益气清热膏通过内质网应激途径保护氨基核苷嘌呤霉素大鼠模型足细胞损伤的机制研究

目的:研究益气清热膏对氨基核苷嘌呤霉素大鼠模型(PAN)蛋白尿水平、足细胞损伤的作用,并从调节内质网应激途径的主要分子伴侣:糖调节蛋白78(glucose regulated protein,GRP78)和GRP94的表达探讨益气清热膏的作用机制。方法:24只雄性Wistar大鼠按随机数字表分为假手术组、PAN模型组、益气清热膏组、蒙诺组,每组各6只。除假手术组予等量生理盐水外,其余各组均采用颈静脉插管注射嘌呤霉素氨基核苷(PA)(40 mg/kg)法制备PAN肾病大鼠模型。分别于造模前(0天)、造模后第9天和第14天检测大鼠24 h尿蛋白定量,第15天处死各组大鼠,取肾组织行电镜检查;Western Blot和实时定量逆转录多聚酶链反应(real time-PCR)法检测大鼠肾组织中GRP78和GRP94表达。结果:(1)与假手术组比较,益气清热膏可以降低造模后第9天和第14天大鼠24 h尿蛋白定量(P<0.01)。(2)超微病理:模型组出现广泛足突融合、消失,足突基底部肿胀,足细胞内线粒体肿胀,内皮窗孔凌乱。益气清热膏可以明显改善大鼠足细胞损伤。(3)real-time PCR法和Western blot检测肾皮质GRP78和GRP94的表达。模型组GRP78和GRP94的mRNA水平和蛋白水平显著升高,益气清热膏可以显著降低两者mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。结论:益气清热膏可显著降低PAN模型大鼠尿蛋白水平,修复足细胞损伤,其机制可能与益气清热膏降低肾组织GRP78和GRP94表达,从而抑制内质网应激,修复肾组织蛋白质合成有关,具体机制需要进一步研究证实。

单次静脉注射嘌呤霉素氨基核苷所致大鼠肾病模型的优化及评价

目的明确大鼠嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)肾病模型的适宜条件和病程演变,为该模型更好地用于肾病综合征、肾硬化发病机制及治疗的研究奠定基础.方法用6周龄雄性Wistar大鼠,一次性颈静脉注射PAN,分别以2、3、4、5、7、9 mg/100 g体重的剂量给药,以等量生理盐水作对照,测定2周内不同时间点的尿蛋白排泄量;另以9 mg/100 g体重的剂量给药,观察28周内尿蛋白、血清胆固醇和三酰甘油的变化及肾组织的病理改变.结果各个剂量的PAN均可引起不同程度的蛋白尿,约在10～14 d达到高峰,最高达(592.0±61.0)mg/24 h.28周连续观察的结果显示,PAN组动物的尿蛋白呈现典型的双相曲线,即第2周达到高峰,伴有血清胆固醇及三酰甘油的升高,此后逐渐降至接近正常,但自第12周起尿蛋白再度逐渐上升,第28周可达急性期峰值的一半.结论6周龄雄性Wistar大鼠,一次性颈静脉注射适量PAN可建立不同程度的肾病模型,成功率极高,方法简单,用药量省,动物价廉易得,且急性期发病快而周期短,不失为研究人类相应疾病的良好模型.

