猪粪炭对茶园土壤硝化过程及微生物酶活性的影响

为探讨猪粪炭对茶园土壤的改良作用,通过35 d的好气密闭培养实验,研究猪粪炭施加对茶园土壤的硝化过程、温室气体N2O排放及土壤微生物酶活性的影响。结果表明:施加猪粪炭可以改善茶园土壤的酸性环境,显著提高土壤pH,使其更适宜茶树的生长;茶树是典型的喜铵厌硝植物,较高的硝铵比不利于茶树的生长,低、中量猪粪炭施加显著增加土壤pH,并未促进茶园土壤的硝化作用,且显著降低土壤N2O累积排放量高达41.2%~58.7%;高量猪粪炭施加显著增加茶园土壤净硝化速率,降低N2O累积排放量62.4%;猪粪炭施加显著提高土壤FDA水解酶、脲酶及脱氢酶活性。研究表明,适量猪粪炭的添加可以改善茶园土壤的酸碱环境和微生物活性,促进土壤的生物化学反应和土壤养分元素的循环,从而提高土壤养分的可利用性和土壤质量。

内源性抗氧化剂PRDX4及其在生殖系统作用的研究进展

过氧化物还原酶4(PRDX4)是过氧化物还原酶家族成员,是一种细胞内源性抗氧化剂,可锚定在内质网调节蛋白质氧化折叠,也可分泌到细胞外基质发生抗氧化作用。在女(雌)性生殖系统,氧化应激影响卵巢的功能状态,定位在颗粒细胞及卵母细胞的体细胞型PRDX4(PRDX4s)通过抗氧化应激机制促进卵泡发育成熟、抑制卵母细胞老化,并参与多囊卵巢综合征(PCOS)和卵巢功能减退的病理过程。在睾丸组织内同时表达两种PRDX4亚型,PRDX4s和睾丸特异型PRDX4(PRDX4t)。PRDX4通过抑制内质网应激、清除胞质和细胞外基质活性氧簇(ROS)保护睾丸组织结构与细胞功能,参与调节精子发生和精子形成,抑制生精细胞凋亡。综述PRDX4的结构与功能,及其在调节配子发生中的作用。

尼古丁诱导口腔癌前病变细胞中E26转录因子1与过氧化物还原酶1的相互作用

目的 研究尼古丁诱导口腔癌前病变细胞中E26转录因子1（E26 transformation specific 1,Ets1）与过氧化物还原酶1（peroxiredoxin 1,Prx1）的相互作用,探讨尼古丁在口腔癌前病变中作用的分子机制.方法 培养口腔癌前病变细胞株（dysplastic oral keratinocyte,DOK）,实验分为尼古丁组、对照组、敲低组和敲低对照组,尼古丁组、敲低组和敲低对照组DOK细胞用1μmol/L尼古丁处理7d,对照组不作任何处理.分别采用蛋白质印迹法、免疫共沉淀（co-immunoprecipitation,Co-IP）和染色质免疫共沉淀（chromatin immunoprecipitation,ChIP）法检测尼古丁组和对照组DOK细胞中Prx1和Ets1的蛋白表达量、Prx1和Ets1蛋白结合量以及Ets1与过氧化物还原酶1基因（PRDX1）启动子区的结合情况.分别利用siRNA干扰和慢病毒感染技术敲低Ets1和Prx1,蛋白质印迹法检测敲低组和敲低对照组DOK细胞中Prx1和Ets1的蛋白表达变化.结果 尼古丁诱导Prx1和Ets1蛋白表达显著增加,尼古丁组Prx1和Ets1蛋白相对表达量分别为0.71±0.02和0.12±0.01,均显著高于对照组中二者的表达（Prx1和Ets1蛋白分别为0.53±0.06和0.01±0.01,P=0.009,P=0.000）.Co-IP结果显示,Prx1能与Ets1形成蛋白复合体,尼古丁组Prx1和Ets1蛋白结合量高于对照组.ChIP检测发现,尼古丁可显著上调Ets1与PRDX1基因启动子区的结合,尼古丁组富集倍数（80.9±19.7）显著高于对照组（13.8±1.2）（P=0.004）.在DOK细胞中,成功敲低了Ets1和Prx1蛋白的表达,敲低组Ets1和Prx1蛋白相对表达量分别为0.60±0.06和0.48±0.03,敲低对照组分别为0.83±0.08和0.80±0.06 （P=0.016,P=0.002）.敲低核转录因子Ets1可显著抑制Prx1蛋白表达（P=0.002）;反之,敲低Prx1亦可显著降低Ets1蛋白的表达（P=0.000）.结论 在口腔癌前病变细胞中,Ets1可直接调控Prx1的表达,与Prx1蛋白存在相互作用;尼古丁可能通过放大Ets1与Prx1之间的正反馈调控信号,促进口腔癌前病变的发生和发展.

