基于Fe_(3)O_(4)@CeO_(2)过氧化物模拟酶的尿酸检测

两步水热法制备的四氧化三铁@二氧化铈(Fe_(3)O_(4)@CeO_(2))具有过氧化物模拟酶活性,可催化H2O2氧化3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)生成蓝色的氧化产物(TMBox)。通过与尿酸酶对尿酸的催化反应进行级联,开发了高灵敏、高特异性的尿酸比色检测新方法。该方法测定尿酸的线性范围为10~100μmol/L,检测限为7.9μmol/L,结果准确可靠。

一种基于过氧化物模拟酶活性快速检测过氧化氢的方法

目的:建立基于G4/hemin过氧化物模拟酶活性快速检测过氧化氢的方法。方法:连续的富含G碱基的DNA片段可堆积的G-四链体结构(G4),氯化血红素能诱导分子内平行/反平行混合型G4-DNA形成分子内平行结构,常温下分子内平行的G4与氯化血红素基于疏水作用可形成过氧化物模拟酶,样品经前处理后,吸取适量样品溶液于具塞比色皿,依次加入适量过氧化物模拟酶、适量底物ABTS溶液,以手摇方式进行催化反应。结果:催化反应3 min后可用于快速定性筛查过氧化氢;催化反应5 min后通过比较标准色阶卡可半定量分析样品中过氧化氢含量,也可通过分光度计进行定量分析,回收率96.0%~102.6%。结论:基于G4/hemin过氧化物模拟酶活性快速检测过氧化氢的方法构建简便,灵敏度高,重现性好等优点,可应用于环境和食品中过氧化氢的定性筛查和(半)定量分析。

一种基于G4/hemin过氧化物模拟酶快速降解罗丹明B的方法

目的:建立一种基于G4/hemin过氧化物模拟酶快速降解罗丹明B的方法。方法:重复的富含G碱基的结构单元的DNA片段能形成堆积的G-四链体结构(G4),分子内平行G4-DNA与氯化血红素室温孵育成强活性的过氧化物模拟酶。吸取罗丹明B溶液于具塞比色皿中,依次加入过氧化物模拟酶、过氧化氢溶液,以手摇方式进行降解反应。结果:加入过氧化氢30 min后,溶液的颜色由桃红色变为酒红色,通过罗丹明B标准曲线计算得至少90%以上的罗丹明B染料已降解。结论:该方法具有成本较低,方法简便,稳定性和重复性良好等优点,可推广至环境中罗丹明B的快速降解。

血红蛋白作为过氧化物模拟酶催化测定过氧化氢

研究了牛血红蛋白 (Hemoglobin ,Hb)作为过氧化物模拟酶催化H2 O2 氧化隐性亮绿 (RecessiveBrilliantGreen ,RBG)显色反应的催化特性及反应条件。该体系在pH 5 .73的条件下形成的酶催化产物在 640nm处有最大吸收。体系测定H2 O2 时表观摩尔吸光系数为 7.1 5× 1 0 3L·mol-1·cm-1,测定H2 O2 检测限为 2 .8× 1 0 -6mol L。方法可用于天然水中H2 O2 的测定。

NaYF_4∶Yb,Er纳米粒子作为过氧化物模拟酶用于尿酸检测

聚丙烯酸修饰的NaYF4∶Yb,Er纳米粒子能够有效地催化H2O2氧化3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)产生显色反应,表现出良好的过氧化物模拟酶催化活性。本研究以TMB为模型底物,研究了催化条件(温度和pH值)对催化活性的影响。同时,结合尿酸在尿酸氧化酶作用下产生H2O2的原理,建立了比色法测定血样中尿酸含量的简便方法。在最优条件下,本方法的检测范围为1.0×10"5～2.0×10"4mol/L,检出限为5.3×10"6mol/L,并对实际样品进行测定,测定结果与临床结果一致。

