血管钙化时血管血红素加氧酶/一氧化碳系统的变化

目的 :观察血管钙化时血管血红素加氧酶 (HO) -一氧化碳 (CO) -环磷酸鸟苷 (cGMP)系统的改变 ,以探讨血管钙化发病的细胞分子机理。方法 :利用维生素D3 (VitD3 )和尼古丁 (nicotine)复制大鼠血管钙化模型 ,检测HO - 1mRNA的相对含量 ,HO - 1免疫组织化学染色 ,测定主动脉HO - 1活性、碳氧血红蛋白 (HbCO)的生成及血管cGMP含量。结果 :用竞争性定量RT -PCR的方法发现 ,钙化动物血管组织的HO - 1mRNA水平较对照组低34 9% (P <0 0 5 ) ;免疫组织化学方法观察发现钙化血管的HO - 1蛋白表达减少 ,仅在内膜略有表达 ,中膜无明显表达 ;HO - 1活性低 6 0 6 % (P <0 0 1) ;CO生成少 5 3 9% (P <0 0 1) ,cGMP的含量低 77 1% (P <0 0 1)。结论 :钙化血管血红素 -HO -CO

血红素氧化酶在糖尿病及其并发症中的保护作用

糖尿病及其并发症的发生与氧化应激密切相关。血红素氧化酶(heme oxygenase,HO)作为机体重要的防御系统之一可以对抗氧化应激造成的损伤,具有重要的生理作用。HO可以被氧化应激诱导产生,分解血红素生成一氧化碳、胆红素及铁,这些代谢产物具有抗炎、抗氧化损伤和抗凋亡的作用。在高血糖环境中,HO的表达被诱导增高,发挥保护作用,使胰岛细胞、内皮细胞和单核细胞等多种细胞和组织免受氧化损伤。其代谢产物的增加不仅可以维持胰岛细胞的正常功能,延缓糖尿病的进展,而且可以调节血管、神经和肌肉细胞的功能,防止糖尿病并发症的发生。

硫化氢供体对实验性高肺血流性肺动脉高压及内源性一氧化碳／血红素氧合酶体系的影响

目的:探讨硫化氢供体——硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaHS)对大鼠高肺血流性肺动脉高压及内源性一氧化碳(carbon monoxide,CO)／血红素氧合酶(heme oxygenase,HO)体系的影响。方法:将32只雄性SD大鼠随机分为分流组(n=8)、分流+NaHS组(n=8)、假手术组(n=8)和假手术+NaHS组(n=8)。对分流组和分流+ NaHS组大鼠行腹主动脉-下腔静脉穿刺建立高肺血流动物模型。分流11周后,测定肺动脉收缩压(systolic pul- monary artery pressure,SPAP)和肺组织CO含量;光镜下计算肺血管中肌型动脉(muscularized artery,MA)、部分肌型动脉(partially muscularized artery,PMA)和非肌型动脉(non-muscularized artery,NMA)百分比,以及肌型动脉的相对中膜厚度(relative medial thickness,RMT)和相对中膜面积(relative medial areas,RMA);电镜下观察其超微结构变化;应用蛋白质免疫印迹技术(Western blot)检测大鼠肺组织HO-1含量。结果:术后11周,分流组与假手术组比较,大鼠SPAP增高48．6％;肺MA和PMA百分比分别升高74．2％和90．9％,NMA百分比降低32．2％,在中型 MA和小型MA中RMT分别升高83．6％和86．9％,RMA分别升高74．4％和39．9％;大鼠肺腺泡水平肌型动脉内皮细胞变性明显,内外弹力层不规则,平滑肌细胞体积增大,呈合成表型;大鼠肺组织CO和HO-1含量变化不明显。而分流+NaHS组与分流组比较,大鼠SPAP降低19．8％;肺MA和PMA百分比分别降低14．4％和12．2％, NMA百分比升高13．9％,在中型MA和小型MA中RMT分别升高16．2％和14．3％,RMA分别升高26．9％和 14．3％;大鼠肺腺泡水平肌型动脉内皮细胞变性减轻;内弹力层比较规则;平滑肌细胞呈收缩表型;大鼠肺组织CO 含量升高25．5％,HO-1蛋白表达升高114．3％。结论:NaHS可以缓解高肺血流性肺动脉高压形成和肺血管结构重建,其作用机制可能与调节内源性CO／HO-1体系变化有关。

