稀土氧化谷胱甘肽配合物的XPS研究

谷胱甘肽是人体内重要低肽,具有许多生物功能。正常状态下,体内主要以还原型(GSH,-O_2CCH(NH_3^(+))CH_2CH_2C∶ONHCH(CH_2SH)C∶ONHCH_2CO_2H)存在,氧化型(GSSG、(-O_2CCH(NH_3^(+))CH_2CH_2C∶ONHCH(CH_2S-)C∶ONHCH_2CO_2H)_2)只占还原型浓度的～1%,并由谷胱甘肽氧化还原酶维持二者的平衡。近年来发现。

谷胱甘肽过氧化物酶4在消化系统恶性肿瘤中的研究进展

消化系统恶性肿瘤的发病率居全球肿瘤的首位,其发病机制涉及多个基因和信号通路的改变。目前消化系统恶性肿瘤的治疗方式多样,但患者的病死率仍居高不下,亟须寻找更加有效的治疗手段。铁死亡是近年肿瘤研究的热点方向,谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)是铁死亡的关键调控因子,其失活可导致脂质过氧化积累,进而诱导细胞铁死亡。消化系统恶性肿瘤组织中GPX4表达水平显著升高,参与和调控肿瘤的发生发展。因此,深入研究GPX4在消化系统肿瘤中的作用机制,可以为疾病的治疗提供理论支持。

谷胱甘肽过氧化酶4在胃肠道肿瘤中的作用与治疗

胃肠道肿瘤发病率逐年上升,其病死率在我国癌症中位居前列,严重危害国民健康。只有提前预防加有效治疗双管齐下,才能更好地降低癌症负担。铁死亡是一种铁依赖的,区别于细胞凋亡、坏死、自噬的细胞程序性死亡方式。近几年,肿瘤耐药性的增加引起了学者对诱导癌细胞铁死亡的兴趣,因为铁死亡固有的生理功能之一就是肿瘤抑制。铁死亡受到氧化系统和抗氧化系统的平衡调节,谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)是抗氧化系统的核心因子之一,在多种恶性肿瘤中异常表达,与肿瘤的不良生物学行为相关。在胃肠道肿瘤中,GPX4表达异常,并参与肿瘤的发生发展、治疗和耐药。作为胃肠道肿瘤中许多分子的作用靶点(例如小分子化合物、miRNA和纳米反应器等),GPX4在多个水平上受到调节,并参与调控多种复杂的信号通路。以GPX4为靶点的策略有望成为治疗胃肠道肿瘤的新途径。本文就GPX4在胃肠道肿瘤中的国内外研究进展进行综述,阐明其分子调控机制和目前的药物研究进展,为胃肠道肿瘤的研究及防治提供新的思路。

血清谷胱甘肽过氧化物酶、脂质过氧化物水平与妊娠期糖尿病及其糖脂代谢异常、胰岛素抵抗和母婴结局的关系

目的探讨血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、脂质过氧化物(Lpo)水平与妊娠期糖尿病(GDM)及其糖脂代谢异常、胰岛素抵抗和母婴结局的关系。方法选择2020年6月至2022年6月重庆大学附属黔江医院收治的120例GDM病人(GDM组)和同期收治的120例糖耐量正常的孕产妇(对照组)。检测血清GSH-Px、Lpo水平以及糖脂代谢、胰岛素抵抗指标,追踪母婴结局。Pearson分析GSH-Px、Lpo与糖脂代谢、胰岛素抵抗之间相关性,多因素logistic回归分析GDM母婴结局不良的因素。结果GDM组血清GSH-Px水平[(21.05±3.46)U/g比(30.42±5.09)U/g]低于对照组(P<0.05),Lpo水平[(15.95±3.17)μmol/L比(10.61±2.33)μmol/L]高于对照组(P<0.05)。GDM病人血清GSH-Px水平与总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)呈负相关(P<0.05),与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈正相关(P<0.05);Lpo水平与TC、TG、LDL-C、FPG、FINS、HOMA-IR呈正相关(P<0.05),与HDL-C呈负相关(P<0.05)。120例GDM病人中45例发生母婴结局不良,母婴结局不良组血清GSH-Px水平低于母婴结局良好组(P<0.05),Lpo水平高于母婴结局良好组(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示年龄、HOMA-IR、Lpo是GDM病人母婴结局不良的危险因素(P<0.05),GSH-Px是GDM病人母婴结局不良的保护因素(P<0.05)。结论GDM病人血清GSH-Px水平降低,Lpo水平增高,且与糖脂代谢紊乱、胰岛素抵抗以及母婴结局不良有关,检测血清GSH-Px、Lpo水平有助于评估GDM胰岛素抵抗状态和母婴结局风险。

