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N-末端氨基酸测序数据估计N-末端不均一的单链重组蛋白制品主肽链比例方法的建立 被引量:4
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作者 史新昌 杨靖清 +2 位作者 韩春梅 陶磊 饶春明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第10期1073-1081,共9页
目的建立应用N-末端氨基酸测序数据估计N-末端不均一的单链重组蛋白制品主肽链比例的方法。方法利用氨基酸测序仪的摩尔归一化数据,经信号和噪音分离、信号的筛选等数据处理过程,将主肽链N-末端序列数据与其他次要序列数据分开,进而估... 目的建立应用N-末端氨基酸测序数据估计N-末端不均一的单链重组蛋白制品主肽链比例的方法。方法利用氨基酸测序仪的摩尔归一化数据,经信号和噪音分离、信号的筛选等数据处理过程,将主肽链N-末端序列数据与其他次要序列数据分开,进而估计主肽链所占比例。将本方法计算结果与质谱结果进行比较,另用混合样品数据进行验证分析。结果本方法所计算结果基本符合实际情况,可较准确地估计主肽链比例。结论初步建立了应用N-末端氨基酸测序数据估计N-末端不均一的单链重组蛋白制品主肽链比例的方法,为相关蛋白的分析和研究提供了辅助。 展开更多
关键词 N-末端氨基酸测序 N-末端不均一 重组蛋白 相关蛋白 数据处理 比例估计
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蛋壳内膜分解菌所产蛋白酶的纯化及其N-末端氨基酸序列测定 被引量:1
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作者 李勃 党永 +1 位作者 马瑜 陈颖怡 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1182-1185,共4页
从土壤中分离得到的1株产蛋壳内膜分解酶(ESMprotease)的铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)。通过对其发酵液进行饱和硫酸铵盐析,二次离子交换层析得到蛋壳内膜分解活性达到304.5U/mg的目标蛋白,SDS-PAGE电泳显示该酶分子量约为32kD... 从土壤中分离得到的1株产蛋壳内膜分解酶(ESMprotease)的铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)。通过对其发酵液进行饱和硫酸铵盐析,二次离子交换层析得到蛋壳内膜分解活性达到304.5U/mg的目标蛋白,SDS-PAGE电泳显示该酶分子量约为32kD,通过测定其N-末端15个氨基酸残基为:Ala、Glu、Ala、Gly、Gly、Val、Ala、Gly、Lys、Glu、Asp、Ala、Ala、Glu和Leu。 展开更多
关键词 蛋壳内膜蛋白酶 铜绿假单胞菌 纯化 N-末端氨基酸测序
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重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a突变区的氨基酸序列分析
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作者 缪为民 陈建鹤 +3 位作者 王梁华 周丙荣 娄永华 焦炳华 《生物技术通讯》 CAS 1997年第Z1期128-129,共2页
我们根据肿瘤坏死因子α(TNFα)结构和功能的关系,应用巨引物法对位于TNFα分子中部的8个核苷酸同时进行突变,在理论上造成第80、90、92位氨基酸的替换,因此命名为rh-TNFαD3a(中国专利:95113311.X)。实验表明,rh-TNFαD3a的抑瘤活性不... 我们根据肿瘤坏死因子α(TNFα)结构和功能的关系,应用巨引物法对位于TNFα分子中部的8个核苷酸同时进行突变,在理论上造成第80、90、92位氨基酸的替换,因此命名为rh-TNFαD3a(中国专利:95113311.X)。实验表明,rh-TNFαD3a的抑瘤活性不变,但其毒性只及原型TNF的1/10。本实验的目的是从氨基酸水平上对rh-TNFαD3a的突变进行验证。 由于目前的氨基酸测序通常是做蛋白质的N端20~40个左右的氨基酸。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子 氨基酸列分析 α衍生物 突变区 基础医学部 氨基酸测序 重组人 微生物 rh-TNFα 军医大学
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小麦返白系胆色素原脱氨酶纯化及编码cDNA序列分析 被引量:3
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作者 程冬梅 范三红 +3 位作者 刘香莉 陈根云 邓志勇 郭蔼光 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期973-978,共6页
以小麦(Triticumaestivum)返白系F772为材料,通过粗提、加热处理、硫酸铵分级沉淀和凝胶柱层析等方法,对胆色素原脱氨酶(PBGD)进行了提取纯化,纯化倍数为1092,得率为15%.纯化的PBGD约为37kD.对其部分生化性质的研究表明:高浓度的NH4+对... 以小麦(Triticumaestivum)返白系F772为材料,通过粗提、加热处理、硫酸铵分级沉淀和凝胶柱层析等方法,对胆色素原脱氨酶(PBGD)进行了提取纯化,纯化倍数为1092,得率为15%.纯化的PBGD约为37kD.对其部分生化性质的研究表明:高浓度的NH4+对酶活性有强烈的抑制,光照处理可以使酶活性降低.对纯化后的PBGDN末端氨基酸序列进行了测定.根据N端序列设计简并引物,获得了PBGD的cDNA全部编码区序列.它编码一个351个氨基酸的前体蛋白,有一个叶绿体导肽的序列.通过比较小麦PBGD与来自与其他物种的同源蛋白表明,有些氨基酸残基非常保守. 展开更多
关键词 小麦返白系 胆色素原脱氨酶 N末端氨基酸测序 纯化 CDNA克隆
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家蝇抗菌肽分子结构及抗菌谱研究 被引量:1
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作者 周义文 申萍 +7 位作者 涂植光 尹一兵 陈辉 孟江萍 王小中 陈如山 卢亮 陈正庚 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期653-656,共4页
