2,3,5-三苯基氯化四氮唑浓度对细菌菌落总数测定的影响

目的了解2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)浓度对细菌菌落总数测定的影响,以规范该法在食品细菌菌落总数测定中的应用。方法采用细菌定量培养的方法,观察含不同浓度TTC营养琼脂培养基对不同细菌生长形成菌落数的影响。将不同稀释度的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌纯培养物各1mL,分别依次接种到TTC质量浓度分别为0.02、0.05、0.10g/L的平板计数琼脂中,同时设空白对照和盐水试剂对照,观察菌落生长状况。结果大肠埃希菌在不同TTC浓度培养基中均能正常生长,其形成菌落数不受影响。培养基中含TTC质量浓度≥0.05g/L对金黄色葡萄球菌菌落数形成有明显影响,≥0.02g/L对蜡样芽胞杆菌的菌落数形成有明显影响。结论培养基中含TTC浓度≤0.10g/L对大肠埃希菌生长基本无影响,>0.02g/L对金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌生长均会产生影响。

不同细菌对2,3,5-三苯基氯化四氮唑耐受力的研究

虽然2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）被广泛应用于菌落计数中,但是高浓度的TTC对细菌生长有抑制作用,不同细菌对TTC的耐受力也不同.本文着重讨论菌量在30~300个/ml[1]时,不同细菌在含TTC 的培养基中,不受抑制时的TTC 最高浓度,从而得出最适合菌落计数的TTC浓度,现报道如下.

2，3，5-氯化三苯基四氮唑对N80^#钢缓蚀行为的研究

用稳态极化法和交流阻抗法研究了2,3,5-氯化三苯基四氮唑对N80#钢在含H2SO3酸性溶液中发生腐蚀时的缓蚀作用及其缓蚀机理.结果表明:2,3,5-氯化三苯基四氮唑是一种以抑制阳极过程为主的缓蚀剂.其还原产物在N80#钢表面的吸附阻止了腐蚀性的酸性溶液与钢表面的接触,从而起到缓蚀作用.

应用氯化三苯基四氮唑染色快速判定超声引导下微波凝固范围

目的:探讨应用氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色快速判定微波凝固范围的可行性。方法:纯种新西兰长耳大白兔18只,随机分成即时、1 d、3 d、7 d、10 d、21 d 6组。超声引导下,45 W微波辐射肝组织3 min。取凝固标本,肉眼观察,并行TTC染色、HE染色、电镜观察。结果:活体兔肝凝固灶,电镜、HE染色证明凝固坏死区TTC不染色;非凝固坏死区TTC染色成玫瑰红色。活检标本TTC染色后,染色区域行HE染色,仍然可以观察细胞形态和组织结构。结论:TTC大体染色判定微波凝固范围,即时、准确、经济且操作简单。TTC不染色区域为凝固区,染成玫瑰红色区域为非凝固区。

新型氯化三苯基锡(1,4-二氢-2,3-二苯基四氮唑酮)配合物的合成及其性能

以三苯基氯化锡和二苯碳酰二肼为原料,在乙醇-钠中反应合成了一个新型的氯化三苯基锡(1,4-二氢-2,3-二苯基四氮唑酮)配合物(1),其结构经FT-IR,元素分析和X-射线单晶衍射表征。结果表明:1(CCDC:1 445377)属单斜晶系,P21/c空间群,晶胞参数a=1.393 2(6)nm,b=1.097 3(5)nm,c=1.933 7(8)nm,β=110.219(9)!,V=2.77 4(2)nm3,Z=4,Dc=1.498 g·cm-3,F(000)=1 264,R1=0.028 8,wR2=0.064 6。中心Sn为五配位三角双锥构型。研究了1的荧光性质、热稳定性、电化学性质和体外抗癌活性。结果表明:1在100℃下较稳定;1在400 nm(λex=320 nm)处有弱荧光峰;c(1)=5μg·m L-1时,对He La细胞株增殖的抑制率为93.70%。

