄素及胭脂树橙都按依赖于剂量的方式抑制亚油酸甲酯氢过氧化物的形成。41.7×10 -6mol/L的叶黄素及玉米黄质的抑制活性相近 ,高于β-胡萝卜素与胭脂树橙的活性 ,后两者活性近似。在83.3×10 -6mol/L浓度下鸡油菌黄质活性高于叶黄素 ,后者又高于 β-胡萝卜素与胭脂树橙 ,最后两者仍近似。结果表明下列五种类胡萝卜素对亚油酸甲酯氧化的抑制能力为 :鸡油菌黄质>玉米黄质≈叶黄素> β-胡萝卜素≈胭脂树橙。类胡萝卜素在抑制脂质氧化过程中 ,本身逐渐损失消耗 ,4h后在试验所用浓度下最高剩余量不超过20 %。其中鸡油菌黄质与胭脂树橙的消耗速度慢于 β-胡萝卜素与玉米黄质。

超声波辅助豆粕一锅法合成氢过氧化亚油酸

利用新鲜豆粕耦合超声波技术开发了一条高底物浓度下合成氢过氧化亚油酸(linoleic acid hydroperoxide,LA-HPOD)的新工艺。研究了pH、温度、厎物和溶剂用量等反应参数对LA-HPOD产率的影响。结果表明,超声波因辐射作用能显著缩短反应时间,有效提高LA-HPOD的产率。40 kHz,100 W超声波辐射下,1.5 g豆粕和1.5 g亚油酸在15℃下,0.5 mL乙醇、7.5 mL pH 9硼酸盐缓冲液中反应40 min,LA-HPOD的产率为89%。该方法成功地将超声波辐射应用于脂肪氧合酶促反应,并采用成本低廉的豆粕代替昂贵的脂肪氧合酶,达到了高底物浓度下低成本绿色高效合成LA-HPOD的目的。

环氧化二十碳三烯甘油酸对肿瘤细胞增殖的影响

背景与目的:环氧化二十碳三烯甘油酸(EETs)由细胞色素P450(CYP)表氧化酶从花生四烯酸合成而来,研究发现,CYP表氧化酶在癌组织中明显高表达,而癌旁正常组织中几乎不表达,并且证实CYP表氧化酶及其代谢产物可能与肿瘤的发生、发展存在密切关系。本研究目的在于研究EETs对肿瘤细胞的促增殖作用及其相关的机制。方法:分别以不同浓度的EETs(8,9-EET、11,12-EET和14,15-EET)作用Tca-8113、A549、Ncl-H446和HepG2肿瘤细胞12、24、48h和72h后,MTT法检测细胞增殖情况。流式细胞仪检测外源性EETs对Tca-8113细胞周期的影响。用选择性抑制剂来阻断细胞增殖的MAPK、PI3K/Akt和PKC细胞信号转导通路,并用Westernblot法检测PI3K/Akt和ERK1/2总蛋白水平和磷酸化水平。结果:与对照组和溶媒组比较,EETs可明显促进肿瘤细胞的生长,并呈明显的浓度依赖性和时间依赖性(P<0.01)。流式细胞仪分析显示,EETs处理后的肿瘤细胞在S-G2/M期的细胞数增多。11,12-EET处理Tca-8113细胞后S期和G2/M期细胞[(49.7±7.5)%vs.(21.0±5.3)%]较对照组明显增多(17.2±9.7)%vs.(4.9±7.3)%],差异有统计学意义(P<0.01)。用EETs培养后肿瘤细胞的MAPK和Akt磷酸化水平显著增加,而且其抑制剂能够阻断EETs诱导的细胞增殖作用。结论:EETs具有促进肿瘤细胞增殖的作用,MAPK和PI3K/Akt细胞转导通路在此过程中起重要作用。

菠菜叶片乙醇酸氧化酶的氧化甘油酸活性(英文)

