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化妆品原料的过敏性体外方法——氨基酸衍生化反应法(ADRA)方法转化与验证
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作者 沈立 王雪梅 +3 位作者 张慧文 所雅琼 吴景 邢书霞 《日用化学工业(中英文)》 CAS 北大核心 2023年第2期157-164,共8页
在皮肤致敏不良结果通路(AOP)的第一个关键事件中化学反应为亲电物质与皮肤蛋白中的亲核中心共价结合,即皮肤与物质接触后,可能与皮肤上的蛋白结合形成抗原,导致不良反应。采用半胱氨酸和赖氨酸衍生物替代皮肤组织,模拟皮肤蛋白与化合... 在皮肤致敏不良结果通路(AOP)的第一个关键事件中化学反应为亲电物质与皮肤蛋白中的亲核中心共价结合,即皮肤与物质接触后,可能与皮肤上的蛋白结合形成抗原,导致不良反应。采用半胱氨酸和赖氨酸衍生物替代皮肤组织,模拟皮肤蛋白与化合物结合,通过计算半胱氨酸和赖氨酸衍生物反应后耗竭值(百分比)将物质分类,以此区分皮肤敏化剂和非敏化剂,此种方法称之为氨基酸衍生化反应法(ADRA)。本实验选择10种致敏性已知的物质,探究ADRA方法用于化合物致敏性评价的准确度,并在10种物质中随机选取几种物质采用国内已转化验证过的方法直接反应多肽法(DPRA)对结果进行验证。结果表明,10种物质致敏性判定结果符合样品自身致敏性,认定ADRA致敏性判定准确度较好,可作为皮肤致敏AOP的第一个关键事件替代实验方法。 展开更多
关键词 皮肤致敏性 替代实验 氨基酸衍生化反应(ADRA)
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毛细管电泳-间接紫外法用于太子参中的非衍生化氨基酸检测 被引量:2
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作者 童萍 《分析测试技术与仪器》 CAS 2014年第4期197-203,共7页
建立了一种简单、快速测定赖氨酸(Lys)、脯氨酸(Pro)、亮氨酸(Leu)、丙氨酸(Ala)、组氨酸(His)、苏氨酸(Thr)、蛋氨酸(Met)、丝氨酸(Ser)和甘氨酸(Gly)的毛细管电泳-间接紫外检测方法.通过研究缓冲液的种类和浓度、缓冲液的p H等分离条... 建立了一种简单、快速测定赖氨酸(Lys)、脯氨酸(Pro)、亮氨酸(Leu)、丙氨酸(Ala)、组氨酸(His)、苏氨酸(Thr)、蛋氨酸(Met)、丝氨酸(Ser)和甘氨酸(Gly)的毛细管电泳-间接紫外检测方法.通过研究缓冲液的种类和浓度、缓冲液的p H等分离条件对被测组分分离度和灵敏度的影响,从而优化了分析条件.实验结果表明,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节14 mmol/L的对氨基苯磺酸至p H为11.2做为运行缓冲液,当分离电压为20 k V时,9组分在12 min内实现了完全分离.实验结果表明,方法能成功用于不同产地太子参药材中9种氨基酸的含量测定.方法重现性良好,迁移时间和峰高的RSD分别小于2.6%和4.5%(n=7). 展开更多
关键词 毛细管电泳 衍生氨基酸 间接紫外检测 太子参
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基于衍生化法结合HPLC的蜈蚣多成分定量研究
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作者 毛颖 尤伟夫 +3 位作者 张宏莲 孟庆楠 张雪玲 王冬梅 《中药材》 CAS 北大核心 2023年第8期2000-2003,共4页
目的:建立一种同时测定蜈蚣中8种氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、谷氨酸、精氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸)含量的方法。方法:使用邻苯二甲醛(OPA)和3-巯基丙酸(3-MPA)以3∶1的比例进行柱前衍生化,将非荧光氨基酸转化为荧光物质,使用... 目的:建立一种同时测定蜈蚣中8种氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、谷氨酸、精氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸)含量的方法。方法:使用邻苯二甲醛(OPA)和3-巯基丙酸(3-MPA)以3∶1的比例进行柱前衍生化,将非荧光氨基酸转化为荧光物质,使用HPLC结合荧光检测器进行分离和检测;以含3.0%20 mmol/L四氢呋喃的醋酸盐缓冲液(pH=7.6)-100 mmol/L醋酸盐缓冲液∶乙腈∶甲醇(1∶2∶2)为流动相进行洗脱分离。结果:各氨基酸在一定的浓度范围内线性关系良好。10批蜈蚣中8种氨基酸含量以谷氨酸和丝氨酸较高。结论:该方法有利于蜈蚣质量控制,可为蜈蚣从鲜品到加工过程中提供一种常规的监测方法。 展开更多
关键词 蜈蚣 HPLC 氨基酸衍生化 荧光检测
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高效液相色谱-蒸发光散射检测法直接检测20种未衍生基本氨基酸 被引量:31
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作者 王玉红 申克宇 +2 位作者 李鹏 周君裔 阎超 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期908-911,共4页
