3-氨基吡咯烷及其N-衍生物的合成

3-氨基吡咯烷的二盐酸盐和乙酰化物是合成托氟沙星和其它喹诺酮类抗菌药的关键中间体。以苄胺和丙烯酸乙酯为原料经加成反应制得3-苄胺基丙酸乙酯;再与氯乙酸甲酯进行N-烷基化反应制得3-[N-(甲氧羰基亚甲基)苄胺基]丙酸乙酯;然后经狄克曼缩合、脱羧而得1-苄基-3-吡咯烷酮;再经肟化、还原而得中间体3-氨基-1-苄基吡咯烷,并由它进而制得目标化合物的路线因原料价廉易得而具有很大的工业化价值。但原有方法存在产率低,操作烦琐等缺点。经过研究,将原来的N-烷基化反应收率从62.4%提高到95%以上,并对其它一些反应操作进行了相应改进;从而得到一条原料价廉易得,操作方便,成本低的适于工业化的制备目标产物的工艺路线。

3－氨基吡咯烷及其N－乙酰物的合成

３－苄胺基丙酸乙酯（４）经Ｎ－烷基化、Ｄｉｅｃｋｍａｎｎ环合、脱羧、成肟与催化氢化５步反应得到３－氨基－１－苄基吡咯烷（９），收率３７．５％。由９分别合成了３－氨基吡咯烷二盐酸盐（１）与３－乙酰胺基吡咯烷（２），总收率从丙烯酸乙酯计分别为３０％与２０％。

3-氨基吡咯烷及其(S)型光学异构体合成路线图解

３┐氨基吡咯烷及其（Ｓ）型光学异构体合成路线图解ＧＲＡＰＨＩＣＡＬＳＹＮＴＨＥＴＩＣＲＯＵＴＥＳＯＦ３┐ＡＭＩＮＯＰＹＲＲＯＬＩＤＩＮＥＡＮＤＩＴＳ（３Ｓ）┐ＩＳＯＭＥＲ刘明亮郭惠元＊（中国医学科学院、中国协和医科大学医药生物技术研究所，北京１０００...

巴氟替尼中间体(R)-3-二甲氨基吡咯烷的合成

( R )-3二甲氨基吡咯烷是合成药物巴氟替尼的关键手性中间体。本文以L-苹果酸为起始原料,经过环化、还原、过磺酰化、脱保护等反应合成了( R )-3-二甲氨基吡咯烷,总收率31.45%,其结构经 1 H NMR, 13 C NMR 和IR确证。并对关键中间体的合成条件进行了优化。

(S)-(+)3-氨基吡咯烷二盐酸盐的合成研究

以L-天冬氨酸为原料,经缩合得N-甲酰-L-天冬氨酸酐,然后经酰化、酯化、还原、成环得(S)-1-苄基-3-氨基吡咯烷,最后脱苄合成(S)-(+)3-氨基吡咯烷二盐酸盐,总收率62.8%。考察了工艺条件对反应的影响。(S)-1-苄基-3-氨基吡咯烷适宜工艺条件为:n(KBH4)∶n(H2SO4)∶n(混合物4)=3∶1.5∶1,反应温度50～60℃,反应时间6h,收率71.6%。产物结构经MS和1 H NMR进行确证。

3-氨基吡咯烷盐酸盐的合成

3-氨基吡咯烷是重要的精细化工中间体,其各类衍生物在农药、医药行业有广泛的应用。目前3-氨基吡咯烷的合成工艺有多种,但是这些工艺都有各自的缺点,如原料昂贵不易得、反应条件要求高、各步收率不高,路线长、所用原料种类多、步骤繁琐等。本文研究了以羟脯氨酸为原料,通过四步反应合成3-氨基吡咯烷盐酸盐的工艺,其产品收率达65%。通过对该工艺的生产成本、生产周期、反应条件等因素的研究,所得新合成工艺路线短、步骤简单、原料种类少、生产周期短、成本低,具有良好的应用前景。