添加腐熟堆肥对厨余垃圾堆肥腐殖质形成的影响

以不同比例的腐熟堆肥作为添加剂,在自制的强制通风好氧反应器内进行厨余垃圾高温堆肥,文章研究了添加腐熟堆肥对堆肥温度、腐殖质各组分、腐殖质前体和氧化还原类酶活性等的影响。结果表明,与对照组相比,添加适量腐熟堆肥延长了55℃以上高温的持续时间(1~3 d);堆肥结束时,实验组的可提取腐殖酸碳、富里酸碳和胡敏酸碳含量均降至初始值以下,显著高于对照(P<0.05),但胡富比比对照平均低5.9%,E4/E6值则平均高20.0%;添加腐熟堆肥增加了堆肥过程中的还原糖、多酚和氨基酸含量,提高了脱氢酶活性和多酚氧化酶活性,降低了过氧化氢酶活性。综上,添加腐熟堆肥有利于厨余垃圾堆肥腐殖质的形成与积累,能有效降低腐殖质损失率,显著提高腐殖质含量,但也会抑制堆肥过程中腐殖质聚合度和芳构化程度的增长。

乙酰胆碱与去甲肾上腺素对食管癌细胞分化调节作用及其机制的研究

目的:探讨食管神经递质对食管癌细胞分化的影响及其机制,为防治食管癌与复发提供实验依据。方法:应用EC109细胞系,分为乙酰胆碱(acetylcho-line,Ach)组、Ach加阿托品组、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)组、NE加托拉唑林组、Ach+NE组和对照组,体外培养14d,HE和氧化还原修复酶-1(peroxire-doxin-1,PRX1)免疫组化染色,镜下观察和图像分析,并对结果进行统计学处理。结果:各药物处理组与对照组相比:1)细胞3d长出突起,7d明显长长,14d部分细胞之间相互连结形成网状;2)PRX1免疫组化显色明显加深;3)核质比下降。Ach和NE组3项指标与对照组者相比差异均有统计学意义,P值均<0.05。结论:神经递质Ach和NE对食管癌细胞分化具有诱导作用,其作用可能与其增强DNA修复酶的表达有关,但其确切作用机制尚待进一步研究。该发现为开拓食管癌发病机制和防治研究的新领域提供了基础资料。

抑制过氧化物酶1表达对肝癌细胞放射敏感性的影响

目的:探讨抑制过氧化物酶1(Prx-1)对肝癌细胞放射敏感性的影响。方法:选用人肝癌Hep G2细胞,用分次放疗放射剂量递增法诱导放射抵抗的肝癌细胞(RR-Hep G2),检测RR-Hep G2细胞与亲代Hep G2细胞中Prx-1的表达,以及两种细胞在接受相同放射处理后存活率与迁移、侵袭能力。用表达sh RNA-Prx-1的质粒转染两种细胞后,再次检测上述指标的变化。结果:与亲代Hep G2细胞比较,RR-Hep G2细胞Prx-1的m RNA与蛋白表达明显增高;放射处理后,RR-Hep G2细胞的存活率升高,迁移能力及侵袭能力增强(均P<0.05)。转染sh RNA-Prx-1后,与各自转染阴性对照序列的细胞比较,两种细胞Prx-1的m RNA与蛋白表达均明显降低;接受放射处理后,两种细胞的存活率均降低,迁移能力以及侵袭能力均明显减弱(均P<0.05)。结论:肝癌细胞对放射的敏感性降低可能与Prx-1的表达有关,调控Prx-1的表达可望成为增强肝癌细胞放射敏感性的有效途径。