肉制品检验中未被0.001%2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色菌落的研究

目的鉴定1批肉制品样品中不能被2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazoliumchloride,TTC)染色菌落的菌落。方法依照GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物检验菌落总数测定》和GB 29921-2013《食品安全国家标准食品中致病菌限量》对样品前处理后进行分离纯化,采用VITEK 2以及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪进行检测鉴定。结果经VITEK 2和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪鉴定,肉制品样品中不能够被0.001%TTC染色的菌落分别为鲁氏不动杆菌和奇异变形杆菌。结论在出现TTC无法染色的情况下,应该采用适当的菌种鉴定方法对样品的颗粒和菌落进行详细区分,进而防止漏检和误检。

氯化三苯基四氮唑对细菌生长指示的适用性研究

对TTC的细菌指示作用及其适用范围进了实验研究和现场考核。结果表明,TTC含量在0.005％时,革兰氏阴性菌红色指示效果最佳,且对细菌影响也较小。但对大多数革兰氏阳性菌则呈现较强的抑制作用,若再降低使用浓度,则其对阳性菌指示效果不佳。现场考核提示用TTC做指示剂进行食品微生物菌落计数测定时,可误使微生物超标的不合格食品错判为合格食品之弊。

纸巾细菌总数检测加入氯化三苯四氮唑(TTC)方法的探讨

目的 探讨一种能精确检测纸巾细菌总数的方法。 方法 在细菌总数检测时加入氯化三苯四氮唑 (TTC)试剂 ,TTC在细菌脱氢酶的作用下变为红色。 结果 细菌菌落着红色 ,被检样品不着色 ,使细菌菌落与样品中的絮状颗粒及气泡明显区分开来。 结论 本方法在纸巾细菌总数检测中操作简便 ,结果准确 ,易于推广。

2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)在支原体培养中的应用研究

为了分析细菌培养指示剂2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)在支原体培养中的应用,笔者将牛支原体、丝状支原体山羊亚种、山羊支原体山羊肺炎亚种、绵羊肺炎支原体、鸡毒支原体、肺炎支原体分别接种于含有TTC的改良Thiaucourt’s液体培养基(TTC-MTB)和改良Thiaucourt’s固体培养基(TTC-MTA)中,同时以常规酚红指示剂培养基作为对照,观察支原体在2种培养基中的生长情况,并筛选TTC在培养基中的最适指示浓度。结果显示,与常规酚红指示剂相比较,TTC有更为灵敏的培养指示效果;在固体培养基中,TTC指示的支原体红色菌落更有利于菌落的计数及形态的观察;TTC的最佳使用浓度为0.2 mg/mL。本研究可为支原体培养和优化疫苗生产工艺提供参考。

利用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)测定细胞活力的方法与应用

目的：利用细胞内脱氢酶对2，3，5-三苯基氯化四氮唑（TTC）的催化作用建立比目前常用的3-（4，5-二甲基-2-噻唑）-2，5-二苯基溴化四氮唑（噻唑蓝，MTT）法更可靠的测定细胞活力的方法。方法使用不同浓度的TTC溶液测定细胞活力，并确定TTC的有效浓度范围。在计算所测定值与细胞数量函数关系的基础上，通过与传统测定细胞活力的MTT法进行比较，分析该方法的可行性。结果0．5％～1．0％浓度范围内的TTC溶液可用来测定细胞活力，测定值与细胞数量之间存在线性关系，与MTT法得到的结果基本一致，可避免MTT法测定过程中来自于细胞培养体系中其他抗氧化物质的非特异性干扰。结论 TTC可用于测定细胞活力，可替代常规的MTT法，具有操作简便，费用经济，结果可靠等优点。

TTC-脱氢酶还原法测定铜绿微囊藻活性

利用氯化三苯基四氮唑（TTC）-脱氢酶还原法定量地测定了铜绿微囊藻细胞的活性,并对影响活性测定的因素进行了分析与研究.结果显示,TTC浓度大于0.6%时会抑制酶活性,最适TTC浓度为0.2%;脱氢酶还原反应在Tris-HCl缓冲液中能正常进行,而在磷酸盐缓冲液中受到抑制,最适pH值为7.5-8.0;培养时间和培养温度对TTC脱氢酶还原反应的影响较大,最适培养时间为8-16h,最适培养温度为30-35℃;反应不需加入非离子去垢剂,吐温20和曲拉通X-100对脱氢酶反应会产生较强抑制作用.TTC还原所生成的三苯基甲臢（TPF）可采用50%乙醇提取.研究显示TTC-脱氢酶还原法可以很好地进行藻细胞活性定量化测定.