谷胱甘肽过氧化酶4及铁蛋白重链1在甲状腺乳头状癌组织中的表达

目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)组织中谷胱甘肽过氧化酶4(GPX-4)和铁蛋白重链1(FTH-1)的表达情况,分析二者在PTC发生发展中的生物学意义。方法采集2019年6月至2023年8月合肥市第三人民医院40例PTC病人的手术切除标本,分别为癌组织和癌旁组织。应用免疫组织化学染色检测PTC组织和癌旁组织中GPX-4和FTH-1的表达情况,然后利用SPSS 22.0软件进行统计分析。结果GPX-4在PTC组织与癌旁组织中的阳性表达率分别为80.00%(32/40)和15.00%(6/40),GPX-4在癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(χ^(2)=18.38,P<0.001)。同样,FTH-1在PTC组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为72.50%(29/40)和10.00%(4/40),FTH-1在癌组织中的阳性表达率也显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(χ^(2)=18.58,P<0.001)。GPX-4和FTH-1在PTC组织中的表达与PTC的TNM分期及淋巴结转移具有相关性(P<0.05)。结论GPX-4和FTH-1在PTC组织中均呈阳性高表达,与PTC的TNM分期和淋巴结转移有关,提示其与PTC的发生发展密切相关,二者检测可作为评估PTC临床预后的辅助指标,也为PTC的分子靶向治疗提供新的方向。

脑缺血再灌注后补体C3高迁移率族蛋白B1及谷胱甘肽过氧化物酶4表达变化

目的探讨大鼠脑缺血再灌注损伤后不同时间点脑组织补体C3、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达的变化。方法选择SPF级健康雄性SD大鼠72只,按数字随机法分为假手术组36只和模型组36只,线栓法制备大脑中动脉闭塞模型,根据再灌注时间分为3、6、24 h及3 d共4个时间点,每个时间点9只。参照Zea Longa评分法行神经功能学评分。每组行R2StarMap成像、弥散加权成像(DWI)、T_1加权成像、T_2加权成像扫描。测量DWI异常信号体积,检测脑梗死体积。R2StarMap原始图经后处理生成R2^(*)伪彩图,测量双侧大脑中动脉供血区R2^(*)值,检测脑铁沉积含量。采用蛋白免疫印迹法检测C3、HMGB1、GPX4表达。结果假手术组大鼠无神经功能损伤,模型组大鼠3、6、24 h及3 d神经功能评分较假手术组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组大鼠3、6、24 h及3 d右侧脑梗死体积较假手术组明显增大,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组3、6、24 h及3 d右侧大脑中动脉供血区R2^(*)值明显高于左侧(P<0.05,P<0.01)。模型组3、6、24 h及3 d右侧大脑中动脉供血区R2^(*)值明显高于假手术组右侧(P<0.05,P<0.01)。模型组3、6、24 h及3 d的R2^(*)比值明显高于假手术组(1.82±0.82 vs 1.12±0.31,P<0.05;1.31±0.26 vs 1.04±0.14,P<0.05;1.94±0.74 vs 1.06±0.10,P<0.01;1.99±0.39 vs 1.02±0.11,P<0.01)。与假手术组比较,模型组3、6、24 h及3 d补体C3和HMGB1表达明显升高,GPX4表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能对脑组织中补体C3、HMGB1、GPX4表达有显著影响。

冬季低温寡照胁迫下叶面喷施氧化型谷胱甘肽对日光温室草莓生长的影响

为减轻入冬后持续低温寡照天气对日光温室草莓生长的影响,以红颜草莓为试验材料,研究在入冬后低温寡照阶段,在常规施肥的基础上叶面喷施氧化型谷胱甘肽(300 mg/L)对草莓生长的影响。结果表明:在草莓定植后30 d开始喷施氧化型谷胱甘肽,每隔15 d喷施1次,共喷施7次,可以较对照显著提高草莓植株叶面积30.16%,显著提高SPAD值10.47%;在喷施氧化型谷胱甘肽第3天光合速率显著提高24.11%,喷施后第15天光合速率显著提高25.60%,第21天光合速率显著提高30.09%,但对草莓现蕾率和开花率没有显著影响;可通过显著提升草莓果个数实现草莓667 m^(2)产量显著提升23.83%;对草莓可溶性糖含量提升效果显著,可显著提升草莓的糖酸比21.20%。因此,叶面喷施氧化型谷胱甘肽方案是冬季低温寡照期实现草莓高产、优质、安全、高效生产的有效技术途径。

