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DNA提取方法的比较及改良 被引量:24
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作者 童大跃 伍新尧 +4 位作者 陆惠玲 蔡贵庆 区敬华 陈勇 曾艳红 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期411-412,共2页
用于处理 DNA检材以分离和提取 DNA的方法很多.不同的方法有不同的优缺点,其适用的分析技术也不同 [1~ 5].在法医检案的实际应用过程中经常会遇到不少的问题,如微量检材的 DNA提取,既要纯度高,又要回收率高;常用的几种方法单独进行时... 用于处理 DNA检材以分离和提取 DNA的方法很多.不同的方法有不同的优缺点,其适用的分析技术也不同 [1~ 5].在法医检案的实际应用过程中经常会遇到不少的问题,如微量检材的 DNA提取,既要纯度高,又要回收率高;常用的几种方法单独进行时则很难达到这样的要求.本文就几种常用的方法进行了改良及它们效果比较. 展开更多
关键词 DNA提取 酚-氯仿提取法 Chelex-100处理 酶裂解 序列分析
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不同方法提取鳗鲡病原菌DNA模板的差异分析 被引量:3
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作者 熊静 关瑞章 +2 位作者 郭松林 黄文树 关淑芳 《集美大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第3期161-166,共6页
利用吸光值、琼脂糖电泳及PCR差异扩增等指标,对酚-氯仿法、水煮法、碱裂解法3种方法制备的鳗鲡病原菌DNA模板进行了差异分析.结果表明:1)不同方法提取的病原菌模板DNA的浓度、纯度及分子质量大小存在差异,但以这3种方法提取的病原菌DN... 利用吸光值、琼脂糖电泳及PCR差异扩增等指标,对酚-氯仿法、水煮法、碱裂解法3种方法制备的鳗鲡病原菌DNA模板进行了差异分析.结果表明:1)不同方法提取的病原菌模板DNA的浓度、纯度及分子质量大小存在差异,但以这3种方法提取的病原菌DNA为模板,均能成功扩增到细菌16S rD-NA和外膜蛋白的保守序列.其中,酚-氯仿提取的模板DNA浓度较低、纯度较高;水煮法和碱裂解法提取的模板DNA浓度较高、纯度较低.2)电泳显示,3种方法获得的模板DNA扩增出的16S rDNA保守序列条带均一,没有显著差异,但在外膜蛋白保守序列的扩增中却因菌种和模板提取方法的不同而存在差异. 展开更多
关键词 模板DNA 水煮 碱裂解 酚-氯仿提取法 16SrDNA 外膜蛋白基因
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三种提取血液DNA方法的比较 被引量:4
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作者 林经东 林经安 《中华医学写作杂志》 2002年第6期488-490,共3页
目的:为了探求简单、省时、有效的提取血液DNA的方法。方法:对三种常用的提取血液DNA方法所提取的DNA进行HLA-B27的检测结果的比较。结果:三种提取血液DNA方法所提取的DNA的含量和纯度基本一致,HLA-B27的检测结果安全相同;简化... 目的:为了探求简单、省时、有效的提取血液DNA的方法。方法:对三种常用的提取血液DNA方法所提取的DNA进行HLA-B27的检测结果的比较。结果:三种提取血液DNA方法所提取的DNA的含量和纯度基本一致,HLA-B27的检测结果安全相同;简化盐析法最省时、简单。结论:简化盐析法适合大量人群血样本DNA模板提取。 展开更多
关键词 血液 DNA提取 盐析 PCR 苯酚一氯仿提取法 HLA-B27
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两种提取枝角类休眠卵基因组DNA方法的比较 被引量:3
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作者 徐磊 李思嘉 +2 位作者 王晟 韩小玉 韩博平 《湖泊科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第4期632-636,共5页
休眠卵是枝角类在环境胁迫条件下通过有性生殖形成的,休眠卵的孵化对种群补充与恢复有着重要作用.沉积于底泥中的休眠卵保存了不同阶段的种群遗传信息,有效地提取枝角类休眠卵基因组DNA是进一步研究水体枝角类遗传多样性的关键环节.采... 休眠卵是枝角类在环境胁迫条件下通过有性生殖形成的,休眠卵的孵化对种群补充与恢复有着重要作用.沉积于底泥中的休眠卵保存了不同阶段的种群遗传信息,有效地提取枝角类休眠卵基因组DNA是进一步研究水体枝角类遗传多样性的关键环节.采用目前国际上使用的氯仿异戊醇提取法和玻璃乳提取法分别对流溪河水库底泥中表层和底层的盔型溞(Daphnia galeata)休眠卵进行基因组DNA提取的比较分析.结果显示,氯仿异戊醇提取法成功率为27.5%,平均浓度为14.25±1.84 ng/μl;玻璃乳提取法成功率为65.0%,平均浓度为28.37±2.56 ng/μl.无论是提取成功率还是提取浓度玻璃乳提取法都显著高于氯仿异戊醇提取法,且玻璃乳提取法所用试剂少,不涉及有毒试剂,操作步骤简单,整个提取过程所用时间短,玻璃乳提取法提取枝角类休眠卵基因组DNA是一种快捷实用的方法. 展开更多
关键词 休眠卵 DNA提取 盔型溞 仿异戊醇提取 玻璃乳提取
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荧光定量PCR检测HCV核酸提取法临床价值分析 被引量:3
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作者 张为民 龚文波 《中国实用医药》 2013年第18期16-17,共2页
