血清对氧磷脂酶活性连续检测方法的建立及临床意义

目的建立血清中对氧磷脂酶(PON)活性测定的方法,测定正常人和肝硬化患者血清中PON的活性,探讨该酶诊断肝硬化的意义。方法PON活性测定以乙酸苯酯为底物,在PON的作用下水解,生成苯酚,用分光光度计在37℃、270nm处连续监测3min测定苯酚特征性的紫外吸收,计算出酶促反应速度。结果本方法的最适的测定条件为37℃、270nm处连续监测3min,底物浓度为10mmol/L,最适pH值为8.0,激活剂Ca2+浓度为2mmol/L,批内变异系数(CV)可达4.3%,批间CV为5.0%。正常人组血清PON活性为(284.95±83.76)U/ml,参考范围为201.2～368.7U/ml,肝硬化患者组PON活性为(153.78±107.54)U/ml,两组差异有显著性(P<0.01)。结论本方法测定血清中PON的活性操作简便、精密度、线性良好。肝硬化患者血清PON活性与正常人组比较差异有显著性。

中国广东潮汕地区汉族人对氧磷脂酶1(PoN1)L55M基因多态性与冠心病伴高血糖的关系

目的观察广东省潮汕地区汉族人群对氧磷脂酶1(PON1)L55M基因多态性与冠心病(CHD)合并空腹血糖升高(FHG)及2型糖尿病(T2DM)的相关关系,及与冠状动脉血管病变数和病变范围的相关关系。方法284例受检者据空腹血糖和冠状动脉造影结果分正常对照组(90例)、CHD组(86例)、CHD+FHG组(62例)、CHD+T2DM组(46例),进行SNPs序列测定入选人群PON1L55M基因并分析。结果广东地区汉族人群PON1L55M基因存在多态性,L等位基因频率为0.86。3种基因型(LL,LM,MM)在4组中无明显差异。L等位基因在冠心病病变血管数目和病变范围中无明显差异(χ2=0.56,P=0.758;χ2=0.11,P=0.743)。结论中国广东潮汕地区汉族人群中存在PON1L55M基因多态性,等位基因频率以L型为主。PON1L55M基因多态性与是否发生空腹血糖升高或糖尿病以及冠状动脉病变严重程度无明显相关性。

对氧磷脂酶2及载脂蛋白E基因多态性与2型糖尿病肾病相关分析

目的探讨对氧磷脂酶2(PON2)基因S311C及载脂蛋白(ApoE)基因变异单独及联合作用对2型糖尿病肾病的影响。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测福建地区210例2型糖尿病(T2DM)患者(113例糖尿病肾病患者,97例糖尿病非肾病患者)和105例健康对照者的PON2基因S311C及ApoE基因多态性。结果①糖尿病肾病组PON2 CC基因型及C等位基因和ApoEε3/4+ε4/4基因型及ε4等位基因频率明显高于糖尿病非肾病组及正常对照组(P<0.05);②SC+CC与ε3/4+ε4/4基因型并存时对糖尿病肾病的发生具有协同效应(X^2=20.89,P=0.00);③T2DM患者中CC及ε3/4+ε4/4基因型有较高的总胆固醇、低密度脂蛋白水平(P<0.05);④Logisitic回归分析表明:CC及ε3/4 +ε4/4基因型是糖尿病肾病发生的独立变异危险因素(P<0.05)。结论PON2、ApoE基因多态性可通过血脂代谢紊乱而影响2型糖尿病肾病的发生。

依达拉奉对急性脑梗死患者血浆氧化低密度脂蛋白及对氧磷脂酶-1的影响

目的研究依达拉奉对急性脑梗死患者血浆ox-LDL浓度和PON1活性的影响。方法将68例急性脑梗死患者随机分为对照组(30例)和实验组(38例),对照组给予常规药物治疗;实验组在常规药物治疗的基础上加用依达拉奉治疗。用ELISA法检测患者ox-LDL水平,用速率法测定PON1浓度,比较两组患者治疗前后ox-LDL和PON1水平的变化情况,并进行相关性研究。结果治疗前,两组患者血浆ox-LDL浓度和PON1活性差异无统计学意义(P>0.05);治疗后实验组患者ox-LDL水平较治疗前显著降低(P<0.01),而PON1水平显著增高(P<0.05),两组间ox-LDL和PON1差异有统计学意义(P<0.05)。相关性研究发现,治疗后实验组患者ox-LDL浓度同PON1活性呈负相关性(r=-0.298,P<0.01)。结论依达拉奉能有效减轻急性脑梗死患者ox-LDL水平,这种作用可能与PON1增高有关。