应用国产蒸发光散射检测器(ELSD),建立了一种采用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测器(RHPLC-ELSD)直接测定20种未衍生基本氨基酸的分析方法,并将其用于氨基酸注射液中氨基酸含量的测定。采用BISCHOFFTMC18 AQ PLUS色谱柱(250 mm×4.... 应用国产蒸发光散射检测器(ELSD),建立了一种采用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测器(RHPLC-ELSD)直接测定20种未衍生基本氨基酸的分析方法,并将其用于氨基酸注射液中氨基酸含量的测定。采用BISCHOFFTMC18 AQ PLUS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,以甲醇-0.2%七氟丁酸溶液(含0.1%三氟乙酸)为流动相进行梯度洗脱,流速0.8 mL/min,ELSD飘移管温度40℃,载气流量2.5 L/min,对20种基本氨基酸进行分离检测。氨基酸的质量浓度在30~300 mg/L范围内,其峰面积的对数值与进样质量的对数值呈良好的线性关系;氨基酸的检出限(信噪比(S/N)>3)介于24~100 ng之间,样品加标回收率为90.6%~106.0%。结果表明,该系统及方法操作简便快速、准确可靠,无需依靠专门的氨基酸分析仪或衍生处理氨基酸即可直接测定氨基酸注射液中氨基酸含量,为药品、食品及化工生产等领域混合氨基酸样品的直接检测提供了参考。 展开更多
关键词 反相高效液相色谱 蒸发光散射检测 衍生氨基酸 氨基酸 注射液
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高效液相色谱-串联质谱法直接定量分析植物酵素中多种氨基酸成分 被引量:27
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作者 郑重 孙琦 +3 位作者 石永伟 曲佳乐 宋凤瑞 刘志强 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期309-313,共5页
利用高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法直接分析植物酵素中多种未衍生化的氨基酸。样品用甲醇稀释5倍,超声提取30 min,离心10 min(速度为10 000 r/min),取上清液分析。采用色谱柱Venusil ASB C18(250mm×4.6 mm,5μm)分离... 利用高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法直接分析植物酵素中多种未衍生化的氨基酸。样品用甲醇稀释5倍,超声提取30 min,离心10 min(速度为10 000 r/min),取上清液分析。采用色谱柱Venusil ASB C18(250mm×4.6 mm,5μm)分离,以甲醇-乙酸-水混合溶液为流动相体系进行梯度洗脱,流速为0.5 mL/min,质谱喷雾电压为3 kV,离子源温度为150℃,去溶剂温度350℃,去溶剂气体流速为800 L/h。碰撞气氩气的流速保持压力为0.17 Pa。以被测物的提取离子流图峰面积进行定量,该分析方法的线性范围为0.5~200μmol/L(r2〉0.99),回收率为86%~110%,可对植物酵素中16种氨基酸成分进行定量分析。该方法操作简便快速、准确可靠,还适用于食品、药品及天然产物中多种氨基酸成分的定量分析。 展开更多
关键词 高效液相色谱-串联质谱 衍生氨基酸 植物酵素
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^(13)CMFA过程中GC-MS分析菌体蛋白氨基酸的^(13)C标记丰度 被引量:7
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作者 王建 王泽建 +3 位作者 黄明志 钱江潮 储炬 张嗣良 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期87-93,共7页
基于13C标记的代谢通量分析(13CMFA)由于具有准确性和应用性已成为国际上代谢工程研究的热点,其中一个至关重要的问题就是分析菌体蛋白氨基酸的13C标记丰度信息。用含20%全标记葡萄糖([U-13C])和80%天然葡萄糖的合成培养基喂养维生素B1... 基于13C标记的代谢通量分析(13CMFA)由于具有准确性和应用性已成为国际上代谢工程研究的热点,其中一个至关重要的问题就是分析菌体蛋白氨基酸的13C标记丰度信息。用含20%全标记葡萄糖([U-13C])和80%天然葡萄糖的合成培养基喂养维生素B12生产菌Pseudomonas denitrifican,然后在稳态条件下取20mg带13C标记菌体用1ml6mol/L盐酸95℃水解24h得到带13C标记的菌体蛋白氨基酸;氨基酸经分离、浓缩、真空干燥、MBDSTFA衍生化后得到的TBDMS衍生物可以用气相色谱-质谱(GC-MS)进行分析,最后分析质谱图得到15种菌体蛋白氨基酸的13C标记丰度信息。成功获得菌体蛋白氨基酸13C标记丰度信息的实验方法和样品处理技术,为13CMFA在国内进一步发展提供了参考意义。 展开更多