血红素氧合酶-内源性一氧化碳系统对脂多糖性休克大鼠心脏的影响

目的:探讨血红素氧合酶-内源性一氧化碳系统是否对脂多糖性休克大鼠的心脏有保护作用。方法:40只健康清洁级Sprague-Dawley大鼠随机分为4组:①对照(C)组,n=10;②脂多糖性休克(S)组,n=10,10mg/kgE.coli脂多糖(LPS)稀释至0.5mL静脉注射,待其MAP下降至给予LPS前75%时,腹腔内注射1mL50mmol/L碳酸氢钠溶液;③LPS性休克+ZnPP-IX(LZ)组,n=10,休克模型的复制同②,成功后,将10μmol/kgZnPP-IX用50mmol/L碳酸氢钠溶液稀释至1mL腹腔内注射;④ZnPP-IX组(Z)组,n=10,0.5mL0.9%氯化钠溶液静脉内注射,2h后将10μmol/kgZnPP-IX稀释至1mL腹腔内注射。测定各组腹腔内注射碳酸氢钠溶液或ZnPP-IX前及后30min、60min、90min时的LVSP及±dp/dtmax;C组和Z组在静脉内注射氯化钠溶液后6h,S组和LZ组则在静脉内注射LPS6h,检测血中LDH和CK的含量,COHb的浓度及左心室心肌组织内HO-1mRNA、HO-2mRNA及HO-1、HO-2蛋白水平。结果:①LZ组大鼠的LVSP和±dp/dtmax均分别低于S组(P<0.05),其血浆中LDH、CK的含量均分别高于S组(P<0.05);S组大鼠血中COHb水平明显高于LZ组(P<0.05)。②LZ组大鼠其左心室心肌组织内HO-1mRNA表达水平及HO-1蛋白水平明显低于S组(P<0.05);而各组间左心室心肌组织内HO-2mRNA表达水平及HO-2蛋白水平均无显著差异(P>0.05)。结论:脂多糖性休克大鼠其心肌组织内HO-1的上调及随后的CO增加可能对心脏发挥着保护作用。

乌司它丁对油酸致急性肺损伤大鼠肺组织血红素氧化酶-1的影响

目的:探讨乌司他丁对油酸致急性肺损伤大鼠肺组织血红素氧化酶-1表达的影响。方法30只成年SD大鼠,随机分为3组(n=10)。正常组(A组)经大鼠尾静脉注射0.2mL/kg生理盐水;急性肺损伤组(B组)、乌司他丁组(C组)经大鼠尾静脉注射油酸0.2mL/kg制成急性肺损伤模型,随后立即给予A组、B组腹腔注射生理盐水10mL/kg,C组100ku/kg的乌司他丁腹腔注射。测取动物4h时间点呼吸频率和左心室动脉血氧分压,并于4h后取右下肺组织行HE染色和HO-1免疫组织化学检查,观察光镜下病理改变以及血红素氧化酶-1的表达。结果:乌司他丁能显著改善油酸所致急性肺损伤所致的呼吸窘迫;肺组织血红素氧化酶-1在对照组仅有少量表达,急性肺损伤组表达增多,乌司他丁干预组表达明显增强。结论:乌司他丁可通过增加肺组织中血红素氧化酶-1的表达而发挥保护作用。

