新生儿筛查发现的氨甲酰磷酸合成酶1缺乏症患儿长期随访研究

目的:研究浙江省新生儿筛查发现的氨甲酰磷酸合成酶1(CPS1)缺乏症患儿的基因型和表型特点及长期预后。方法:回顾性分析2013年9月至2023年8月浙江省新生儿疾病筛查中心采用干血斑串联质谱法筛查并联合基因检测诊断的CPS1缺乏症患者的所有筛查及临床随访资料。结果:共筛查新生儿4 056 755名,联合表型及基因检测诊断CPS1缺乏症6例;基因检测结果发现CPS1 10种变异,包括2种已知致病性变异(c.2359C>T、c.1549+1G>T)及8种未报道变异(c.3405-1G>T、c.2372C>T、c.1436C>T、c.2228T>C、c.2441G>A、c.3031G>A、c.3075T>C、c.390-403del)。患儿初筛血瓜氨酸值均有下降(2.72~6.21μmol/L),伴有血氨不同程度升高;诊断后给予限制天然蛋白摄入(特殊奶粉)、精氨酸及支持治疗,分别随访至9个月~10岁,有高氨血症发作3例,注意力缺陷多动、一过性口角抽动、肌张力增高各1例;除1例死亡,5例存活患儿的年龄与发育进程问卷及格里菲斯发育评估量表评分均正常,但合并身高或体重发育落后4例。结论:浙江省CPS1缺乏症患儿表现为典型血瓜氨酸低、高氨血症生化改变;基因变异多数为家族特有,未发现热点突变。新生儿筛查早期诊断规范治疗患儿预后较好。

氨甲酰磷酸合成酶1缺乏症1例临床及基因分析

目的分析CPS1基因突变致氨甲酰磷酸合成酶1缺乏症的临床特征、诊断及治疗.方法回顾分析1例CPS1基因突变致氨甲酰磷酸合成酶1缺乏症患儿的临床资料及基因检测结果,并结合文献进行分析.结果患儿男性,36周早产,出生体质量2500 g,出生后反应差、拒乳,四肢肌张力低下;血氨显著升高,血串联质谱示瓜氨酸水平减低,存在尿素循环障碍.全外显子基因测序显示CPS1基因复杂杂合突变,分别来自母亲的C.2876A>G(p.Y959C)及父亲的C.2429A>C(p.Q810P)的错义突变.父母非近亲结婚,表型无异常.结论早期行基因检测可协助氨甲酰磷酸合成酶1缺乏症诊断.

1例新生儿期发病氨甲酰磷酸合成酶1缺乏症的诊断方法

目的总结新生儿期发病的氨甲酰磷酸合成酶1缺乏症(CPS1D)的诊断方法。方法对1例新生儿期发病的CPS1D患儿的临床资料作回顾性分析。结果患儿女,出生第3天表现为发热、反应低下、嗜睡及血氨水平升高。患儿CPS1基因存在复合杂合突变,分别为第19号外显子chr2:211473230位置c.2238C>T(p.R780C),可导致第780位氨基酸由精氨酸突变为半胱氨酸;第3号外显子chr2:211441171位置c.338A>T(P.D113V),可导致第113位氨基酸由天冬氨酸突变为缬氨酸。患儿母亲存在CPS1基因第19号外显子chr2:211473230位置c.2238C>T(p.R780C)变异,患儿父亲存在第3号外显子chr2:211441171位置c.338A>T(P.D113V)变异。根据临床表现、实验室检查及基因检测结果,患儿明确诊断为CPS1D。结论新生儿期发病的CPS1D患儿主要临床表现为反应低下、意识障碍、血氨水平升高,患儿存在CPS1基因第19号外显子chr2:211473230位置c.2238C>T(p.R780C)、c.338A>T(P.D113V)复合杂合突变,患儿CPS1基因复合杂合突变分别遗传自患儿父、母。血、尿氨基酸实验室检查联合基因检测可明确CPS1D诊断。

CPS1基因新发变异致氨基甲酰磷酸合成酶1缺乏症1例并文献复习

目的提高氨基甲酰磷酸合成酶1缺乏症表型及基因型认识。方法回顾性分析中南大学湘雅二医院儿童医学中心新生儿专科1例氨基甲酰磷酸合成酶1缺乏症的诊治过程。结果男性患儿,17 d,因出生后反应差,反复吐奶17 d入院。血串联质谱示瓜氨酸3.63~4.35μmol/L,血氨波动于117.12~905.4μmol/L;全外显子基因测序发现CPS1基因母源性c.1912C>T无义变异和父源性c.3389C>A错义变异,确诊氨基甲酰磷酸合成酶1缺乏症。CPS1基因c.3389C>A变异位点未见文献报道。结论对反应差及呕吐新生儿,需警惕尿素循环障碍,积极基因检测可明确诊断。

