对氨基马尿酸铽二元、三元配合物的合成、表征及荧光光谱研究

在乙醇溶液中以邻菲咯啉（phen）、2，2’-联吡啶（bipy）和对氨基马尿酸（PAH，HL）为配体与铽离子（Tb（HI））合成了二元和三元稀土配合物。通过元素分析、差热-热重分析、紫外光谱、红外光谱分析，确定了配合物的组成为TbLa（1）、TbL3·phen·H2O（2）和TbL3·bipy·H2O（3），并讨论了配合物1～3的谱学性质和荧光性能。推测出羧基中的氧原子以桥式双齿的形式与稀土离子配位。由红外光谱和热分析测试确定的配合物1及配合物2中的水分子未参与配位。研究表明，铽配合物在489，583和621nm处出现发射峰，它们分别归属于5D4→7F6,5D4→7F5,5D4→7F4和5D4→7F3的跃迁。其中544nM处5D4→7F5跃迁的强度最强，配体的共平面性和共轭性越大，配合物的荧光性能越高，三元配合物TbL3·phen·H2O和TbLa·bipy·H2O的荧光强度优于二元配合物TbLa的荧光强度。

阴离子交换纤维素膜、微晶纤维素膜作为室温燐光固体基质的评价对氨基马尿酸的固体基质室温燐光法的研究

本文评价了固体基质阴离子交换纤维素膜（ＤＥＡＥ膜）和微晶纤维素膜，且将此基质用于在重原子盐ＣｓＣｌ存在下，对氨基马尿酸的室温光法测定。重原子对ＲＴＰ有显著增强作用，且呈Ｃｓ￣＋＞＞Ｉ￣－＞Ｂｒ￣－＞Ｃｌ￣－的趋势。对有关的实验条件：烘烤温度、点样时机、介质ｐＨ、重原子浓度和ＲＴＰ稳定时间作了详细探讨。上述两种基质上，对氨基马尿酸的检出限和线性范围与滤纸上的结果相类似，特别是本文所得检出限均低于文献报道值。

银杏叶提取物促进大鼠肾皮质薄片对氨基马尿酸的转运

目的:研究银杏叶提取物(Ginkgo Biloba extract,GBE)对大鼠肾缺血再灌注和顺氯氨铂(顺铂)所致肾近曲小管转运功能损伤的保护作用。方法:采用体外肾皮质薄片孵育法,以肾薄片蓄积对氨基马尿酸(p-aminohippurate,PAH)的量间接反映肾脏近曲小管的转运功能。结果:GBE能促进大鼠肾皮质薄片摄取PAH,并能抵抗肾缺血再灌注和顺铂所致的大鼠肾皮质薄片摄取PAH的减少。此外,GBE同时减少了肾皮质中ATP的浓度,而增加了K^+浓度。ATP的减少可能与GBE增加Na^+-K^+-ATP酶活性而消耗了ATP有关,因为PAH的转运是耗能的过程。但这一结论还需进一步研究。结论:GBE促进肾薄片蓄积PAH的作用可以抵消大鼠急性肾衰竭时所致的PAH蓄积的减少。

半乳甘露寡糖促进氨基酸和葡萄糖的吸收

中国科学院亚热带农业生态研究所王彬等，通过对10头15kg体重试验猪实施门静脉血管插管等外科手术，并结合回肠肠系膜静脉灌注对氨基马尿酸（PAH）技术，探讨半乳甘露寡糖对生长猪门静脉血浆流率（PVPD和血液流率（PVBD、氨基酸和葡萄糖的净吸收量及耗氧量的影响。

