血清C肽、糖化血红蛋白与N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶联合检验在诊断2型糖尿病早期肾损伤中的应用

目的探讨血清C肽、糖化血红蛋白与N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶联合检验在诊断2型糖尿病早期肾损伤中的应用。方法选择2018年1月~2019年6月我院收治的50例2型糖尿病早期肾损伤患者作为为研究组,另选取同时间段收治的50例单纯2型糖尿病患者作为对照1组,另选取同时间段来我院进行常规体检的50例自愿者作为对照2组。三组均接受血清C肽、糖化血红蛋白与N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶联合检验诊断,并进行比较分析。结果研究组的糖尿病病程长于对照1组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组的空腹血糖、尿微量白蛋白/肌酐比值水平均高于对照1组、对照2组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组的糖化血红蛋白、N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶水平均高于对照1组、对照2组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组的血清C肽水平低于对照1组、对照2组,差异有统计学意义(P<0.05);对照1组的空腹血糖、尿微量白蛋白/肌酐比值水平均高于对照2组,差异有统计学意义(P<0.05);对照1组的糖化血红蛋白、N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶水平均高于对照2组,差异有统计学意义(P<0.05);对照1组的血清C肽水平低于对照2组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在临床检查诊断糖尿病早期肾损伤过程中,应用血清C肽、糖化血红蛋白与N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶联合检验方法可以起到有效作用,能够提供准确检查诊断参考依据,具有重要应用价值。

不同海拔高度高原红细胞增多症患者尿白蛋白和N-乙酰-β-D-氨基葡糖苷酶的排泄变化及其机理的探讨

目的 :研究不同海拔高度高原红细胞增多症 (HAPC)患者尿白蛋白 (ALB)和N -乙酰 - β -D -氨基葡糖苷酶 (NAG)的排泄变化及其与红细胞生物物理特性的关系。方法 :对两个海拔高度 (刚察县 330 0m、甘德县4 0 80m)HAPC患者检测了尿ALB、NAG、红细胞滤过指数 (EFl)、红细胞超氧化物歧化酶 (SOD)活性和血浆丙二醛(MDA)含量。结果 :HAPC患者尿ALB、NAG、血浆MDA含量和EFI明显高于同海拔健康组 ,而红细胞SOD活性明显低于同海拔健康组 ;随海拔升高 ,HAPC患者尿ALB和NAG排泄量、血浆MDA含量和EFI明显升高 ,相关和多因素逐步回归分析表明 ,尿ALB和NAG与EFI呈正相关 ,而与血浆MDA含量、红细胞SOD、血色素、红细胞、红细胞压积水平无明显相关。结论 :红细胞变形能力 (ED)对尿ALB和NAG存在独立影响 ,HAPC患者机体脂质过氧化反应增强 ,可能导致ED降低 ,造成肾内微循环障碍 ,可能是尿ALB和NAG含量产生增多的病理生理机制之一。

N-乙酰-β-D氨基葡糖苷酶在肾病早查中的临床意义

目的探讨N-乙酰-β-D氨基葡糖苷酶(NAG)检测在肾病早查中的临床意义。方法分析28例IgA肾病患者的临床及病理资料,探讨肾小球及间质病理损害程度与NAG的关系。结果肾小管间质损害情况:肾小管间质损害轻度者占46.43%,中重度者占32.14%,无肾小管间质损害者21.43%。肾小管间质损害与NAG的关系:肾小管间质损害中、重度者尿NAG酶(5.141±1.821)U/(mmol.cr);小管间质损害轻度者尿NAG酶(1.659±1.485)U/(mmol.cr);无肾小管间质损害者尿NAG酶(1.447±1.816)U/(mmol.cr)。小管间质中重度损害者同其他两组比较,其尿NAG酶有显著统计学差异,P<0.05。结论 IgA肾病常合并小管间质损害,肾小管功能中尿NAG酶改变与肾脏小管间质损害程度成对应关系。