新生儿型氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ缺乏症合并地中海贫血1例及文献复习

目的探讨新生儿型氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ缺乏症(CPSⅠD)的临床特点及实验室分析结果。方法收集1例CPSⅠD患者的临床资料及基因测序结果,并结合相关文献进行分析。结果患儿出生2 d即出现吮奶差,随后出现精神反应差,拒奶,嗜睡,昏迷和高氨血症,1个月后开始出现贫血;患儿外周血及其父母外周血染色体核型均显示正常,基因测序结果显示患儿为2个CPSⅠ基因变异,均位于2号染色体,分别源于父方和母方,其中c.2359(exon19)C>T是致病突变位点,c.3389(exon27)C>A基因突变位点临床意义不明;地中海贫血血红蛋白电泳检测结果Bart′s2.9,基因型诊断为SEA杂合,血串联质谱瓜氨酸显著降低。结论新生儿疾病筛查技术结合基因测序有利于疾病的早发现早诊断,新生儿起病迅速,常规治疗未见明显改善时应高度怀疑遗传代谢性疾病,并进行相应的筛查和精准确诊。

氨甲酰磷酸合成酶1缺乏症一例并文献复习

目的分析1例氨甲酰磷酸合成酶1缺乏症(CPS1D)患儿临床资料及基因检测结果,总结国内外报道儿童病例的相关特点。方法回顾性分析四川省妇幼保健院收治的1例CPS1D患儿的临床资料、实验室检查、基因检测结果。以"氨甲酰磷酸合成酶1缺乏症"和"carbamoyl phosphate synthetase 1 deficiency"为检索词,分别检索中国知识资源总库、万方数据库和PubMed数据库,检索建库以来至2022年6月发表的文献,并进行文献资料总结。结果先证者表现为吐奶、呼吸窘迫、抽搐、意识障碍,血氨升高。基因检测:CPS1基因c.2424delT(p.F809Sfs*12)(未报道)和c.1145C>T(p.P382L)(已报道)复合杂合突变,确诊CPS1D。数据库检索获得符合纳入标准的文献14篇,共报道31例CPS1D患者,临床表现多样,缺乏特异性。共统计57个CPS1基因突变,错义突变最常见(69.8%)。新生儿发病23例,病死率73.9%,基因型、血氨水平对病死率的影响不显著(P>0.05)。结论本研究扩大了CPS1基因突变谱;CPS1D发病率低,临床症状不典型,病死率高,容易延误诊断;提高对CPS1D的认识,有助于早期诊断和干预。

全基因组测序确诊氨基甲酰磷酸合成酶缺乏症Ⅰ型1例

患儿,男,1个月20天,因“呕吐3天,昏睡、呻吟半天伴反复抽搐发作”入院,患儿系G2P2,足月顺产,否认出生时有窒息抢救史,出生体重3400g,父母体健,否认近亲结婚,否认家族遗传病、传染病及肝胆疾病史.患儿哥哥体健.入院查体:昏睡状态,精神、反应差,面色稍苍白,无特殊面容,全身皮肤无黄染、淤点淤斑、出血点及花纹征。

新生儿型氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ缺乏症1例报告及文献回顾

目的探讨新生儿型氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ缺乏症(CPS 1 D)的临床特点。方法回顾分析1例新生儿型CPS 1 D患儿的临床资料及基因学检测结果,并复习相关文献。结果患儿,女,3 d。以不吃、不动、气促、抽搐等非特异表现起病,予禁食、抗感染、呼吸支持等治疗病情一度好转,恢复喂养后病情加重、进展迅速。头颅MRI示广泛脑白质病变;血氨>500μmol/L;基因检测发现致病基因CPS1存在第20号外显子c.2407C>G(p.803,R>G)及第4号外显子C.323 G>A(p.108,G>E)两处杂合突变,最终确诊为CPS 1 D。结论对出生时正常,建立喂养后出现不明原因喂养困难、抽搐及意识障碍的新生儿,若血氨水平明显增高,应尽早行血、尿氨基酸及基因分析明确诊断。