血红素氧化酶-1在离体大鼠心肌缺血预处理中的作用

目的 :观察缺血预处理对离体大鼠心肌缺血再灌注后心功能、乳酸脱氢酶 (LDH)活性和丙二醛(MDA)含量及血红素氧化酶 - 1活性的影响。方法 :应用Langendorff离体大鼠等容收缩灌流模型行离体大鼠心脏灌流。缺血预处理方案为停灌 5min后再灌 5min反复 3次 ,持续缺血再灌方案为停灌 4 0min后再灌 2 0min ,监测正常对照组、缺血再灌组 (IR)和缺血预处理组 (IPC)心功能指标的同时 ,测定冠脉流出液LDH活性、心肌MDA含量和HO- 1活性变化。结果 :IPC组再灌 2 0min时的心功能恢复率显著高于IR组 (P <0 0 1) ,心肌血红素氧化酶 - 1活性也明显高于IR组 (P <0 0 5 ) ,而LDH活性及MDA含量显著少于IR组 (均为P <0 0 1)。结论 :血红素氧化酶 - 1活性增高可能与缺血预处理对大鼠缺血再灌心肌的保护作用有关。

低氧预处理对心脏成纤维细胞血红素氧化酶1基因表达的影响

目的:探讨离体培养的心脏成纤维细胞低氧预处理后血红素氧化酶1(HO-1)mRNA的表达及其经时变化。方法:选用新生W istar大鼠心脏进行成纤维细胞培养,给予低氧预处理(HPC)及低氧/复氧处理(H/R)。测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)浓度。自处理后心脏成纤维细胞提取总RNA并进行逆转录扩增合成cDNA。应用即时定量PCR对HO-1mRNA进行定量分析。结果:HPC后HPC组LDH浓度未见显著升高;经过H/R后,H/R组LDH浓度显著高于HPC组(P<0.01)。HPC后HO-1mRNA表达迅速增加,30 m in时达到高峰,此后逐渐下降,24 h基本恢复到基线水平。结论:新生大鼠心脏成纤维细胞低氧预处理可减少低氧/复氧对细胞的损伤,低氧预处理后HO-1mRNA被显著诱导,并在12 h内维持较高水平,24 h后基本恢复至基线水平。

诱导血红素氧化酶-1表达的化合物研究进展

血红素氧化酶-1(HO-1)是一种细胞应激性蛋白,它的表达在许多病理和生理过程中起着重要的调节作用。虽然它在机体多数组织中表达水平低或不表达,但大量的临床和药理实验证明很多化合物可通过调节不同的转录因子和信号传导途径而诱导HO-1表达,从而发挥一定的疗效。本文总结了近十年来该领域国内外研究的几类化合物,并对其诱导机制进行简要分析。

老年冠心病患者血清缺氧诱导因子-1α和血红素氧化酶-1水平的研究

目的:探讨老年冠心病患者血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血红素氧化酶-1(HO-1)水平的变化和意义。方法:选择经冠状动脉造影确诊的老年(年龄>60岁)冠心病患者134例,其中急性心肌梗死患者32例(AMI组)、不稳定型心绞痛患者68例(UAP组)、稳定型心绞痛患者34例(SAP组);选择冠状动脉造影示冠状动脉正常的老年患者42例作为对照组。采用酶联免疫吸附法测定所有入选对象的血清HIF-1α、HO-1的水平。采用相关分析HIF-1α和HO-1与老年冠心病患者的相关性。结果:AMI和UAP组患者血清HIF-1α、HO-1明显高于SAP组和对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。AMI组血清HIF-1α、HO-1水平高于UAP组,差异有统计学意义(P<0.05)。SAP组血清HIF-1α、HO-1水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。对老年冠心病患者血清HIF-1α、HO-1水平做相关性分析显示两者呈正相关(r=0.48,P<0.05)。结论:老年冠心病患者随着心肌缺血严重程度的增加体内HIF-1α及HO-1表达水平增高,HIF-1α及HO-1在老年冠心病的发病中有重要意义。