恶性多形性腺瘤中谷胱甘肽过氧化物酶3甲基化特征及临床意义

目的:观察恶性多形性腺瘤(malignant in pleomorphic adeoma,MPA)组织中谷胱甘肽过氧化物酶3(glutathione peroxidase 3,GPX3)蛋白、基因甲基化水平及临床意义。方法:选取2021年1月—2023年1月在新疆医科大学第二附属医院接受手术治疗的55例唾液腺多形性腺瘤(salivary gland pleomorphic adenoma,SPA)、24例MPA患者肿瘤组织及55例上述患者的正常腺组织。免疫组织化学法检测组织中GPX3蛋白的表达,甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)法检测组织中GPX3甲基化程度,分析其与临床病理特征的关系。选择人恶性多形性腺瘤细胞系SM-AP1,转染GPX3过表达载体、空载体,并将其分为过表达空载体组(Vector组)、GXP3表达组(OE-GPX3组),实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测GPX3 mRNA及蛋白表达量;CCK8法检测细胞增殖能力;transwell小室检测细胞侵袭能力。结果:GPX3蛋白在正常腺体组织中的阳性表达率(90.9%,50/55)高于其在SPA(56.4%,31/55)和MPA(29.2%,7/24)组织中;GPX3蛋白在SPA组织中的阳性表达率高于其在MPA组织中,且差异具有统计学意义(P<0.001)。正常腺体组织中,GPX3的甲基化比例(7.3%,4/55)低于SPA组织(34.5%,19/55)和MPA组织(66.7%,16/24)中,SPA组织中的GPX3甲基化比例低于MPA组织中,差异具有统计学意义(P<0.001)。GPX3甲基化水平与MPA患者TNM分期、分化程度、恶性成分比例有关(P<0.05)。GPX3蛋白阳性表达率与TNM分期、恶性成分比例有关(P<0.05)。与Vector组比较,OE-GPX3组细胞GPX3 mRNA、蛋白表达量显著上升,48 h及72 h的吸光度值、侵袭细胞数量降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:恶性多形性腺瘤GPX3基因启动子甲基化程度高,与TNM分期、分化程度、恶性成分比例呈负相关,有潜力成为诊断恶性多形性腺瘤的预警分子指标和临床治疗中的基因调控靶点。

谷胱甘肽过氧化物酶4/谷胱甘肽铁死亡防御系统在三阴性乳腺癌治疗中的作用研究进展

铁死亡是一种以脂质过氧化物为核心的细胞死亡方式,细胞可依赖谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)/谷胱甘肽(GSH)抗氧化系统降低铁死亡敏感性。三阴性乳腺癌(TNBC)细胞较正常细胞更依赖胞内抗氧化机制,以GPX4/GSH系统为基础的铁死亡诱导表现出显著的治疗TNBC前景。本文综述近年来以GPX4/GSH为背景的铁死亡治疗TNBC研究成果,以期为TNBC的临床治疗提供参考。

氧化型谷胱甘肽有机水溶肥对冬马铃薯生长及产量的影响

为明确现蕾期叶面喷施氧化型谷胱甘肽有机水溶肥对冬马铃薯生长及产量的影响,设3个处理,即在冬马铃薯现蕾期分别叶面喷施含15%氧化型谷胱甘肽有机水溶肥、100%氧化型谷胱甘肽有机水溶肥和清水,开展了田间试验,观测记录马铃薯生育期、农艺性状、经济性状、产量等指标,分析各处理对冬马铃薯各指标的影响。结果表明,喷施氧化型谷胱甘肽有机水溶肥处理对马铃薯生育期和农艺性状影响不明显,喷施含15%氧化型谷胱甘肽有机水溶肥处理商品率95.19%,较喷清水处理商品率提高6.74百分点;喷施含15%氧化型谷胱甘肽有机水溶肥折合产量较喷清水处理显著增加3 900 kg/hm^(2),商品薯产量提高7 466.59 kg/hm^(2),商品薯产值增加17 173.15元/hm^(2)。喷施含15%氧化型谷胱甘肽有机水溶肥和100%氧化型谷胱甘肽有机水溶肥处理间折合产量差异不显著。可见,含15%氧化型谷胱甘肽有机水溶肥可作为节本增效投入品在冬马铃薯生产中大面积推广应用。

