三元、超临界及氯仿抽提物有机地球化学特征对比--以渤海湾盆地东营凹陷沙四段为例

通过三元、超临界及氯仿抽提对渤海湾盆地东营凹陷古近系沙河街组四段下部的4个烃源岩样品进行了抽提量、族组分及色谱特征等分析和对比。抽提量对比研究表明:超临界抽提萃取能力较弱;三元抽提则具有相对较强的萃取能力,特别是在成熟度较高的烃源岩评价中,可能是一种相对有效的方法。族组分及色谱特征对比表明:三元抽提对中高碳数正构烷烃及杂原子化合物的萃取能力较强,其色谱特征与氯仿抽提物有较大区别;而超临界抽提对低分子量烃类萃取能力较强,其色谱特征与氯仿抽提物相似。

氯仿抽提物对黄陵烟煤预热前后吡啶抽提率和性质的影响

测定了黄陵烟煤氯仿抽出物和预热前后吡啶抽出物的性质及产率;讨论了氯仿抽出物在煤的预热过程中所起的作用。结果表明,黄陵烟煤氯仿抽出物是富有脂肪性的碳氧化合物,在煤的预热过程中能起供氢体的作用。

质粒DNA的酚-氯仿一步抽提法

本文介绍了一种极快速提取质粒DNA的方法。该法是对Serghini等发表的方法的改进,全过程只需用酚-氯仿混合液抽提一次,用时少,操作简便,适用于大规模筛选重组克隆子,也可直接用作转化、酶切及DNA序列测定。

氯仿抽提纯化CA 16病毒最优条件的筛选

目的筛选氯仿抽提纯化柯萨奇病毒A组16型(Coxsakievirus A 16,CA16)的最优条件。方法根据《中国药典》三部(2015版)的相关要求,选择病毒感染性滴度、残余蛋白、残余牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)、残余卡那霉素及残余氯仿含量等指标,分析氯仿抽提的不同条件及超滤浓缩对纯化产物质量指标的影响。将CA16浓缩病毒液与氯仿按不同体积比进行一抽多洗纯化,分析不同比例氯仿对纯化效果的影响;将CA16超滤浓缩病毒液分别用不同浓度的PBS洗涤,以评价不同离子浓度的PBS洗涤对纯化病毒纯化液质量指标的影响。结果不同浓度的PBS洗涤液、病毒液与氯仿体积比对纯化液病毒感染性滴度均无明显影响,病毒回收率平均为81.7%;随着PBS洗涤次数的增多,洗液中的杂蛋白逐渐减少,氯仿比例及PBS离子浓度对蛋白去除率影响不明显,蛋白去除率均大于82%(82.69%~93.6%),平均去除率88.37%;不同氯仿比例、不同PBS浓度及不同洗涤次数对残余卡那霉素含量无明显影响,结果均低于30 ng/mL,经超滤浓缩后,其含量低于3.0 ng/mL;氯仿抽提纯化残余BSA的去除率可达68.87%,若结合超滤浓缩工艺,残余BSA的去除率可达94.74%;超滤浓缩后纯化病毒液残余氯仿去除率可达98%以上,最终纯化液残余氯仿含量小于6μg/mL。结论氯仿抽提方法结合超滤浓缩可得到符合要求的CA16病毒实验性疫苗。

页岩滞留液态烃的定量评价

利用低温样品前处理技术并与地质分析相结合,建立了应用氯仿沥青"A"和热解参数定量评价页岩中滞留烃的方法。通过自生自储油气藏中原油与烃源岩氯仿抽提物组分对比,建立了东营凹陷主要生油窗范围内氯仿沥青"A"轻烃恢复系数随烃源岩生烃演化而变化的关系曲线,Ro小于0.5%,氯仿沥青"A"恢复系数较小,其重要增加发生在Ro为0.7%以后,Ro在1.2%时达到1.40以上。通过新鲜冷冻样品与常温保存样品的对比,建立了热解过程中散失轻烃的确定方法,并建立了不同演化阶段的散失系数,其变化规律与氯仿沥青"A"恢复系数相似。通过原样及抽提残渣的热解对比分析,建立了不同演化阶段烃源岩热解S2中滞留烃的比例系数,在成熟阶段(Ro为0.8%),这一比例可高达50%以上。通过上述技术方法,可以客观评价页岩中滞留烃含量,对油气资源评价具有重要意义。

柴达木盆地西部第三系烃源岩生烃动力学研究

对柴达木盆地西部第三系烃源岩进行了生烃动力学模拟实验,使用氯仿对产物抽提,结果表明抽提物的生成量不符合经典的生烃动力学规律,无法采用动力学方程模型进行分析,这可能是由于模拟实验中产生了有机酸盐的缘故．柴西烃源岩模拟实验中抽提物的生成可以概括为有机母质→有机酸盐→抽提物和有机母质→抽提物两条途径．