嘌呤霉素氨基核苷诱发肾病综合征大鼠模型的改良制作研究

目的:在嘌呤霉素氨基核苷模型经典制作方法的基础上进行多次尾静脉追加,制作更适合慢性肾脏病药理学研究的实验性大鼠模型。方法:Wistar大鼠42只,6周龄,雄性,随机分为对照组、颈静脉给药组和追加给药组,每组14只,各组分别于造模后第30天和第56天处死动物。颈静脉给药组行颈静脉插管术缓慢推注嘌呤霉素氨基核苷(40 mg/kg),追加给药组在颈静脉给药(40 mg/kg)后第13、16、19天再进行3次小剂量尾静脉追加(5 mg/kg)。对照组给等容积0.9%生理盐水。造模后第5、10、15、20、28、42、56天时检测24 h尿蛋白。实验结束时对比两组模型的肾脏组织病理改变和血清总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平。结果:颈静脉给药组在造模后第5天出现蛋白尿,10 d左右尿蛋白达到高峰(均值264.1 mg/24 h),随后尿蛋白急剧下降,约在第20天降至接近正常水平。追加给药组尿蛋白出现一个持续增高的平台期(均值维持在略高于150 mg/24 h的水平),末次追加后约10 d(颈静脉给药后第28天)开始缓慢下降,于第56天时接近正常。光镜所见:在30 d和56 d时,追加给药组大鼠的肾小球局灶节段性硬化和间质纤维化、炎性浸润等组织病理学指标较颈静脉给药组改变显著,其中两组之间间质纤维化的差异有统计学意义(P<0.05)。第30天血清生化结果显示,追加给药组大鼠TG、TC(P<0.05)、Scr(P<0.05)升高较明显,而颈静脉给药组变化则不明显。结论:对嘌呤霉素氨基核苷经典模型进行多次小剂量尾静脉追加,可以造成大鼠慢性肾脏病变。改良后的模型能够节约研究时限和研究成本,更适用于开展慢性肾脏病药理学研究。

单次尾静脉注射嘌呤霉素氨基核苷制作大鼠肾病模型的研究和评价

目的研究单次尾静脉注射嘌呤霉素氨基核苷(PAN)制作大鼠肾病模型的方法,临床病理过程及效果评价。方法成年雄性SD大鼠,体重200-250g。PAN 15mg/100g浓度溶解在0.9%氯化钠溶液中,从大鼠尾静脉注射(PAN组);对照组为等量生理盐水注射,测定不同时间点的血压、尿蛋白排泄量、观察尿蛋白、血清胆固醇和甘油三酯及血肌酐的变化及肾组织的病理改变。结果尿蛋白定量在PAN注射第8d达峰值,同时血浆蛋白明显降低,血胆固醇和甘油三酯明显增高;尿蛋白在第4周降至正常,然后又逐渐增高在14和20周时尿蛋白在PAN组显著高于对照组;肾小球硬化指数(GSI)在PAN组4、14和20周分别是6.21%、25.35%、30.49%,明显高于对照组。同时伴有收缩压在PAN组明显高于对照组,在注射后20周,PAN组血肌酐明显高于对照组。结论单次尾静脉注射PAN可成功地诱导肾病综合征(急性期)和慢性肾炎FSGS(慢性期)的肾病模型,成功率高,方法较简单,用药量少,克服传统方法用药剂量过小,造模失败或需重复注射使剂量过大而致动物死亡等缺点,是研究人类相关肾脏疾病的良好动物模型。

嘌呤霉素氨基核苷肾病大鼠模型的病理机制研究进展

嘌呤霉素氨基核苷（puromycin aminonucleoside,PAN）大鼠模型是研究微小病变肾病（minimal change nephrotic syndrome,MCNS）和局灶节段性肾小球硬化（focal segmental glomerulosclerosis,FSGS）病理损害的理想实验动物模型,该模型最主要的临床特征为大量蛋白尿。对于PAN导致肾脏损害的机制目前尚不十分清楚,然而。