首先从菠菜叶片中纯化了乙醇酸氧化酶(GO)。通过鉴定反应中氧的消耗以及反应产物 H2O2的生成,证实菠菜 GO 具有氧化光呼吸途径中间代谢物甘油酸的活性。该氧化活性依赖于辅因子 FMN和 FAD,而不依赖核黄素和光黄素;其最适反应pH值为 8.0,Km(甘油酸)值为 7.14mmol/L,kcat值为1.04s-1,活化能为17.29kJ/mol;草酸和丙酮酸对该氧化活性有明显的抑制作用,其中前者为典型的竞争性抑制。进一步通过两底物竞争作图表明:菠菜叶片 GO 氧化甘油酸反应和氧化乙醇酸反应为同一活性中心所催化。菜叶片 GO 氧化甘油酸反应和氧化乙醇酸反应为同一活性中心所催化。

亚油酸乳状液体系氧化模型与求解

研究了恒表面氧压静置式无限氧补偿条件下乳状液中亚油酸的氧化,通过综合考虑气液边界传质阻力、水相扩散、油水边界乳化剂膜边界层阻力、多不饱和脂肪酸(PUFA)自催化氧化反应动力学,建立了扩散-氧化数学模型。采用非对称正交配置法处理特殊边界,求解偏微分方程组,计算了氧化过程中乳状液中氧和亚油酸在垂直于液膜方向的浓度分布,计算方法快捷、有效;结合数学模拟试验和实验值,确定了气液界面氧的液膜传质系数和水相中氧的扩散系数。实验验证该模型能较好地拟合静置式无限氧补偿条件下乳状液中氧的扩散和亚油酸的氧化过程。

ω-羧基样亚油酸氧化物促进ATP结合盒转运子A1(ABCA1)表达

ω-羧基样亚油酸氧化物(7-KC-9-COOH)是由Cu2+氧化低密度脂蛋白(ox LDL)中得到的负性胆固醇氧化物。研究其对ATP结合盒(ABC)转运子超家族成员ABCA1表达的调控作用,并探讨其对高密度脂蛋白(HDL)介导的胆固醇流出的影响。THP-1单核细胞经佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞,化学合成的7-KC-9-COOH以时间梯度孵育细胞,随后采用RTPCR,western blot研究其对ABCA1基因和蛋白水平表达的影响。7-KC-9-COOH显著促进了ABCA1 mRNA和蛋白水平表达,其中作用2 h效果最为显著,基因水平增加48.6%(*P<0.05),蛋白水平增加285.3%,较空白组升高近3倍(**P<0.01)。抑制其上游核转录因子PPARγ与LXRα,其蛋白表达量下降51.2%。ω-COOH亚油酸氧化物7-KC-9-COOH经由PPARγ-LXRα信号通路提高了ABCA1的表达,促进了胆固醇逆转运(RCT)和HDL介导的胆固醇流出。

油酸酰胺丙基二甲基氧化胺压裂液稠化剂的性能研究

油酸在170 ℃、NaOH催化剂条件下与二甲氨基丙胺缩合生成中间体,在55℃条件下与30％过氧化氢氧化生成油酸酰胺丙基二甲基氧化胺,总转化率为97％.使用质量分数为1.5％～3％的油酸酰胺丙基二甲基氧化胺及助剂配制的清洁压裂液,在170 s-1、80℃条件下剪切1h,黏度在50～150 mPa·s之间;使用质量分数为3％的清洁压裂液在170 s-1、100℃下剪切1h,黏度达到30 mPa·s.由于氮氧键之间为配位共价键,具有较大的偶极矩,极性大,增稠能力强.利用裂缝导流实验装置,分别通10 PV 2％油酸酰胺丙基二甲基氧化胺清洁压裂液及羟丙基瓜胶压裂液破胶液,它们对裂缝导流能力的伤害率分别为13％和90％,清洁压裂液对裂缝导流能力伤害小.清洁压裂液与煤油按质量比为10∶1混合,在40℃破胶0.5 h,破胶液黏度为2.71 mPa·s,破胶彻底.

