多种中性糖、氨基己糖及乙酰氨基己糖的微量测定

糖的定量测定的方法很多,有根据糖的还原性测定的3,5二硝基水杨酸比色法,Somogyi-Neson法;有将糖变成糠醛衍生物进行测定的地衣酚—硫酸法、苯酚—硫酸法、蒽酮—硫酸法等;有用酶的糖定量法等。但以前的方法中,反应体积和样品用量较大,而且。

N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶在汞作业工人健康监护中的意义

将汞接触组 (Hg组 )以工龄 4年为标准分为Hg 1组和Hg 2组 ,不接触汞的机关工作人员组成对照组 (C组 ) ,分别检测血清、尿NAG ,以及尿 β2 微球蛋白 ( β2 MG)、血肌酐水平。结果 Hg 1组和Hg 2组血清NAG总活性均高于C组(P <0 0 5 ) ;尿NAG总活性Hg 1组同C组比较差异无显著性 ,Hg 2组明显高于C组 (P <0 0 5 ) ;Hg组的尿 β2 MG、血肌酐水平与对照组比较差异均无显著性。

N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶与流行性出血热各期关系的研究

目的 :探讨各期流行性出血热 (EHF)患者尿 N-乙酰 -β-D氨基葡萄糖苷酶 (NAG)改变及其与 EHF病程的相互关系。方法 :用比色法对 1 0例 EHF患者进行尿 NAG酶活性 ,NAG酶活性指数测定 ,同时随机选取 1 2 0例体检正常者为正常对照组。结果 :EHF患者尿 NAC酶活性 ,NAG酶活性指数均较对照组增高 ,差异有显著性 (P<0 .0 1 )。其中以休克期、少尿期、多尿期最为显著 (P<0 .0 0 1 ) ,发热期次之 (P<0 .0 1 ) ,恢复期差异无显著性 (P>0 .0 5)。结论 :尿 NAG酶活性及 NAG酶活性指数与 EHF患者肾损伤程度呈正相关 ,且 NAG酶活性指数较 NAG酶活性更稳定、更可靠 ,适时开展此项检测有助于 EHF的早期诊断、疗效评估和预后判断。

化学合成的几丁寡糖类似物诱导黄瓜对镰孢霉枯萎病的抗性

报道3种化学合成的寡糖(β-1,3-乙酰氨基葡聚二糖,β-1,3-乙酰氨基葡聚三糖和Lewis^a三糖)诱导黄瓜对镰孢霉枯萎病(Fusariumoxysporumf.sp.cucumerium)的抗性.在黄瓜胚根期,β-1,3-乙酰氨基葡聚二糖和β-1,3-乙酰氨基葡聚三糖浸泡种子胚根后,表现抗病性,相对诱导抗性效果分别为21.9和22.3,β-1,3-乙酰氨基葡聚糖的最低有效诱导浓度为5μg·mL-1;而Lewis^a三糖处理不表现抗病性.在黄瓜幼苗期,用β-1,3-乙酰氨基葡聚二糖和β-1,3-乙酰氨基葡聚三糖叶面喷雾,均表现抗病性,相对诱导抗性效果分别是28.5和23.5,β-1,3-乙酰氨基葡聚糖的最低有效诱导浓度为10μg·mL-1;而Lewis^a三糖同样处理后不表现抗性.化学合成的几丁寡糖类似物(β-1,3-乙酰氨基葡聚二糖和β-1,3-乙酰氨基葡聚三糖)和Lewis^a三糖诱导黄瓜抗性的差异可能是由于糖残基、还原末端取代基及(或)其主链结构的差异.

几丁寡糖结构类似物的化学合成

合成了两个结构新颖的几丁寡糖结构类似物:β-1,3连接的乙酰氨基葡聚二糖和β-1,3连接的乙酰氨基葡聚三糖,并通过核磁共振和质谱分析确证了其化学结构.与天然的几丁寡糖不同,本文所合成的葡聚二糖和葡聚三糖均采取了1→3糖苷键的连接方式,为研究几丁寡糖诱导植物抗病活性与寡糖区域异构体之间的关系提供有用材料.