目的研究家蝇抗菌肽的分子结构和抗菌谱,寻找广谱高效天然抗菌肽。方法家蝇被损伤感染诱导免疫后制成组织匀浆,用蛋白质纯化技术分离纯化抗菌肽,测定抗菌活性及抗菌谱,纳升电喷雾飞行时间质谱测定氨基酸序列。结果家蝇组织提取液经蛋白... 目的研究家蝇抗菌肽的分子结构和抗菌谱,寻找广谱高效天然抗菌肽。方法家蝇被损伤感染诱导免疫后制成组织匀浆,用蛋白质纯化技术分离纯化抗菌肽,测定抗菌活性及抗菌谱,纳升电喷雾飞行时间质谱测定氨基酸序列。结果家蝇组织提取液经蛋白质纯化,得到一纯化的抗菌活性成份,纳升电喷雾飞行时间质谱测序,得到两个肽段的氨基酸序列:肽段1.QPNLYYNK和肽段2.PNNVYYTK。通过NCBInr蛋白质数据库检索,未发现有与之序列相匹配的蛋白质。该抗菌肽对11种临床标本分离菌株铜绿色假单胞菌、大肠埃希菌、伤寒沙门菌、普通变形菌、异形柠檬酸杆菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、福氏痢疾杆菌、表葡菌、耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和白念珠菌的MIC分别为:3.89、2.22、4.44、6.67、3.33、6.67、5.0、6.67、4.44、4.44和13.33μmol/L。结论本文得到的抗菌肽是一个新型抗菌肽,有广谱抗菌活性,对革兰阴性菌和革兰阳性菌均有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 家蝇抗菌肽 抗菌谱 分子结构 氨基酸测序
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3-磷酸甘油醛脱氢酶的修饰蛋白减轻急性肾小管坏死自由基损伤的研究
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作者 李子龙 孙英慧 +5 位作者 王力宁 任青 粱再赋 马健飞 冯江敏 周希静 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期417-421,F0004,共6页
目的通过分离、纯化、鉴定及蛋白质氨基酸测序3-磷酸甘油醛脱氢酶(G3PD)修饰蛋白(MP),观察庆大霉素诱发大鼠急性肾小管坏死(ATN)时,MP抗自由基损伤及对肾小管上皮细胞的修复作用。方法采用Western印迹法及间接免疫荧光检测等方法对MP进... 目的通过分离、纯化、鉴定及蛋白质氨基酸测序3-磷酸甘油醛脱氢酶(G3PD)修饰蛋白(MP),观察庆大霉素诱发大鼠急性肾小管坏死(ATN)时,MP抗自由基损伤及对肾小管上皮细胞的修复作用。方法采用Western印迹法及间接免疫荧光检测等方法对MP进行鉴定分析。纯化的MP以氨基酸自动分析仪测定氨基酸序列。将SD雄性大鼠随机分成正常对照组(腹膜内注射0.9%氯化钠溶液2 mL/d×7 d+0.9%氯化钠溶液2 mL/d×14 d)、阴性对照组(腹膜内注射庆大霉素140 mg·kg^(-1)·d^(-1)×7 d+0.9%氯化钠溶液2 mL/d×14 d)、阳性对照组(腹膜内注射庆大霉素140 mg·kg^(-1)·d^(-1)×7 d+表皮生长因子20μg·kg^(-1)·d^(-1)×14 d)及实验组(腹膜内注射庆大霉素140 mg·kg^(-1)·d^(-1)×7 d+MP 250μg·kg^(-1)·d^(-1)×14 d)。应用MP观察7和14 d的ATN大鼠模型血清及肾组织中脂质过氧化物(LPO)、还原型谷光苷肽(GSH)及一氧化氮(NO)水平的动态变化。通过光学显微镜、电子显微镜及免疫组织化学等形态学方法,观察MP修复ATN时大鼠肾小管上皮细胞的组织形态学及细胞间黏附因子-1(ICAM-1)表达的变化。同时测定血肌酐(SCr)水平。结果间接免疫荧光法证实,MP位于细胞质内,且钾浓度为3.2 mmol/L条件下的荧光强度明显强于钾浓度为5.4 mmol/L时。MP由25个氨基酸残基组成。实验组的血清及肾皮质匀浆中LPO、NO水平均较阴性对照组明显下降(P值均<0.01),GSH明显上升(P值均<0.01)。MP组肾脏病理改变比模型组明显减轻,同时SCr下降(P<0.01);实验组的ICAM-1表达较阴性对照组下调。结论自由基积极参与ATN肾小管上皮细胞损伤,MP能够抑制ATN大鼠血清及肾组织中LPO、NO水平的升高及GSH水平的下降。MP具有抗自由基损伤及修复肾小管上皮细胞的作用。 展开更多
关键词 3-磷酸甘油醛脱氢酶 修饰蛋白 氨基酸测序 肾小管坏死 自由基
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一种新的蛇毒解离素同系物的分离
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作者 王广发 《广东微量元素科学》 CAS 2006年第4期31-36,共6页
为发现新的具有生物活性的蛇毒蛋白,以我国华南地区富有的蝮蛇蛇毒为分离样品源,采用高效液相色谱,从中分离出一种新的解离索同系物——AHP-4,建立了快速分离纯化蛇毒蛋白的方法。结构确认的结果表明,AHP-4的相对分子质量为7554 D... 为发现新的具有生物活性的蛇毒蛋白,以我国华南地区富有的蝮蛇蛇毒为分离样品源,采用高效液相色谱,从中分离出一种新的解离索同系物——AHP-4,建立了快速分离纯化蛇毒蛋白的方法。结构确认的结果表明,AHP-4的相对分子质量为7554 Da,是由一条多肽链组成的蛋白质,N-端第1~15位的氨基酸序列为GEECDCGSPANPCCD。经GeneBank protein-protein BLAST检索及人工检索,在已知蛋白质N-端第1~15位氨基酸序列中,未发现与AHP-4氨基酸结构完全相同的蛋白质。AHP-4N端第1~5位氨基酸序列与5种解离素中的氨基酸序列具有高度同源性,表明AHP-4是一种新的解离素同系物。 展开更多
关键词 蛇毒 解离素 氨基酸测序
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介绍四种鉴定生物亲缘关系的方法 被引量:1
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作者 刘汉超 《中学生理科月刊(下半月高中版)》 2004年第8期3-3,5,共2页
有关生物进化的证据很多,除了教材中提到的古生物学、比较解剖学、胚胎学的证据外,还有比较生理学、生物化学、遗传学和生物地理学等方面的证据.下面介绍四种常见的鉴定方法.
关键词 亲缘关系 鉴定方法 生物进化 氨基酸测序 血清鉴定法 高中 生物
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Bioinformatics Analysis of Zinc Transporter from Baoding Alfalfa
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作者 王海波 郭俊云 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2012年第9期1829-1832,1837,共5页