目的使用RQ-PCR比较氯仿-异丙醇法和核酸分离柱法提取HCVRNA的临床价值。方法分别用两种核酸提取法提取相同患者的HCVRNA后,采用RQ-PCR技术检测HCVRNA含量,对两种方法的提取效率和重复性进行对比。结果两种方法均能较好地提取RNA,且提... 目的使用RQ-PCR比较氯仿-异丙醇法和核酸分离柱法提取HCVRNA的临床价值。方法分别用两种核酸提取法提取相同患者的HCVRNA后,采用RQ-PCR技术检测HCVRNA含量,对两种方法的提取效率和重复性进行对比。结果两种方法均能较好地提取RNA,且提取效率相近(P>0.05),但是核酸分离柱法在重复性上更加优于氯仿-异丙醇法。结论两种方法均可被临床采纳,但是核酸分离柱法重复性更高,且毒性低,值得推广。 展开更多
关键词 荧光定量聚合酶链反应 丙型肝炎病毒核酸 核酸分离柱 仿-异丙醇提取
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核酸提取方法对丙型肝炎病毒检验结果的影响分析
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作者 罗娟 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2020年第12期247-247,共1页
目的分析核酸提取方法对丙型肝炎病毒检验结果的影响。方法:以丙型肝炎病毒患者80例为研究对象,研究时间为2019年2月-2020年2月,分为参照组40例与研究组40例,参照组实施氯仿异丙醇核酸提取法,研究组实施固相吸附核酸提取法,均使用荧光定... 目的分析核酸提取方法对丙型肝炎病毒检验结果的影响。方法:以丙型肝炎病毒患者80例为研究对象,研究时间为2019年2月-2020年2月,分为参照组40例与研究组40例,参照组实施氯仿异丙醇核酸提取法,研究组实施固相吸附核酸提取法,均使用荧光定量PCR术检测,对比检验结果。结果研究组检验阳性率明显高于参照组,P<0.05,差异有统计学意义。研究组在50g/L血红蛋白水平中抗干扰能力高于参照组,P<0.05,差异有统计学意义。所有患者均无明显不良反应。结论丙型肝炎病毒使用固相吸附核酸提取法开展荧光定量PCR检验,有效检出疾病,且抗干扰能力强,可广泛应用于临床。 展开更多
关键词 仿异丙醇核酸提取 固相吸附核酸提取 丙型肝炎病毒 荧光定量PCR检验
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利多卡因水解物不同处理方法对TLC结果的影响
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作者 葛卫红 《药学与临床研究》 1997年第4期26-27,共2页
采用氯仿提取法、碱性环境蒸干法及酸性环境蒸干法分别对利多卡因水解样品进行了薄层色谱前处理,并比较了不同处理方法对样品薄层色谱图的影响。结果表明,采用蒸干法时,若供试品溶液呈酸性,则利多卡因的酸性水解产物不可检出;若供试品... 采用氯仿提取法、碱性环境蒸干法及酸性环境蒸干法分别对利多卡因水解样品进行了薄层色谱前处理,并比较了不同处理方法对样品薄层色谱图的影响。结果表明,采用蒸干法时,若供试品溶液呈酸性,则利多卡因的酸性水解产物不可检出;若供试品溶液呈碱性,则利多卡因的碱性水解产物不可检出。采用氯仿提取法时,所得的薄层色谱图,杂质斑点齐全,且操作方便。 展开更多
关键词 利多卡因 氯仿提取法 蒸干 TLC
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PCR扩增法检测牛病毒性腹泻病毒
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作者 李秉鸿 《畜牧兽医科技信息》 1996年第8期7-7,共1页
美国Radwan,G.S.等通过PCR扩增合成cDNA可快速检测散装牛乳中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)。试验的Holstein乳牛,一头作人工急性感染,2头持续性感染。病毒RNA是通过异硫氰酸胍和酚/氯仿提取法从纯化的全乳体细胞中获得。
关键词 牛病毒性腹泻病毒 PCR扩增 持续性感染 急性感染 病毒分离 快速检测 氯仿提取法 体细胞数 病毒RNA 寡核苷酸
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牛支原体分离株全基因组序列测定及初步分析 被引量:10
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作者 王艳杰 李平安 +1 位作者 吴太平 关平原 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第8期44-49,共6页
为全面了解牛支原体NM2012株的基因序列,研究其潜在的致病机制及其复制、转录、翻译过程的调控机制,采用体外大量培养,酚-氯仿法提取牛支原体NM2012株基因组DNA,并送往北京华大基因公司进行全基因组测序注释。结果显示,牛支原体NM2012... 为全面了解牛支原体NM2012株的基因序列,研究其潜在的致病机制及其复制、转录、翻译过程的调控机制,采用体外大量培养,酚-氯仿法提取牛支原体NM2012株基因组DNA,并送往北京华大基因公司进行全基因组测序注释。结果显示,牛支原体NM2012株基因组大小为993 483bp,GC含量为29.26%,测序组装后共产生3个scaffolds,24个contigs。基因组组分分析后发现,NM2012株的基因组含有885个基因,总长度为834 042bp,基因平均长度为942bp,占基因组全长的83.95%。串联重复序列共79个,总长为9 203bp,占基因组全长的0.926 3%。小卫星序列53个,微卫星序列5个,tRNA 34个,rRNA 4个。牛支原体NM2012株16SrRNA序列与支原体属致牛羊病主要菌株构建进化树进一步证实NM2012株为牛支原体,为后期进一步研究牛支原体提供依据。 展开更多
关键词 牛支原体 酚-氯仿提取法 全基因组测序