基于纳米金的过氧化物模拟酶比色检测乐果

以金纳米粒子(gold nanoparticles,Au NPs)作为过氧化物模拟酶建立一种简单、快速、可视化的有机磷农药检测方法。以金晶种生长法制得平均直径为25 nm表面带正电性球形Au NPs,这种Au NPs具有明显的过氧化物模拟酶的活性;优化反应条件实验得出在p H 4.0、温度35℃、四甲基联苯胺浓度1 mmol/L和H_2O_2浓度10 mmol/L时模拟酶具有最强的催化活性;通过比色分析法实现对有机磷农药检测,实验发现乐果在1～80 mmol/L浓度范围与显色抑制率呈良好的线性关系,相关系数R^2为0.985,检出限为1.39 mmol/L,在茶叶样本中的加标回收率在91.36%～102.56%之间;Au NPs在室温条件下贮存1个月能保持良好的催化活性;通过傅里叶变换红外光谱的变化推断乐果是通过酰胺键连接Au NPs;该方法对环境污染物检测具有潜在的应用价值。

血红蛋白作为过氧化物模拟酶催化显色体系的研究与应用

研究了以血红蛋白（Ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ，Ｈｂ）作为过氧化物模拟酶对过氧化氢－４－氨基安替比林（４－Ａｍｉｎｏａｎｔｉｐｙｒｉｎｅ，４－ＡＡＰ）氯取代苯酚衍生物显色体系的催化反应性能，探讨了不同氯取代苯酚类衍生物作为酶催化反应氢供体底物的构效关系及酶催化反应的可能机理。拟定了Ｈｂ催化Ｈ２Ｏ２氧化４－ＡＡＰ－２，３，个三氯苯酚（２，３，４－Ｔｒｉｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｏｌ，ＴＣＰ）显色体系用于Ｈ２Ｏ２的测定方法。该方法测定Ｈ２Ｏ２灵敏度高，表观摩尔吸光系数为 ２．２１×１０４ Ｌ·ｍｏｌ－１·ｃｍ－１。将拟定方法与葡萄糖氧化酶催化反应偶联，用于人血清样品中葡萄糖含量的测定，得到满意的结果。

纳米材料过氧化物模拟酶在比色分析及电化学传感器中的应用

纳米材料模拟酶与天然酶相比,稳定性好,反应活性较高,易于对各类功能分子或蛋白质等进行修饰和标记,能够方便地应用于生物分析检测中。近几年,国内外的研究人员制备出各种各样的新型纳米材料模拟酶用于过氧化氢、葡萄糖、癌症标志物的检测。简要总结了近年来国内外磁性纳米粒子、金属纳米粒子、纳米合金等纳米材料模拟酶在比色分析及电化学传感器中应用的研究进展。

过氧化物模拟酶催化氧化测定过氧化氢

在 pH9．58 NH_4Cl－NH_3·H_2O缓冲体系中,氯化血红素(Hemin)呈现过氧化物酶的催化性能,催化过氧化氢氧化有机染料2,4－二羟基苯基荧光酮(2,3,7－tirhydroxy－9(3,5－dihydroxy)phenylfluorone,DHPF)降解褪色．本文研究了Hemin－DHPF－H_2O_2催化体系的褪色反应条件,拟定了测定H_2O_2高灵敏度的光分析方法,测定H_2O_2的线性范围为 0~2．40 × 10－5mol/L,表观摩尔吸光系数为8．06×10~3L·mol-1·cm-1,检测线为2．48×10~6mol·L-1．根据理论计算和实验现象,探讨了酶催化反应的可能反应机理．

血红蛋白过氧化物模拟酶胶束催化显色体系

在胶束Tween 80介质中 ,研究了以血红蛋白 (hemoglobin ,Hb)作为过氧化物模拟酶、隐性亮绿(recessivebrilliantgreen ,RBG)为氢供体底物、溶解氧为受氢体的酶催化反应特性。在pH 5 .6 4 (NH4 ) 2 HPO4 KH2 PO4 缓冲溶液中 ,利用模拟酶对溶解氧作为受氢体催化RBG氧化生成亮绿 (brilliantgreen ,BG)而拟定了测定Hb含量的新方法。讨论了胶束介质对酶体系催化反应的影响及酶催化反应的可能机理。