高速逆流色谱分离纯化氧化葵花油中三亚油酸甘油酯单氢过氧化物

该文为了获得较高纯度的三亚油酸甘油酯单氢过氧化物,用于"脂肪调控氧化-热反应"制备肉味香精机理的研究。葵花油在70℃下通空气0.72 m3/(kg.h)氧化70 h制备含三亚油酸甘油酯单氢过氧化物的氧化产物,采用液-质联机定性及液相色谱-蒸发光散射检测器面积归一化定量,氧化产物中三亚油酸甘油酯单氢过氧化物质量分数为1.95%。高速逆流色谱分离该氧化产物中的三亚油酸甘油酯单氢过氧化物,较佳的两相溶剂系统为V(正己烷)∶V(二氯甲烷)∶V(乙腈)=4∶1∶3。以上相为固定相,下相为流动相,正向洗脱,流速1.5 mL/min,转速850 r/min,上样5 g,分离时间195 min,一次性得三亚油酸甘油酯单氢过氧化物53 mg,液相色谱-蒸发光散射检测器分析纯度为96.3%,回收率52.3%。

环氧化季戊四醇油酸酯的合成

以季戊四醇油酸酯和过氧化氢为原料,强酸性阳离子交换树脂为催化剂,对环氧化季戊四醇油酸酯的合成反应进行了研究。考察了催化剂用量、过氧化氢用量、反应温度、甲酸用量、反应时间等因素对环氧化反应的影响。确定了较佳的合成条件,当m(季戊四醇油酸酯)∶m(甲酸)∶m(过氧化氢)∶m(离子交换树脂)=1∶20%∶70%∶5%时,在60℃反应温度下反应6h,制得淡黄色油状环氧化季戊四醇油酸酯,产品环氧值为4.6%,碘值低于3g/100g。

大豆脂肪氧合酶酶促合成亚油酸氢过氧化物

研究了水相体系中大豆脂肪氧合酶酶促合成亚油酸(LA)氢过氧化物的反应,最佳反应条件为底物质量浓度4 11g/L,pH=9,5℃,反应时间120min,亚油酸氢过氧化物产率80%。当m(LA)∶m(surfactant)=1∶1时,Tween系列、CTAB、AOT、AEO4、OAPCG、S8390均能加速反应,其中AEO4使反应时间缩短至30min,产率提高12%。一些盐可以明显地加快反应进程,其中柠檬酸钠使反应时间缩短至15min。外源Fe3+在反应体系中的浓度为0 5μmol/L或外源Fe2+为5nmol/L时反应速度显著提高,消除了滞后期。

亚油酸氧化引起大足黑山羊肌原纤维蛋白保水性变化的机制研究

为探究亚油酸氧化对大足黑山羊肌原纤维蛋白(myofibrillar protein,MP)保水性的影响,建立不同浓度的亚油酸氧化体系,4℃孵育24 h后,通过Zeta电位值、氨基酸含量和二级结构含量等指标,研究亚油酸氧化体系对黑山羊肉MP的氧化修饰及对电荷与保水性的影响。结果表明,随着亚油酸浓度的增大,MP剧烈氧化,羰基含量由0.44 nmol/mg增加到2.09 nmol/mg;MP表面疏水性先显著上升(P<0.05),在亚白结构趋向于交联和无序化,α-螺旋呈下降趋势,而无规则卷曲、β-转角则具有相反的趋势(P<0.05)。可质子化氨基酸损失导致Zeta电位绝对值呈现先上升后下降的趋势;在亚油酸浓度为5 mmol/L时,MP保水性达到8 g水/g蛋白,随后迅速下降。该研究表明,随着亚油酸浓度的增加,在结构和净负电荷的双重影响下,MP保水性呈现先升高后降低的变化规律。

