积雪草酸通过调控TNF-α/Mfn2通路改善2型糖尿病β细胞胰岛素分泌功能

目的:研究积雪草酸改善2型糖尿病β细胞功能的作用及分子机制。方法:利用高脂饲料和链脲佐菌素构建2型糖尿病小鼠模型,评估不同浓度积雪草酸对2型糖尿病小鼠血糖调节作用,筛选积雪草酸最佳治疗浓度。体外采用棕榈酸处理小鼠胰岛构建2型糖尿病胰岛模型。针对积雪草酸处理后体内、外胰岛模型,利用酶联免疫吸附试验检测胰岛β细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)功能、胰岛内肿瘤坏死因子(TNF)α、白介素(IL)6含量,紫外分光光度法检测胰岛内腺苷三磷酸(ATP)含量,蛋白质印迹法检测胰岛β细胞成熟标志蛋白尿皮质素(Ucn)3及线粒体融合蛋白(Mfn)2表达变化。采用小干扰RNA干扰Mfn2或加用TNF-α处理胰岛后,考察积雪草酸对Ucn3表达及GSIS功能的调控作用。结果:体内实验显示,25 mg·kg^(-1)·d^(-1)积雪草酸具有较好的降糖效果,并改善稳态模型评价β细胞指数。积雪草酸可增加Mfn2和Ucn3蛋白表达,改善体内、外糖尿病模型β细胞GSIS功能(均P<0.05)。体外实验显示,积雪草酸可改善2型糖尿病胰岛ATP生成量(P<0.05);干扰Mfn2阻断积雪草酸对Ucn3和GSIS的上调作用。积雪草酸可抑制糖尿病胰岛TNF-α生成(P<0.05),逆转TNF-α所导致的Mfn2及Ucn3蛋白表达下调。结论:积雪草酸能改善2型糖尿病β细胞胰岛素分泌功能,其机制可能与调控TNF-α/Mfn2通路维持β细胞成熟有关。

磷脂酶Cβ1过表达对葡萄糖刺激胰岛素分泌的影响

目的观察过表达磷脂酶Cβ1(phospholipase Cβ1,PLCβ1)对葡萄糖刺激胰岛素分泌(glucose-stimulated insulin secretion,GSIS)的影响。方法设定葡萄糖浓度梯度:10、20、40、80、100mmol/L,分别刺激INS-1细胞40min,检测细胞培养上清液中胰岛素含量,确定最适的葡萄糖刺激浓度;设定时间梯度:20、40、60、80、120min,以最适葡萄糖浓度刺激,检测胰岛素含量,确定最适的刺激时间。②以最适葡萄糖浓度刺激INS-1细胞适当时间后,RT-PCR检测PLCβ1表达变化。③构建PLCβ1真核表达载体(PCMV-HA-PLCβ1),转染INS-1细胞,Western blot检测INS-1细胞中PLCβ1蛋白的表达。④收集转染后INS-1细胞培养上清液,检测胰岛素含量。结果用40mmol/L葡萄糖刺激60min,INS-1细胞的胰岛素分泌量最大;RT-PCR观察刺激后PLCβ1表达显著升高;过表达PLCβ1的INS-1细胞培养上清液中胰岛素含量为(1.906±0.080)ng/ml,较转染PCMV-HA载体的对照组(0.740±0.091)ng/ml显著升高(P<0.01)。结论过表达PLCβ1显著增加INS-1细胞的胰岛素分泌,提示PLCβ1可能参与GSIS信息传递。

硫酸脱氢表雄酮对MIN6细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌的影响

目的探讨硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)对胰岛β细胞株MIN6葡萄糖刺激的胰岛素分泌的影响。方法以葡萄糖刺激浓度为2.8mmol/L和16.7mmol/L的对数生长期MIN6细胞作为实验对象,分别以1、5、10μmol/LDHEAS干预10min和24h(不同浓度DHEAS组),以5μmol/LDHEAS或与10μmol/L糖皮质激素受体阻断剂RU486联合干预24h(DHEAS和DHEAS+RU486组),设立空白对照组。ELISA法测定细胞培养上清液中胰岛素分泌量,Real-TimePCR检测细胞胰岛素mRNA表达。结果干预后10min和24h时点,5μmol/L和10μmol/LDHEAS组MIN6细胞培养上清液中的胰岛素分泌量均显著高于空白对照组(P<0.05);干预后24h时点,DHEAS+RU486组与DHEAS组MIN6细胞培养上清液中胰岛素分泌量比较差异无统计学意义(P>0.05),但均显著高于空白对照组(P<0.05)。干预后24h时点,5μmol/L和10μmol/LDHEAS组MIN6细胞胰岛素mRNA表达均显著高于空白对照组(P<0.05)。结论 DHEAS对MIN6细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌具有促进作用,且其核内信号通路可能不经糖皮质激素受体介导。