胆红素及血红素氧化酶与缺血性卒中的关系

胆红素作为血红素的代谢产物，长期以来一直被用作肝胆疾病的诊断指标。但Schwertner等首次提出低浓度的血清胆红素是冠状动脉硬化性心肌病的独立危险因素。

血红素氧化酶-1对高血糖和高血脂诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的:探讨血红素氧化酶-1(HO-1)在高血糖和高血脂诱导内皮细胞损伤中的保护作用。方法:体外培养人的脐静脉内皮细胞,在D-葡萄糖25mmol/L和软脂酸250μmol/L的刺激下,分别用氯化血红素和锌原卟啉-9诱导和阻断HO-1的表达,应用逆转录-聚合酶链式反应和免疫细胞化学法检测HO-1mRNA和蛋白的表达,酶联免疫法检测培养上清液中碳氧血红蛋白,并检测内皮细胞的存活率、乳酸脱氢酶释放率和脂质过氧化产物丙二醛的含量。结果:D-葡萄糖25mmol/L和软脂酸250μmol/L条件下,氯化血红素可以促使HO-1的表达,培养上清液中碳氧血红蛋白的含量显著增加(P<0.05),并且显著地提高内皮细胞的存活率(P<0.05),乳酸脱氢酶的释放率和细胞内丙二醛的含量显著减少(P<0.05)。而应用锌原卟啉-9后,HO-1的保护性作用消失。结论:在高血糖和高血脂条件下HO-1可以明显减轻血管内皮细胞的损伤,起到明显的保护性作用。

血红素氧合酶-1/一氧化碳系统的变化对兔动脉粥样硬化进程的影响

目的研究食饵性动脉粥样硬化(AS)形成中,主动脉壁内血红素氧合酶-1(HO-1)活性及一氧化碳(CO)生成的变化及对AS进程的影响,以探讨HO-1/CO系统在AS进程中的作用。方法32只新西兰大白兔,随机均分为4组。对照组:喂饲普通饲料;胆固醇组:喂饲含1.5%胆固醇饲料;卟啉锌组及血红素组:在予以高胆固醇饮食的同时,分别经腹腔注射氯化血红素(15mg·kg-1·d-1)或锌原卟啉-9(45μmol·kg-1·d-1),共12周。采血测定血脂、血清总胆红素(TBil)水平;取主动脉,测定CO生成量及HO-1活性,采用油红O染色及图像分析软件检测主动脉斑块面积。结果与对照组比较,胆固醇组主动脉CO生成量及HO-1活性显著增高(P均<0·01),实验结束时主动脉斑块面积达54·00%±4·16%;锌原卟啉-9显著降低了主动脉CO生成量及HO-1活性(P均<0·01),主动脉斑块面积达61·13%±3·50%;与胆固醇组比较,氯化血红素显著增高了血清TBil水平、主动脉CO生成量及HO-1活性(P均<0·01),主动脉斑块面积仅17·88%±3·01%(P<0·05)。结论HO-1/CO系统具有延缓AS的作用,HO-1活性增高可能是HO-1/CO系统发挥抗AS作用的基础。

诱导血红素氧化酶表达对乙醇所致人原代肝细胞氧化损伤的保护作用

目的 探讨乙醇暴露与诱导血红素氧化酶(HO 1)表达之间的关系。方法 经体外灌流、分离培养人原代肝细胞 ,观察 10 0mmol·L- 1乙醇暴露 9h后谷胱甘肽 (GSH) ,谷草转氨酶 (GOT) ,乳酸脱氢酶 (LDH)和丙二醛 (MDA)的变化以反应人原代肝细胞的氧化损伤 ,用RT PCR及Western印迹方法检测乙醇对人原代肝细胞HO 1mRNA及蛋白表达的影响。结果 10 0mmol·L- 1乙醇暴露 9h后可导致人原代肝细胞明显的氧化损伤 ,肝细胞中的GSH明显降低 ,而MDA明显升高 ,GOT和LDH ,此外 ,急性乙醇暴露下 ,HO 1表达开始应激升高 ,随后慢慢降低 ,肝细胞经HO 1诱导剂预处理后再与乙醇作用 ,能减轻乙醇对肝细胞的氧化损伤作用 ,并且这种作用可被HO 1抑制剂所抵消。结论 诱导HO 1对乙醇所致人原代肝细胞的氧化损伤有保护作用。