高效化学转化菌内同源重组法构建重组腺病毒

目的:对细菌内同源重组法构建重组腺病毒AdEasy系统加以改进,为制备具有更高抗肿瘤疗效的生物治疗制剂奠定基础。方法:将自杀基因CD和HSV-TK插入穿梭质粒pAdTrack-CMV中,PmeⅠ酶切后,用酚∶氯仿抽提、乙醇沉淀或切胶回收纯化;分别采用电穿孔转化法和化学转化法将线性穿梭质粒(pAdTrackCMV-CDglyTK)与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在细菌内实现同源重组;将重组腺病毒质粒rpAdEasyGFP-CDglyTK以脂质体介导至293细胞中进行包装、扩增。结果:采用切胶回收化学转化法获得阳性重组率最高(100%)。经PCR、酶切以及测序等方法鉴定,证实融合自杀基因已成功插入腺病毒中。结论:对细菌内同源重组法构建重组腺病毒的方法进行了改进,在降低实验成本的同时获得了较原法更高的阳性重组率,并成功构建了复制缺陷性重组腺病毒rAd-CDglyTK。

二次生烃过程中升温速率对生烃途径的影响——以鄂尔多斯烃源岩生烃动力学研究为例

采用生烃动力学方法对鄂尔多斯已熟烃源岩进行模拟实验,与以往结果有所不同,实验证明在源岩二次生烃过程中,慢速升温并不利于液态烃的生成,而快速升温才更有利于生成液态烃。这可能是因为在慢速升温条件下,有机质可以有足够长时间缩聚成超大基团,而快速升温则易造成中等分子链的断裂,从而导致快速升温时抽提物产率高于慢速升温。因此,升温速率的差异对有机质的演化影响不只是影响反应速率,更重要的是会改变反应路径,从而对于像鄂尔多斯这样存在二次生烃的盆地,应适当重视那些高地温梯度区块石油资源的寻找。

一种适用于绿僵菌克隆筛选的DNA批量快速提取方法

基因组DNA的提取是最基本的分子生物学实验技术,介绍了一种适用于绿僵菌克隆筛选的DNA批量快速提取方法.研究结果表明:使用改良的察氏琼脂培养基(CDA)代替常用的土豆葡萄糖琼脂(PDA)培养绿僵菌,以钢珠振打破碎菌丝,配以简化的酚氯仿抽提操作,可以高效地提取高质量的真菌基因组DNA.本方法中,CDA菌落生长需2~3 d,双样品提取耗时约15 min,每个菌落可获得DNA数百纳克,片段长度在10 kb左右,电泳条带清晰可见.

pH值对甲肝减毒活疫苗后处理得率的影响

在甲肝减毒疫苗生产工艺中不同pH对疫苗得率有一定的影响 ,为提高疫苗的产量 ,在传统的氯仿抽提条件下 ,使用不同pH值 (pH1.0～ 12 .0 )的磷酸盐缓冲体系进行氯仿抽提 ,检测抽提后甲肝病毒(HepatitisAVirus ,HAV)抗原滴度和感染性滴度 ,结果表明 :经氯仿抽提后 ,HAV抗原滴度和感染性滴度均在pH8.0～ 9.0时最高 ,相应得率也比常规处理的得率有显著的提高 .说明改进pH抽提条件对甲型肝炎减毒活疫苗后处理工艺效率的提高 ,成品疫苗产量的增加具有实际应用价值 .

不同核酸提取方法及检测方法检测猪圆环病毒2型的比较

采用传统酚氯仿、磁珠吸附两种核酸提取法和普通PCR、荧光PCR两种检测方法,对26份临床样品进行猪圆环病毒2型(PCV2)检测。结果比较发现两种提取方法在普通PCR检测中差异显著(X2=10.029,P<0.01),磁珠吸附法的阳性检出率明显高于传统酚氯仿抽提法;荧光PCR检测结果一致。普通PCR和荧光PCR两种检测方法对传统酚氯仿法提取的核酸进行检测,结果差异显著(X2=31.951,P<0.01),荧光PCR法阳性检出率高;对磁珠吸附法提取的核酸检测,结果差异显著(X2=7.988,P<0.01),荧光PCR法阳性检出率高。结果表明,用磁珠吸附法结合荧光PCR法进行检测,其敏感性和稳定性优于传统方法。

马来酰亚胺C改性的轮胎再生胶:性能、结构、对橡胶性能的影响

由热机械法从轮胎硫化胶制得的再生胶,含有大量易裂解聚异戊二烯,由于内聚强度和门尼粘度低而具有不良的工艺性能。同时也已知,在制造过程中通过机械化学改性。

抗体库构建中影响库容量的因素探讨

目的:探讨在噬菌体抗体库的构建过程中,提高转化效率的最优条件。方法:通过改变感受态细菌的浓度、电击时间的长短以及连接产物的纯化方法,从而找出最佳条件。结果:实验证明:在仪器的电压、电阻、电容等条件设定不变的情况下,感受态细菌的OD600在0.4左右,电击时间为2 s,转化效率最高。结论:连接产物进行酚-氯仿抽提后转化效率也会大大提高。

分子生物学实验中几种提取基因组DNA方法的比较

基因组DNA的提取是分子生物学的常规技术之一,本次实验课采用新的课程设计思路,比较了几种基因组DNA提取的方法,为学生后续的科研工作提供参考。