关键词 ^13C代谢通量分析 菌体蛋白氨基酸 氨基酸衍生化 气相色谱-质谱 ^13C标记丰度信息
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Capillary Zone Electrophoresis of Native Amino Acids with Indirect Ultraviolet Detection
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作者 王洪 顾峻岭 +2 位作者 傅若农 胡汉芳 丁天惠 《Journal of Beijing Institute of Technology》 EI CAS 1998年第1期43-48,共6页
Aim To strdy the separation of native amino acids using capillary zone electro- pboresis (CZE) with indirect ultraviolet detecition. Methods 13 native amino acids were sepa- rated by capillary electrophoresis with ind... Aim To strdy the separation of native amino acids using capillary zone electro- pboresis (CZE) with indirect ultraviolet detecition. Methods 13 native amino acids were sepa- rated by capillary electrophoresis with indirect detection . The experiments were carried out with homemade CE apparatus under the following operating conditior conditions: a fused-silica capillary col- umn of 50.0cm effect length and of 75m i.d. was used. 7 organic acids were used as BGAE, and a positive potential of separation in CZE with indirect detection. After optimizing for l3 native amino acids were established. Conclusion The choice of BGAe is an important factor influencing the efficiency of separation in CZE with indiect detection .After optimizing the separation conditions a baseline separation for 13 native amino acids is obtained. 展开更多
关键词 CZE indirect UV detection native amino acid
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柱前衍生HPLC法检查壳聚糖中蛋白质残留 被引量:2
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作者 李博 张家骊 +1 位作者 步芬 夏文水 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期620-627,共8页
目的:建立氨基酸的柱前衍生化HPLC测定法用于壳聚糖中残留蛋白质的检查。方法:壳聚糖样品经酸水解并以9-芴甲氧羰酰氯柱前衍生,用5 mmol.L-1醋酸铵缓冲液(pH 6.7)-乙腈(80∶20)和5 mmol.L-1醋酸铵缓冲液(pH 6.7)-乙腈(20∶80)为流动相... 目的:建立氨基酸的柱前衍生化HPLC测定法用于壳聚糖中残留蛋白质的检查。方法:壳聚糖样品经酸水解并以9-芴甲氧羰酰氯柱前衍生,用5 mmol.L-1醋酸铵缓冲液(pH 6.7)-乙腈(80∶20)和5 mmol.L-1醋酸铵缓冲液(pH 6.7)-乙腈(20∶80)为流动相梯度洗脱,C18柱分离后,以荧光检测器在266 nm激发波长、313 nm发射波长处检测,外标法计算各氨基酸含量,并以总氨基酸含量作为壳聚糖中蛋白质残留量。结果:各氨基酸分离良好,过量衍生试剂和氨基葡萄糖衍生产物仅对Leu、Ile、Phe产生干扰。各氨基酸浓度在0.01~5.0μg.mL-1范围内线性关系良好(r>0.99),精密度(RSD)为1.6%~8.5%,定量限为1.9~10.9 ng.mL-1,回收率为83.4%~99.3%。结论:本方法可准确测定壳聚糖中13个氨基酸并用于壳聚糖中微量蛋白质残留的检查,为评价壳聚糖质量,保证壳聚糖在医药和生物材料使用的安全性提供依据。 展开更多
关键词 壳聚糖 蛋白质残留 9-芴甲氧羰酰氯 氨基酸衍生化 氨基葡萄糖 高效液相色谱
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Synthesis and antimicrobial activity of 2-(3', 5'-disubstituted-indoly-2'-yl)-4H-3, 1-benzoxazin-4-ones and their derivatives