高糖饮食对口腔粘膜酶活性的影响

作者研究高糖饮食对口腔粘膜酶活性的影响,用120只大鼠进行实验,实验组饲料的组成为蔗糖68%,酪蛋白18%,豚脂10%,盐类4%。对照组则用淀粉代替蔗糖。两组实验动物除饲料外都给服复合维生素。分别在30天和60天杀死大鼠,剥离出颊部、移行皱襞处和舌下粘膜,将其冷却并磨碎使呈均质状态后,分别测定组织蛋白酶D、酸性磷酸酶(ACP)、N-乙酰氨基己糖甙酶(N-AH)、β半乳糖甙酶(β-G)、亮氨酸氨基肽酶(LAP)、乳酸脱氢酶(LDH)。

甲壳素、壳聚糖及其衍生物的研究进展

对甲壳素、壳聚糖及其衍生物就其发展历史、性质与应用、和发展前景几个方面的研究进展进行了综述．在性质与应用部分里详述了在生物医学、组织细胞移植、医药、临床治疗及环境保护等方面的应用实例。

长双歧杆菌N-乙酰氨基己糖1-位激酶的活性位点

【目的】研究长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)JCM1217的N-乙酰氨基己糖1-位激酶(Nacetylhexosamine 1-kinase,Nah K)中对催化活性有影响的位点。【方法】利用点突变试剂盒,获得Nah K的4个位点的共10种单点突变体表达菌株。诱导表达并纯化野生型和突变体酶,用DNS法和NADH偶联的微孔板分光光度法检测野生型及突变体酶的最适p H和最适Mg^(2+)浓度,并测定酶促反应动力学参数。【结果】D208A、D208N、D208E和I24A四种突变体的催化活性几乎丧失。突变体H31A、H31V、F247A和I24V的最适p H由野生型的7.5变为7.0,突变体H31A和F247A的最适Mg^(2+)浓度由野生型的5 mmol/L变为10 mmol/L。反应动力学参数测定结果表明,突变体F247Y对底物Glc NAc/Gal NAc及ATP的催化活性均高于野生型。【结论】通过定点突变,确定了对Nah K催化活性有影响的4个位点,并且获得了一个催化效率提高的突变体(F247Y),为进一步对Nah K进行分子改造奠定了一定基础。

硫酸软骨素生产工艺探讨

以部颁标准中的澄清度，氮含量，氨基已糖含量３个主要指标为依据，对生产硫酸软骨素的酸解，稀碱－浓盐，稀碱和浓碱等工艺进行了研究，结果认为：浓碱，稀碱和稀碱－稀盐工艺在实际生产中可行，稀碱－浓盐工艺实际生产有困难，酶解工艺产品不符合标准要求。

穴注法对大鼠慢性萎缩性胃炎胃粘液屏障的影响

目的 观察穴位注射对大鼠不同程度慢性萎缩性胃炎 (CAG)时胃粘液屏障的影响。方法 以不同浓度的N 甲基 N 硝基亚硝基胍 (MNNG)复制出不同程度的大鼠CAG模型。在成功造模的基础上 ,以黄芪注射液与当归注射液等分混合穴注足三里对其进行治疗 ,观察其对CAG病变情况及胃粘膜氨基己糖与磷脂值的影响。结果 胃粘膜损伤指数、萎缩、肠化、异型增生或两者合见者随着造模浓度的增加而增加 ,穴注组可明显改善胃粘膜损伤指数及治疗相关病变 (P均<0 .0 1) ;随着造模浓度的增加 ,胃粘膜氨基己糖及磷脂值显著下降 ,而穴注组可明显提高这两项指标 ((P均 <0 .0 1) ;胃粘膜损伤指数与氨基己糖及磷脂值呈负相关 (P均 <0 .0 1)。结论 随着CAG程度的加重 ,胃粘膜氨基己糖及磷脂值明显下降 ,胃粘液屏障功能受损。穴注法可明显提高胃粘膜氨基己糖及磷脂值 ,通过加固胃粘液屏障 。

