混合菌感染中氨苄西林耐药的大肠埃希菌β-内酰胺酶基因的研究

目的研究大肠埃希菌和屎肠球菌混合感染中氨苄西林耐药的大肠埃希菌β-内酰胺酶基因型。方法收集2010年1月—2014年1月首都医科大学附属北京友谊医院分离出的大肠埃希菌和屎肠球菌混合感染24例。采用纸片扩散法测定大肠埃希菌和屎肠球菌的药物敏感性,聚合酶链反应(PCR)检测大肠埃希菌β-内酰胺酶基因型。结果混合感染中24株大肠埃希菌对氨苄西林耐药的有20株(83.3%)。12株检测出β-内酰胺酶基因,其中6株只检测出TEM耐药基因,1株只检测出amp C耐药基因,5株同时检出TEM和amp C耐药基因。结论混合菌感染中氨苄西林耐药大肠埃希菌β-内酰胺酶基因以TEM型为主。

氨苄西林耐药流感嗜血杆菌的基因分型研究

目的了解2000—2003年北京、上海、广州细菌耐药监测项目中,小于5岁呼吸道感染儿童鼻咽部携带氨苄西林(AMP)耐药流感嗜血杆菌(Haemophilusinfluenzae,Hi)的分子流行病学情况。方法对上述呼吸道感染儿童鼻咽部分离的899株Hi进行AMP敏感性检测,筛选出74株AMP耐药Hi,采用巢式PCR荚膜分型和玻片凝集法,对AMP耐药菌株进行b型Hi(Haemophilusinfluenzaetypeb,Hib)检测,并用脉冲电场凝胶电泳(pulsed-fieldgelelectrophoresis,PFGE)和多重PCR两种方法,对AMP耐药菌株进行基因分型。结果74株AMP耐药Hi中,有2株Hib(占2.7%)。PFGE分型74株AMP耐药Hi中有38种基因型,具有克隆传播趋势的有5型,包括41株Hi(占55.4%)。其中菌株数最多的为A型,有18株,占24.3%,以2002年上海地区为主。多重PCR分型结果有31型,多重PCR与PFGE分型结果一致率为63.5%。结论北京、上海、广州三地区四年内小于5岁的呼吸道感染儿童鼻咽部携带的AMP耐药Hi有55.4%的菌株存在克隆传播。

屎肠球菌对氨苄西林耐药pbp5基因突变的研究

目的研究屎肠球菌对氨苄西林耐药与β内酰胺酶、pbp5基因突变的关系。方法用硝基噻吩(nitrocefin)法检测β内酰胺酶的产生,聚合酶链反应扩增pbp5基因片段,单链构像多态性分析检测pbp5扩增片段的基因突变,测序确定突变的具体位点。结果57株对氨苄西林耐药的屎肠球菌β内酰胺酶阴性;pbp5基因片段均有3至6个位点发生突变,485和499位点突变、466′位插入突变最为常见。结论pbp5基因突变在屎肠球菌对氨苄西林耐药中起着重要作用。