对氧磷脂酶1、2基因多态性与2型糖尿病肾病相关性研究

目的探讨对氧磷脂酶(paraoxonase,PON)PON1R192Q及PON2C311S多态性与糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测210例2型糖尿病(type 2 diabeticmellitus,T2DM)(其中DN患者113例,非DN患者97例)及105例健康人的PON1 R192Q、PON2C311S基因多态性。结果 R等位基因与DN发生无直接相关性(OR:1.65;95%CI 0.93-2.92,P=0.09);C等位基因与DN发生相关(OR:2.99;95%CI1.67-5.34,P=0.00),CC基因型是DN发生独立危险因素。RR基因与SC+CC基因共存时,能进一步提高DN发生危险性(OR:3.38;95%CI 1.50-7.55,P=0.00)。结论PON2C311S多态性与DN相关,C等位基因是DN发生的一个易感基因;PON1 R192Q多态性与DN无直接的相关性,但RR基因型与CC型在DN的发生中可能有协同作用。

超氧化物歧化酶和氧磷脂酶-1在2型糖尿病肾病患者血清中的表达及临床意义

目的:探讨超氧化物歧化酶(SOD)和氧磷脂酶-1(PON-1)在2型糖尿病肾病(T2DM)中的作用及临床价值。方法:80例T2DM患者分为T2DM肾病组(肾病组)和T2DM非肾病组(非肾病组),测定患者血清中SOD和PON-1浓度及生化指标、计算胰胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果:肾病组SOD、PON-1水平显著低于非肾病组,相比较有显著性差异(P<0.05);肾病组FINS、TG水平和HOMA-IR显著高于非肾病组,相比较有显著性差异(P<0.05);而两组FBG、PBG2h、HbAlc水平比较差异无统计学意义;T2DM患者血清SOD、PON-1水平与HOMA-IR呈显著负相关(r=-0.287,-0.509;P=0.006,0.000),而血清SOD水平与PON-1水平无相关性(P>0.05)。结论:SOD和PON-1参与了T2DM肾病的发生与发展,联合检测血清SOD、PON-1水平,对于T2DM肾病患者的早期诊断、预防、治疗及预后评价具有重要的临床意义。

对氧磷脂酶-1基因多态性与颅内大动脉粥样硬化性病变的相关性研究

目的探讨对氧磷脂酶-1(paraoxonase-1,PON-1)的基因多态性与颅内大动脉粥样硬化性狭窄或闭塞的相关性。方法对53例伴有颅内大动脉粥样硬化性狭窄或闭塞的首发急性脑梗死患者(病例组)和55例年龄、性别匹配的健康者(对照组)进行PON-1基因型研究。结果病例组和对照组PON-1 Q192R QQ、QR、RR三种基因型分布间差别无显著性意义(X^2=5．96,P＞0．05),但病例组R等位基因频率高于对照组(分别为0．77,0．62,X^2 =5．49,P＜0．05)。多因素LoGIstic回归分析表明,R等位基因可增加颅内动脉粥样硬化的发生风险(OR=1．51, 95% CI 1．13～2．03,P＜0．05)。结论R等位基因是河北地区汉族人颅内大动脉粥样硬化的危险因素;R等位基因与糖尿病、吸烟可发生协同作用,可增加糖尿病、吸烟对颅内动脉粥样硬化的发生风险。