过氧化物模拟酶生物传感器——二茂铁衍生物为介体

本文用三种二茂铁衍生物—双羟基乙基二茂铁、单羟基已基二茂铁和羧基二茂铁为介体,在过氧化物模拟酶-meso-四(4-磺基苯)卟啉锰存在下,检测过氧化氢。以双羟基、单羟基已基二茂铁为介体时,获得了良好的结果。

铜、碘掺杂碳点过氧化物模拟酶比色探针检测茶叶中痕量Pb(Ⅱ)

基于Pb(Ⅱ)对铜、碘掺杂碳点模拟酶的活性调节,建立简单、灵敏测定茶叶中Pb(Ⅱ)的比色探针新方法。铜、碘掺杂碳点的动力学分析结果表明:其模拟酶催化参数符合典型的米氏方程模型。Pb(Ⅱ)吸附于铜、碘掺杂碳点表面后,可促进底物3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine,TMB)的氧化。Pb(Ⅱ)在0.27~27.02 mg/L范围内呈良好的线性关系。将该方法用于Pb(Ⅱ)含量的测定,其检出限可达到34.3μg/L,实际茶叶样品的加标回收率在92.41%~101.85%范围内,满足GB 5009.12—2017《食品中铅的测定》中的检测要求。该方法具有简便、稳定、特异性强等特点,其检出限也低于国家规定的食品中Pb(Ⅱ)含量限值。

四磺基锰酞菁作为过氧化物模拟酶在过氧化氢化学发光测定中的应用

以四磺基锰酞菁 (MnTSPc)作为过氧化物模拟酶催化H2 O2 与鲁米诺的化学发光反应 ,建立了测定环境样品中H2 O2 的化学发光分析新方法。该法的线性范围为 4 .0× 10 - 8～ 2 .0× 10 - 5mol L ;检出限为 6 .8×10 - 9mol L ;对 1.0× 10 - 6 mol L的H2 O2 进行连续 10次平行测定 ,相对标准偏差为 2 .4 %。用本法对天然雨水进行了分析测定 ,结果良好。

利用过氧化物模拟酶催化化学发光法检测钾离子

K＋存在时,富含鸟嘌呤（Guanine）的特定序列单链DNA会发生构象变化形成G-四联体结构,从而能够与氯化血红素（hemin）结合生成具有过氧化物酶活性的模拟酶,对鲁米诺-H2O2化学发光体系具有强的催化作用.据此,提出了利用G-四联体-hemin-鲁米诺-H2O2化学发光体系测定K＋的新方法.探讨了DNA浓度,hemin浓度,反应时间及干扰离子对化学发光体系的影响,在优化的实验条件下,对K＋检测的线性范围为2.8×10-5~1.5×10-4mol/L,检出限（3σ,n=11）为9.0×10-6mol/L.本方法用于环境水样中K＋检测,结果良好.

过氧化物模拟酶催化显色体系的增效作用

以β－环糊精或表面活性剂为增效试剂，分别研究了它们对以Ｆｅ－ｍｅｓｏ－（四（４－磺基苯）卟啉）（Ｆｅ－ＴＰＰＳ４）为催化剂，催化过氧化氢氧化４－氨基安替比林（４－ＡＡＰ）与苯酚衍生物显色反应的速度和灵敏度的影响，发现β－ＣＤ和十二烷基苯磺酸钠（ＳＤＢＳ）对该体系具有明显的增效作用．在３×１０－３ｍｏｌ／Ｌβ－ＣＤ存在下，测定Ｈ２Ｏ２的灵敏度比文献报道的提高了１．５６倍．利用ＳＤＢＳ浓度与催化显色反应初速度增加值之间的线性关系，建立了测定微量ＳＤＢＳ的方法．