二硫代氨基吡咯烷对大鼠急性肺损伤保护作用

目的探讨二硫代氨基吡咯烷(PDTC)对内毒素(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织的保护作用及其机制。方法将72只Wistar大鼠随机分为对照组(C组),LPS组(L组),PDTC+LPS组(P组)。各组分为1,3,6,12 h亚组,每组6只。L组和P组制作内毒素性肺损伤模型。P组腹腔注射LPS前30 min尾静脉注射PDTC,120 mg·kg-1,L组和C组给予等体积0.9%氯化钠溶液。观察大鼠肺组织病理变化,肺组织湿/干质量比(W/D)变化,RT-PCR法检测大鼠肺组织细胞间黏附分子-1 mRNA(ICAM-1mRNA)的表达,放射免疫法检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)含量变化。结果病理切片显示,与C组比较,L组肺组织结构破坏严重,W/D明显增大,ICAM-1mRNA在各时间点表达明显增强(P<0.05),血清TNF-α、IL-6含量在1,3,6 h增高(P<0.05)。与L组比较,P组肺组织结构破坏明显减轻,W/D减小(P<0.05),ICAM-1mRNA表达明显减少(P<0.05),血清TNF-α、IL-6含量1,3,6 h降低(P<0.05或P<0.01)。结论 PDTC能明显抑制ICAM-1mRNA表达,降低TNF-α和IL-6含量,PDTC可能对ALI大鼠有保护作用。

(R)-1-苄基-3-氨基吡咯烷的合成

(R)-1-苄基-3-氨基吡咯烷是合成抗糖尿病新药Dutogliptin的关键中间体。现以D-天冬氨酸为原料,通过氨基保护、内酸酐化、内酰胺化、脱保护和还原等五步反应,合成得到1-苄基-3-氨基吡咯烷,总产率为67.5%。该法具有原料便宜易得、操作简单、产物易于分离提纯等优点。

二硫代氨基吡咯烷对慢性混合反流性食管炎大鼠核因子-κB/白细胞介素-6信号通路的干预作用

目的 观察NF-κB抑制剂二硫代氨基吡咯烷（PDTC）对慢性混合反流性食管炎大鼠食管黏膜的保护作用及对NFκB/IL-6信号通路的影响.方法 40只健康清洁级SD雄性大鼠平均分为健康对照组、假手术组、模型对照组、奥美拉唑组、PDTC组,每组8只.除健康对照组和假手术组以外的大鼠建立慢性混合反流性食管炎大鼠模型.健康对照组、假手术组及模型对照组大鼠予以0.9％ NaCl溶液2 mL/d腹腔注射,奥美拉唑组大鼠每天按体质量予以20 mg/kg奥美拉唑腹腔注射,PDTC组大鼠每天按体质量予以100 mg/kg PDTC腹腔注射,6周后处死,肉眼及光学显微镜下观察食管组织的形态学改变并评分,应用ELISA法检测血清NF-κB p65、IL-6蛋白在各组大鼠中的表达.各组间均数比较采用t检验.结果 健康对照组、假手术组、模型对照组、奥美拉唑组、PDTC组5组大鼠的食管黏膜肉眼评分分别为0.000±0.000、0.000±0.000、2.250±0.707、1.125±0.835、1.429±0.535,病理评分分别为0.000±0.000、0.000±0.000、2.625±0.518、1.500±0.535、1.429±0.535,与模型对照组比较,健康对照组、假手术组、奥美拉唑组及PDTC组大鼠食管黏膜的肉眼、病理积分均降低,差异均有统计学意义（t肉眼 =7.603、7.603、2.909、2.506,t病理评分=9.674、9.674、4.277、4.399;P均＜0.05）.健康对照组、假手术组、奥美拉唑组、PDTC组大鼠的血清NF-κB p65蛋白含量分别为（68.618±18.450） pg/mL、（77.824±22.228） pg/mL、（106.693±45.312） pg/mL、（103.781±42.502） pg/mL,与模型对照组[（184.882±49.165） pg/mL]比较明显降低,差异均有统计学意义（t=6.262、5.612、3.308、3.427,P均＜0.05）;血清IL-6蛋白含量分别为（24.826±4.008） pg/mL、（23.599±4.351） pg/mL、（32.370±11.657） pg/mL、（33.694±10.394） pg/mL,与模型对照组[（51.378±9.697） pg/mL]比较亦显著降低,差异均有统计学意义（t=7.157、7.393、3.546、3.392,P均＜0.05）.PDTC组大鼠食管黏膜的肉眼、病理积分及血清NF-κB p65、IL-6蛋白含量与奥美拉唑组相比无明显升高,差异均无统计学意义（P均＞0.05）.结论 NF-κB抑制剂PDTC能减轻反流性食管炎大鼠食管黏膜的损伤程度,其机制可能与下调NF-κB/IL6信号通路有关.