对氧磷脂酶192Glu/Arg多态性与2型糖尿病周围神经病变发病的关系

目的:研究对氧磷脂酶-1(PON-1)192Gln／Arg多态性与2型糖尿病周围神经病变发病的关系。方法:RFLP-PCR法对89例2型糖尿病周围神经病变患者、80例单纯糖尿病的患者和90例健康对照组者的PON-1192进行基因分型。结果:PON-1基因在192A、B等位基因在糖尿病合并周围神经病变组为0.19、0.81。单纯糖尿病组为0.37、0.63,正常对照组为0.39、0.61,结论PON基因第192位B等位基因是糖尿病并发周围神经病变的危险因素之一。

脑梗死患者的对氧磷脂酶-1活性及其基因多态性研究

目的探讨动脉硬化性脑梗死患者血清对氧磷脂酶-1(PON-1)活性及其基因多态性与脑梗死的关系。方法用分光光度法检测127例脑梗死患者和128例相匹配的对照组的对氧磷脂酶-1(PON-1)的活性,同时,检测这两组研究对象血浆氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)、血管性假血友病因子(VWF)、血清一氧化氮(NO)、血浆颗粒膜蛋白(GMP-140)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A(apoA)、载脂蛋白B(apoB)的变化,并把这些指标与PON-1的活性作相关分析。用PCR检测PON-1192RR与55LL基因型,用Logistic回归分析脑梗死组及对照组的基因型与其他危险因素相关性。结果脑梗死组和对照组的PON-1活性均在国人正常范围内,但脑梗死组血清PON-1活性降低明显(F=10．39,P<0．01)。相关分析表明血PON-1活性与血NO呈正相关(r=0．205,P<0．01),与血VWF呈负相关(r=-0．423,P<0．01),与血GMP-140呈负相关(r=-0．383,P<0．01),与血OX- LDL呈负相关(r=-0．339,P<0．01)。PON-1活性与HDL-C、apoA、apoB无相关性。PCR结果表明PON-1 192基因的多态性在脑梗死组与对照组有明显不同,其中脑梗死组的RR基因型分布频率明显高于对照组(31．3％:24．6％, P=0．01, x2=5．74),而PON-1 55基因的多态性在两组间差异无显著性意义(78．13％:76．78％,P=0．29,x2=1．1)。分析还表明PON-1 192RR基因型的PON-1活性低于其它PON-1基因型,差异有显著性意义(P<0．001)。Logistic回归分析提示PON-1 192RR基因型是脑梗死的危险因素(OR=1．8,95％CI 0．16-5．08),高血压也是脑梗死的危险因素,而PON-1 55LL基因型并不是脑梗死的危险因素。PON-1基因型与PON-1活性在高血压与非高血压组之间的差异无显著性意义。结论脑梗死组血清PON-1活性及PON-1192RR基因多态性与脑梗死的发生有关,而高血压是脑梗死的独立危险因素。

对氧磷脂酶测定对慢性肝病的临床诊断价值

目的探讨血清对氧磷脂酶(PON)活性测定对慢性肝病临床诊断的价值。方法通过与常规肝功能试验比较,包括胆碱酯酶(CHE)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、总胆红素(TBil)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)和L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT),用ROC曲线对慢性肝炎、肝硬化、肝癌和其他慢性肝病进行实验室试验结果的临床准确性评价。结果在诊断慢性肝病时,血清PON活性与GGT的准确性相比差异无统计学意义(P>0.05),但优于其他项目;评价肝脏合成功能时,优于CHE和Alb(P<0.05)。结论 PON是一项较好的诊断慢性肝病的指标,对于评价肝脏合成功能具有常规肝功能检查无法达到的准确性,可作为常规肝功能的检测项目。

对氧磷脂酶基因多态性与2型糖尿病大血管病变

对氧磷脂酶 (PON)基因家族 ,至少包括PON1 、PON2 、PON33种基因。研究发现 ,PON1 基因在 3个位点出现多态性 ,分别是Q R、M L、C T等位基因 ;PON2 基因在两个位点出现多态性 ,为A G和C S等位基因。其中PON1 的R等位基因和L等位基因均是 2型糖尿病大血管病变的独立危险因素 ,而PON1 的T等位基因与 2型糖尿病大血管病变具有相关性 ,PON2 的C等位基因则对