TREM2与POMGNT1基因联合检测对早期阿尔茨海默病的诊断效能

目的探讨2型髓样细胞触发受体(TREM2)与β1,2-N-乙酰氨基葡萄糖-O-甘露糖基转移酶1(POMGNT1)mRNA表达水平联合检测在阿尔茨海默病(AD)早期诊断中的临床意义。方法选择2020年1月—2021年6月济南市第三人民医院神经内科收治住院且主诉存在记忆力下降和(或)存在其他认知功能损伤的患者作为研究对象,根据神经心理量表及相应诊断标准分为AD组60例,轻度认知障碍(MCI)组60例;另外选择同期60名健康体检者作为健康对照组(NC组)。所有入组者均采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测外周血单核细胞TREM2和POMGNT1基因的mRNA表达水平。绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)并计算ROC曲线下面积(AUC),比较TREM2和POMGNT1单独与联合检测对AD的诊断效能。结果AD组TREM2的mRNA表达量明显高于MCI组和NC组,POMGNT1的mRNA表达量明显低于MCI组和NC组(TREM2:4.03±1.54比3.24±0.72、2.56±0.34,POMGNT1:0.92±0.42比1.37±0.26、1.60±0.22,均P<0.05);MCI组TREM2的mRNA表达量明显高于NC组,POMGNT1的mRNA表达量明显低于NC组(均P<0.05)。TREM2和POMGNT1联合检测对AD和MCI均有较高的诊断效能,AUC分别为0.953、0.904,95%可信区间(95%CI)分别为0.915~0.991、0.853~0.955。TREM2与POMGNT1联合检测在鉴别AD和MCI中具有一定的诊断效能(AUC为0.796,95%CI为0.712~0.879)。结论TREM2和POMGNT1基因联合检测在AD的临床早期诊断和治疗评价中有一定临床价值,可为AD的临床早期诊断和治疗评估提供新方法,为药物作用靶点提供了研究思路。

膝关节腔注射透明质酸钠注射液产生疼痛的原因分析

近几年来使用透明质酸钠注射液膝关节腔注射治疗膝关节骨性关节炎、髌骨软化症等等的报道屡见不鲜。笔者在门诊听到很多患者表述膝关节注射透明质酸钠注射液的注射中疼痛问题,注射后疼痛持续3-4d才可缓解。一些医生为预防注射中及注射后产生的疼痛,将透明质酸钠注射液配合利多卡因注射液一起注入膝关节腔。

Endo-H在毕赤酵母中的表达、纯化及其在N-糖基化分析中的应用

目的通过巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达制备内切β-N-乙酰氨基葡糖苷酶-H(endo-beta-N-acetylglucosaminidase H,Endo-H),并用于蛋白质的N-糖基化分析。方法根据GenBank中公布的褶皱链霉菌(Streptomyces plicatus)Endo-H的cDNA序列,设计并合成Endo-H全基因,将其克隆至P.pastoris表达载体pPIC9中,重组质粒转化P.pastoris JC308宿主菌,工程菌经甲醇诱导,分泌表达Endo-H,目的蛋白经疏水层析、凝胶过滤两步纯化后,纯度可>95%。成品用于基于DNA测序的荧光辅助糖电泳(DNA sequencer assisted fluorophore-assisted carbohydrate electrophoresis,DSA-FACE)分析核糖核酸酶B(ribonuclease B,RNaseB)的糖基结构,比较了Endo-H与商品化N-糖酰胺酶F(peptide-N-asparigine amidase F,PNGase F)的糖基切割功能。结果利用P.pastoris表达制备EndoH,可切割天然或变性状态下的β-1,4-糖苷键连接的甘露糖型结构糖链,不能切割复杂型糖链糖蛋白;经DSAFACE分析,结果显示Endo-H酶切RNaseB后其糖链为Man5GlcNAc-Man9GlcNAc,PNGaseF酶切RNaseB的糖链为Man5GlcNAc2-Man9GlcNAc2,两者相差一个GlcNAc。结论通过P.pastoris制备的Endo-H具有天然生物活性,可用于蛋白质的N-糖基化结构分析。

胃炎灵对大鼠胃粘膜保护作用的研究

目的 :探讨胃炎灵对实验大鼠胃粘膜损伤的保护作用及可能机制。方法 :在无水乙醇形成大鼠胃粘膜损伤模型后 ,应用中药胃炎灵治疗并观察胃粘膜病理变化、炎症程度、溃疡指数 (UI)及溃疡面积 ,并检测胃粘膜氨基乙糖及前列腺素 E2 (PGE2 )含量。结果 :治疗组胃粘膜充血、水肿、坏死、炎症程度、UI及溃疡面积较对照组明显减少 (P<0 .0 5 ) ,两组胃粘膜氨基乙糖及 PGE2 对照差异亦有显著性意义 (P<0 .0 5 )。结论 :胃炎灵对胃粘膜有良好的细胞保护作用 ,其机制可能为该药抑制炎症反应 ,提高氨基乙糖含量 ,增加 PGE2 的合成。