亚油酸氧化诱导大豆分离蛋白氧化对其结构的影响

利用脂肪氧合酶催化不同底物浓度亚油酸氧化大豆分离蛋白,通过测定氧化后大豆分离蛋白的羰基值、巯基、表面疏水性、内源荧光以及凝胶电泳等指标,对氧化修饰后大豆分离蛋白的结构进行分析,并通过分析氧化后大豆分离蛋白在不同溶剂中溶解性能表征其分子间相互作用力。结果表明,随体系中亚油酸浓度的增加,大豆分离蛋白羰基含量增加56.3%,总巯基和游离巯基含量降低,表面疏水性呈先增大后减小趋势,内源荧光强度降低,发生先红移后蓝移现象,大豆分离蛋白粒径先减小后增大,主要分布于5~40 nm之间,蛋白质氧化过程发生去折叠和重聚集,蛋白质交联中存在非二硫键共价键生成。

水相还原氢过氧化亚油酸制备羟基共轭亚油酸

开发了一种绿色、温和的合成羟基共轭酸的方法。以大豆脂肪氧合酶催化氧化亚油酸所得的氢过氧化亚油酸（LA-HPOD）为原料，用亚硫酸钠于水相还原氢过氧化亚油酸，得到羟基共轭亚油酸。分别通过添加乙醇作为辅溶剂以及用碳酸钠适度皂化氢过氧化亚油酸以便于增加氢过氧化亚油酸在水中的溶解度。考察了还原剂用量、温度、时间对氢过氧化亚油酸转化率的影响。0～40℃内，反应温度对氢过氧化亚油酸转化率无显著影响，醇-水体系所得的还原反应转化率与皂化体系的还原反应转化率接近，氢过氧化亚油酸的最高转化率达98．5％。

地鳖虫酶解液体外抗氧化作用的研究

通过正交试验得出Arazyme蛋白酶酶解地鳖虫的最佳工艺条件为加酶量300U,酶解时间5h,料水比1:20。并分析了其酶解液对羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-·)、二苯代苦味酰基自由基(DPPH)的清除作用以及对亚油酸自氧化反应的抑制作用。结果表明:地鳖虫酶解液对·OH、O2-·、DPPH三种自由基的最高清除率分别为75.15%(浓度为50g/L)、31.72%(浓度为2.5g/L)、74.88%(浓度为80mg/L);在肽含量为2.0mg时,对亚油酸自氧化反应的抑制率为95%。

茶叶多糖的抗氧化活性研究

从婺源粗老绿茶叶中提取纯化出了茶叶多糖,研究了它对超氧自由基、DPPH自由基的清除作用,以及对β-胡萝卜素-亚油酸氧化体系的抑制作用,以此来评价该多糖的抗氧化活性。结果表明,茶叶多糖对超氧自由基、DPPH自由基有较好的清除作用,而对β-胡萝卜素-亚油酸氧化体系也有较明显的抑制作用。

模拟人胃肠仿生消化对花生肽亚铁抗氧化活性的影响

为探讨花生肽亚铁在模拟人胃肠仿生消化条件下抗氧化活性变化规律,研究了仿生消化过程中表面疏水性、DPPH·清除率、O2-·清除率、·OH清除率、亚油酸氧化抑制活性和脂质过氧化抑制活性等指标变化。结果发现:模拟胃肠仿生消化后花生肽亚铁表面疏水性得到增强,仿生消化270 min时表面疏水性最大((15.84±0.33)μg);仿生消化增强了DPPH·清除活性,仿生消化300min时,DPPH·清除率为(88.77±1.00)%,显著高于1.0 mg/mL VC(p<0.05);胃肠仿生消化物O2-·和·OH清除活性分别显著低于1.0 mg/mL VC和0.6 mg/mL VC;胃肠仿生消化物具有较好的亚油酸氧化抑制作用,小肠仿生消化物抑制活性最高;仿生消化可增强脂质过氧化的保护效果,仿生消化330 min(质量浓度20 mg/L)时,脂质过氧化抑制效果最好,但显著低于VC对脂质过氧化的抑制作用(p<0.05)。试验结果表明,胃肠仿生消化可不同程度地增强花生肽亚铁的抗氧化活性。