妊娠糖尿病孕妇血清谷胱甘肽过氧化物酶3、水通道蛋白9表达水平及意义

目的探讨妊娠糖尿病(GDM)孕妇血清谷胱甘肽过氧化物酶3(GPX3)、水通道蛋白9(AQP9)表达水平变化及其与妊娠结局的关系。方法选取200例GDM孕妇(GDM组)和200名健康孕妇(对照组)作为研究对象,并根据妊娠结局将GDM组孕妇进一步分为不良妊娠结局(APO)亚组22例和良好妊娠结局亚组178例,采用酶联免疫吸附法检测血清GPX3、AQP9表达水平。采用多因素Logistic回归分析法筛选GDM孕妇APO的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血清GPX3、AQP9表达水平对GDM孕妇APO的预测效能。结果与对照组比较,GDM组血清GPX3表达水平降低,血清AQP9表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。200例GDM孕妇的APO发生率为11.00%(22/200)。与良好妊娠结局亚组比较,APO亚组稳态模型评估-胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)和AQP9水平更高,GPX3水平更低,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,HOMA-IR、HbA1c、AQP9升高为GDM孕妇APO的独立危险因素(P<0.05),GPX3升高为GDM孕妇APO的独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清GPX3、AQP9单独和联合预测GDM孕妇APO的曲线下面积为0.784(95%CI:0.673~0.881)、0.788(95%CI:0.687~0.894)和0.906(95%CI:0.805~0.972),两者联合预测的曲线下面积大于单独预测(P<0.05)。结论GDM孕妇血清GPX3表达水平降低,血清AQP9表达水平升高,血清GPX3、AQP9均为APO的独立影响因素,两者联合预测GDM孕妇APO的价值较高。

利拉鲁肽影响海马组织核因子E2相关因子2/谷胱甘肽过氧化物酶4信号通路和铁死亡活性改善阿尔茨海默病大鼠认知障碍的机制研究

目的探讨利拉鲁肽影响海马组织核因子E2相关因子2(Nrf2)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)信号通路和铁死亡活性改善阿尔茨海默病(AD)大鼠认知障碍的机制。方法将40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、利拉鲁肽组和利拉鲁肽+erastin组,每组各10只。侧脑室注射脲链佐菌素(STZ)构建AD模型;利拉鲁肽组在AD造模同时每日腹腔注射利拉鲁肽(200μg/kg)连续28 d;利拉鲁肽+erastin组在AD造模同时侧脑室注射erastin(2.5 nmol/g),然后腹腔注射利拉鲁肽(200μg/kg)连续28 d。采用Morris水迷宫检测大鼠认知功能,采用ELISA法检测大鼠海马组织Aβ42和谷胱甘肽(GSH)水平,采用Western blot检测磷酸化Tau蛋白、Nrf2、GPX4蛋白表达水平。结果对照组、利拉鲁肽组、利拉鲁肽+erastin组及模型组大鼠第3 d、4 d和5 d逃逸潜伏期时间均依次延长,穿越平台次数依次减少(P<0.05)。对照组、利拉鲁肽组、利拉鲁肽+erastin组及模型组大鼠海马组织Aβ42水平和Nrf2、GPX4、磷酸化Tau蛋白表达水平均依次升高;对照组、利拉鲁肽+erastin组、利拉鲁肽组及模型组大鼠海马组织GSH水平依次降低(P<0.05)。结论利拉鲁肽可能通过影响海马组织Nrf2/GPX4信号通路和铁死亡活性,参与AD大鼠认知障碍的改善。