吡咯烷二硫代氨基甲酸酯对TGF-β2诱导人晶状体上皮细胞EMT的抑制作用

目的:探究吡咯脘二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对转化生长因子-beta2(TGF-β2)诱导人晶状体上皮细胞(LECs)上皮-间充质转化(EMT)的逆转机制。方法:TGF-β2诱导人晶状体上皮细胞EMT,并给予不同浓度PDTC处理TGF-β2诱导的LECs。CCK-8、划痕试验检测细胞增殖与迁移,Western Blot检测EMT标志物E-cadherin、α-SMA和NF-κB信号传导通路相关蛋白表达,以及凋亡相关蛋白BAX、BCL-2、Caspase-3、细胞周期蛋白D_1的表达。结果:TGF-β2处理组细胞增殖和迁移活力明显高于未添加TGF-β2的实验组;E-cadherin表达下调,α-SMA表达上调。在TGF-β2的作用下NF-κB p65和磷酸化的NF-κB p65表达增加(P<0.05)且在TGF-β210 ng/mL刺激浓度时LECs表现出较强的增殖活力和迁移能力。PDTC逆转EMT和诱导细胞凋亡的机制研究表明,PDTC干预处理后细胞活力和迁移能力都显著降低,PDTC抑制IκB的磷酸化进而抑制NF-κB核移位,NF-κB信号通路中NF-κBp65/p-NF-κB p65、Iκκ-α/p-Iκκ-α表达下调(P<0.05),诱导促凋亡蛋白BAX/Caspase-3表达上调、抑凋亡蛋白BCL-2、细胞周期蛋白Cyclin D_1表达下调,NF-κB/IκB mRNA表达下调,凋亡相关mRNA BAX表达上调BCL-2表达下调。结论:PDTC可显著逆转由TGF-β2诱导的LECs细胞EMT过程,可能与抑制NF-κB信号通路活化使NF-κB p65/IκB/Iκκ-α表达降低以及激活凋亡相关蛋白表达有关,PDTC可通过抑制NF-κB信号通路达到逆转EMT的进程并使异常增殖的细胞发生凋亡,这将为后发性白内障的治疗提供新的潜在的治疗药物。

3—乙酰氨基吡咯烷

3-乙酰氨基吡咯烷是合成新型氟喹诺酮抗菌药物中间体,亦可用于合成克林沙星、ABT-719的中间体,主要生产厂家为日本富山株式会社,目前国内尚未工业化生产.

二硫代氨基甲酸吡咯烷在重症胰腺炎肺损伤中的作用

目的 :观察二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)对重症胰腺炎 (SAP)大鼠肺损伤的作用并探讨其机制。方法 :Wistar大鼠 4 0只 ,逆行胆胰管注射 5 %牛磺胆酸钠制备SAP模型。观察血清淀粉酶、动脉血氧分压 (PaO2 )、肺组织髓过氧化物酶 (MPO)活性、支气管肺泡灌洗液 (BALF)白蛋白含量 ;胰腺和肺组织病理变化及核因子 κB(NF κB)和诱导型一氧化氮合成酶 (iNOS)在肺组织中的表达。结果 :PDTC组较SAP组血清淀粉酶显著下降 ,PaO2 明显升高 ,胰腺、肺组织病理损伤减轻 ,BALF白蛋白含量 [PDTC组 (17.2 8± 2 .5 5 )mg/ml,(16 .5 3± 3.0 8)mg/ml;SAP组 (2 3.5 6± 0 .94 )mg/ml]和MPO活性 [PDTC组 (9.18± 1.70 )U/ g ,(8.6 9± 2 .0 6 )U/ g ;SAP组 (13.2 9± 3.36 )U/g]明显下降 ,同时肺组织NF κB和iNOS表达下调 ,P均 <0 .0 5。结论 :PDTC对SAP大鼠肺损伤有一定的治疗作用 ,其机制与其抑制NF κB活化、抑制中性粒细胞等多种炎性细胞的活化和调控iNOS基因的表达进而抑制一氧化氮的过量生成有关。