丙酮酸循环回补反应与葡萄糖刺激的胰岛素分泌的关系

葡萄糖刺激的胰岛素分泌对维持机体葡萄糖代谢的稳态起着至关重要的作用。在此过程中,β细胞的线粒体一方面利用葡萄糖酵解产生的ATP引起ATP依赖的KATP通道关闭,Ca2+通道开放,Ca2+内流,促进胰岛素囊泡向胞外分泌;另一方面通过KATP通道非依赖途径,利用丙酮酸回补反应使葡萄糖充分酵解,既补充了由于糖酵解循环代谢造成的中间物的流失,又生成了促进胰岛素分泌的中间产物及促使ATP/ADP比率的增加,进一步促进胰岛素的释放。该文对丙酮酸回补反应的3个途径,即丙酮酸-苹果酸循环途径,丙酮酸-柠檬酸循环途径和丙酮酸-异柠檬酸循环途径,及其在胰岛素分泌中的作用等方面的研究进展进行了综述。

11β-羟类固醇脱氢酶1型基因沉默对胰岛β细胞系NIT-1葡萄糖刺激胰岛素分泌的影响

目的观察RNA干扰阻断胰岛β细胞系NIT-1中11β-羟类固醇脱氢酶1型(11β-HSD1)表达对细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)的影响。方法pSuper质粒为载体,构建针对11β-HSD1基因的质粒oligo886、oligo866和乱序对照质粒oligoScr886,转染NIT-1细胞,RT-PCR和蛋白印迹法检测11β-HSD1mRNA和蛋白表达。oligo886重组质粒转染25 mmol/L葡萄糖培养基中的NIT-1细胞,测GSIS。结果转染oligo886和oligo866质粒的NIT-1细胞11β-HSD1mRNA分别下降78.1%±2.9%和51.7%±2.7%,11β-HSD1蛋白的水平分别下降82.2%±2.1%和56.5%±2.0%。oligo866转染25 mmol/L葡萄糖培养基中的NIT-1细胞后,GSIS较对照组明显升高(P<0.01)。结论11β-HSD1基因沉默能改善NIT-1细胞的葡萄糖刺激胰岛素分泌能力,提示胰岛β细胞NIT-1通过11β-HSD1调节糖皮质代谢,参与葡萄糖刺激胰岛素分泌。

脂联素对小鼠葡萄糖刺激下胰岛素分泌的影响

目的观察脂联素干预后小鼠葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)的变化。方法分离获得原代小鼠胰岛,使用胶原酶Ⅴ消化小鼠胰腺,反复过滤离心后体式显微镜下手工挑取胰岛;胰岛的纯度采用双硫棕(DTZ)染色法鉴定;采用RTPCR的方法检验小鼠胰岛细胞表面脂联素受体(AdipoR)的表达;分为溶剂对照组(Con组)和脂联素组(Ad组),观察脂联素干预后小鼠胰岛在低糖(LG)和高糖(HG)刺激下胰岛素分泌的变化。结果该方法获得的胰岛外形饱满,状态良好;胰岛细胞表面AdipoR1及AdipoR2的表达分别为0.56±0.08、0.32±0.03,P<0.05;使用脂联素干预后,体外刺激胰岛素分泌实验,测得胰岛素含量使用胰岛素总量标化后分析得到:低糖时Ad组胰岛素总量(0.01410±0.00088)低于低糖时Con组(0.01470±0.00110),差异无统计学意义;高糖时Ad组胰岛素总量(0.04420±0.00408)显著高于高糖时Con组(0.03150±0.00274)及低糖时Ad组,P<0.05;高糖时Con组胰岛素总量显著高于低糖时Con组,P<0.01。结论使用胶原酶Ⅴ消化获得的小鼠原代胰岛纯度高、活性好;小鼠胰岛细胞表面有AdipoR的表达;低糖情况下,脂联素对胰岛素分泌无明显影响,高糖刺激下,脂联素对胰岛素分泌有促进作用。