板蓝根及所含靛蓝和靛玉红强烈抑制小鼠肾主要有机阴离子转运体Oat1,Oat2和Oat3

目的探讨板蓝根颗粒剂(GRI)和饮片水煎剂(DRI)及其所含主要成分靛蓝和靛玉红对小鼠肾有机阴离子转运体(OAT)中3个主要亚型Oat1,Oat2和Oat3的影响。方法 NIH小鼠分别ig给予GRI0.615和2.460 g·kg-1,DRI 1.6和6.4 g·kg-1(生药量),靛蓝0.008和0.640 mg·kg-1,靛玉红0.0192和1.5360 mg·kg-1,每组60只(雌雄对半),每天2次,连续5 d。同时设丙磺舒(0.05 g·kg-1)阳性对照组和两种溶媒〔纯水和0.5%羧甲纤维素钠(CMC-Na)水溶液〕对照组及糊精加蔗糖(各1.5 g·kg-1)添加剂组。最后1次给予供试物后实施对-氨基马尿酸(PAH,iv,0.03 g·kg-1)清除实验,即在iv PAH后1.0,2.5,5.0,7.5,10.0和20.0 min时每组分别各取10只小鼠(雌雄对半),安乐处死收集全血制备血清,并迅速摘取双肾,右肾进行组织匀浆后测定PAH蓄积量,左肾组织用于提取总m RNA。每组另取10只小鼠(雌雄各半),同样给药处理,按Nakakariya法做肾切片进行摄取PAH实验。用Kiguchi法测定血清和肾组织匀浆液中PAH浓度。以药动学软件(DAS 2.0)计算血清及肾组织中PAH的主要药动学参数。以实时定量PCR法测定小鼠肾组织Oat1,Oat2及Oat3 m RNA表达。结果与纯水对照组比较,0.5%CMC-Na对照组各项检测指标均无显著差异。与两种溶媒对照组相比,GRI 2.460 g·kg-1,靛蓝0.640 mg·kg-1和靛玉红1.5360 mg·kg-1组消除半衰期(t1/2β)显著延长(P<0.05);各供试物组分布容积(Vd)和清除率(Cl)均显著减少(P<0.01),曲线下面积(AUC0→20 min)均显著增加(P<0.01);由采血时间段内各组肾组织中的PAH蓄积量所求得的AUC0→20 min显著大于同期对照组(P<0.05,P<0.01),且肾AUC0→20 min与血液AUC0→20 min的比值在各组间无显著差异。各剂量供试物均可使肾切片摄取PAH的量显著少于对照组(P<0.05,P<0.01)。与纯水/CMC对照组相比,GRI 2.460 g·kg-1,DRI 6.4 g·kg-1,靛蓝0.640 mg·kg-1,靛玉红1.5360 mg·kg-1组小鼠肾组织Oat1,Oat2及Oat3 m RNA表达除靛玉红组Oat2 m RNA(P<0.05)、GRI组Oat3 m RNA(P<0.01)表达水平被显著上调外,其余均被显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论 GRI、DRI、靛蓝、靛玉红在所用剂量下对小鼠肾组织Oat1,Oat2及Oat3均有明显抑制作用,GRI和DRI的这种抑制作用可能主要来自其所含的靛蓝和靛玉红成分。

用于营养物质代谢的猪动静脉插管技术的研究Ⅱ.门静脉营养物质净流量测定方法

本研究描叙了利用门静脉与颈动脉浓度差及门静脉血流量测定营养物质在门静脉的净流量。根据对氨基马尿酸 (PAH)不为动物所吸收的特性 ,通过回肠肠系膜灌注PAH的方法测定门静脉血流量 ,其计算公式为PVPF =Ci×IR× (PAHpv-PAHa) - 1 ,而安装了血流量计的实验猪可通过仪器直接读出门静脉血流量。营养物质净流量计算公式为 :q =(Cp-Ca)