对氧磷脂酶1在2型糖尿病强化治疗前后的变化及与微血管病变关系

目的探讨对氧磷脂酶1(PON-1)水平在2型糖尿病(2DM)强化治疗前后的变化及其与微血管病变的关系。方法用酶联免疫吸附法分别检测40例体检正常者和80例2DM患者(其中单纯糖尿病患者30例,合并微血管病变患者50例)以及强化治疗后2个月30例回访患者血清PON-1水平,并同时测定其他临床指标。结果 2DM微血管病变组血清PON-1明显低于单纯2DM组(P<0.05)。经过降糖、降压、降脂等有针对性的强化治疗后2个月30例回访患者与治疗前对比PON-1明显升高(P<0.01)。糖尿病微血管病变组血清PON-1与空腹血糖呈负相关(P=0.0084),与糖化血红蛋白呈负相关(P=0.0156)。结论血清PON-1与2DM微血管病变密切相关,强化治疗可以使PON-1水平明显升高,筛查并监测血清PON-1水平对于防治2DM微血管病变的发生发展可能具有重要意义。

2型糖尿病合并脑梗死患者血清对氧磷脂酶-1的活性变化及临床意义

目的探讨2型糖尿病合并脑梗死患者血清对氧磷脂酶-1(PON-1)活性变化的临床意义。方法采用对硝基苯酚为底物的速率法测定正常对照组(n=50)、单纯2型糖尿病组(n=56)及糖尿病合并脑梗死组(n=48)观察者血清PON-1活性,同时检测3组的体重指数、血糖、氧化低密度脂蛋白胆固醇(ox-LDL)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平等指标。结果2型糖尿病组血清PON-1、HDL-C明显低于正常对照组(P<0.001),ox-LDL、LDL-C、TC、TG明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);糖尿病合并脑梗死组PON-1活性又明显低于单纯糖尿病组(P<0.05),糖尿病合并脑梗死组ox-LDL水平又明显高于单纯糖尿病组(P<0.05);相关分析显示血清PON-1与ox-LDL呈显著负相关(r=-0.565,P<0.001),与HDL呈正相关(r=0.179,P<0.05)。结论 PON-1活性降低导致抗氧化能力的减弱,这种改变对预测2型糖尿病并发脑梗死风险有重要意义。

对氧磷脂酶1测定对慢性肝病的临床诊断价值

目的探讨血清对氧磷脂酶(PON1)活性测定对慢性肝病临床诊断的价值。方法通过与常规肝功能试验比较,包括胆碱酯酶(CHE)、总蛋白(TP)、清蛋白(Alb)、总胆红素(TBil)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)和γ-谷氨酰基转移酶(GGT),用ROC曲线对慢性肝炎、肝硬化、肝癌和其他慢性肝病进行实验室试验的临床准确性评价。结果血清PON1活性在诊断慢性肝病时与GGT的准确性无显著差异,但优于其它项目(P【0.05);评价肝脏合成功能时,优于CHE和ALB(P【0.05)。结论PON1是一项较好的诊断慢性肝病的试验,对于评价肝脏合成功能具有常规肝功能检查所不能达到的准确性,PON1可作为常规肝功能的检测项目。

贵州地方猪品种对氧磷脂酶1基因的多态性研究

本试验以欧洲猪种为参照,研究贵州地方猪对氧磷脂酶1(paraoxonase,PON1)基因的多态性,探讨基因多态性与地方猪的脂肪沉积之间是否存在相关性。研究采用锚定聚合酶链反应技术对香猪、糯谷猪、萝卜猪和可乐猪共138个贵州地方猪品种PON1基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)进行研究。结果表明,猪群PON1基因的163/165位点出现A/T、G/A变异,515位点检测到C/T突变,均以3种基因型存在。经卡方(χ2)检验,贵州地方猪群PON1基因515位点的基因型频率和基因频率与欧洲猪品种间的差异不显著(P>0.05);163/165位点中,贵州地方猪种A等位基因的频率为83.7%,明显高于欧洲猪品种(25.2%)。贵州地方猪品种PON1基因的163/165位点A等位基因占优势,编码的第55位氨基酸为甲硫氨酸(Met55),与脂代谢异常人群的基因型相同;欧洲猪种以B等位基因为主(P<0.01),编码的第55位是亮氨酸(Leu55),与正常人群的基因型一致。以人PON1蛋白的晶体结构为模板,推导出香猪PON1蛋白的三维结构。地方猪PON1基因变异导致的Met55突变可能影响PON1水解酶活性中心的疏水环境,可能使蛋白的水解酶活性下降,使得地方猪品种的脂肪沉积量和肉质不同于欧洲猪种。由此推测,贵州地方猪品种PON1基因163/165位点存在多态性,可能与地方猪种的脂肪沉积和肉质有一定的相关性。