黄葵胶囊对氨基核苷嘌呤霉素诱导的大鼠慢性肾病的作用研究

目的:观察黄葵胶囊对氨基核苷嘌呤霉素(PAN)诱导的大鼠慢性肾病的作用。方法:Wistar大鼠雄性,40只,130～140g,SPF级,随机分为假手术组、模型组、蒙诺组、黄葵胶囊组。除假手术组外,各组均行颈静脉插管术缓慢推注PAN(40mg/kg体重)后,再进行3次小剂量尾静脉追加(5mg/kg体重)诱导大鼠慢性肾病,假手术组同样行颈静脉插管术和尾静脉追加给等容积0.9%生理盐水,观察56d。颈静脉给药后第5、10、15、20、28、42、56天时检测24h尿蛋白,第57天时处死动物检测血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(Alb)、三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平;对肾组织进行病理学观察并对损害程度进行评分;采用免疫组化法,观察黄葵胶囊对α-SMA蛋白在肾脏组织表达的影响;取脾脏、胸腺和睾丸,取脏器指数观察该药对免疫系统、生殖系统的影响。结果:黄葵胶囊对PAN诱导的尿蛋白大量排泄有降低趋势,对肾功能的损伤有所改善,对肾小球硬化有显著改善作用(P<0.01),对α-SMA蛋白在肾脏组织表达有所降低,脾脏、胸腺和睾丸指数没有变化。结论:黄葵胶囊对PAN诱导的大鼠慢性肾病有一定的治疗作用,但对免疫系统、生殖系统未见毒副作用。

甘西鼠尾草总酚酸提取物抗嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞氧化应激损伤

目的研究甘西鼠尾草总酚酸提取物(SPE)在体内和体外对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)肾病大鼠足细胞以及PAN诱导小鼠足细胞氧化应激损伤的作用。方法 (1)建立PAN肾病大鼠动物模型,给予SPE和他克莫司干预,分别在第5、10、15、21天留取肾组织标本,WT1染色计数足细胞数目,免疫荧光观察8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)荧光强度。(2)体外采用PAN致足细胞损伤模型,PAN作用小鼠足细胞24h,分别加入含SPE、丹酚酸B(SalB)、迷迭香酸(RA)及他克莫司的培养基培养6、12、24、48h,观察足细胞骨架相关蛋白F-actin的表达,流式细胞仪分析细胞内活性氧(ROS)荧光强度。结果 (1)肾小球WT1细胞计数结果显示,PAN组第5天时足细胞数已开始下降,第15天达(14.4±0.7)个/肾小球切面,较正常组(37.2±1.5)个/肾小球切面减少(P<0.05),SPE组与阳性对照组(他克莫司组)各时间点足细胞数量高于PAN组;第15天时,阳性对照组肾小球WT1细胞计数与SPE高剂量组较为接近(P>0.05)。第5天时PAN组大鼠肾组织8-OHdG荧光强度较正常组增强,第10天上升至高峰,而后开始减弱,第15天时仍高于正常组;给予药物干预后,大鼠肾组织的8-OHdG荧光强度降低,其中阳性对照组与SPE高剂量组8-OHdG荧光强度较为接近。(2)体外研究发现,PAN作用24h后,F-actin几乎完全解聚,少数细胞尚有残存的被切断的丝状结构,给予SPE、SalB、RA及他克莫司治疗后,PAN诱导的足细胞损伤明显减弱,细胞内重新出现极性分布的微丝。与正常组相比,PAN作用小鼠足细胞24h后ROS荧光强度增加(P<0.05)。给予药物干预后足细胞内ROS荧光强度降低,24hSPE低剂量组、SalB高剂量组和RA高剂量组与阳性对照组足细胞内ROS的荧光强度降低程度相近(P>0.05),24hSalB降低足细胞内ROS荧光强度效果优于RA,且与药物剂量呈正相关。结论本研究从体内及体外证实,SPE对PAN所致足细胞氧化应激损伤具有保护作用。