糖尿病患者血尿酸、肌酐及尿N-乙酰-β-D氨基葡糖苷酶的相关性研究

目的探讨糖尿病(DM)患者血尿酸、血肌酐、尿N-乙酰-β-D氨基葡糖苷酶(NAG)测定的相关性。方法检测62例糖尿病患者[尿微量白蛋白正常(尿微量白蛋白<30mg/24h)41例(DM-1组)、升高(30mg/24h<尿微量白蛋白<300mg/24h)21例(DM-2组)]血生化(尿酸、肌酐)指标及尿NAG水平,并对尿NAG与血生化指标(尿酸、肌酐)的相关性进行分析。结果 DM-2组尿NAG均显著高于DM-1组(P<0.01),其升高与血尿酸呈正相关,与血肌酐无明显相关性。结论尿NAG在早期预测与筛选糖尿病肾病(DN)方面灵敏度高,是DN的早期诊断有价值的指标。

重症肌无力患者胸腺组织中天冬氨酰氨基葡糖苷酶基因mR-NA的表达

目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺组织中天冬氨酰氨基葡糖苷酶(AGA)基因mRNA的表达情况。方法:利用荧光定量聚合酶链反应方法检测比较39例不同临床分型MG患者和10例正常人胸腺组织的AGAmR-NA表达情况。结果:MG患者和正常人胸腺组织中AGA基因mRNA的表达水平分别为0.67±0.14和0.61±0.08,差异有统计学意义(P<0.05)。不同临床分型的MG患者之间胸腺组织中AGAmRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MG患者胸腺组织中AGA基因的转录水平表达异常,其可能是MG的致病基因或相关基因。

链球菌gordonii FSS2 N-乙酰氨基葡糖苷酶基因的克隆和表达

目的 :N -乙酰氨基葡糖苷酶 (N -acetylglucosaminidase)是链球菌gordonii六种胞外糖苷酶之一。为研究该酶 ,克隆和表达该基因片段。方法 :将链球菌gordoniiFSS2染色体DNA分离提纯 ,用限制性内切酶Sau 3AI不完全酶切 ,产生长度不等的随机片段 ,琼脂糖凝胶电泳分离和回收 2 - 8kpb的随机片段 ,然后与BamHI线性化及 5’端脱磷处理的载体pUC 18连接 ,转化大肠杆菌XL1-Blue;β—半乳糖苷酶筛选系统及酶切 ,检测插入片段。根据N -乙酰氨基葡糖苷酶与特异人工底物X -GlucNac反应 ,有色物质X被释放原理 ,筛选表达克隆。结果 :共有 6×10 6个转化子 ,约 5 0 %转化子含有插入片段 ;检测到 8个N—乙酰氨基葡糖苷酶表达克隆。结论 :所构建的基因组文库具有完整性 ,该基因在大肠杆菌XL1-Blue中成功表达。

用中国仓鼠卵巢细胞构建内切-β-N-乙酰氨基葡糖苷酶筛选系统

糖苷水解酶85家族的内切-β-N-乙酰氨基葡糖苷酶具有糖基转移酶活性,利用该类酶,可以合成特定结构N-糖链修饰的糖基化复合物。为构建糖基转移酶筛选系统,将N-乙酰氨基葡萄糖转移酶的跨膜定位区域与绿色荧光蛋白融合表达,成功把带有天冬酰胺连接糖基化位点的单体增强绿色荧光蛋白定位到中国仓鼠卵巢细胞的高尔基体中。流式细胞仪分析显示,融合了定位区域后,绿色荧光蛋白仍可以发出荧光,且在引入糖基化位点后,细胞荧光强度约降低10倍。经衣霉素处理,细胞糖基化被抑制,同时荧光强度减弱。此细胞株荧光强度对于糖基化水平的依赖性表明其在糖基转移酶的进化筛选方面的应用潜力。