低温处理对家蚕滞育卵还原型与氧化型谷胱甘肽比值的影响

还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)的比值反映出细胞的氧化胁迫状况。利用分光光度法分别测定家蚕滞育卵持续25℃保护和经5℃低温处理后卵内谷胱甘肽代谢的变化,探讨蚕卵的谷胱甘肽代谢与滞育解除的关系。与持续25℃滞育温度条件下的蚕卵相比,5℃低温解除滞育的处理显著提高了蚕卵总谷胱甘肽含量、GSSG含量和硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)活性,而显著降低了GSH含量以及GSH/GSSG比值。结果表明,低温处理过程中,滞育卵TPX活性显著升高,间接地促进GSH氧化为GSSG,使GSH/GSSG比值显著下降,由此导致蚕卵处于过氧化状态。

基于氧化型谷胱甘肽保护的荧光金纳米团簇的制备及其对Fe^(3+)的检测

利用氧化型谷胱甘肽作为还原剂和稳定剂,通过绿色合成法制备了具有良好生物相容性的金纳米团簇(GSSG-Au NCs),其平均粒径大小为2.9 nm。以其为荧光探针实现了对Fe^(3+)的高灵敏检测,且对干扰离子具有高度选择性,线性范围宽(0.1~30μmol/L),检出限为0.03μmol/L。该方法用于实际水样(自来水、湖水和河水)中Fe^(3+)的测定,结果满意。

芹菜素对雄性小鼠肝脏组织总抗氧化能力、还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽值、丙二醛含量影响研究

目的观察不同剂量、不同作用时间芹菜素对雄性小鼠肝脏总抗氧化能力(T-AOC)、还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)、丙二醛(MDA)含量的影响。方法 200只成年SPF级昆明种雄性小鼠随机分为对照组(生理盐水10 mL/kg)、低剂量组(芹菜素252 mg/kg)、中剂量组(芹菜素504 mg/kg)和高剂量组(芹菜素1008 mg/kg)。连续灌胃7、14、21、28、35 d,分批处死,称取肝脏制备匀浆,测定T-AOC、GSH、GSSG及MDA含量。结果高剂量组T-AOC含量[(1.397±0.641)U/mg]显著低于对照组[(1.573±0.781)U/mg](P=0.000);芹菜素灌胃28 d GSH/GSSG值相对对照组升高幅度最大(140.556%);高剂量组灌胃21 d MDA含量[(1.068±0.729)nmol/mg]显著高于对照组[(0.354±0.212)nmol/mg](P=0.000)。结论 1008 mg/kg芹菜素对小鼠肝脏组织T-AOC具有一定的抑制作用,并可增加肝脏脂质过氧化程度。T-AOC可以比较早地反映出机体抗氧化能力的变化。

纳米硒对肉鸡组织硒含量和谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响

本试验采用2×6因子完全随机设计,研究了纳米硒和亚硒酸钠2种硒源对肉鸡组织硒含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响。岭南黄公母混合雏780羽按饲养试验要求分为13组,每组4个重复,每个重复15羽。将纳米硒和亚硒酸钠2种硒源分别以0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1.0mg/kg6个硒水平添加到基础日粮中,配制成12种试验日粮,基础日粮作对照。结果显示:(1)亚硒酸钠添加浓度在0.2～0.4mg/kg硒添加水平范围内肉鸡生长性能和GSH-Px活性处于高峰平台,1.0mg/kg硒添加水平肉鸡生长性能和GSH-Px活性显著低于0.2～0.4mg/kg硒添加水平。纳米硒添加浓度在1.0mg/kg肉鸡生长性能和GSH-Px活性仍然保持在高峰平台。(2)硒源添加浓度在0.1～0.3mg/kg时,亚硒酸钠和纳米硒对肉鸡生长性能的影响无显著差异(P>0.05);硒源添加浓度在0.4～1.0mg/kg时,纳米硒组肉鸡生长性能显著高于亚硒酸钠组(P<0.05)。(3)硒源添加浓度在0.1～0.4mg/kg时,两种硒源对GSH-Px活性的影响无显著差异(P>0.05);在0.5和1.0mg/kg硒添加水平上,纳米硒组GSH-Px活性显著高于亚硒酸钠组(P<0.05)。(4)不加硒的空白组全血和组织硒含量显著低于硒添加组。在同一硒添加水平上,纳米硒组和亚硒酸钠组肉鸡全血硒浓度差异不显著,但是,组织硒含量却受硒源的影响。硒源添加?