二硫代氨基甲酸吡咯烷对小鼠免疫性肝损伤的抑制作用

目的探讨二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对免疫性肝损伤的抑制作用及其机制。方法设正常对照、脂多糖(LPS)、卡介苗(BCG)、BCG+LPS、PDTC和BCG+PDTC+LPS组。除正常对照、LPS和PDTC组外,其余各组小鼠经尾静脉注射BCG(每只2.5mg)。10d后,LPS和BCG+LPS组分别给予LPS(0.2mg·kg-1,ip),PDTC和BCG+PDTC+LPS组在给予LPS前24和2h分别给予PDTC(100mg·kg-1,ip),对照组给予等体积生理盐水。每组15只小鼠用于观察LPS处理后72h的死亡率;每组6只小鼠于LPS处理后1.5h处死,取肝脏,用RT-PCR检测肝脏组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)mRNA表达水平,用凝胶电泳迁移率分析法测定肝脏核因子κB(NF-κB)结合活性;每组12只小鼠于LPS处理后6h取血,处死,留取肝脏,测定血清谷丙转氨酶(GPT)活性、一氧化氮(NO)水平和肝组织还原型谷胱甘肽(GSH)含量,制备肝组织切片进行HE染色,观察组织病理变化。结果与正常对照组比较,BCG和LPS组小鼠肝脏炎症细胞明显增加,血清GPT活性升高,肝脏GSH含量显著下降,肝脏TNF-α与IL-1β mRNA表达增强,各组均未见小鼠死亡;PDTC组除血清GPT活性升高外,上述其他指标均未发生明显改变。与BCG和LPS组比较,BCG+LPS组血清GPT活性进一步升高,并伴有大面积肝脏坏死和大量炎症细胞浸润,肝脏NF-κB结合活性显著升高,TNF-α和IL-1β表达进一步增强,GSH水平下降,血清NO水平增加,小鼠死亡率40%。与BCG+LPS组比较,PDTC预处理明显抑制BCG+LPS引起的肝脏NF-κB活性、TNF-α及IL-1β mRNA表达增强,升高肝脏GSH含量,降低血清GPT活性和NO水平,减轻BCG+LPS引起的肝脏炎症和坏死,未见小鼠死亡。结论PDTC可抑制BCG+LPS引起的小鼠免疫性肝损伤,其机制可能与其抗炎和抗氧化作用有关。

二硫代氨基甲酸吡咯烷在铜绿假单胞菌肺炎中的抗炎作用

目的探讨二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC）在大鼠铜绿假单胞菌（PA）肺炎中的抗炎作用。方法54只sD大鼠建立急性PA肺炎模型，按随机法分为对照组、PA组和PDTC组，每组18只。模型制作前60min，大鼠腹腔分别注射生理盐水（对照组及PA组）和PDTC（PDTC组），每组按PA刺激后不同时间又分为3、9、24h亚组，每亚组6只大鼠。观察大鼠临床表现及肺组织湿／干比（W／D）；病理组织切片观察大鼠肺组织形态学改变，行半定量中性粒细胞（PMN）计数；免疫组织化学染色检测肺组织NF-KB p65表达；用酶联免疫吸附法（ELISA）测定支气管肺泡灌洗液中IL-8含量。结果PA组大鼠肺组织明显水肿，大量炎性细胞浸润，PDTC组较PA组明显减轻；免疫组织化学染色显示PA刺激后3h可见NF—KB阳性细胞，3～24h均较PDTC组明显增多（P〈0．01）；IL-8蛋白分泌在PA刺激后3h开始升高，9h达高峰，3～24h均较PDTC组明显增高（P〈0．01）。结论NF—KB及其诱导的IL-8在PA肺炎中发挥重要作用，PDTC可能通过抑制NF—KB的活性减轻肺损伤。

