左旋门冬酰胺酶杀伤MOLT-4细胞的机制研究

目的:以左旋冬酰胺酶诱导MOLT-4T淋巴细胞白血病细胞发生氨基酸反应为模式,观察左旋门冬酰胺酶对MOLT-4细胞CHOP,ASNS,Bax以及Bcl2基因表达的影响,探讨可能存在的凋亡机制。方法:左旋门冬酰胺酶作用MOLT-4细胞,于不同时间点搜集细胞样品,并提取RNA,相对定量PCR法检测CHOP,ASNS,Bcl2,Bax mRNA相对表达水平;台盼蓝拒染法检测细胞存活率。结果:在左旋门冬酰胺酶用药后的8 h和18 h CHOP与ASNS mRNA出现两次表达高峰,1 8 h后CHOP mRNA水平维持在较高水平,ASNS mRNA开始逐渐下降,Bax/Bcl2的比值也于18 h后显著升高;细胞存活率于24 h后下降明显,细胞存活数在0～12 h缓慢增加,随后开始下降,24 h开始下降最为显著。结论:左旋门冬酰胺酶杀伤MOLT-4细胞可能存在下列机制:CHOP通过上调Bax/Bcl2比值激活线粒体凋亡途径;CHOP通过抑制抗凋亡基因ASNS的表达杀伤细胞。