DTBNP、DTDP促进INS-1细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌

目的：探讨巯基氧化还原试剂对葡萄糖刺激胰岛素分泌（glucose-stimulated insulin secretion,GSIS）影响,进而揭示其调节胰岛素分泌的可能机制。方法 ：INS-l细胞经传代培养3~4 d后在KRBH液中,37℃培养箱孵育30 min,再用含有不同浓度葡萄糖和巯基氧化还原试剂的KRBH液中培养60 min。然后留取上清液进行胰岛素测定。结果：（1）INS-1细胞在2.5、5、10、15、20 mmol/L葡萄糖浓度范围内胰岛素分泌量逐渐增加,G5、G10、G15组间两两相比均有统计学意义（P〈0.05）;（2）与G10组相比,G10＋DTBNP、G10＋DTDP组胰岛素分泌量显著增加（P〈0.05）,且该效应可以被DTT所消除。（3）DTBNP、DTDP均能增加NIF处理组胰岛素分泌,但其增加幅度低于非NIF处理组（P〈0.05）;（4）与非DIA组相比,G10＋DIA＋DTBNP、G10＋DIA＋DTDP组胰岛素分泌增加幅度显著减低（P〈0.05）;（5）同G10组比较,G10＋DIA＋NIF＋DTBNP、G10＋DIA＋NIF＋DTDP组胰岛素分泌值增加（P〈0.05）。结论 ：本研究显示巯基氧化还原试剂对GSIS产生调节作用。DTDP、DTBNP可能通过对K_ATP、L型Ca_V通道及IP_3受体活性的调节,促进胰岛素分泌。

芬太尼抑制体外培养大鼠胰岛动态条件下葡萄糖刺激胰岛素分泌

目的研究芬太尼对体外培养大鼠胰岛动态条件下葡萄糖刺激胰岛素分泌的抑制作用。方法根据芬太尼浓度将SD大鼠胰岛随机均分为四组:Ⅰ组(0.3 ng/ml)、Ⅱ组(3.0 ng/ml)、Ⅲ组(30 ng/ml)和Ⅳ组(0 ng/ml)。每组胰岛分别按以下3种方式与药物共同培养24 h:单独与芬太尼,芬太尼+0.1μg/ml纳洛酮和芬太尼+1μg/ml纳洛酮。每组设6个培养孔,每孔加入胰岛30IEQ,重复3次。检测胰岛细胞活力。动态培养条件下葡萄糖刺激胰岛素释放试验按以下方法进行:先加入2.8mmol/L葡萄糖(低糖)培养液培养,分别于10 min(第一分泌时相)和60 min(第二分泌时相)吸取上清液,然后加入16.7mmol/L(高糖)的培养液继续培养,分别于10 min和60 min吸取上清液,测定胰岛素含量。结果四组胰岛细胞活力差异无统计学意义。第一和第二分泌时相单独芬太尼培养下,Ⅱ组和Ⅲ组低糖和高糖刺激胰岛素释放量明显低于Ⅳ组(P<0.01),且Ⅲ组高糖刺激胰岛素释放量最低(P<0.05)。第一和第二分泌时相芬太尼+0.1μg/ml纳洛酮培养下,Ⅱ组和Ⅲ组低糖和高糖刺激胰岛素释放量仍明显低于Ⅳ组(P<0.01),且Ⅲ组高糖刺激胰岛素释放量仍最低(P<0.05)。第一和第二分泌时相芬太尼+1μg/ml纳洛酮培养下,各组胰岛素释放量差异无统计学意义。结论高浓度芬太尼抑制体外培养大鼠胰岛素的分泌,并且对鼠胰岛细胞具有一定的损伤作用。