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的基质合成及其动力学法测定

本文应用本室合成的底物2-氯-4-硝基苯基N-乙酰-β-D 氨基葡萄糖苷(CNP-NAG),用动力学法测定N-乙酰-β-D 氨基葡萄糖苷酶(NAG),酶促反应最适pH 值为4.8～5.2,Km 为0.66～0.70mmol/L。用N.N-二甲基甲酰胺和乙二醇等量混合液使基质浓度达到4mmol/L,同时提高了反应的灵敏度和基质液的稳定性.用该法测定不受尿色的干扰.批内CV<3.57%,批间CV>4.04%,与PNP 终点法比较相关系数为0.933,100例尿参考值调查为0.75～23.9u/g.Cr。

血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C和尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶测定在糖尿病肾损害治疗监测中的作用

目的探讨血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cystatin C)和尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)测定在糖尿病肾损害治疗监测中的作用。方法测定64例糖尿病患者应用血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)或血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ATIIRA)治疗前后血清Cystatin C、肌酐(Scr)、尿微量清蛋白(mAlb)、NAG,其中微量清蛋白尿期患者36例,临床蛋白尿期患者28例,在HITACHI7060自动生化分析仪上,采用乳胶颗粒增强免疫比浊法测定血清Cystatin C,终点比色法测定尿NAG,免疫透射比浊法测定尿mAlb,酶法测定血、尿肌酐。结果36例微量清蛋白尿期患者治疗6周后尿mAlb、血清CystatinC与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05),平均下降68.9%和22.0%,而Scr、尿NAG与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05);28例临床蛋白尿期患者治疗后血清CystatinC、Scr、尿mAlb、NAG与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05),平均下降25.6%、17.2%、40.7%和19.5%。血清Cystatin C与Scr的变化率呈显著正相关(r=0.796 3,P<0.01),尿NAG与Scr和血清Cystatin C的变化率不相关(r=0.306 5,P>0.05和r=0.269 6,P>0.05)。结论血清CystatinC可作为糖尿病早期肾损害患者治疗的一项肾功能监测指标;对临床蛋白尿期DN患者,用血清Cystatin C作为治疗监测和疗效评价的指标,比用Scr更加敏感,尿NAG可作为一项独立指标用于有尿NAG活性增高的DN患者治疗效果的观察和评价。

尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶对监测早期肾功能损害的价值

目的探讨尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)监测早期肾功能损坏的价值。方法根据内生肌酐清除率(Ccr)将120例肾病患者分为A、B两组,A组58例,其Ccr≥80 mL/min。B组62例,其Ccr<80 mL/min。分别检查A、B两组和50例健康人的尿NAG(U/mmol Cr),并与其尿微量清蛋白〔mAlb(mg/mmol Cr)〕和血肌酐(Cr)含量进行比较。结果A、B两组肾病患者尿NAG、mAlb检测结果显著高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),B组患者尿NAG、mAlb检测结果显著高于A组,差异有统计学意义(P<0.05);在A、B两组中,尿NAG的阳性率显著高于尿mAlb和血Cr,差异也有统计学意义(P<0.05);肾病患者尿NAG活性与Ccr具有良好的相关性,差异有统计学意义(r=0.876,P<0.05)。结论尿NAG在肾病早期有较高的检出率,可作为监测早期肾功能损害的敏感指标。

尿N-乙酰-β-D-氨基-葡萄糖苷酶及尿β_2微球蛋白在过敏性紫癜肾损害早期诊断中的意义

目的探讨联合检测尿N-乙酰-β-D-氨基-葡萄糖苷酶(NAG)及尿β2微球蛋白(β2-MG)在过敏性紫癜(AP)肾损害早期诊断中的意义。方法以双夹心酶免疫法及放射免疫法检测94例AP患儿尿NAG、β2-MG水平。结果94例AP患儿中15例尿NAG异常,12例尿β2微球蛋白异常,5例尿NAG、β2微球蛋白均异常,尿NAG异常阳性率为15.96%(15/94),尿β2微球蛋白异常阳性率为12.78%(12/94);尿NAG及尿β2-MG异常的联合阳性率为28.72%(27/94),以上阳性率间两两比较:尿NAG与尿β2-MG阳性率无差异(X2=0.39P>0.05),而两者联合阳性率高于尿NAG(X2=4.41P<0.05),也高于尿β2-MG(X2=7.28P<0.05)。结论尿NAG及尿β2-MG均可作为早期诊断AP肾损害的尿标志性蛋白;应用两者联合指标,可提高其早期诊断阳性率。