肉桂等八种中药对小鼠肾脏三种主要有机阴离子转运体的影响

目的:检测8种具有肾毒性的中药对小鼠肾脏有机阴离子转运体(OATs)中3个主要亚型(Oat1,Oat2,Oat3)的影响。方法:肉桂等8种中药水煎剂(以高、低两个剂量)及纯水、丙磺舒(阳性对照)及羧甲基纤维素钠(CMC,丙磺舒溶媒)分别灌胃给NIH小鼠(每组雌雄各半),2次/d,连续5 d。最后一次给予供试品后1 h所有受试鼠逐一经尾静脉注入对氨基马尿酸(para-aminohippuric acid,PAH,30 mg/kg),然后在1、2.5、5、7.5、10、15和20 min时从各组分别取10只鼠安乐处死收集全血并迅速摘取双肾。匀浆各左肾(以Folin-酚法定量蛋白浓度)后以文献法定量其中及血清中的PAH浓度,以药动学软件(DAS2.0)分析血中PAH的主要药动学参数:消除半衰期(t1/2β)、分布容积(Vd)、总清除率(CL)及药时曲线下面积(AUC0-20 min);比较全部采血点中5个时间点(1、5、10、15、20 min)各组肾组织中的PAH蓄积量;从1 min采血点时的各组右肾提取总mRNA,以实时荧光定量PCR法比较各组小鼠肾脏中Oat1、Oat2、Oat3 mRNA的表达量。结果:与纯水组相比,益母草高剂量组,蜈蚣高、低剂量组的t1/2β显著延长(P<0.05,P<0.01),其余各组无明显改变(P>0.05)。除细辛低剂量组和益母草低剂量组外所有其他供试物组的Vd、CL和AUC0-20 min均发生显著变化:Vd变小(P<0.01),CL变慢(P<0.01),AUC0-20 min增大(P<0.01)。与纯水对照组相比,肾组织中的PAH蓄积量除冬虫夏草低剂量组、蜈蚣低剂量组外其余各组均显著升高(P<0.05,P<0.01)。与CMC组相比,丙磺舒组的mRNA表达量在Oat1、Oat3被显著上调(P<0.05,P<0.01),而在Oat2被显著下调(P<0.05);与纯水组相比,Oat1的mRNA表达水平在细辛、冬虫夏草、益母草、番泻叶、厚朴等各组被显著上调(P<0.05,P<0.01),而在蜈蚣组则被显著下调(P<0.05);肉桂、冬虫夏草、益母草、番泻叶、厚朴等各组的Oat2的mRNA表达量被显著上调(P<0.01);肉桂、厚朴两组的Oat3的mRNA表达水平被显著上调(P<0.01),而细辛、益母草、蜈蚣、苦参等组的Oat3的mRNA表达水平被显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论:肉桂、细辛、益母草、番泻叶、苦参、厚朴、蜈蚣、冬虫夏草等8种肾毒性中药可能通过抑制有机阴离子转运体中的3个主要成员OAT1、OAT2、OAT3而导致肾损伤。

稳定表达hOAT1的HEK293细胞系的建立及鉴定

目的构建人肾脏近曲小管阴离子转运体1(human organic anion transporter 1,hOAT1)-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)质粒,获得稳定表达pEGFP-hOAT1的HEK-293细胞系。方法构建EGFP与hOAT1的融合基因表达载体pEGFP-hOAT1,并利用FuGENE 6转染试剂将其转染至HEK293细胞中,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况,经G418抗性筛选获得稳定转染细胞株。用RT-PCR法、qRT-PCR法和Western blot技术,检测稳定转染细胞及正常细胞hOAT1 mRNA和蛋白的表达情况,并进一步用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)考察稳定转染细胞的对氨基马尿酸摄取能力,以及丙磺舒对hOAT1的抑制作用。结果使用该文的方法,细胞转染率可达90%。RT-PCR、qRT-PCR、Western blot,以及对氨基马尿酸摄取、丙磺舒抑制实验结果显示,相对于正常组,转染细胞在荧光显微镜下呈绿色荧光,其hOAT1表达均呈阳性(P<0.01);稳定转染细胞的对氨基马尿酸摄取能力明显升高(P<0.05),且丙磺舒对hOAT1有明显的抑制作用(P<0.05)。结论高效快速地建立了稳定高表达hOAT1的HEK293细胞系,为核苷类膦酸类似物这类药物引起的临床剂量依赖性肾毒性的机制研究奠定了模型基础,也为体外研究hOAT1底物或抑制剂的筛选提供了一个便利的工具。