利用药物抑制人类EZH2可在体外促进胰腺导管祖细胞变成分泌胰岛素的β细胞样细胞

据Marikar SN 2023年6月12日[Clin Epigenetic,2023,15(1):101-101.]报道,澳大利亚贝克心脏病与糖尿病研究所的研究人员发现,来自人类胰腺的导管祖细胞可以通过抑制EZH2酶的药物刺激再生β细胞样细胞(beta-like cell),从而为糖尿病患者提供治疗的新希望。1型糖尿病患者中,β细胞的损伤和破坏意味着胰腺产生很少的胰岛素或没有产生胰岛素。这导致葡萄糖积聚在血液中而不是进入β细胞。这种血液中葡萄糖的堆积被称为高血糖症,身体无法利用葡萄糖作为能量。研究人员已投入了大量的时间和精力来研究替代方法,如细胞替代疗法和胰腺移植。由于捐赠器官短缺的严峻现实,这种潜在的选择受到了限制。在新的研究中,通过用小分子抑制剂刺激胰腺导管祖细胞这种方法来研究胰腺细胞的再生能力,作为一种替代策略来恢复糖尿病患者的胰岛素产生。这项新研究中使用的药物包括主要用作癌症治疗(在癌症中发现EZH2的过度表达)的EZH2抑制剂(GSK-126、EPZ6438)和一种已被测试用于治疗炎症疾病的天然衍生药物——雷公藤甲素(triptolide)。这项新的研究表明,经过重新编程的细胞能够产生胰岛素和关键功能,如在葡萄糖刺激下的胰岛素分泌。

精氨酸刺激试验评估糖尿病患者第一相胰岛素分泌功能的临床价值

目的：探讨精氨酸刺激试验评估糖尿病患者胰岛β细胞第一相分泌功能的临床价值及该试验评估胰岛分泌功能的判断指标。方法选择内分泌科住院糖尿病患者，分1型糖尿病组（T1DM组）12例；2型糖尿病 a组（T2DMa组，病程≤1年）57例；2型糖尿病 b组（T2DMb组，病程＞1年）82例。测定三组的空腹0 min与精氨酸刺激后2，4，6 min时血糖（PG）、胰岛素（INS）和C肽（CP），结果进行统计学分析。结果精氨酸刺激后，三组 PG以及 T1DM组 INS和 CP均无明显变化，差异无统计学意义（F＝0.150-0.696，P值均＞0.05）；T2DMa组和 T2DMb组 INS和 CP均在2 min达峰值，且峰值T2DMa组＞T2DMb组，差异有统计学意义（F＝12.145-40.518，P 值均＜0.01），4，6 min 逐渐下降，但仍高于0 min。同时组间△INS和△CP的值以 T2DMa组＞T2DMb组＞T1DM组，差异有统计学意义（F＝11.022-10.387，P 值均＜0.01）。T1DM组△INS和△CP无相关性（r＝0.428，P＞0.05），T2DMa组和T2DMb组△INS和△CP均呈正相关（r＝0.768，0.722，P值均＜0.01）。结论精氨酸刺激试验能敏感地评估糖尿病患者胰岛β细胞第一相分泌功能，有一定的临床应用价值，同时△INS和△CP均可作为该试验评估胰岛第一相分泌功能的判断指标。

精氨酸刺激试验评估2型糖尿病患者第一相胰岛素分泌的临床价值

目的探讨精氨酸刺激试验(AST)评估2型糖尿病(T2DM)患者第一相胰岛素分泌的临床价值。方法 81例T2DM患者分为继发磺脲类药物(SU)失效的T2DM组39例和初发T2DM组42例,首日行AST,次日查口服葡萄糖耐量试验(OGTT),以AST中急性胰岛素反应(AIRArg)指数、急性C肽反应(ACRArg)指数反映非葡萄糖刺激的第一相胰岛素分泌功能,以OGTT中30分钟C肽增值与血糖增值的比值(△CP30/△G30)反映葡萄糖刺激的第一相胰岛素分泌功能,比较两组患者AIRArg指数、ACRArg指数、△CP30/△G30以及胰岛素分泌指数(HOMA-IS)的差别。结果两组患者△CP30/△G30、HOMA-IS无显著性差异(P>0.05);但初发T2DM组患者AIRArg指数、ACRArg指数高于继发SU失效的T2DM组患者(P<0.05)。结论 AST能较为敏感地评估胰岛β细胞的第一相分泌功能,有一定的临床应用价值。