血清N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在肝病诊断中的应用

目的：观察血清Ｎ乙酰βＤ氨基葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）活性对临床上几种肝病诊断的价值。方法：对１０３例肝病患者进行血清ＮＡＧ活性和血清总胆汁酸（ＴＢＡ）水平测定，并与传统肝功能试验做比较；选取１３０例健康体检者做血清ＮＡＧ活性参考值统计。所有项目均采用日立７１５０型自动生化分析仪测定。结果：健康人血清ＮＡＧ测值呈正偏态分布，以Ｐ９５作参考值上限为２１５Ｕ／Ｌ。血清ＮＡＧ在肝癌和酒精性肝病中阳性率分别为８００％和７００％，ＴＢＡ在肝硬变和急性肝炎中阳性率分别为９１６％和６８８％。结论：血清ＮＡＧ活性测定不仅对临床各种肝病的诊断有价值，而且其与血清ＴＢＡ同时检测能更有效地对急性酒精中毒和肝硬变进行早期鉴别诊断。

高原红细胞增多症患者尿白蛋白和N-乙酰-β-D-氨基葡糖苷酶的排泄变化

目的:对海拔高度3 300m(刚察县)高原红细胞增多症(HAPC)患者尿白蛋白(ALB)和N-乙酰-β-D-氨基葡糖苷酶(NAG)的排泄变化进行了观察并探讨了可能的机制变化。方法:对海拔高度3 300m HAPC患者38例和健康人115例分别采用尿蛋白酶标免疫法、邻苯三酚自氧化法、TBA和酶法检测了尿ALB、NAG、红细胞滤过指数(EFl)、红细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性和血浆丙二醛(MDA)含量。结果:HAPC患者尿ALB、NAG、血浆MDA含量和EFI明显高于同海拔健康组,而红细胞SOD活性明显低于同海拔健康组;相关和多因素逐步回归分析表明,尿ALB和NAG与EFI呈正相关,而与血浆MDA含量、红细胞SOD、血红蛋白、红细胞、红细胞压积水平无明显相关。结论:红细胞变形能力(ED)对尿ALB和NAG存在独立影响,HAPC患者机体脂质过氧化反应增强,可能导致ED降低,造成肾内微循环障碍,可能是尿ALB和NAG含量产生增多的病理生理机制之一。

自制尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶与尿微量白蛋白两项复合室内质量控制物质量评价

目的研制出1种包含尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)和尿微量白蛋白(UMA)2项复合室内质量控制物,并初步评价其质量。方法收集临床肾病患者新鲜尿液,经过一定的处理,研制出1种包含尿NAG和UMA 2个项目的复合室内质量控制物;并对研制的质量控制物进行不同保存温度下的稳定性和瓶间均一性检测。结果在各保存温度下,尿NAG的稳定天数:4℃12 d,-20℃>300 d,-80℃>365 d;UMA的稳定天数:4℃27 d,-20℃>300 d,-80℃>365 d;各个保存阶段测得瓶间均一性良好。结论本次研制的尿NAG和UMA 2项复合室内质量控制物在合适的保存条件下,具备较好的稳定性与瓶间均一性,符合临床使用要求。

尿中N—乙酰—β—D氨基葡萄糖苷酶测定方法探讨

我们用国内合成的对硝基苯—N乙酰—β—D氨基葡萄糖苷(PNP—NAG)为基质,对于测定N—乙酰—β—D氨基葡萄糖苷酶的方法,进行了实验性探讨,通过对硝基酚的吸光度测定,它的最大吸收峰为400nm。NAG反应的最适PH为4.6,同一标本测20次精密度的 CV为 2.18％。该法操作简单、快速、结果可靠。NAG的测定对肾脏疾病的早期诊断和疗效观察是一种较为理想的方法。