内源性血红素氧合酶-1/一氧化碳系统对球囊损伤后再狭窄的影响

目的:探讨血红素氧合酶-1(HO-1)/一氧化碳(CO)系统对球囊损伤后再狭窄的影响及其可能的作用机制。方法:家兔随机分为5组(各组10只):对照组、胆固醇组、血红素组、卟啉锌组和假手术组。对照组予普通饮食,其余4组喂饲含1.5%胆固醇饲料,血红素组和卟啉锌组同时分别予氯化血红素或锌原卟啉-9腹腔内注射,2周后实验组行颈总动脉球囊损伤术,术后继续原喂养给药8周。结果:与对照组比较,胆固醇组颈动脉一氧化氮(NO)生成量、结构型一氧化氮合酶(cNOS)活性显著降低,而CO生成量、HO-1 mRNA和蛋白表达显著增加,内膜面积和内膜/中膜面积比值增大,均P<0.01。与胆固醇组比较,氯化血红素干预显著增高HO-1 mRNA和蛋白表达,增加CO生成量,同时显著降低ET-1 mRNA和蛋白表达,减小内膜面积和内膜/中膜面积比值,均P<0.01;锌原卟啉-9显著降低HO-1 mRNA和蛋白表达,减少CO生成量,而ET-1 mRNA和蛋白表达显著增高,内膜面积和内膜/中膜面积比值增大,均P<0.01。结论:HO-1/CO系统通过代偿和调节NOS/NO系统以及降低ET-1表达,改善内皮功能和抑制内膜增殖,从而有效阻止再狭窄的发生发展。

阿霉素诱导亚铁血红素氧化酶-1在大鼠肝、脾和肾脏组织的表达及其对肝功能的影响

目的 :观察阿霉素诱导亚铁血红素氧化酶 - 1 (HO- 1 )在大鼠肝、脾和肾脏组织的表达及对肝功能的影响。方法 :雄性 Wistar大鼠随机分为空白对照组、小剂量阿霉素组 (1 mg· kg- 1 )和大剂量阿霉素组 (1 0 mg· kg- 1 ) ,分别于给药后 6、 1 2、 1 8、 2 4和 4 8h切取阿霉素组与对照组部分肝脏用蛋白电泳法检测 HO-1表达 ,切取注药后 4 8h阿霉素组和对照组部分肝、脾和肾行 HO- 1免疫组化染色 ,同时检测三组大鼠肝功能、血清 ET- 1和 TNF- α。结果 :蛋白电泳检测显示 HO- 1蛋白在正常肝脏内的表达阴性 ;给药后 6 h两组均可检测出HO- 1的表达 ,2 4 h达到高峰 ,4 8h HO- 1表达已明显减弱。免疫组化染色显示 ,注射阿霉素 4 8h,肝、脾和肾仍可见大量 HO- 1染色阳性细胞 ;对照组肝脏无染色阳性细胞 ,脾肾可见少量染色阳性细胞。肝功能指标、血清 TNF-α和 ET- 1对照组与小剂量阿霉素组差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ,大剂量阿霉素组上述指标明显高于对照组和小剂量阿霉素组 (P<0 .0 5 )。结论 :阿霉素可诱导肝脏、脾脏和肾脏 HO- 1表达 ,小剂量阿霉素对大鼠肝脏未造成明显损害。