缩泉丸和真武汤对小鼠肾脏有机阴离子转运体Oat1和Oat3的影响

目的初步检测缩泉丸和真武汤对小鼠肾脏有机阴离子转运体（Oats）中的2个主要亚型（Oat1,Oat3）的影响。方法以缩泉丸和真武汤及方中各药水煎剂、丙磺舒、氢氯噻嗪给NIH小鼠灌胃,每天2次,连续5 d,另设纯水对照组。末次给药后所有受试鼠逐一经尾静脉注入对氨基马尿酸（para-aminohippuric acid,PAH）30mg·kg^-1,然后在1,2.5,5,7.5,10,15,20 min时分别从各组各取10只小鼠处死收集全血,并迅速摘取双肾,测定血清及肾匀浆液中的PAH浓度,以药动学软件（DAS2.0）求出血清及肾组织匀浆液中PAH的主要药动学参数：消除半衰期（t1/2β）,分布容积（Vd）,清除率（CL）和药-时曲线下面积（AUC0-20 min）;从各组右肾提取总mRNA,以实时荧光定量PCR法比较小鼠肾脏中Oat1、Oat3 mRNA的表达量。另从各组各取10只小鼠,末次给药后1 h,断头处死后,取右肾做肾切片摄取PAH试验。结果与纯水对照组比较,真武汤组、茯苓组t1/2β显著延长（P〈0.01）,缩泉丸、乌药、附子各组t1/2β显著缩短（P〈0.05,P〈0.01）;缩泉丸、益智仁、山药、真武汤、白芍、生姜、茯苓各组Vd显著降低（P〈0.05,P〈0.01）,附子组Vd升高（P〈0.01）;缩泉丸、山药、真武汤、白术、生姜、茯苓各组CL均显著降低（P〈0.05,P〈0.01）;除益智仁、白芍、茯苓各组AUC0-20 min无显著变化外（P〉0.05）,其他供试物组均显著增大（P〈0.01）。各供试物组肾脏与血清AUC0-20 min比值均在0.247~0.475之间,与纯水对照组相似;肾切片摄取PAH试验显示,与纯水对照组比较,缩泉丸、乌药、山药、真武汤、白术、白芍、附子、生姜、茯苓各组摄取PAH量明显降低（P〈0.05,P〈0.01）。与纯水对照组比较,益智仁组、附子组小鼠肾脏Oat1 mRNA表达水平显著上调（P〈0.01）,而缩泉丸组、真武汤组Oat1 mRNA表达水平则显著下调（P〈0.01）;缩泉丸、益智仁、附子各组小鼠肾脏Oat3 mRNA表达水平显著上调（P〈0.01）,而真武汤组Oat3 mRNA表达水平则显著下调（P〈0.01）。结论缩泉丸及其君药益智仁、真武汤及其君药附子可能通过影响有机阴离子转运体的2个主要成员Oat1,Oat3的表达导致肾脏损伤。

