GAP1基因缺失对上面发酵酵母高级醇代谢能力的影响

以亲本上面发酵酵母工业菌株S17为对照,研究了GAP1一个等位基因敲除重组菌株S17G和GAP1两个等位基因敲除重组菌株S17G2的发酵性能.实验结果表明:与亲本菌株相比,重组菌株S17G的总高级醇生成量降低17.47%,α氨基氮利用能力降低13.67%,麦芽糖利用能力降低31.08%;重组菌株S17G2的总高级醇生成量得到进一步降低,达到210.58 mg/L,较亲本菌株降低了21.98%,α氨基氮利用能力降低了18.47%,麦芽糖利用能力降低了35.14%.重组菌株S17G、S17G2的其他发酵性能与亲本菌株S17相比没有发生显著的变化.

转AAP1基因玉米游离氨基酸与可溶性蛋白质含量变化关系的研究

氨基酸通透酶1(AAP1)是位于细胞膜上与氨基酸转运有关的载体蛋白。以转组成型启动子(UBI)的AAP1玉米植株(N7-30、N7-26)、转胚乳特异性启动子(Glu)的AAP1玉米植株(KF8-33、KF8-39、KF9-22)为材料,探究转AAP1基因玉米中游离氨基酸和可溶性蛋白质含量之间的变化关系。结果表明,转AAP1基因玉米的根部和叶片中游离氨基酸含量在抽丝期最高;根部可溶性蛋白质含量在成熟期最高;叶片中可溶性蛋白质含量在抽丝期最高。叶片中游离氨基酸含量与可溶性蛋白质含量随着生育期的变化均呈现低-高-低的趋势,抽丝期达到最高值;种子中游离氨基酸的含量与可溶性蛋白质含量呈显著正相关性。转胚乳特异性启动子玉米种子中游离氨基酸含量、脯氨酸含量、赖氨酸含量均显著高于转组成型启动子玉米种子。AAP1可以提高植物对游离氨基酸的吸收与转运,进而提高植物对氮素的利用效率。

拟南芥AAP1基因的克隆及植物表达载体的构建

拟南芥氨基酸透性酶1(AAP1,也叫NAT1)是植物中第一个被分离的氨基酸转运蛋白,在拟南芥主根、侧根、根毛及根表皮细胞中均有增加氨基酸含量的作用。本研究利用RT-PCR的方法,从拟南芥中克隆了该基因,测序结果与GenBank(NM-104616.4)中已发表的拟南芥AAP1(AtAAP1)基因的同源性高达99.93%;并将AtAAP1基因与pCAMBIA3300构建p3300-AAP1植物表达载体,为过表达AtAAP1基因,提高作物氨基酸含量,从而改善作物氮素利用效率提供参考。