血清胱抑素C、尿N-乙酰-β-D氨基葡糖苷酶在老年人糖尿病早期肾损伤的表达

目的探讨血清胱抑素C（CysC）与尿N-乙酰-β-D氨基葡糖苷酶（NAG）在老年人糖尿病早期肾损伤的表达。方法将127例糖尿病患者分为单纯糖尿病组（糖尿病1组）、早期糖尿病肾病组（糖尿病2组）、糖尿病肾病组（糖尿病3组），另选取38例健康体检者为健康对照组（对照组）。检测血清CysC、肌酐（Scr）浓度，比色法测定人体尿NAG活性，检测白蛋白排泄率（UAER／24h）。结果CysC、尿NAG、Scr、UAER／24h分别在四组中呈递增趋势，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。血清CysC、尿NAG分别与Scr、UAER／24h均呈正相关。CysC对早期糖尿病肾病组患者诊断准确度、灵敏度、特异度分别为86．8％、76．1％、97．8％；NAG分别为83．5％、71．7％、95．6％。结论血清CysC和尿NAG水平能敏感地反映老年人糖尿病早期肾损害，是反映肾小球滤过率（GFR）的理想指标。

尿 N-乙酰-β-D 氨基葡萄糖苷酶活性测定在小儿肾脏疾病中的应用

本文对90例各类肾脏疾病患儿进行尿 N-乙酰-β-D 氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性测定。结果显示:单纯性肾病17例活动期均明显升高,缓解期恢复正常,其活性与尿蛋白呈正相关,而与血浆白蛋白呈负相关;急性肾炎25例,其中10例急性期升高,恢复期转为正常;单纯性血尿1 5例,均正常;肾小管疾病4例,均明显升高;急性肾功能衰竭5例中有3例明显升高。此外对过敏性紫癜性肾炎、乙肝肾炎等肾脏疾病的测定结果也表明尿 NAG 的检测是一项判断肾脏疾病严重程度的敏感指标。

血清N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖酶测定新方法及应用

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖酶(E、C、3、2、1、30,以下简称 NAG),是细胞溶酶体酶,在肾近曲小管分布最多,临床上多检查尿中的 NAG做为判断肾损伤的指标。血清中 NAG

联合尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶和血半胱氨酸蛋白酶抑制剂C检测在糖尿病肾病早期诊断中的意义

目的探讨联合检测尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）和血半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CystatinC）对糖尿病肾病（DN）早期诊断的临床意义。方法62例2型糖尿病患者（糖尿病组）根据24h尿白蛋白排泄量（24hUAE）分为三组，A组（正常白蛋白尿组，24hUAE〈30mg）20例；B组（微量白蛋白尿组，24hUAE30～300mg）22例；C组（大量自蛋白尿组，24hUAE〉300nag）20例。另选择30例健康人作为对照组。收集并测定各组24hUAE、尿NAG活性，同时检测血清肌酐（SCr）及Cystalin C、采用Coekcroft—Gault公式计算内生肌酐清除率（Ccr），比较各组上述指标的变化。结果糖尿病组尿NAG活性、血清CystatinC水平均较对照组明显升高（P〈0．01），Ccr显著降低（P〈0．01）；尿NAG活性、血清CystatinC水平在糖尿病分组问逐渐升高（P〈0．05或〈0．01），而SCr增高在A组、B组差异无统计学意义（P〉0．05）。糖尿病组尿NAG活性、血清CystatinC、24hUAE、SCr两两比较差异均有统计学意义，呈正相关（P〈0．01），与Ccr均呈显著负相关（P〈0．01）。尿NAG活性和血清CystatinC联合检测阳性率（80．6％，50／62）高于单项检测阳性率[分别为58．1％（36／62）和61．3％（38／62）]（P〈0．05）。结论尿NAG和血清CystatinC是反映DN的敏感指标，联合检测可提高DN早期损害的检出率，有利于早期诊断。