实验性肺血栓栓塞症血红素氧化酶的变化

目的探讨肺血栓栓塞症（PTE）时肺动脉血红素氧化酶（HO）的表达变化，及其对肺动脉压力的影响。方法23只健康成年雄性杂种家犬随机分为PTE3h组（A组）、PTE8h组（B组）、PTE24h组（C组）和对照组（D组）。经右颈静脉置管注入自体血栓建立犬PTE模型，股静脉置入Swan—Ganz导管监测肺血流动力学变化。实验终点处死实验犬取肺动脉，用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫组化方法检测HO-1的表达水平。结果各实验组犬肺动脉平均压（PAMP）、肺动脉收缩压（PASP）和肺动脉舒张压（PADP）在栓塞成功后即刻均明显升高，与栓塞前比较差异有统计学意义（P均〈0．05）；栓塞后1h开始均明显下降（P均〈0．05），并呈下降趋势，约4～5h后趋于稳定，栓塞8h点与栓塞前相比仍有升高，但差异无统计学意义。RT-PCR和免疫组化检测结果显示，在D组肺动脉未见HO-1表达；栓塞后各实验组可见HO-1表达，且随着栓塞时间的延长，HO-1表达逐渐增多，以栓塞24h表达量最明显（P均〈0．05）。结论PTE后HO-1表达增加，同时升高的肺动脉压力下降，提示HO-1在PTE时与肺血管舒张相关。

针刺对脑出血大鼠血红素氧化酶1及炎性因子表达的影响

目的:从行为学、组织学及分子生物学层次分别探讨针刺百会透曲鬓穴对急性脑出血大鼠血红素氧化酶1(HO-1)及炎性因子表达的影响,为临床针刺治疗脑出血提供实验基础。方法:将108只Wistar雄性大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组和针刺组,每组按1、3、7 d时间点再分为3个亚组,每个亚组各12只。自体血注入法建立脑出血大鼠模型,通过Berderson评分法确定动物成功模型,评分1~3分的大鼠纳入实验。假手术组接受类似模型组的各项手术操作,但不进行注血制作;模型组接受脑出血模型制作,但不进行任何干预;针刺组制作脑出血模型,于造模后12 h开始治疗。采用针刺百会透曲鬓穴对脑出血大鼠治疗,进针深度20 mm,以100 r/min小幅度捻转。每间隔5 min捻针1次,每次持续捻转5 min,留针30 min,每日1次。采用改良的神经功能缺损评分(mNSS)对各组大鼠神经功能进行评估,通过HE染色观察各组大鼠脑组织病理形态学变化,并采用Western blot法检测各组大鼠血肿组织HO-1、核转录因子-κB(NF-κB)、白介素1β(IL-1β)、转化生长因子-β(TGF-β)蛋白表达。结果:(1)假手术组各时间点无明显神经功能缺损表现;模型组大鼠于第1天时已表现出神经功能缺损症状,第3天及第7天时仍有明显神经缺损表现;与模型组相比,针刺组在各时间点大鼠神经功能评分均明显降低(P<0.01)。(2)假手术组大鼠基底节区可见正常的神经细胞及胶质细胞;模型组大鼠在造模第1天后可见出血灶,第3天出血灶增大,脑组织病理结构破坏明显,第7天血肿范围减少;与模型组相比,针刺组在各时间点脑组织病理结构破坏程度降低。(3)假手术组可见HO-1蛋白少量表达;模型组各时间点HO-1蛋白表达增多;与模型组相比,针刺组于第3天、第7天HO-1蛋白表达明显升高(P<0.05)。(4)假手术组均可见NF-κB、IL-1β、TGF-β蛋白少量表达;模型组各时间点NF-κB、IL-1β、TGF-β蛋白表达明显增高,第3天时相对表达最多;与模型组相比,针刺组在第1天、第3天及第7天NF-κB、IL-1β、TGF-β蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论:针刺能降低脑出血大鼠神经功能缺损评分,可能通过促进HO-1蛋白表达,抑制NF-κB、IL-1β、TGF-β蛋白表达,减轻病理炎性损伤,发挥脑保护作用。