Ghrelin促进大鼠胰岛素合成及高葡萄糖诱导的胰岛素分泌

Ghrelin是由胃黏膜分泌的小分子脑肠肽。本研究探讨了Ghrelin对于大鼠胰岛细胞合成与分泌胰岛素的影响。将分离培养的大鼠胰岛分为Ghrelin处理组和对照组 :(1)在高浓度葡萄糖 (16 7mmol L)刺激时加入不同浓度Ghrelin 10 - 1 2 ～ 10 - 8mol L孵育 6 0min ,测定胰岛素分泌量。 (2 )在培养液中加入不同浓度Ghrelin 10 - 1 2 ～ 10 - 8mol L预处理 2 4h后 ,用RT PCR方法检测胰岛内前胰岛素原mRNA表达 ,并测定不同浓度葡萄糖 (5 6mmol L ,16 7mmol L)刺激时胰岛素分泌量。离体大鼠胰岛 ,在高糖刺激时加入Ghrelin 10 - 1 1 ～ 10 - 1 0 mol L共同培养 6 0min ,胰岛素分泌量增加高于对照组 (P <0 0 5 )。Ghrelin 10 - 1 2 ～ 10 - 1 0 mol L预处理 2 4h后 ,高糖刺激时胰岛素分泌量增加高于对照组 (P <0 0 5 ) ,同时Ghrelin 10 - 1 0 mol L促进胰岛内前胰岛素原mRNA表达高于对照组 (P <0 0 5 )。一定浓度的Ghrelin促进胰岛在高葡萄糖诱导下的胰岛素分泌 ,经Ghrelin预处理 2 4h后该作用更为显著。Ghrelin增加大鼠胰岛内前胰岛素原mRNA的表达 ,促进胰岛素合成。

S-雌马酚改善高糖培养条件下INS-1细胞胰岛素分泌功能的研究

目的研究大豆甙元活性代谢产物S-雌马酚(S-equol,S-Eq)对高糖培养条件下大鼠胰岛素瘤(INS-1)细胞胰岛素分泌功能的影响。方法采用26.2 mmol/L葡萄糖(高糖组,H)及葡萄糖分别与不同浓度S-Eq(0.1、1、10、100μmol/L S-Eq+H组)干预INS-1细胞24 h,另设未干预的INS-1细胞为对照组(C)。采用CCK-8检测细胞活力,ELISA法测定葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)功能,TUNEL法联合Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡,Real-time PCR和Western blot分别检测前胰岛素原(preproinsulin,PPI)、葡萄糖转运蛋白2(glucose transporter 2,Glut2)、线粒体阴离子载体解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)mRNA及蛋白表达。结果 S-Eq能显著增加高糖培养条件下INS-1细胞活力(P<0.05),其中1μmol/L S-Eq效果最为明显。GSIS检测发现,与对照组比较,高糖处理后INS-1细胞胰岛素分泌显著降低,而S-Eq能显著增加高糖处理的INS-1细胞的胰岛素分泌(P<0.05)。同时,0.1、1、10μmol/L S-Eq均能明显减少高糖培养条件下INS-1细胞凋亡,上调PPI mRNA、Glut2 mRNA和Glut2蛋白表达,而显著抑制UCP2 mRNA及其蛋白的表达(P<0.05)。结论 S-Eq可有效改善高糖培养条件下INS-1细胞胰岛素分泌功能,可能与抑制细胞凋亡,调节Glut2和UCP2表达有关。

肿瘤坏死因子-α拮抗瘦素抑制胰岛素合成及分泌作用的实验观察

目的探讨在炎症情况下,瘦素(leptin)对胰岛β细胞胰岛素合成与葡萄糖刺激的胰岛素分泌(glucose-stimulated insulin secretion,GSIS)功能的影响。方法在含5.5 mmol/L葡萄糖培养基中培养传代的大鼠胰腺癌细胞系(INS-1E)和大鼠原代分离的胰岛,经生理浓度leptin(0.5 nmol/L)或TNF-α(2 ng/ml)及高浓度leptin(10 nmol/L)与TNF-α(20 ng/ml)单独及联合处理48 h后,在基础葡萄糖(3.3 mmol/L)或高糖(16.7 mmol/L)中分别刺激1 h,放免法检测葡萄糖刺激的GSIS功能;用RT-PCR方法检测胰岛素原(proinsulin)mRNA表达水平,同时细胞经超声破胞后检测胞内胰岛素含量。结果高浓度leptin(10 nmol/L)或TNF-α(20 ng/ml)单独刺激组与对照组以及低浓度leptin或TNF-α组相比,均可显著性抑制INS-1E细胞和原代胰岛的GSIS功能(P<0.05),与之相应的是细胞内proinsulin mRNA水平以及胞内胰岛素含量亦显著降低(P<0.01);但TNF-α+leptin联合刺激组中,胰岛素原mRNA水平及胰岛素蛋白含量均较leptin单独刺激并未进一步降低,反而有显著升高(P<0.05),提示TNF-α具有拮抗leptin抑制胰岛素基因表达和分泌的作用。结论 TNF-α可以干扰leptin对胰岛β细胞胰岛素合成和分泌的抑制作用。提示肥胖者体内升高的TNF-α可能通过拮抗leptin对胰岛素分泌的抑制作用,在肥胖伴随的高胰岛素血症的发生及葡萄糖代谢紊乱中具有重要作用。