常见可药/食用植物及其所含化学成分明显抑制小鼠肾脏主要有机阴离子转运体

目的检测市售主要草（凉）茶、植物瘦身产品、热带水果、热门中药等是否影响小鼠肾脏有机阴离子转运体（OAT）中3个主要亚型Oat1,Oat2和Oat3,以预测对患者的药物排泄是否产生可能的干扰.方法王老吉等5种凉茶、碧生源等4种减肥产品、清开灵等4种清瘟解毒复方中药以及上述产品的主要组成植物和它们所含有的部分化学成分的水溶液、以及荔枝等9种热带水果榨汁,分别以两种剂量经口投与NIH小鼠,每天2次连续5天.同时设丙磺舒阳性对照组和两种溶媒（纯水和05%羧甲基纤维素钠水溶液）对照组及糊精加蔗糖添加剂组.最后1次投与供试物后实施对-氨基马尿酸（PAH）清除试验：在静脉注射PAH后1.0、2.5、5.0、7.5、10.0及20.0min时从每组分别各取10只小鼠（♀♂对半）,安乐处死收集全血并迅速摘取双肾（右肾供匀浆后测定其PAH蓄积量,左肾供提取总mRNA）.另取NIH小鼠（♀♂对半,10只/组,供试物投与同前）,按Nakakariya法做肾切片摄取PAH试验.用Kiguchi法测定来自上述血清及肾匀浆液中的PAH浓度（以Folin酚法定量其蛋白含量）;以药动学软件（DAS20）计算血中PAH的主要药动参数;以实时定量PCR法定量小鼠肾脏Oat1,Oat2及Oat3的mRNA表达.结果与相应对照组比较,大部分供试物组（高剂量更明显）的消除半衰期（T1/2β）明显延长（P〈0.05～0.01）,且其分布容积（Vd）和清除率（CL）均明显减少（P〈0.05～0.01）而曲线下面积（AUC0→20min）则均明显增加（P〈0.05～0.01）.肾组织中的PAH蓄积量在所查时间段（ivPAH后1～20min）大部分供试物组（高剂量更明显）均明显高于相应对照组（P〈0.05～0.01）.肾切片摄取PAH的结果在大部分供试物组（高剂量更明显）均明显低于相应对照组（P〈0.05～0.01）.与对照组相比,大部分供试物组小鼠的Oat1、Oat2及Oat3的mRNA表达均明显异常（P〈0.05～0.01）.结论大部分供试物（高剂量更明显）在本实验条件下对小鼠肾脏Oat1、Oat2及Oat3均有明显抑制作用,提示上述供试物对患者的药物排泄过程可能产生明显干扰,故服药期间需谨慎食用它们.

雷公藤多甙肾毒作用机制

多种肾毒物质的毒效可发生在肾单位的不同节段而表现选择性位点损伤，其中肾近端小管是毒物诱导肾损伤的最常见部位。已知，雷公藤多甙有明显肾毒作用，但其损伤机制不清。目的：阐明雷公藤多甙肾毒性作用机制。方法：SD大鼠，给予雷公藤多甙250mg／kg、500mg／kg i．g．（q．d．）．5周后处死；

羊水检查及其临床意义(二)

4 羊水的检查 4.1 羊水量的测定羊水量的测定方法有直接法和间接法两类。直接法通过破膜得到羊水进行测量,结果尽管准确,但后果却是流产或早产;间接法是将已知剂量的标记物(放射性同位素,色素如刚果红,库马西蓝,化学物质如对氨基马尿酸等)注入羊膜腔内,从其稀释度求出羊水量的方法。间接法所测得的数值一般均少于直接法,

各科药物

0119298 兔离体灌注的肾远端小管管腔中对 p-氨基马尿酸转运氯的置换和抑制剂的效应/Chatsudthipong V//J PharmacolExp Ther.-1999,288(3).-993～1001医科情0119299 前肾上腺髓质素氨基端20肽对麻醉狗的抗利尿作用和由刺激肾神经引起的去甲肾上腺素过剩/Tadano K//J Phar-macol Exp Ther.-1999,288(2).-522～528

对氨基苯甲酸甘氨酸结合代谢率定量检测试验对白兔肝功能的研究

目的评估急性肝坏死兔甘氨酸结合对氨基苯甲酸（ＰＡＢＡ）转变成马尿酸的代谢能力。方法３０只雄性大耳白兔随机分组成实验组（２０只）用Ｄ－氨基半乳糖致大耳白兔急性肝坏死，对照组（１０只）注射生理盐水。采用高效液相色谱法测定血清中不同时间的对乙酰氨基马尿酸（ＰＡＡＨＡ）、对氨基马尿酸（ＰＡＨＡ）和对乙酰氨基苯甲酸（ＰＡＡＢＡ）的含量。结果实验组与对照组比较，马尿酸的形成明显减少。在不同时间分析马尿酸的代谢率，显示与肝损伤的程度相关，而ＰＡＢＡ的乙酰化程度与肝损伤程度无明显相关，在严重急性肝损伤时ＰＡＨＡ的浓度为零。结论甘氨酸结合ＰＡＢＡ的代谢率的测定可作为肝功能定量试验和急性肝坏死的灵敏指标。