[Objective] This study aimed to perform the bioinformatics analysis of Zinc transporter (ZnT) from Baoding Alfalfa. [Method] Based on the amino acid sequence, the physical and chemical properties, hydrophilicity/hyd... [Objective] This study aimed to perform the bioinformatics analysis of Zinc transporter (ZnT) from Baoding Alfalfa. [Method] Based on the amino acid sequence, the physical and chemical properties, hydrophilicity/hydrophobicity, secondary structure of ZnT from Baoding alfalfa were predicted by a series of bioinformatics software. And the transmembrane domains were predicted by using different online tools. [Result] ZnT is a hydrophobic protein containing 408 amino acids with the theoretical pl of 5.94, and it has 7 potential transmembrane hydrophobic regions. In the sec- ondary structure, co-helix (Hh) accounted for 48.04%, extended strand (Ee) for 9.56%, random coil (Cc) for 42.40%, which was accored with the characteristic of transmembrane protein. [Conclusion] mZnT is a member of CDF family, responsible for transporting Zn^2+ out of the cell membrane to reduce the concentration and toxicity of Zn^2+. 展开更多
关键词 Baoding alfalfa Zinc transporter (mZnT) BIOINFORMATICS
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近期国内学术交流会议及展会
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《生命科学仪器》 2007年第2期56-58,共3页
CME2007第二届国际复合医学工程学术大会暨展览会IEEE/ICME International Conference on Complex Medical Engineering-CME2007会议时间:2007年5月23日—27日(其中:报到/布展:2007年5月21-22日会议/展出:2007年5月23-25日旅游:2007年5... CME2007第二届国际复合医学工程学术大会暨展览会IEEE/ICME International Conference on Complex Medical Engineering-CME2007会议时间:2007年5月23日—27日(其中:报到/布展:2007年5月21-22日会议/展出:2007年5月23-25日旅游:2007年5月26-27日)会议地点:北京京丰宾馆(丰台区丰台路75号) 展开更多
关键词 实验室家具 展会 展出时间 分析仪器 展出地点 参展范围 学术交流 科学交流 CME 专用仪器仪表 分析处理系统 会议 北京理工大学生命科学与技术学院 光学显微镜 动力试仪器 氨基酸测序
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Molecular cloning and mRNA expression analysis of myosin heavy chain(MyHC)from fast skeletal muscle of grass carp,Ctenopharyngodon idella 被引量:5
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作者 褚武英 符贵红 +6 位作者 宾石玉 蒙涛 周瑞雪 成嘉 赵发兰 张红芳 张建社 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2010年第2期239-247,共9页
The myosin heavy chain(MyHC)is one of the major structural and contracting proteins of muscle.We have isolated the cDNA clone encoding MyHC of the grass carp,Ctenopharyngodon idella. The sequence comprises 5 934 bp,in... The myosin heavy chain(MyHC)is one of the major structural and contracting proteins of muscle.We have isolated the cDNA clone encoding MyHC of the grass carp,Ctenopharyngodon idella. The sequence comprises 5 934 bp,including a 5 814 bp open reading frame encoding an amino acid sequence of 1 937 residues.The deduced amino acid sequence showed 69%homology to rabbit fast skeletal MyHC and 73%–76%homology to the MyHCs from the mandarin fish,walleye pollack,white croaker,chum salmon,and carp.The putative sequences of subfragment-1 and the light meromyosin region showed 61.4%–80%homology to