大肠杆菌肽酶D的重组表达和晶体生长

用PCR技术扩增大肠杆菌肽酶D(pepD)的基因,并将扩增基因克隆于原核表达载体pET-22b中,获得该蛋白的可溶性高效表达。通过镍亲和层析柱一步纯化后可得电泳纯的重组蛋白。该蛋白为二体形式,每个单体含有一个锌原子。用“悬滴气相扩散法”对该蛋白进行晶体生长,获得单晶。