脑出血损伤相关分子模式研究进展

脑出血后产生的免疫风暴可导致神经元及其支持细胞死亡,红细胞裂解释放的血红蛋白、血红素和铁离子等细胞毒性物质也具有促进神经细胞死亡的作用。神经细胞死亡后释放的损伤相关分子模式(DAMP)激活固有免疫反应,导致炎症反应-细胞死亡-DAMP释放-炎症反应的恶性循环,是脑出血后继发性脑损伤的重要机制。本文旨在对目前开展的一系列探讨DAMP在脑出血继发性脑损伤中作用的研究进展进行概述,以为进一步的基础研究与临床转化研究提供参考。

miR-650靶向PRDX2调控幽门螺旋杆菌对胃癌细胞氧化应激的机制研究

背景与目的:幽门螺旋杆菌(HP)在人类胃部的定植是引起胃癌发生较明确的危险因素,且研究发现,HP感染后胃癌细胞的氧化应激水平有明显改变,但机制尚未明确。因此,本研究探讨HP引起胃癌细胞氧化应激的潜在机制和作用。方法:用HP感染胃癌细胞SNU-1后,分别用DCF-DA荧光法和CCK-8法检测的活性氧(ROS)水平和增殖能力的变化;用高通量测序和siRNA筛选鉴定HP感染后引起SNU-1细胞氧化应激增强的关键基因,随后通过miRDB在线分析和荧光素酶报告系统鉴定引起胃癌细胞SNU-1氧化应激的关键上游miRNA,同时结合功能获得与功能缺失实验验证。结果:SNU-1细胞感染HP后,ROS水平升高,增殖能力增强,但同时使用氧化应激抑制剂乙酰半胱氨酸处理,SNU-1细胞的以上变化被取消(均P>0.05)。siRNA筛选结果发现,敲低过氧化氢酶2(PRDX2)时HP感染的SNU-1细胞ROS水平升高,增殖能力增强,而过表达PRDX2后则相反(均P<0.05),同时Western blot验证显示,HP感染后SNU-1细胞中PRDX2的表达下调。HP感染后,SNU-1细胞中PRDX2的启动子活性没有变化(P>0.05),但PRDX2的mRNA水平下降(P<0.05)。分析结果显示,HP感染的SNU-1细胞中miR-650的表达水平上升(P<0.05),且miR-650靶向PRDX2 mRNA的3’端非编码区。验证结果显示,SNU-1细胞过表达miR-650后,PRDX2的表达下调、ROS水平升高、增殖能力增强,敲低miR-650后则呈反向变化(均P<0.05);HP感染的SNU-1细胞同时敲低miR-650或同时过表达PRDX2,细胞的增殖能力无明显变化(均P>0.05)。结论:HP感染增加胃癌细胞氧化应激水平的机制和作用可能是其上调miR-650的表达,后者靶向PRDX2 mRNA的3’端非编码区抑制PRDX2 mRNA与蛋白表达,导致ROS水平升高,从而促进胃癌细胞的增殖。

念珠菌抗氧化损伤机制的研究进展

念珠菌是人类最常见的机会致病菌，近年来，念珠菌感染的发病率呈上升趋势。念珠菌是否能致病，取决于其对环境中各种压力的抵抗及适应能力，其中又以抗氧化能力最为重要。在念珠菌中存在抗氧化损伤机制作用的主要有：促丝裂原活化蛋白激酶转导通路、抗氧化酶系统、谷胱甘肽系统等。念珠菌的抗氧化过程是通过上述一个或多个机制同时发挥作用，通过对这些机制的了解，可以为寻找新的药物作用靶点提供理论依据，从而在临床上更好地治疗念珠菌病。

Prdx4蛋白表达水平改变对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的 :观察过氧化物还原酶4(peroxiredoxin 4,Prdx4)蛋白表达水平的改变对人宫颈癌He La细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用脂质体瞬时转染法将表达质粒pc DNA3.0-HA-Prdx4(以pc DNA3.0-HA空载体为阴性对照)和针对人Prdx 4基因的3种小干扰RNA(small interference RNA,si RNA)(以阴性对照si RNA为阴性对照)分别转染宫颈癌He La细胞;用蛋白质印迹法证实Prdx4蛋白表达水平被改变后,采用MTT法和FCM法分别检测He La细胞的增殖活性和凋亡情况。结果 :pc DNA3.0-HA-Prdx4质粒转染组He La细胞的Prdx4蛋白表达水平明显上调(P<0.05),而3个Prdx4 si RNA干扰组的Prdx4表达水平均明显下调(P值均<0.05)。Prdx4过表达组He La细胞的增殖能力与空白对照组及空载体转染组比较,未发生明显改变(P值均>0.05),且凋亡细胞百分率差异也无统计学意义(P值均>0.05);而3个Prdx4表达干扰组He La细胞的增殖能力较阴性对照组均明显降低(P值均<0.05),凋亡细胞百分率均明显提高(P值均<0.05)。结论 :Prdx4蛋白表达水平上调对He La细胞的增殖和凋亡没有明显影响,但其下调会抑制He La细胞增殖并促进细胞凋亡。推测Prdx4有可能成为临床治疗宫颈癌的一个潜在靶点。