10种肾毒性中药对小鼠肾脏有机阴离子转运体的影响

目的:研究10种肾毒性中药对小鼠肾脏有机阴离子转运体(Oats)中3个主要亚型(Oat1、Oat2、Oat3)的影响。方法:1 840只SPF级NIH小鼠随机分为正常对照(等容纯水)组,丙磺舒(30 mg/kg)组,羧甲基纤维素钠(CMC-Na)组与白头翁、延胡索、草乌、川乌、独活、皂角刺、虎杖、甘遂、侧柏叶、木香水煎剂高、低剂量组,ig给药,bid,连续5 d。末次给药1 h后,尾iv给予对氨基马尿酸(PAH,30 mg/kg),测定小鼠肾脏匀浆中PAH药动学参数与在1、5、10、15、20 min时间点的肾组织中PAH的蓄积量。用DAS 2.0分析软件计算血中PAH的药动学参数。分组与给药同上,末次给药1 h后制作肾切片置于PAH-buffer中,测定肾切片PAH摄取量。结果:与正常对照组比较,延胡索高剂量组,草乌高、低剂量组,独活高剂量组,虎杖高、低剂量组,侧柏叶高剂量组t1/2β升高;10种中药高、低剂量组Vd均降低;除独活低剂量组、皂角刺低剂量组、甘遂低剂量组外,其余用药组的CL均降低、AUC0-20 min均升高,差异均具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。与正常对照组比较,白头翁高剂量组,延胡索高剂量组,草乌高剂量组,川乌高、低剂量组,独活高、低剂量组,皂角刺高、低剂量组,虎杖高、低剂量组,甘遂高、低剂量组,侧柏叶高、低剂量组,木香高、低剂量组小鼠肾组织PAH蓄积量增加,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。与正常对照组比较,延胡索高剂量组,草乌高、低剂量组,皂角高、低剂量组,甘遂高剂量组,侧柏叶高、低剂量组,木香高剂量组小鼠肾切片PAH摄取量减少,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:10种肾毒性中药可能通过抑制有机阴离子转运体Oat1、Oat2、Oat3而导致肾损伤。

缺血再灌注损伤后大鼠肾小管上皮细胞有机阴离子转运蛋白的表达及其功能

目的探讨大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）后肾小管上皮细胞有机阴离子转运蛋白（OAT）1和3表达及功能变化。方法建立大鼠IRI模型，于术后第1、2、4、6天取血及肾组织标本。常规测定Scr浓度及观察肾脏组织形态。分别用免疫组织化学和Western印迹检测肾脏组织OAT1和3蛋白表达。毛细血管电泳仪检测肾脏对氨基马尿酸（PAH）排泄率。钼蓝分光光度法测定基侧膜钠-钾-ATP酶（Na^＋-K^＋-ATP酶）活性。另设假手术组作对照。结果模型组大鼠术后第1天肾小管上皮细胞坏死脱落，管腔内可见大量管型，刷状缘消失，基底膜裸露；Scr显著升高。与假手术组比较，模型组大鼠肾组织匀浆及肾小管上皮细胞OAT1和OAT3表达增强；PAH排泄率降低[（0．53±0．15）比（4．00±0．67）ml／min，P〈0．01]；肾小管上皮细胞基侧膜Na^＋-K^＋-ATP酶活性降低[（9．33±1．37）比（15．07±0．15）μmolPi·（mg蛋白）^-1·h^-1，P〈0．01]。损伤后第2天及第4天，损伤的肾小管逐渐修复，OAT1和3表达逐渐降低，PAH排泄率和Na^＋-K^＋-ATP酶活性逐渐增加；至第6天时肾小管基本恢复正常。结论急性肾缺血再灌注导致大鼠肾小管上皮细胞可逆性损伤，损伤初期肾小管OAT1和OAT3表达增强，转运有机阴离子功能下降，PAH排泄减少。