新生儿氨甲酰磷酸合成酶缺乏症1例报告

氨甲酰磷酸合成酶缺乏症是尿素循环障碍中的一型,如果在新生儿期起病,则会在生后数日内出现喂养困难、意识障碍、呕吐、惊厥等,死亡率高,应引起重视.现将本科发现的1例总结报告如下.1 病例报告患儿,男,出生1d,1d内面色青紫2次入院.患儿系第1胎第1产,胎龄41周,因头盆不称行剖宫产,羊水Ⅱ度粪染,无羊水早破、宫内窘迫及生后窒息史;出生体重3 000 g,生后3h开始喂配方乳,食欲及吸吮正常,生后5h排胎便及排尿;生后20 h连续发生两次面色青紫,自行缓解,测血糖1.7mmol/L,当地医院给予口服糖水后,转入我院治疗.

氨甲酰磷酸合成酶1缺乏症的诊断与治疗研究进展

氨甲酰磷酸合成酶1(carbamogl phosphate synthe tose 1,CPS1)缺乏症为尿素循环障碍的一个少见类型,引起不同程度的高氨血症及代谢性脑病及肝病。如果不能及时正确地治疗,预后不良,致残率及病死率较高。现就CPS1缺乏症的病因及发病机制、临床特征、诊断、饮食、药物及肝移植治疗进展进行总结,进一步提高临床医师对该病的认识。

氨甲酰磷酸合成酶缺乏症Ⅰ型1例报告

尿素是通过五种酶和尿素循环的作用形成的.这些酶缺乏症的患者多发生在新生儿期,典型表现为急性高氨血症.氨甲酰磷酸合成酶缺乏症缺乏症（CPS）携带者的基因特征是一种遗传代谢性疾病,CPS的致病原因是氨甲酰磷酸合成酶缺乏,使尿素循环阻断,血氨增高,对脑产生毒性.笔者总结氨甲酰磷酸合成酶缺乏症Ⅰ型1例的经验和体会报告如下.

新生儿氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ缺乏1例报告及文献回顾

目的提高医护人员对新生儿尿素循环障碍中氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ缺乏症(CPS1D)的认识。方法回顾分析1例新生儿型CPS1D患儿的临床资料及基因学检测结果,并复习相关文献。结果患儿,男,出生3 d后出现嗜睡、反应差,肌张力减弱、呕吐等非特异临床表现,予禁食、抗感染、血液透析等治疗病情一度好转,恢复母乳、奶粉喂养后病情加重,血氨明显增高>500μmol·L^(-1);外送基因检测结果提示致病基因CPS12号染色体长臂(2q34)可见两处基因突变19号外显子c.2339G>A(p.(Arg780His))(父亲杂合携带)和29号外显子c.3520C>T(p.(Arg1174*))(母亲杂合携带)杂合突变,CPS1D诊断明确。结论对于出生时正常,开始喂养后出现嗜睡、反应差、喂养困难、呕吐等不典型临床症状新生儿,应尽早完善血氨检查,若血氨水平明显增高,则尽快行氨基酸及基因检测以明确病因。

氨甲酰磷酸合成酶单克隆抗体的制备、鉴定及应用

目的:制备抗人氨甲酰磷酸合成酶(CPSI)的单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定与应用。方法:将正常成人肝组织匀浆离心并分离线粒体,用线粒体总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb,并通过间接ELISA法、Western blot、免疫组化及免疫荧光染色的方法对mAb进行特性鉴定,通过免疫沉淀联合质谱、Uni-ZAP XR表达文库筛选鉴定抗原,借助免疫捕获的方法用抗体来分离复合物。结果:获得3株可稳定分泌抗人CPSImAb的杂交瘤细胞系。mAb的Ig亚类(型)为IgG1(κ),该mAb可用于ELISA检测、Westernblot、免疫组化、免疫荧光染色、免疫沉淀实验和复合物的分离。结论:成功制备了抗人CPSI的mAb,为CPSI的研究提供了有力的工具。