系统性红斑狼疮患者血清对氧磷脂酶-1的测定及其临床意义

目的探探讨系统性红斑狼疮患者血清对氧磷脂酶-1(PON-1)活性水平及其临床意义。方法测定48例SLE患者(33例活动期和15例非活动期)、30例健康正常者血清PON-1活性、ox-LDL等指标。结果SLE患者PON-1活性为(131.5±45.2)IU/ml,显著低于健康正常者(223.4±65.8)IU/m(lP<0.01);且SLE患者活动期PON-1活性低于非活动期,相反血清ox-LDL水平则高于非活动期,有显著性差异(P<0.05)。PON-1与ox-LDL存在负相关性(r=-0.552,P<0.001),而PON-1与HDL-C不存在相关性(r=0.173,P>0.05)。结论SLE患者血清PON-1活性下降;PON-1与血清ox-LDL水平、高脂质过氧化有关。PON-1活性下降可能是SLE早发动脉粥样硬化的一大因素。

标准化药物治疗对不稳定型心绞痛患者血清对氧磷脂酶-1活性的影响

目的:研究接受标准化药物治疗的不稳定型心绞痛患者血清对氧磷脂酶-1(PON1)活性的演变规律,评价标准化药物治疗对不稳定型心绞痛患者血清PON1活性的影响和意义。方法:对2008年7月-2009年12月在中山大学附属第一医院住院的80例不稳定型心绞痛患者进行标准化药物治疗,于治疗后的第1日、第5日、第10日和第15日检测患者血清PON1的活性;选取华南理工大学医院体检中心进行健康体检者50名作为健康对照组。结果:不稳定型心绞痛组第1日血清PON1活性明显低于健康对照组[(87±3)μmol/(min.ml)对比(105±8)μmol/(min.ml),P<0.05)],该组患者治疗后第1日、第5日PON1活性比较差异无统计学意义。不稳定型心绞痛组患者PON1活性表现出显著的提升作用开始于第10日,从第1日的(87±3)μmol/(min.ml)到第10日的(92±5)μmol/(m in.ml),再到第15日的(95±7)μmol/(min.ml)(P<0.05)。结论:接受标准化药物治疗的不稳定型心绞痛患者血清PON1活性升高,其活性的演变可能与其抗动脉粥样硬化作用有关。

对氧磷脂酶与动脉粥样硬化

近年来的研究发现,对氧磷脂酶-l的活性和浓度与动脉粥样硬化的发生呈负相关,对氧磷脂酶基因多态性也可能与动脉粥样硬化有关。对氧磷脂酶-1通过水解脂质过氧化物和同型半胱氨酸巯基内酯,抑制动脉粥样硬化的发生和发展。

对氧磷脂酶1与2型糖尿病血管并发症的关系研究

目的探讨血清对氧磷脂酶1活性与2型糖尿病血管并发症的关系。方法以对氧磷为底物测定2型糖尿病各组患者及健康老年人血清对氧磷脂酶1活性。结果 2型糖尿病组与健康对照组血清对氧磷脂酶1活性差异有统计学意义(P<0.01);2型糖尿病合并血管病变组与2型糖尿病组血清对氧磷脂酶1活性差异有统计学意义(P<0.01)。结论对氧磷脂酶1活性在2型糖尿病及并发血管病变患者中均显著降低,提示对氧磷脂酶1活性的降低参与了糖尿病血管并发症的发生。