二硫代氨基甲酸吡咯烷对小鼠急性凋亡性肝损伤的效应

目的探讨二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对氨基半乳糖(GalN)/细菌脂多糖(LPS)诱导小鼠急性凋亡性肝损伤的作用及其分子机制。方法设置生理盐水(NS)组、GalN/LPS组、PDTC+GalN/LPS组和PDTC组。每组10只小鼠被用于观察LPS处理后72h内的动物死亡情况;每组6只小鼠经LPS处理后1.5h被取血、处死并留取肝脏,用RT-PCR检测肝脏组织TNF-αmRNA表达水平,用EMSA分析肝脏NF-κB结合活性,每组12只小鼠于LPS处理后8h取血、处死并留取肝脏,测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)活力,用TUNEL技术检测肝脏细胞凋亡,并对肝组织切片行常规HE染色。结果GalN/LPS共处理升高小鼠血清ALT活力;肝脏组织病理学检查发现,GalN/LPS组小鼠肝脏严重充血、坏死并伴有大量炎性细胞浸润,肝脏组织TUNEL阳性细胞增多;在GalN/LPS共处理72h内有90%小鼠发生死亡,所有死亡小鼠均伴有肝脏严重充血。PDTC预处理抑制GalN/LPS诱导的肝脏NF-κB激活和TNF-α表达,但PDTC预处理反而加重GalN/LPS引起的小鼠肝脏细胞凋亡、进一步升高血清ALT活力、加重肝脏充血和坏死并加速小鼠死亡。结论NF-κB抑制剂PDTC通过抑制肝脏实质细胞NF-κB介导的抗凋亡机制加重GalN/LPS诱导的小鼠急性凋亡性肝损伤。

NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷提高卵巢癌细胞顺铂化疗的敏感性

目的:探讨核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)提高人卵巢癌SKOV-3细胞对顺铂(cisplatin)化疗敏感性的作用及其可能的机制。方法:用不同浓度PDTC联合顺铂在不同时间作用于卵巢癌SKOV-3细胞,MTT法观察药物作用对细胞生长的抑制,Western Blotting分析胞质内NF-κB抑制蛋白α(inhibitor of NF-κB,I-κBα)、胞核P65蛋白的表达;流式细胞术检测细胞凋亡。结果:PDTC(10 ～40μmol/L)或顺铂(0.1 ～100μg/ml)均明显抑制SKOV-3细胞的生长(P<0.05或P<0.01),并引起细胞的凋亡;小剂量PDTC(2.5、5μmol/L)和顺铂(0.01μg/ml)联合应用与单用顺铂比较,可明显增加细胞生长抑制率和细胞凋亡率(均P<0.05)。单用顺铂组与对照组比较,胞质I-κBα蛋白减少而胞核P65蛋白增多,联合使用PDTC可逆转此现象。结论:小剂量PDTC可增强卵巢癌细胞对顺铂的敏感性,这一作用可能与PDTC增加I-κBα蛋白的表达而抑制P65蛋白进入核内有关。