氨甲酰磷酸合成酶I上游顺序功能和特性的CAT检测

首次构建了一系列含有不同长度氨甲酰磷酸合成酶Ｉ（ＣＰｓＩ）上游ＤＮＡ顺序的ｐＫＣＰＳｘ－ＣＡＴ表达质粒，并通过ＣＡＴ检测观察了ＣＰＳⅠ调控顺序的功能及特性。结果表明，ＣＰＳⅠ上游顺序具有高度组织特异性基因表达调控作用；－１４２～－３８ｂｐ上游顺序与特异性调控有密切关系，是维持ＣＰＳⅠ转录必不可少的顺序；－１７００～－１６１ｂｐ顺序中含有增强ＣＰＳⅠ启动子转录作用的顺序。地塞米松和促分化剂硫杂脯氨酸对肝癌细胞中ＣＰＳⅠ的转录均有改善作用。这对探索ＣＰＳⅠ调控机制的细胞内过程，研究肝癌细胞的逆转和分化机制有重要意义，并提供了特殊模型。

大鼠肝氨甲酰磷酸合成酶I cDNA片段在肝癌及非肝细胞中表达体系的构建

观察０．５８７和０．７１２ｋｂＣＰＳＩｃＤＮＡ片段分别与ｐＳＶ＿２载体的重组质粒ｐＳＶ＿２－ＣＰＳ＿（５０５）和ｐＳＶ＿２－ＣＰＳ＿（５０７）在人肝癌和非肝细胞中的表达情况。结果证实，两种重组的表达质粒转染的７４０２人肝癌细胞和ＮＩＨ／３Ｔ３细胞均能有效地表达ＣＰＳＩ，ＣＰＳＩ基因的非翻译区顺序与其高度组织特异性无关。这些体系的建立为体外生产ＣＰＳＩ抗原和天然ＣＰＳＩ蛋白提供了细胞模型和实验依据，对深入了解ＣＰＳＩ的表达过程及其癌变和分化的关系具有重要的意义。

制备^(35)S标记的氨甲酰磷酸合成酶I的cDNA探针用于原位分子杂交

应用改进的缺口翻译方法,将α-^(35)S-dATP掺入CFS_1cDNA分子,获得了0.9～1.5×10~8cpm/μgDNA的高比度^(35)S标记探针.用其做RNA-DNA原位分子杂交探测正常和癌变肝组织中CPS_1基因的表达,放射自显影10～14天,能够获得满意的结果.

血清氨甲酰磷酸合成酶1在戊型肝炎急性肝衰竭患者的表达及其预后价值

目的分析戊型肝炎急性肝衰竭(HEV-ALF)患者血清氨甲酰磷酸合成酶1(CPS1)水平与患者预后的相关性,评估血清CPS1水平对HEV-ALF患者30 d病死率的预测价值。方法收集2018年12月至2019年6月浙江大学医学院附属第一医院等6家医院的100例HEV-ALF患者、100例急性戊型肝炎(AHE)患者以及100名健康人群3组资料进行回顾性分析。根据HEV-ALF患者30 d随访期内是否死亡,分为死亡(n=21)和生存(n=79)亚组;根据HEV-ALF患者血清CPS1的中位数水平,分为高CPS1水平(n=50)和低CPS1水平(n=50)亚组;根据HEV-ALF患者病情变化情况,分为病情好转(n=55)、病情波动(n=32)和病情恶化(n=13)亚组。收集所有纳入对象的一般资料。通过酶联免疫吸附试验检测血清CPS1水平。采用Kaplan-Meier曲线比较高CPS1水平和低CPS1水平患者的生存时间。通过线性回归分析血清CPS1水平与HEV-ALF患者丙氨酸转氨酶和总胆红素水平的相关性。用受试者工作特征曲线评价血清CPS1水平预测HEV-ALF患者30 d病死率的效能。结果HEV-ALF组血清CPS1水平高于AHE组[958.6(665.5,1105.8)pg/ml比549.4(495.0,649.1)pg/ml,P<0.001],AHE组血清CPS1水平高于健康人群[549.4(495.0,649.1)pg/ml比469.9(373.3,564.5)pg/ml,P<0.001]。HEV-ALF患者生存亚组的血清CPS1水平低于死亡亚组[922.6(652.7,1042.3)pg/ml比1252.8(933.3,1555.8)pg/ml,P<0.001],且高CPS1水平HEV-ALF患者的生存时间低于低CPS1水平患者[24.59(22.11,27.06)d比28.16(26.25,30.07)d,P=0.045]。与入院时CPS1水平比较,波动和恶化亚组血清CPS1水平升高,而好转亚组降低(P均<0.01)。此外,患者血清CPS1水平与丙氨酸转氨酶和总胆红素呈正相关(r=0.339、0.304,P均<0.01)。血清CPS1水平预测HEV-ALF患者30 d病死率的曲线下面积为0.803(95%CI 0.666~0.941),敏感度为66.67%,特异度为97.47%。结论血清CPS1水平在HEV-ALF患者中高表达,且与患者的预后密切相关。