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产油微生物的筛选及其产油率测定 被引量:3
10
作者 廖春丽 高阿龙 +3 位作者 郑瑞 薛丛丛 黄飞 单林娜 《贵州农业科学》 CAS 2016年第6期83-85,89,共4页
为寻求可再生、环境友好且经济可行的化石能源替代燃料,采用苏丹黑B和尼罗红染色法及甲醇-氯仿提取法对平顶山各地不同生境富含油脂土壤中的高产油脂微生物进行分离筛选。结果表明:试验分离到2株产油菌株PDS1和PDS2。其中,产油细菌PDS1... 为寻求可再生、环境友好且经济可行的化石能源替代燃料,采用苏丹黑B和尼罗红染色法及甲醇-氯仿提取法对平顶山各地不同生境富含油脂土壤中的高产油脂微生物进行分离筛选。结果表明:试验分离到2株产油菌株PDS1和PDS2。其中,产油细菌PDS1为革兰氏阴性菌,产油率为29.47%;产油细菌PDS2为革兰氏阳性菌,产油率为23.57%。 展开更多
关键词 苏丹黑B染色 尼罗红染色 甲醇-氯仿提取法 产油细菌PDS1 产油细菌PDS2
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Genomic DNA Isolation by Phenol/Chloroform Extracting Method from Sheep Blood Clot 被引量:6
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作者 曹果清 莫清珊 陈凤仙 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2009年第5期76-78,共3页
[ Objective] The aim was to establish the method of extracting genomic DNA from sheep blood clot on the basis of the improvement of method for extracting genomic DNA from tissues. [Method]The genomic DNA with complete... [ Objective] The aim was to establish the method of extracting genomic DNA from sheep blood clot on the basis of the improvement of method for extracting genomic DNA from tissues. [Method]The genomic DNA with complete primary structure and high purity was obtained from the sheep blood clot after the steps of cutting the sheep blood clot with ophthalmic scissors, cell lysis with tissue DNA extracts and digested by proteinase K, extracting with phenol/chloroform and precipitating with ethanol were performed. [ Result] The concentration of the extracted DNA was 159.90 ±0.70 ng/μl and the ratio of the A260/A280 was 1.80 +0.01. The sheep microsatellite locus of BM203 was amplified by using the extracted DNA from the sheep blood clot as template of PCR, and the PCR result was perfect. [Conclusion]This method is simple and feasible, the quantity and quality of the extracted DNA can satisfy the demands for the subsequent researches. It is worth to extending and using for reference. 展开更多
关键词 Sheep blood clot Phenol/chloroform extracting method DNA extraction
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Fluka的RNA分离盒
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作者 朱遐 《生物技术通报》 CAS CSCD 1995年第3期20-21,共2页
作为Sigma-Aldrich Co Ltd一部分的Fluka Chemicals研制出一种新的RNA分离盒,其Micro Selelct区具有快速、一步提取RNA的功能。这种盒使用guanidiam硫氰酸盐-酚-氯仿提取法,能获得纯RNA,不含DNA且污染蛋白含量低于用guanidium-CsC1法制... 作为Sigma-Aldrich Co Ltd一部分的Fluka Chemicals研制出一种新的RNA分离盒,其Micro Selelct区具有快速、一步提取RNA的功能。这种盒使用guanidiam硫氰酸盐-酚-氯仿提取法,能获得纯RNA,不含DNA且污染蛋白含量低于用guanidium-CsC1法制备的样品。因为没有离心步骤,所以能同时加工大量样品。Fluka介绍说,这种盒可应用于小规模和大规模制备RNA。 展开更多
关键词 RNA分离 大规模制备 蛋白含量 一步提取 点印迹杂交 氯仿提取法 培养细胞 细胞系 酚-仿 异戊醇
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