不规则趋化蛋白在嘌呤霉素氨基核苷肾病模型中的表达

目的 :检测CX3C族趋化因子不规则趋化蛋白 (fractalkine,Fkn)在嘌呤霉素氨基核苷 (puromycinaminonucleoside,PAN)肾病中的表达 ,进一步阐明肾病的发病机制 ,为肾病的治疗提供新的靶点。 方法 :从Wistar大鼠的颈静脉给予PAN ,对照组给予等量生理盐水 ,在不同的时间点观察PAN引起的尿蛋白改变和肾脏炎性细胞浸润情况 ,并于第 1、3、5、7、1 0天处死动物 ,制作肾组织匀浆和冰冻切片 ,分别用于RT PCR和免疫组化研究 ,观察在PAN注射的不同时间点肾组织中FknmRNA和蛋白质的表达情况 ;同时在体外用白介素 1 β(IL 1 β)刺激培养的肾小管上皮细胞观察Fkn的表达。 结果 :PAN注射后第 5天尿蛋白开始升高 ,持续增加直至第 1 0天 ,同时伴有肾间质中CD4+ T细胞 ,CD8+ T细胞和单核 /巨噬细胞的增加。RT PCR和免疫组化均显示Fkn在第 7、第 1 0天表达升高 ,第 3天主要分布在肾小球 ,以后主要在肾小管上皮细胞表达。用IL 1 β刺激后 1h体外培养的肾小管上皮细胞即开始表达FknmRNA ,在 4～ 6h达到高峰。 结论 :本文首次观察到Fkn在PAN肾病模型中表达增高 ,其特征为先出现于肾小球 ,后移行至肾小管 ,并早于肾组织中白细胞浸润及蛋白尿的发生。提示Fkn可能是肾病发病和进展过程中的另一重要的相关分子。

甘西鼠尾草总酚酸提取物对嘌呤霉素氨基核苷诱导损伤的足细胞中Toll样受体4表达的影响

目的:探讨SPE及其单体对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)诱导的损伤足细胞中Toll样受体4(TLR4)通路表达的影响。方法:足细胞与含有甘西鼠尾草总酚酸提取物(SPE)、迷迭香酸(RA)、丹酚酸B(SalB)、RA+SalB混合及他克莫司的完全培养液预先孵育30 min,再加入PAN(100μg/ml)继续作用24 h,观察足细胞骨架结构F-actin变化,western blot及半定量RT-PCR检测足细胞中TLR4、myd88、phosphor-NF-κB(pp65)在蛋白及mRNA水平的表达量变化。结果:(1)PAN作用24 h后,足细胞骨架蛋白F-actin明显损伤,微丝解聚、胞体回缩,少数细胞尚存排列紊乱的丝状结构,而提前给予保护药物SPE、SalB、RA、SalB+RA混合药物及他克莫司组的足细胞损伤明显减弱。(2)western blot数据显示,PAN诱导的损伤足细胞中TLR4、myd88及pp65蛋白的表达与正常组相比均有明显上调(P<0.05);保护药物组:TLR4蛋白表达较模型组有明显下降(P<0.05);My D88蛋白表达除SalB高剂量组及SalB+RA低剂量组较模型组无显著下降外,其余均能明显下调其表达量(P<0.05);pp65在保护药物组中的表达均较模型对照组低(P<0.05)。(3)半定量RT-PCR结果显示,模型对照组中TLR4、My D88及NF-κB的mRNA表达量明显高于正常对照组;保护药物组中:TLR4 mRNA表达量在各药物处理组中均明显低于PAN组(P<0.05),其中的SPE高、低剂量组,RA高、低剂量组,SalB+RA高剂量组与正常组相接近(P>0.05);My D88 mRNA表达量在SPE及其单体处理后均有明显下调(P<0.05);NF-κB mRNA表达量除SalB高剂量组中无明显下调外(P>0.05),其余各保护药物组均下调(P<0.05)。结论:SPE及其活性单体对PAN诱导损伤足细胞的保护作用机制可能部分通过抑制TLR4信号相关蛋白表达来实现;甘西鼠尾草总酚酸提取物中的单体迷迭香酸对TLR4及其下游信号分子My D88、NF-κB的抑制作用优于丹酚酸B和混合给药组。

Podocin在大鼠氨基核苷嘌呤霉素肾病中的表达与分布(英文)