新生儿氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ缺乏症1例

本文报道1例新生儿期起病的氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ(carbamoyl phosphate synthetaseⅠ,CPSⅠ)缺乏症,患儿生后3 d出现拒奶、呕吐、反应差,血氨最高514μmol/L,全外显子测序提示CPSⅠ基因复合杂合变异,经低蛋白饮食、降血氨药物治疗后患儿病情好转,但喂养困难、生长迟缓,于4月龄接受肝移植手术,随访至2岁,智力运动及体格发育正常。

婴儿迟发型氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ缺乏症1例并文献分析

目的探讨婴儿迟发型氨甲酰磷酸合成酶I缺乏症(CPSID)的临床特征及基因突变情况。方法总结1例婴儿迟发型CPSID患儿的临床资料,回顾分析其临床特点、头颅磁共振成像及基因检测等结果,并分析相关文献。结果患儿,男,1月29天,以吐奶、烦躁及精神反应差等非特异性表现起病,后病情迅速进展,出现抽搐、昏迷及呼吸暂停等症状。先后两次查血氨值分别为:518.6μmol/L、952.8μmol/L,头颅磁共振提示双侧大脑半球白质区异常信号,基因检测发现CPSI致病基因存在第15号外显子c.1676delA(p.E559fs)及第20号外显子c.2407C>G(p.R803G)两处杂合突变。结合以上最终确诊为迟发型CPSID。结论对于婴幼儿建立喂养后出现不明原因吐奶、喂养困难及意识障碍等症状,应尽快完善血氨等代谢指标检测,若血氨水平明显增高,应考虑先天性尿素循环障碍,并行头部MRI检查以评价脑损伤程度。本例患儿基因检测结果发现了一个新的突变位点c.1676delA(p.E559fs),这在一定程度上扩展了CPSID的基因谱。

鞘氨醇1磷酸酯裂解酶1突变对小鼠脂类和脂肪代谢的影响

目的探讨鞘氨醇1磷酸酯裂解酶1(SGPL1)突变对小鼠脂类和脂肪代谢的影响。方法 8只野生型(WT)小鼠(WT组)和4只SGPL1^(-/-)小鼠(SGPL1^(-/-)组)正常饮食喂养5周,每周称体质量。2组小鼠禁食12 h后分别采用葡萄糖耐量试验(GTT)和胰岛素耐量试验(ITT)检测小鼠对胰岛素的敏感性。于第6周麻醉小鼠进行眼球取血,采用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平。脊椎脱臼处死小鼠,解剖分离皮下脂肪组织(SAT)和附睾脂肪组织(EAT)并称其质量,计算SAT、EAT与体质量的比值;采用苏木精-伊红染色观察脂肪组织形态学变化,实时荧光定量聚合酶链反应检测小鼠脂肪组织中脂肪合成相关基因乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)、固醇调节元件结合蛋白1C(SREBP-1C)及脂肪分解相关基因羧酸酯酶1(CES1)、激素敏感脂肪酶(HSL)、脂蛋白脂酶(LPL)和脂肪酸氧化基因肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT1)、脂代谢调控基因过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPAR-γ) mRNA表达。结果 0～5周,WT组小鼠体质量呈缓慢增加趋势,SGPL1^(-/-)组小鼠体质量呈逐渐下降趋势。SGPL1^(-/-)组小鼠血清TC、TG、LDL、HDL水平均显著高于WT组(P <0. 05),SGPL1^(-/-)组小鼠SAT、EAT质量及其与体质量的比值均显著低于WT组(P <0. 05)。GTT、ITT结果显示,2组小鼠0、15、30、60、90、120 min时血糖水平比较差异均无统计学意义(P> 0. 05)。SGPL1^(-/-)组小鼠脂肪组织中FAS、SREBP-1C、CES1、HSL、LPL、CPT1和PPAR-γmRNA表达均显著高于WT组(P <0. 05),2组小鼠脂肪组织中ACC mRNA表达比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 SGPL1突变后小鼠血清脂类代谢紊乱,脂肪组织减少,脂肪合成和分解相关基因表达明显上调。