丙泊酚后处理对大鼠原代皮质神经元氧糖剥夺．复糖复氧后P38蛋白激酶和促凋亡因子Bid、Bim、Puma表达的影响

目的探讨丙泊酚后处理对大鼠原代皮质神经元氧糖剥夺-复糖复氧后P38蛋白激酶（P38MAPK）和促凋亡因子Bid、Bim、Puma表达的影响。 方法体外培养出生24 h内的SD大鼠的皮质神经元并接种于6孔板或96孔板培养皿，分为对照组（C组，正常培养）、氧糖剥夺-复糖复氧组（O组）、氧糖剥夺-复糖复氧＋丙泊酚后处理组（OP组）、氧糖剥夺-复糖复氧＋丙泊酚后处理组＋P38MAPK阻断处理组（OPS组）、P38MAPK阻断处理组（S组）、氧糖剥夺-复糖复氧＋P38MAPK阻断处理组（OS组）。氧糖剥夺-复糖复氧处理是将神经元氧糖剥夺90 min并复糖复氧24 h；丙泊酚后处理为向培养基中加入丙泊酚原液（50 μmol/L）处理2 h；P38MAPK阻断处理为提前1 h向培养皿中加入P38MAPK抑制剂SB202190（50 μmol/L）。收集各组处理好的神经元，采用Annexin V-FITC/PI双染色法测定神经元凋亡率，MTT法测定细胞生存率，乳酸脱氢酶法测定细胞损伤率，JC-1荧光法测定线粒体膜电位水平，荧光素-荧光素酶试剂盒测定ATP含量，Western blotting测定P38MAPK和促凋亡因子Bid、Bim、Puma表达水平。结果与C组比较，O组神经元磷酸化P38MAPK表达升高，凋亡率升高，存活率降低，损伤率升高，线粒体膜电位水平和ATP含量降低，促凋亡因子Bid、Bim、Puma表达水平增加，差异均有统计学意义（P〈0.05）。与O组比较，OP组神经元磷酸化P38MAPK表达升高，凋亡率降低，存活率升高，损伤率降低，线粒体膜电位水平和ATP含量升高，促凋亡因子Bid、Bim、Puma表达水平降低，差异均有统计学意义（P〈 0.05）。与OP组比较，OPS组神经元凋亡率升高，存活率降低，损伤率升高，线粒体膜电位水平和ATP含量降低，促凋亡因子Bid、Bim、Puma表达水平增加，差异均有统计学意义（P〈0.05）。与O组比较，OS组神经元凋亡率升高，存活率降低，损伤率升高，线粒体膜电位水平和ATP含量降低，促凋亡因子Bid、Bim、Puma表达水平增加，差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论丙泊酚后处理降低氧糖剥夺-复糖复氧后大鼠原代皮质神经元凋亡的机制可能与增加P38MAPK磷酸化后抑制促凋亡因子Bid、Bim、Puma表达相关。