氟对小鼠睾丸谷胱甘肽抗氧化系统的影响

为探讨氟化钠对小鼠睾丸谷胱甘肽抗氧化系统的影响,将24只3周龄ICR雄性小鼠随机分为对照组和染氟组,对照组给予蒸馏水,染氟组分别供给含25、50、100mg·L^(-1) NaF的蒸馏水,自由饮用60d。染毒结束后检测小鼠睾丸总抗氧化能力(T-AOC)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量及谷胱甘肽过氧化氢酶(GPx)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)、谷胱甘肽还原酶(GR)的活性,检测GPx1、GPx4、GST-mu5和GR基因的转录。电镜观察睾丸组织细胞内线粒体、内质网和高尔基体的结构。结果显示,氟中毒可使睾丸T-AOC减弱,ROS、MDA含量升高,GSH含量显著降低,细胞内氧化水平升高,线粒体、内质网和高尔基体出现不同程度的损伤,GPx、GST、GR的活性降低,GPx1、GPx4、GST-mu5和GR基因转录下调。小鼠氟中毒后,睾丸抗氧化能力降低,处于明显的氧化应激状态,这与谷胱甘肽抗氧化系统酶活性降低及其相关基因转录下调有关。

苯并(a)芘和芘对梭鱼肝脏谷胱甘肽过氧化酶活性的影响

在实验生态条件下 ,浓度范围0.1～50μg/L的苯并(a)芘和芘的短期暴露造成梭鱼肝脏GPx活性先抑制后诱导的效应。相同的污染物 ,高浓度组对GPx活性的抑制大于低浓度组 ,出现GPx活性诱导的时间早于低浓度组 ;相同浓度下 ,苯并(a)芘对GPx活的作用大于芘 ,这间接反映了苯并(a)芘和芘的毒性大小。这些结果说明梭鱼肝脏GPx活性与苯并(a)芘和芘暴露有一定的相关性 。

宁夏枸杞谷胱甘肽过氧化物酶的测定

目的研究宁夏枸杞谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的测定方法,以寻求测定枸杞中GSH-Px的最佳条件。方法以0.2mol·L-1的磷酸缓冲液作为提取介质,1.67%的偏磷酸作为沉淀液,用分光光度计分别在410nm、412nm、414nm、416nm、418nm、420nm、422nm波长下比色测定宁夏枸杞中GSH-Px活性。结果宁夏枸杞中GSH-Px在含1mmol·L-1乙二胺四乙酸(EDTA)和1%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的0.2mol·L-1磷酸缓冲液(pH6.24)作为提取介质,反应2min、412nm波长条件下比色测定,活性最高。结论本方法可以准确地测定枸杞中GSH-Px的活性,且重复性好。

胡杨谷胱甘肽过氧化物酶PeGPX基因的克隆及转化植株耐盐性分析

胡杨(Populus euphratica Oliv.)具有极强抗盐碱能力。本实验室前期胡杨微阵列芯片数据结果显示:盐胁迫下,胡杨谷胱甘肽过氧化物酶基因(PeGPX)的转录上调,暗示该基因可能对胡杨耐盐性具有一定的作用。为分析 GPX 对植物耐盐性的贡献,本研究以胡杨为材料,利用 RT-PCR 方法克隆了胡杨谷胱甘肽过氧化物酶PeGPX基因,并在烟草中过量表达该基因,以分析谷胱甘肽过氧化物酶活性与植物耐盐性的关系。研究结果显示,实验中克隆的 cDNA (PeGPX)编码谷胱甘肽过氧化物酶,其 ORF 为 693 bp,其蛋白由 231 个氨基酸编码。过量表达 PeGPX 基因的烟草与野生型烟草的耐盐性实验结果显示,野生型烟草植株在加 NaCl(200 mmol/L)的 MS 培养基中生长 15 d 后,无明显的长高,且不长根;而转基因烟草在同样的加盐培养基上,生长基本没有受到抑制,植株生长状态良好,并且能够长根。光合数据显示,在盐胁迫下过量表达 PeGPX 基因烟草的净光合速率受到影响明显小于野生型烟草的净光合速率。酶活数据显示,转基因株系 GPX 酶活与野生型的相比在盐胁迫下活性有非常显著的提高。我们的研究结果说明:过表达 PeGPX 基因使得烟草的耐盐性得到显著提高,这对深入研究PeGPX基因在胡杨耐盐机制中的作用具有重要的意义。高,这对深入研究PeGPX基因在胡杨耐盐机制中的作用具有重要的意义。