氯仿-甲醇提取贝氏柯克斯体残存组分Q热疫苗的免疫原性及免疫保护性研究

目的实验评价氯仿-甲醇提取贝氏柯克斯体残存组分(CMR)疫苗的免疫特性及免疫保护性。方法采用国内分离贝氏柯克斯体新桥株制备CMR疫苗,用CMR免疫Balb/c小鼠;采用间接免疫荧光法检测CMR免疫小鼠血清特异性抗体水平和用淋巴细胞增殖试验评价CMR疫苗体外刺激小鼠脾细胞增殖的能力;以贝氏柯克斯体攻击免疫小鼠和用贝氏柯克斯体特异的荧光定量PCR检测感染小鼠血和脾脏样本。结果CMR免疫第4周起,小鼠血清中检出高水平的特异性抗体,CMR加氢氧化铝佐剂免疫小鼠的血清特异性抗体显著高于未加佐剂组。CMR在体外刺激正常小鼠和免疫小鼠脾淋巴细胞增殖水平显著高于对照组,WCV则抑制正常脾淋巴细胞增殖。三种剂量(30μg、10μg、1μg/只)CMR免疫小鼠血和脾脏样本贝氏柯克斯体含量显著低于未免疫组,以30μg组及加佐剂免疫小鼠的样本含菌量更显著低于对照组。结论采用我国分离株制备的CMR疫苗能诱导机体产生高效特异性体液免疫和细胞免疫应答,使机体抵抗大剂量的贝氏柯克斯体感染,具有良好的免疫原性和免疫保护性;氢氧化铝佐剂能显著增强CMR疫苗的免疫保护效能。

紫金龙氯仿-甲醇组分对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症的抑制作用

目的探讨紫金龙氯仿-甲醇组分对脂多糖诱导RAW264. 7细胞炎症的抑制作用。方法脂多糖刺激RAW264. 7细胞建立体外炎症模型后,加入不同质量浓度(50、100、200、400 mg/L)紫金龙氯仿-甲醇组分,ELISA法或比色法检测白介素-6 (IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)含有量,Western blot法测定诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、环氧化酶-2 (COX-2)蛋白表达,以及核转录因子κ转抑制蛋白α(IκBα)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38)、c-Jun氨基端激酶(JNK)、细胞外调节蛋白激酶1/2(Erk1/2)磷酸化水平。结果紫金龙氯仿-甲醇组分可显著抑制TNF-α、IL-6、IL-1β、NO、PGE2释放(P <0. 05,P <0. 01),下调i NOS、COX-2蛋白水平(P <0. 01),降低p38、JNK、Erk1/2、IκBα磷酸化水平(P <0. 05,P <0. 01)。结论紫金龙氯仿-甲醇组分可有效抑制脂多糖诱导RAW264. 7细胞炎症,其机制可能与抑制NF-κB、MAPKs信号通路激活、减少炎症因子释放有关。

甲醇-氯仿提取革胡子鲶下脚料中的磷脂酰胆碱

利用实验室现有条件,根据磷脂酰胆碱易溶于甲醇、乙醇等低碳醇、乙醚和氯仿,不溶于丙酮、乙酸乙脂的原理,用有机溶剂提取革胡子鲶下脚料中的磷脂酰胆碱。通过单因素实验得到:甲醇-氯仿为提取的最佳溶剂。通过正交实验,研究了提取温度、提取时间、液料比、甲醇浓度等因素对磷脂酰胆碱提取率的影响,其影响因素主次顺序为:料液比>提取温度>甲醇的浓度>提取时间,最佳工艺为:提取温度40℃,提取时间30 min,料液比1∶3,甲醇浓度为95%。

紫金龙氯仿-甲醇组分对急性实验性炎症的作用及机制研究

目的观察紫金龙氯仿-甲醇组分对体内急性实验性炎症的作用,探讨其抗炎作用的机制。方法于2015年4-7月,选择健康昆明小鼠60只和Wistar大鼠50只,采用醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶致大鼠足趾肿胀模型,观察紫金龙氯仿-甲醇组分的抗炎作用,并检测大鼠炎性组织中TNF-α、NO和PGE2的含量。结果与模型组相比,氯仿-甲醇组分能剂量依赖性降低小鼠腹腔渗出液的吸光度(P<0.05,P<0.01),中、高剂量于角叉菜胶致炎后4h分别显著降低大鼠的足趾肿胀率至31.54%和26.78%(P<0.01),且高剂量组可显著降低大鼠炎性组织中TNF-α、NO和PGE2的含量(P<0.05,P<0.01)。结论紫金龙氯仿-甲醇组分具有明显的抗炎作用,其可能通过调节TNF-α、NO和PGE2炎症因子的水平,从而抑制机体的炎症反应。

产油微生物的筛选及其产油率测定

为寻求可再生、环境友好且经济可行的化石能源替代燃料,采用苏丹黑B和尼罗红染色法及甲醇-氯仿提取法对平顶山各地不同生境富含油脂土壤中的高产油脂微生物进行分离筛选。结果表明:试验分离到2株产油菌株PDS1和PDS2。其中,产油细菌PDS1为革兰氏阴性菌,产油率为29.47%;产油细菌PDS2为革兰氏阳性菌,产油率为23.57%。

佩夫人止咳露中四种主要成分的分离检测

佩夫人止咳露是含有磷酸可待因和其它多种组分的复方制剂。本文介绍了在碱性溶液中,经氯仿提取后用HPLC法,以C_(18)ODS为固定相,0.005 mol·L^(-1)(PIC-B6甲醇液):0.05mol·L^(-1)KH_2PO_4(含1％三乙胺,H_3PO_4调节pH=3),1:1.5为流动相,测定磷酸可待因、盐酸麻黄碱和愈创木酚甘油醚,以及在碱性溶液中经正己烷提取用UV法测定扑尔敏的方法。用该方法测定磷酸可待因、盐酸麻黄碱、愈创木酚甘油醚和扑尔敏这4种组分的回收率分别为100.3％、100.3％、101.7％和99.7％。此方法简便易行,结果可靠。