目的 观察 podocin在大鼠氨基核苷嘌呤霉素肾病模型中的表达和分布的改变 ,探讨其在蛋白尿发生中的可能作用。方法 通过一次性腹腔注射氨基核苷嘌呤霉素 (PAN)建立大鼠肾病模型 ,分别于注射后 1,3,10 ,2 0d处死大鼠 ,每次 6只。对照组注射等量的生理盐水。应用光镜、电镜观察肾脏病理改变 ,应用免疫荧光染色结合图像分析、半定量RT PCR的方法 ,检测肾组织的podocin的表达。结果 ①PAN注射后第 3天 ,大鼠 2 4h尿蛋白的排泄量逐渐增加 ,第 10天达高峰 ,较对照组差异有显著性 (P <0 .0 1) ;第 2 0天 ,模型组大鼠 2 4h尿蛋白排泄逐渐恢复 ,但仍高于对照组 (P <0 .0 5 )。②PAN肾病模型第 3、10天 ,透射电镜显示足细胞足突融合。③与对照组比较 ,肾小球podocin的表达在PAN注射后第 1天出现下调 ,第 3、10天显著下调 ,第 2 0天podocin的表达逐渐恢复 ,但仍低于对照组 (P <0 .0 1)。④Podocin在正常大鼠肾小球沿毛细血管襻 ,呈均匀连续的线样分布。肾病模型第 1天 podocin的分布变得不均匀 ,局部呈颗粒状分布 ;第 3天 podocin的分布呈现弥散性的颗粒状 ;第 10天podocin呈粗大的颗粒状分布。第 2 0天podocin的分布逐渐恢复为线样。⑤肾病模型第 1、3、10天PodocinmRNA水平较对照组表达略有增强 ,第 2

甘西鼠尾草总酚酸提取物对嘌呤霉素氨基核苷大鼠足细胞损伤的保护作用

目的:研究甘西鼠尾草总酚酸提取物(SPE)对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)大鼠足细胞损伤的保护作用。方法:建立PAN肾病大鼠动物模型,给予他克莫司和SPE干预治疗,分别在第5、10、15、21天留取血尿标本,同时采用肾组织病理观察大鼠肾小球组织形态学改变,透射电镜观察肾小球足细胞超微结构改变,并分别从mRNA和蛋白水平分析足细胞裂孔膜蛋白的表达水平。结果:(1)除正常组外,各组大鼠尿蛋白定量第5天时已明显升高,第10天上升至高峰,而后开始下降,第15天时仍明显高于正常。给予药物干预后,可降低大鼠的尿蛋白排泄量,且阳性对照组与SPE高剂量组降低尿蛋白的程度较为接近。(2)光镜下未见肾小球形态异常。电镜结果显示第5天时已出现肾小球足细胞足突融合,第10天时足突融合最明显,随后开始恢复,第21天基本恢复正常;SPE高剂量组和阳性对照组的足突融合程度较轻。(3)阳性对照组和SPE组大鼠的nephrin、podocin蛋白表达水平高于模型对照组。第5天时各组大鼠蛋白表达低于正常,第10天时下降更为明显,第15天蛋白表达已开始回升,至第21天时恢复至正常水平。阳性对照组和SPE高剂量组大鼠蛋白表达均明显高于其余三组。(4)大鼠nephrin、podocin的mRNA表达量在第5天时已下降,至第10天明显下降至最低水平,而后开始上升,直至第21天恢复至正常水平。阳性对照组和SPE高剂量组的表达水平明显高于其他各组(P<0.05)。结论:SPE对PAN大鼠肾小球足细胞损伤有一定的保护作用,可降低PAN大鼠蛋白尿。

