胶束电动色谱法测定蛋白质表面自由氨基

建立了一种毛细管电泳测定蛋白质分子表面自由氨基的方法.配制蛋白质样品溶液,分取5等份,分别加入过量的不同物质的量的芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺(FMOC-OSu)溶液,室温下反应30min后,用胶束电动色谱测定蛋白质溶液中剩余的FMOC-OSu的峰面积.以FMOC-OSu的峰面积对加入的FMOC-OSu的物质的量做校准曲线.该直线外推到峰面积为0时所对应的FMOC-OSu物质的量即为参加反应的蛋白质表面的氨基的物质的量.因此可以计算出蛋白质表面的氨基数目.用甘氨酸检验了本方法的可靠性.以牛血清白蛋白为蛋白质模型,测得其表面氨基数为32,和文献报道值一致.该方法简单易行并且反应条件温和,可用于测定蛋白质修饰过程中的平均修饰度.

高邮湖麦穗鱼酶解工艺的优化研究

以高邮湖麦穗鱼为原材料,利用中性蛋白酶对其进行水解处理,以水解液中氨基态氮的含量(AN)为指标,通过单因素和正交试验,研究加酶量(ES)、温度、pH值和酶解时间对AN的影响规律。结果表明:最佳的酶解条件为加酶量3000 U/g、温度45℃、pH7.0、时间5 h。该结果为高邮湖小杂鱼酱及相关制品的开发与利用提供理论依据和数据支撑。