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作者 Saundane A. R. Yarlakatti Manjunatha 《Journal of Chemistry and Chemical Engineering》 2009年第12期54-59,共6页
As benzoxazin-4-ones and quinazolines linked to indole nucleus acting as a good pharmacophore, the synthesis of these compounds has significant meaning. The key intermediates 2-(2', 5'-disubstituted-indol-2'-yl... As benzoxazin-4-ones and quinazolines linked to indole nucleus acting as a good pharmacophore, the synthesis of these compounds has significant meaning. The key intermediates 2-(2', 5'-disubstituted-indol-2'-yl)-4H-3, 1-benzoxazin-4-ones (3) were synthesized from cyclocondensation of indole-2-carbonyl chlorides (2) and anthranilic acid. Compound (3) on reaction with thiosemicarbazide and o-phenylene diamine afforded the compound (4) and (6) respectively. Compound (4) subjected to intramolecular cyclization under thermal conditions above its melting point afforded the compound (5). Similarly compound (3) on fusion with o- phenylene diamine gave compound (7). Structures of these compounds were confirmed by their spectral studies. The compounds were screened for their antimicrobial activity and the results were reported. 展开更多
关键词 indole analogues henzoxazin-4-ones triazoloquinazoline benzimidazoloquinazoline antimicrobial activity
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Copper(I)/Sa BOX catalyzed highly diastereo- and enantio-selective cyclopropanation of cis-1,2-disubstituted olefins with a-nitrodiazoacetates 被引量:1
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作者 冯良文 王鹏 +1 位作者 王丽佳 唐勇 《Science Bulletin》 SCIE EI CAS CSCD 2015年第2期210-215,I0002,共7页
A copper-catalyzed highly stereoselective cyclopropanation of 1,2-disubstituted olefins with α-nitrodiazo acetates has been developed, giving the desired products in up to 97 % yields, up to 〉99/1 dr and up to 98 % ... A copper-catalyzed highly stereoselective cyclopropanation of 1,2-disubstituted olefins with α-nitrodiazo acetates has been developed, giving the desired products in up to 97 % yields, up to 〉99/1 dr and up to 98 % ee, which provides an efficient access to the synthesis of optical active cyclopropane α-amino acids and unnatural α-amino acid derivatives. 展开更多
关键词 Asymmetric catalysis CYCLOPROPANATION Sidearm BISOXAZOLINE α-Amino acids
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