嘌呤霉素氨基核苷肾病肾脏中RANK-RANKL的表达

目的探讨RANK-RANKL在嘌呤霉素氨基核苷肾病(PAN)大鼠动物模型肾脏中的表达。方法 36只SD大鼠被分配为PAN组及对照组,单次静脉注射嘌呤霉素氨基核苷(PA,100 mg/kg)制作PAN动物模型。大鼠于第3、7、14天检测蛋白尿及血肌酐。检测肾脏病理,并分析RANK和RANKL变化。结果(1)在PAN SD大鼠动物模型中,第3、7、14天时蛋白尿与对照组比较有显著差别,第7天达到高峰;(2)用Western blotting及RT-PCR定量检测发现RANK-RANKL蛋白及mRNA在PAN模型组高于对照组;(3)用激光共聚焦技术显示足细胞标记蛋白Synaptopodin与RANK完全重合,提示RANK主要在足细胞表达;(4)免疫电镜发现RANK在PAN模型组明显增多,且主要定位于足突的顶部胞膜和胞质内。结论在PAN SD大鼠动物模型足细胞异常表达RANK-RANKL,提示RANK及RANKL在足细胞损伤中可能发挥重要作用。

嘌呤霉素氨基核苷(PAN)肾病中文名称之商榷

给大鼠注射puromycin aminonucleoside(PAN)所建立的肾病模型应该称为嘌呤霉素氨基核苷肾病(PAN肾病),但在国内却多被误为“嘌呤霉素肾病”。本文就嘌呤霉素与嘌呤霉素氨基核苷的区别、嘌呤霉素氨基核苷肾病英文缩写的不同解读等予以辨析,并强调纠正这一流传多年的错误有助于开展国际学术交流。

Rac1及Cdc42在肾上腺髓质肽(AM)缓解嘌呤霉素氨基核苷(PAN)所诱导足细胞损伤中作用机制的初步探讨

目的观察肾上腺髓质肽(adrenomedullin,AM)对嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)所诱导受损足细胞的作用以及Rac1/Cdc42表达变化,初步探讨其可能机制。方法将小鼠肾足细胞株分为对照组、PAN处理组(100μg/mL)、PAN联合AM处理组(10-7mol/L)及PAN联合AM和蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89(10-6mol/L)处理组。经一次性腹腔注射PAN(150 mg/kg)建立大鼠足细胞损伤模型,每天经尾静脉注射AM蛋白(66μg/kg)进行干预。SDS-PAGE法检测尿蛋白水平,电镜观察足细胞足突宽度变化,双重免疫荧光染色及/或Western blot观察足细胞特异性骨架蛋白(synaptopodin、nephrin)、Rac1及Cdc42的蛋白表达水平,实时定量PCR(qRT-PCR)检测synaptopodin、nephrin的mRNA表达,谷胱甘肽巯基转移酶-拉下实验(GST-pull down assay)法检测Rac1及Cdc42活性变化。结果PAN在体内、外均显著降低synaptopodin、nephrin的蛋白或/及mRNA表达水平,且显著升高desmin表达;大鼠PAN肾病模型的尿蛋白水平显著升高,足突宽度显著增加;PAN显著降低Rac1、Cdc42总蛋白及活性水平。上述由PAN所介导的效应被AM显著抑制;H89显著阻断AM的体外作用。结论AM主要通过PKA通路促进受损足细胞的修复,该保护机制与AM调控Rac1/Cdc42表达密切相关。

通过测量肾小球面积评估嘌呤霉素肾炎大鼠肾小球硬化的过程

目的研究不同时间点嘌呤霉素氨基核苷(PAN)大鼠肾病模型的肾小球面积,及其与肾小球硬化指数之间的关系,评估肾小球硬化的进展过程。方法成年雄性SD大鼠,体重200～250 g。PAN组大鼠尾静脉注射PAN,对照组注射等量生理盐水。成模后于4、14及20周处死大鼠,取其肾脏,石蜡包埋,切片,高倍镜下观察拍片,测定肾小球面积及硬化指数,进行统计学分析并观察肾脏病理组织变化。结果 PAN组在4周时肾小球面积与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);14周时,PAN组明显>正常对照组(P<0.01);但是在20周时PAN组肾小球面积<对照组(P<0.001),且20周时肾小球硬化指数与肾小球面积之间的相关系数为-0.82,呈强负相关关系。结论肾小球面积测定在评估PAN诱导肾炎肾小球硬化的发展中起重要作用。疾病的早期小球面积代偿性增大,随着疾病的进展、肾小球的面积随着硬化程度的增加而减小,与肾小球硬化指数存在强负相关关系。因此,观察肾小球面积的改变可以反映肾小球疾病进展及肾小球硬化的典型过程。