冠心病患者缺氧诱导因子-1α与血红素氧化酶-1的相关性研究

目的探讨冠心病患者外周血单个核细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与血红素氧化酶-1(HO-1)的相关性。方法 选择经冠脉造影确诊的冠心病患者为病例组,按照临床表现分为急性心肌梗死组(AMI组)、不稳定型心绞痛组(UAP组)和稳定型心绞痛组(SAP组);选择冠脉造影未发现冠脉病变的患者为对照组。利用Western blot检测入选对象外周血单个核细胞HIF-1α和HO-1的蛋白表达水平,相关分析方法分析两者表达水平的相关性。结果与对照组相比,AMI和UAP组HO-1和HIF-1α蛋白表达均明显增高,SAP组患者增高不明显。总体水平上,HIF-1α与HO-1呈正相关(r=0.76);在AMI、UAP、SAP组HIF-1α与HO-1表达水平也呈正相关。结论冠心病发生、发展过程中HIF-1α/HO-1通路被激活,HIF-1α可能通过诱导HO-1蛋白表达参与心肌保护作用。

急性乙醇暴露对人原代肝细胞血红素氧化酶的影响

目的 研究急性乙醇暴露对人原代肝细胞血红素氧化酶活力及蛋白水平的影响。方法 经体外灌流、分离培养人原代肝细胞 ,观察乙醇对人原代肝细胞上清液中天冬氨酸氨基转移酶 (AST)的释放及谷胱甘肽 (GSH)含量的变化 ,用westernblot方法检测乙醇对人原代肝细胞血红素氧化酶活力及蛋白水平的影响。结果 急性乙醇暴露导致人原代肝细胞上清液中释放的AST增加 ,并呈明显的剂量效应和时间效应关系 ;此外 ,在 10 0mmol L乙醇 2 4h暴露下 ,肝细胞中的GSH明显降低 ,而HO 1酶活力在 0 5～ 12h之间明显升高 ,随后开始降低 ,且HO 1蛋白水平变化趋势与此一致。结论 HO

血红素氧化酶1过表达对急性损伤肾脏中骨髓间充质干细胞的影响

目的:构建可高效表达血红素氧化酶1(HO-1)的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),观察HO-1过表达对移植BMSCs在缺血再灌注(I/R)诱导的急性肾损伤(AKI)肾脏中存活的影响,并探讨其机制。方法:基因转染技术获得HO-1-BMSCs和e GFP-BMSCs(空载体对照)。构建I/R诱导的AKI大鼠模型(I/R-AKI)并分别行BMSCs、e GFP-BMSCs和HO-1-BMSCs移植,移植3d后处死,检测大鼠肾功能及移植细胞在肾组织的分布。制作AKI的肾脏匀浆上清(AKI-KHS),体外干预培养的BMSCs、e GFP-BMSCs和HO-1-BMSCs,检测培养BMSCs的细胞凋亡、HO-1蛋白水平、氧化应激相关酶的活力及核因子κB(NF-κB)p65水平。结果:HO-1-BMSCs移植后,AKI大鼠肾脏中DAPI+细胞(BMSCs)比例最高,肾功能改善显著。经AKI-KHS干预后,培养BMSCs的TUNEL+细胞比例增加,HO-1过表达可显著逆转这一现象。AKI-KHS可诱导BMSCs细胞的HO-1表达增加,以HO-1-BMSCs/AKIKHS组升高最为显著,伴随着该组细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)水平显著升高,丙二醛(MDA)和黄嘌呤氧化酶(XOD)活力降低,细胞内NF-κB p65核移位细胞比例也显著降低。结论:HO-1过表达可增强BMSCs在AKI肾脏微环境中的存活,HO-1的抗氧化作用及其下游NF-κB活化抑制为其可能的机制,期待可以解决移植干细胞在损伤靶器官中存活率低下的问题。