用TTC与INT-电子传递体系活性表征重金属对污泥活性的影响

研究了不同浓度的Cu2 + 、Zn2 + 、Cd2 + 、Hg2 + 、Ni2 + 、Pb2 + 和Ag+ 对污泥TTC和INT 电子传递体系活性产生的影响 ,比较了这 2个参数在表征污泥活性受重金属抑制时的灵敏性 .结果表明 ,各种重金属抑制污泥TTC 电子传递体系活性的IC50 小于抑制INT 电子传递体系活性的IC50 ,TTC 电子传递体系活性反映重金属毒性作用的灵敏性大于INT 电子传递体系活性 .实验的重金属离子呈现出不同的毒性作用 ,以TTC 电子传递体系活性为评价参数 ,毒性顺序为 :Hg2 + >Cd2 + >Cu2 + >Ag+ >Zn2 + >Ni2 + >Pb2 + ,以INT 电子传递体系活性为评价参数 ,毒性顺序为 :Hg2 + >Ag+ >Cu2 + >Cd2 + >Zn2 + >Ni2 + >Pb2 + .

大鼠缺血性卒中模型MRI与TTC染色法测量脑梗死体积的对比研究

目的对比活体下MRI与大体标本2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法评估缺血性卒中大鼠脑梗死体积的差异。方法对19只大鼠利用线栓法建立急性缺血性卒中模型,并于造模24h后行头颅MRI扫描,扫描完毕后进行TTC染色,利用配对t检验评价T2WI及TTC染色测量脑梗死体积的统计学差异。结果除2只大鼠死亡外,共有17只纳入本研究中。T2WI序列与TTC染色法测量的脑梗死体积无明显统计学差异(t=0.50,P=0.62)。结论对于有MRI条件的动物实验研究,T2WI序列可以取代TTC染色法快速、准确的测量缺血性卒中动物模型的脑梗死体积,简化实验流程。

不同2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色方式对心肌梗死面积检测的对比

目的比较应用不同2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色方式对心肌梗死面积的检测结果。方法实验在中国医科大学完成,采用Langendorff离体心脏灌注装置建立全心缺血模型。将20只健康SD大鼠（雌雄不拘、2周龄,体重250~300 g）按随机数字表法分为两组,每组10只。A组：TTC经主动脉根部直接灌注,B组：心脏切片后染色。两组鼠心均平衡10 min,阻断灌注30 min,复灌30 min。染色后观察心肌切片改变,计算心肌梗死面积。结果 A组和B组均能很好地对梗死心肌进行标记,且两组心肌梗死面积差异无统计学意义（45.80%±6.07%vs.47.40%±6.80%,P〉0.05）;A组心肌组织切片平整,颜色对比更明显,计算面积较准确,形态美观;而B组心肌组织切片凸凹不平,较难进行后续处理,计算面积不准确,形态不美观。结论 TTC染色是一种较为经济、快捷检测心肌梗死范围的染色方法,且经主动脉根部直接灌注染色法较心脏切片后染色法更简单、易操作,节省费用,染色效果好,染色后标本更平整、美观,有利于拍照和计算心肌的梗死面积。

应用TTC法快速测定北细辛种子生活力

研究北细辛种子生活力的快速测定方法,为北细辛种子利用及安全保存提供技术支撑。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法,设置不同的浸种时间、TTC浓度、染色温度、染色时间的正交试验,对北细辛种子生活力进行测定。影响北细辛种子生活力测定值大小的因素依次为TTC浓度>染色温度>染色时间>浸种时间;最佳条件:温水浸种6h、0.1%TTC溶液、30℃避光染色18h;最佳反应条件下测得种子生活力与发芽率实测值很相近。TTC法可作为北细辛种子生活力测定的标准方法,对北细辛栽培及种质资源保存具有重要意义。