血管紧张素转化酶抑制剂对嘌呤霉素肾炎模型治疗及预防肾小球硬化的作用

目的研究血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）对嘌呤霉素氨基核苷（PAN）大鼠肾病模型的干预作用,评估ACEI对肾小球肾炎的治疗和延缓肾小球硬化的作用。方法分对照组（n=5）,PAN组（n=5）和PAN＋ACEI组（n=5）3组。选用成年雄性SD大鼠,体重200~250 g。大鼠尾静脉注射PAN 15 mg·kg-1（PAN组）,对照组用同法注射等量生理盐水,PAN组于成模后给予ACEI类药物替莫普利（8 mg·kg-1·d-1）灌胃为PAN＋ACEI治疗组,测定3组4、8 d与4、14及20周的血压、24 h尿蛋白定量,并观察尿蛋白、收缩压及肾组织的病理改变。结果 PAN组及PAN＋ACEI组尿蛋白定量成模后第8天达峰值,在第4周自动降至正常。与对照组比较,PAN组尿蛋白在14周[（44.01±11.31）与（4.34±1.13）mg·24 h-1,P〈0.05]和20周[（100.77±20.92）与（5.47±1.86）mg·24 h-1,P〈0.05]时又逐渐增高,而PAN＋ACEI组与PAN组比较在14周和20周的尿蛋白定量明显降低[（6.27±0.03）与（5.38±0.1）mg·24 h-1,P〈0.05];肾小球硬化指数（GSI）在4、14及20周时PAN＋ACEI组均较PAN组明显减低[（1.55±0.17）与（6.21±0.45）、（4.09±0.56）与（25.34±7.19）、（5.04±0.84）与（30.49±4.37）%,P〈0.05]。同时,收缩压在PAN＋ACEI组明显低于PAN组[（102.8±4.36）与（131.40±3.99）、（113.3±6.11）与（143.43±4.59）和（105.48±6.03）与（133.56±8.65）mm Hg,P〈0.05]。结论 ACEI类药物替莫普利可以降低肾小球肾炎引起的蛋白尿,降低肾性高血压,减少肾小球硬化,从而延缓肾功能的恶化。

Podocin在大鼠微小病变肾病模型中的表达和分布

目的 :观察podocin在大鼠氨基核苷嘌呤霉素 (PAN)肾病模型中的表达和分布 ,探讨其在蛋白尿发生中的可能作用。 方法 :建立大鼠PAN肾病模型 ,应用光镜、电镜观察肾脏病理改变 ,免疫荧光染色图像分析以及半定量RT PCR的方法 ,分别检测不同时间点 (1、3、1 0、2 0天 )大鼠肾组织中podocin的表达。 结果 :①PAN注射后第 1、3、1 0、2 0天大鼠肾小球podocin的表达强度分别为 :4 5 0 3± 5 1 0、33 35± 6 4 1、1 3 5 8± 3 73、4 2 34± 6 6 5 ,显著低于正常对照组 (5 4 95± 6 2 5 ,P <0 0 1 ) ,其中第 1 0天的表达强度最低。podocin的表达与尿蛋白排泄量呈负相关 (r=- 0 786 ,P <0 0 1 ) ;②podocin在正常大鼠肾小球沿毛细血管袢呈均匀连续的线样分布 ;模型第 1天podocin在肾小球局部呈颗粒状分布 ;第 3天呈弥散性的颗粒状分布 ;第 1 0天呈粗大的颗粒状分布 ;第 2 0天podocin的分布逐渐恢复为线样 ;③PAN注射后第 1、3、1 0、2 0天大鼠肾小球podocinmRNA的表达分别为正常对照组的 1 2、1 5和 1 4倍 ,第 2 0天大鼠肾小球podocinmRNA水平恢复正常。 结论