长期不同施肥下太湖地区黄泥土蚯蚓的多样性、蛋白质含量与氨基酸组成的变化

水稻土在不同施肥管理下的土壤质量及其生态系统功能的变化是当前土壤学和农业生态学的关注领域。对太湖地区一个15a的长期不同施肥处理下稻田进行了蚯蚓群落的调查采样,并测定了蚯蚓蛋白质含量和氨基酸组成。供试水稻土中共检出7种蚯蚓。长期不同施肥措施影响了蚯蚓的群落结构,单施化肥下农田蚯蚓的种类和数量明显减少,多样性指数和丰富度明显降低,且蚯蚓总氨基酸的含量和大部分种类氨基酸含量降低,同时蚯蚓中分子量小于25kd的蛋白质含量降低,而分子量33kd附近的蛋白质含量明显增加;相反,长期化肥配合秸杆还田和配施猪粪趋向于提高蚯蚓蛋白质含量或氨基酸含量。看来,农田中蚯蚓不但在种群变化上,而且在体内生命活性物质组成上均响应稻田不同施肥措施下的土壤环境变化。

分子荧光光谱法检测氨基酸配方和蛋白质水解配方特殊医学用途配方食品中的维生素C含量

目的优化前处理方法提取氨基酸配方和蛋白质水解配方特殊医学用途配方食品中的维生素C,并采用分子荧光光谱法进行测定。方法通过氧化后的维生素C与邻苯二胺反应生成荧光物质,利用分子荧光光谱进行外标法定量,考察了含有不同乙醇浓度的偏磷酸-乙酸溶液A前处理方法的方法学参数,同时在不同基质的样品中对确定的最佳前处理方法进行了实验验证。结果采用50%乙醇-偏磷酸-乙酸溶液A提取的前处理方法能够有效沉淀氨基酸和多肽,所得处理液易于过滤且滤液澄清。样品在10 mg/100 g、50 mg/100 g和100mg/100g添加水平的加标回收率为90.7%~96.8%,相对标准偏差为2.73%~3.66%。结论 50%乙醇-偏磷酸-乙酸溶液A的前处理方法快速、准确、灵敏,适用于批量测定氨基酸配方和蛋白质水解配方特殊医学用途配方食品中维生素C。

大鼠肢体缺血再灌注后海马N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚单位表达的变化

目的:观察肢体缺血再灌注后海马N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚单位表达的变化。方法:实验于2005-04在河北医科大学解剖系中心实验室完成。选用10～12周龄健康雄性SD大鼠66只,随机数字表法分为3组:正常组(n=6)、假手术模型组、缺血-再灌注组,后2组又分为6,12,24,48及72h5个时间点,每个时间点6只。制备大鼠肢体缺血-再灌注模型,夹闭双侧股动脉根部4h,去夹再分别开放6,12,24,48,72h,假手术模型组同样手术处理,但不夹闭股动脉,不环扎橡皮筋。将正常组、不同时间点(6,12,24,48及72h)的缺血-再灌注组以及假手术模型组大鼠,常规灌注取材及制备石蜡切片,免疫组织化学染色并利用图像分析系统分析。结果:在实验过程中,实验动物无脱失值,全部进入结果分析。①肢体缺血-再灌注6,12,24,48,72h后,N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚单位蛋白在海马CA1区锥体层神经元表达灰度值分别为(14.64±2.71),(18.90±1.40),(24.71±2.89),(22.10±2.62)和(21.62±1.98),与正常组和假手术模型组灰度值比较,缺血-再灌注6h未见显著变化,再灌注12,24,48,72h的表达都有显著升高,差异均有显著性意义(P<0.01/0.05)。其中再灌注24h前后达到峰值,灰度值是正常组的172%。②肢体缺血-再灌注6,12,24,48,72h后,N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚单位蛋白在海马CA3区锥体层神经元表达灰度值分别为(10.47±2.13),(14.26±1.54),(26.32±2.83),(16.18±2.43)和(15.60±2.70),与正常组和假手术模型组灰度值比较,缺血-再灌注6h组未见显著变化,再灌注12,24,48,72h的表达都有显著升高,差异均有显著性意义(P<0.01/0.05);其中再灌注24h前后达到峰值,灰度值是正常组的261%。③假手术模型组与正常组比较,N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚单位蛋白在海马CA1、CA3区锥体层神经元表达灰度值未见显著性变化。结论:N-甲基-D-天冬氨酸1/2B型受体介入了肢体缺血-再灌注致海马损伤的病理过程。

分光光度法检测特殊医学用途婴儿配方乳粉中左旋肉碱

优化前处理方法来提取氨基酸配方和蛋白质水解配方特殊医学用途配方食品中的左旋肉碱,并采用分光光度法进行测定。左旋肉碱与乙酰辅酶A生成游离的辅酶A,游离的辅酶A和2-硝基苯甲酸反应生成黄色物质,利用分光光度法进行外标法定量。考察了酶水解前处理方法的方法学参数,同时在不同基质的样品中对确定的最佳前处理方法进行了实验验证。采用酶水解所得处理液易于过滤且滤液澄清。一种特殊医学用途氨基酸配方食品样品在5 mg/100 g、15 mg/100 g和50 mg/100 g添加水平的加标回收率为96.1%~108.5%,相对标准偏差RSD为3.18%~3.85%。酶水解前处理方法快速、准确、灵敏,适用于批量测定氨基酸配方和蛋白质水解配方特殊医学用途配方食品中左旋肉碱。