TTC应用于食品菌落计数的探讨

菌落总数是判定食品被污染程度的标志,在实际工作中常因检验样品含有沉渣给菌落鉴别造成一定的困难.为有利于菌落计数,可在培养基中加入适量的2,3,5一氯化三苯基四氮唑(2,3,5一Triphenyl tetrazolium chloride,分子式为C19H15ClN4,以下简称TTC),它能被细菌还原为红色物质使菌落呈红色[1].本试验就TTC在食品菌落总数测定中的应用进行初步探讨.

细菌菌落计数培养基TTC浓度的筛选研究

以细菌菌落计数方法,研究大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌在不同2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）浓度的平板计数琼脂上菌落形态和数量的变化情况。结果表明,3种菌在TTC终浓度≥0.0008%时,菌落颜色比较明显,逐渐加深;大肠埃希菌在TTC终浓度≤0.01%的平板计数琼脂上的菌落数量和对照组无显著差异,TTC终浓度≥0.02%菌落数量明显减少;金黄色葡萄球菌在TTC终浓度≤0.004%的平板计数琼脂上的菌落数量和对照组无显著差异,在0.04%TTC平板计数琼脂上不能生长;鼠伤寒沙门氏菌TTC终浓度≤0.01%的平板计数琼脂上的菌落数量和对照组无显著差异,在TTC终浓度≥0.02%的平板计数琼脂上菌落数量减少。不同浓度的TTC对鼠伤寒沙门氏菌、大肠埃希菌的生长影响较小,对金黄色葡萄球菌影响较大,故在食品（或饲料）细菌总数检测中,TTC的终浓度应选在0.0008%~0.004%之间。

不同浓度TTC染色对高血压性脑卒中病灶面积的评估

【目的】探讨不同浓度2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)对高血压性脑卒中病灶的检出效能。【方法】将卒中易感型自发性高血压大鼠(SHR-SP)随机分为两组,一组用于比较两种不同浓度TTC染色结果(0.05%和2.0%);另一组用于比较0.05%TTC和HE染色方法计算出的脑卒中面积百分比及两者间的相关性。【结果】0.05%TTC组脑卒中面积与2.0%TTC组无显著性差异,且两组比较,计算后的脑卒中面积密切相关。0.05%TTC组与HE染色比较,脑卒中的面积百分比无显著性差异,且两组间脑卒中面积百分比具有高度相关性。【结论】TTC染色是一种比HE染色更为经济、快捷的检测实验性脑卒中范围的染色方法,并且0.05%TTC与常用浓度检出效能具有高度相关性,而其花费只为常规方法的1/40,是理想的TTC染色浓度。

2,3,5-三苯基氯化四氮唑在增菌液中的应用研究

目的确立2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)在增菌液中,对不同的细菌产生抑制和被完全抑制时的浓度。方法用金黄色葡萄球菌、福氏志贺菌、沙门菌、大肠埃希菌、普通变形杆菌、副溶血性弧菌配制不同的菌液浓度,分别加到含1.0 mg/ml琼脂粉的普通营养肉汤增菌液中(副溶血性弧菌用3%氯化钠碱性蛋白胨水代替普通营养肉汤),再加入不同量的10.0 mg/ml TTC储备液,记录TTC对各菌产生抑制和被完全抑制时的浓度。结果在菌量30～300 cfu/ml时,金黄色葡萄球菌、福氏志贺菌、沙门菌、大肠埃希菌、普通变形杆菌、副溶血性弧菌开始被抑制和被完全抑制时的TTC浓度分别为0.02、0.1、0.2、0.6、0.6、0.1 mg/ml和0.1、0.7、0.5、>2.0、>2.0、0.2 mg/ml。结论检测样品时,在增菌液中加入1.0 mg/ml的琼脂粉和适量的TTC可提高致病菌的检出率,可直观样品中细菌数量。选择含不同TTC浓度的增菌液,可选择性地进行筛选增菌,进一步提高检出率。