对氨基苯甲磺酰吡咯烷的制备

以氯苄为主要原料制备了对氨基苯甲磺酰吡咯烷(Ⅰ)。以V〔w(HNO3)=95%的发烟硝酸〕∶V〔w(游离SO3)=22%的发烟硫酸〕=1∶1 3的混酸对氯苄进行硝化,反应温度为0℃,反应2h,得对硝基氯苄(Ⅱ),产率52%;Ⅱ用亚硫酸钠磺化,在V(甲醇)∶V(水)=1∶1 5的溶剂中,回流反应18h,得到对硝基苯甲磺酸钠(Ⅲ),产率96%;Ⅲ用PCl5氯化,得到对硝基苯甲磺酰氯(Ⅳ),产率78%;Ⅳ经吡咯烷氨解,反应物料比为n(Ⅳ)∶n(吡咯烷)=1∶2,以二氯甲烷为溶剂,常温反应10h,得对硝基苯甲磺酰吡咯烷(Ⅴ),产率达到98%;Ⅴ用铁-盐酸还原,在V(乙醇)∶V(水)=1∶1的溶剂中回流1h,得对氨基苯甲磺酰吡咯烷,经HPLC分析,精制后的产物纯度w(对氨基苯甲磺酰吡咯烷)=99 2%,产率85%,总产率32 4%。

吡咯烷二硫氨基甲酸对小鼠大剂量顺铂肾毒性损伤的防治作用

[目的]探讨抗氧化剂吡咯烷二硫氨基甲酸(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对大剂量顺铂(cisplatin,DDP)所致肾毒性损伤的防治作用。[方法]昆明种小鼠100只,雌雄各半,依体重随机分为DDP组,DDP+PDTC组,生理盐水(NS)对照组。DDP 12 mg/kg单次腹腔内注射,PDTC 50 mg/kg每日皮下注射1次,连用3 d,等量NS对照。每组取10只小鼠,观察并记录其用药后的反应、体重变化及存活时间;分别取对照组小鼠和DDP用药后24、48、72h的DDP组和DDP+PDTC组小鼠各10只,内眦静脉取血检测肾脏功能,然后剖腹取两侧肾脏,称重并计算肾系数,统计学分析。[结果]DDP用药后24 h,DDP用药组小鼠体重下降、肾系数增高;用药后48 h,小鼠血尿素氮、肌酐含量明显升高;用药72 h 66%小鼠死亡,与对照组小鼠比较差异具有显著性意义(P<0.01)。PDTC可明显减轻DDP所致小鼠的体重下降,并能有效预防DDP用药后小鼠血尿素氮和肌酐的升高,明显提高小鼠的生存率,与DDP用药组小鼠比较差异具有显著性意义(P<0.01)。[结论]PDTC可改善小鼠DDP用药的毒副作用,预防大剂量DDP所致的肾损伤。

体外循环中应用吡咯烷二硫氨基甲酸酯对犬心肌能量代谢的影响

目的观察抗氧化剂吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC)对犬体外循环(CPB)中心肌能量代谢的影响。方法12只犬随机分为对照组(C组,n=6)和PDTC组(P组,n=6),腹腔内注射戊巴比妥钠25mg/kg麻醉后建立CPB心肌缺血再灌注模型。P组于CPB前静脉注射PDTC30mg/kg,C组静脉注射等量生理盐水。分别于CPB前、阻断主动脉60min和开放主动脉60min时,取心肌测定腺苷酸(ATP、ADP、AMP、TAN、EC)、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)和线粒体肿胀度(MSD)。于CPB前、开放主动脉30min和开放主动脉60min时测定心率(HR)、平均动脉压(MAP)和心输出量(CO)。结果与CPB前比较,两组阻断升主动脉后ATP、TAN、EC含量及T-AOC均降低(P<0.01),MSD和MDA含量均升高;开放主动脉后C组ATP、TAN、EC含量及T-AOC均降低(P<0.01),MSD和MDA含量均升高(P<0.01);P组在开放主动脉60min时ATP、TAN、EC、MDA含量、T-AOC和MSD差异无统计学意义(P>0.05)。P组在阻断主动脉60min时和开放主动脉后ATP、TAN、EC含量及T-AOC均显著高于C组(P<0.01),MSD和MDA含量均显著低于C组(P<0.01)。P组在开放主动脉30min和开放主动脉60min时HR、MAP和CO较C组恢复迅速(P<0.01)。结论CPB可引起心肌能量代谢受损及恢复延迟,PDTC能够明显改善缺血心肌的能量代谢,保护心肌线粒体的结构,从而减轻心肌缺血再灌注损伤。