the corresponding regions of other fish MyHCs.The tissue-specific and developmental stage-specific expressions of the MyHC gene were analyzed by quantitative real-time PCR.The MyHC gene showed the highest expression in the muscles compared with the kidney,spleen and intestine.Developmentally,there was a gradual increase in MyHC mRNA expression from the neural formation stage to the tail bud stage.The highest expression was detected in hatching larva.Our work on the MyHC gene from the grass carp has provided useful information for fish molecular biology and fish genomics. 展开更多
关键词 grass carp real-time PCR myosin heavy chain fast skeletal muscle gene expression
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FE65L2一种新剪接形式的cDNA的克隆及功能研究
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作者 孙朝辉 陈宣茂 +1 位作者 应康 谢毅 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1999年第S3期375-375,共1页
关键词 剪接形式 CDNA 氨基酸组成 生物信息学分析 氨基酸测序 复旦大学 功能研究 基因家族 信号传导途径 信号传递作用
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PREDICTING SUBCHLOROPLAST LOCATIONS OF PROTEINS BASED ON THE GENERAL FORM OF CHOU'S PSEUDO AMINO ACID COMPOSITION: APPROACHED FROM OPTIMAL TRIPEPTIDE COMPOSITION 被引量:3
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作者 HAO LIN CHEN DING LU-FENG YUAN WEI CHEN HUI DING ZI-QIANG LI FENG-BIAO GUO JIAN HUANG NI-NI RAO 《International Journal of Biomathematics》 2013年第2期47-60,共14页
Chloroplasts are organelles found in plant cells that conduct photosynthesis. The subchloroplast locations of proteins are correlated with their functions. With the availability of a great number of protein data, it i... Chloroplasts are organelles found in plant cells that conduct photosynthesis. The subchloroplast locations of proteins are correlated with their functions. With the availability of a great number of protein data, it is highly desired to develop a com- putational method to predict the subchloroplast locations of chloroplast proteins. In this study, we proposed a novel method to predict subchloroplast locations of proteins using tripeptide compositions. It first used the binomial distribution to optimize the feature sets. Then the support vector machine was selected to perform the prediction of subchloroplast locations of proteins. The proposed method was tested on a reliable and rigorous dataset including 259 chloroplast proteins with sequence identity ≤ 25%. In the jack-knife cross-validation, 92.21% envelope proteins, 93.20% thylakoid mem- brane, 52.63% thylakoid lumen and 85.00% stroma can be correctly identified. The overall accuracy achieves 88.03% which is higher than that of other models. Based on this method, a predictor called ChloPred has been built and can be freely available from http://cobi.uestc.edu.cn/people/hlin/tools/ChloPred/. The predictor will provide important information for theoretical and experimental research of chloroplast proteins. 展开更多
关键词 Subchloroplast localization TRIPEPTIDE binomial distribution support vectormachine.
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