目的探讨紫草素对脑胶质瘤细胞氨肽酶N活性的影响及机制。方法本文采用酶抑制动力学方法,研究了紫草素对氨肽酶N的抑制作用、抑制类型和抑制动力学常数,并进行了脑胶质瘤U251细胞的凋亡生长抑制实验及不同浓度紫草素溶液在氨肽酶N溶液...目的探讨紫草素对脑胶质瘤细胞氨肽酶N活性的影响及机制。方法本文采用酶抑制动力学方法,研究了紫草素对氨肽酶N的抑制作用、抑制类型和抑制动力学常数,并进行了脑胶质瘤U251细胞的凋亡生长抑制实验及不同浓度紫草素溶液在氨肽酶N溶液中的荧光光谱测定、圆二色光谱测定。结果紫草素能可逆的竞争性抑制氨肽酶N的活性(半数抑制率IC50为93.59μmol·L^(-1),抑制常数Ki为32.74μmol·L^(-1));随着孵化时间的增加,不同浓度紫草素对氨肽酶N的相对活性无影响,其对脑胶质瘤U251细胞的半数抑制浓度为66.12μmol·L^(-1);紫草素可浓度依赖性的促进氨肽酶N内源性荧光发生猝灭效应,两者的结合常数Ka为4.12×104 L·mol-1,热力学参数ΔH和ΔS分别为38.64 k J·mol-1和179.21 J/(mol·K);紫草素还可诱导氨肽酶N构象的解折叠,使α-螺旋含量增加到32.1%,β-折叠含量减小到22.9%。结论紫草素是一种可逆的竞争型氨肽酶N抑制剂,其可迅速降低酶的活性,并诱导脑胶质瘤U251细胞的凋亡。紫草素的作用可能通过猝灭氨肽酶N的内源性荧光并诱导氨肽酶N构象的解折叠,使α-螺旋含量增加而实现的。展开更多
文摘目的探讨紫草素对脑胶质瘤细胞氨肽酶N活性的影响及机制。方法本文采用酶抑制动力学方法,研究了紫草素对氨肽酶N的抑制作用、抑制类型和抑制动力学常数,并进行了脑胶质瘤U251细胞的凋亡生长抑制实验及不同浓度紫草素溶液在氨肽酶N溶液中的荧光光谱测定、圆二色光谱测定。结果紫草素能可逆的竞争性抑制氨肽酶N的活性(半数抑制率IC50为93.59μmol·L^(-1),抑制常数Ki为32.74μmol·L^(-1));随着孵化时间的增加,不同浓度紫草素对氨肽酶N的相对活性无影响,其对脑胶质瘤U251细胞的半数抑制浓度为66.12μmol·L^(-1);紫草素可浓度依赖性的促进氨肽酶N内源性荧光发生猝灭效应,两者的结合常数Ka为4.12×104 L·mol-1,热力学参数ΔH和ΔS分别为38.64 k J·mol-1和179.21 J/(mol·K);紫草素还可诱导氨肽酶N构象的解折叠,使α-螺旋含量增加到32.1%,β-折叠含量减小到22.9%。结论紫草素是一种可逆的竞争型氨肽酶N抑制剂,其可迅速降低酶的活性,并诱导脑胶质瘤U251细胞的凋亡。紫草素的作用可能通过猝灭氨肽酶N的内源性荧光并诱导氨肽酶N构象的解折叠,使α-螺旋含量增加而实现的。