铁掺杂碳点作为过氧化物模拟酶用于谷胱甘肽检测研究

以芦丁、尿素和三氯化铁为原料,水热法合成了铁掺杂碳点(Fe-CDs),并对制备的Fe-CDs进行了透射电子显微镜、X-射线光电子能谱和傅里叶红外光谱的表征。Fe-CDs表面富含-COOH、-OH和-NH2等含氧官能团,粒径主要分布在0.5~5 nm。Fe-CDs可催化H2O2氧化3,3',5,5'-四甲基联苯胺,并在652 nm处出现较强的吸收峰。而谷胱甘肽(GSH)能还原ox-TMB使体系吸收峰强度降低。基于上述原理,建立了以Fe-CDs为过氧化物模拟酶的GSH测定方法。GSH浓度与体系吸收峰强度的变化值(ΔA)在2~30μmol·L^-1浓度范围内呈良好的线性关系,检出限为0.8μmol·L^-1。将该方法用于测定实际样品谷胱甘肽片的含量,加标回收率在98%~103%,RSD为1.4%~2.2%。结果表明,该方法能够用于实际样品谷胱甘肽片中GSH的含量测定。

基于过氧化物模拟酶的电化学传感器的制备及其在食品检测中的应用

过氧化氢(H2O2)是一种极强的氧化剂,在食品中作为加工助剂主要起漂白、防腐作用,其残留对人体产生很大的危害,引发食品安全问题。因此,食品中的过氧化氢检测具有重要的现实意义。本研究中,笔者以水热合成法制备了3种过氧化物模拟酶,并对其活性进行了考察。将催化活性最好的FeCo纳米复合材料修饰于金电极表面制备了H2O2电化学传感器。电化学测试结果表明:在小于1000μmol/L的浓度下,标准曲线为i=0.0141c+8.042(R^2=0.998);大于1000μmol/L时,标准曲线为i=0.0074c+13.618(R^2=0.997),检测限(3σ/s)为4.94μmol/L。该传感器具有快速稳定的电化学响应和较宽的线性范围,检测限低于食品安全国家标准(GB 5009.226—2016)中的定量限3 mg/kg,即88.2μmol/L,在食品检测中展现了良好的应用潜力。

银纳米团簇的过氧化物模拟酶性质及应用

探究了微生物法合成银纳米团簇的过氧化物模拟酶性质及其应用于血糖浓度检测的可行性。采用催化稳态动力学分析银纳米团簇的过氧化物模拟酶性质,考察pH、温度和银纳米团簇浓度对酶活性的影响,确定其检测H_(2)O_(2)和葡萄糖的线性范围,并应用于小鼠血样中葡萄糖浓度的检测。结果表明,微生物法合成的银纳米团簇具备过氧化物模拟酶性质,在最适条件下,其干重过氧化物模拟酶活性为193.7 U·g^(-1)。其对H_(2)O_(2)和葡萄糖的线性检测范围分别为0.5~4 mmoL·L^(-1)和0.5~3 mmoL·L^(-1)。对小鼠血糖浓度的检测结果与GOPOD氧化酶法试剂盒的结果接近。基于银纳米团簇的过氧化物模拟酶性质,建立了灵敏检测H_(2)O_(2)和葡萄糖浓度的新方法,该方法在血糖检测的实际应用中具有可行性,在分析检测领域中具有良好的发展前景。

氮掺杂中空碳球氧化物模拟酶性能研究

纳米酶由于其独特、高效、稳定的催化性质而在生化反应中备受关注。本研究以碳酸钙微球为绿色模板剂,多巴胺为氮源与碳源,合成了氮掺杂中空碳球(N-HCSs)。以3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用紫外分光光度法探究了N-HCSs的类氧化物酶的催化活性,并研究其催化机理。结果表明,N-HCSs具有氧化物模拟酶催化活性,KOH活化后氮掺杂中空碳球的催化活性提高了3倍;N-HCSs氧化物模拟酶催化反应符合Michaelis-Menten方程,活化前后的米氏常数K_(m)分别为0.105和0.083,对底物具有良好的亲和能力;N-HCSs氧化物模拟酶催化反应中起主要作用的活性氧基团是超氧阴离子(O2^(·–))。本研究为高活性无机非金属类氧化物模拟酶的设计和制备提供了理论依据。