NIDDM的内分泌障碍：胰岛素抵抗与胰岛β细胞功能缺陷

ＮＩＤＤＭ的内分泌障碍：胰岛素抵抗与胰岛β细胞功能缺陷杨永年胰岛素抵抗与胰岛β细胞（功能）缺陷不仅是ＮＩＤＤＭ最重要的特征，而且是主要的发病机理［１，２］．两者既是相互独立的因子却又密切地相互关联，从而形成了众多而复杂的Ⅱ型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）的临床...

瘦素对大鼠胰岛细胞分泌胰岛素的影响

目的:研究瘦素对大鼠胰岛细胞胰岛素分泌的影响。方法:体外分离培养Wistar乳鼠胰岛细胞,与瘦素共同孵育24h后,用放射免疫法测定对照组和瘦素温育的大鼠胰岛细胞的胰岛素分泌量。结果:基础状态下,瘦素组胰岛素分泌量为(50.63±5.53)mU/L,与对照组比较(67.71±6.01)mU/L明显降低,差异有显著性意义(t=4.213,P<0.01)。在葡萄糖刺激下,瘦素组的胰岛素分泌量为(153.43±11.03)mU/L,也明显低于对照组(205.38±15.50)mU/L,差异有显著性意义(t=4.531,P<0.01)。结论:瘦素抑制基础状态和葡萄糖刺激的胰岛素分泌,瘦素可能在2型糖尿病的发病中起一定的作用。

游离脂肪酸对大鼠胰岛细胞体外分泌功能的影响

目的探讨饱和脂肪酸软脂酸和单不饱和脂肪酸油酸对大鼠胰岛细胞体外分泌胰岛素功能的影响。方法体外分离大鼠胰岛细胞,分为:①浓度梯度组,将0.125、0.250、.5 mmol/L软脂酸(PA)和油酸(OA)分别与胰岛细胞共培养48 h;②时间梯度组,将0.25 mmol/L软脂酸、油酸及二者的混合物与胰岛细胞共培养24、487、2 h,进行葡萄糖刺激胰岛素释放试验,放射免疫法检测培养液中胰岛素浓度。结果①浓度梯度组,不同浓度PA和OA组葡萄糖刺激后胰岛素分泌水平均明显减少,浓度越高胰岛素分泌越少,高浓度时(0.5 mmol/L),高糖刺激下OA组胰岛素分泌高于PA组;②时间梯度组,PA、OA及混合组,葡萄糖刺激后胰岛素分泌水平均明显减少,随时间延长,胰岛素分泌逐渐减低;相同时间段,各组胰岛素分泌无差异(P>0.05)。结论PA和OA对大鼠胰岛细胞分泌功能均有一定的抑制作用,呈剂量依赖性,PA抑制程度呈时间依赖性;高浓度时PA抑制程度大于OA;OA对PA诱导的胰岛细胞分泌功能损伤无保护及协同效应。

胰岛素样生长因子-1对大鼠胰岛功能及细胞凋亡的影响

目的研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在高糖条件下对大鼠胰岛功能及胰岛细胞凋亡的影响。方法体外培养SD大鼠胰岛48 h,按培养液不同分为3组:对照组(葡萄糖5.6 mmol/L)、高糖组(葡萄糖15.6mmol/L)、IGF-1组(葡萄糖15.6 mmol/L+IGF-1 10 ng/mL),检测项目(1)胰岛细胞分泌功能:放射免疫法、免疫组织化学法;(2)胰岛细胞凋亡:Hoechst33342染色免疫荧光法、DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL法)、免疫组织化学法、透射电镜。结果与对照组比较,高糖组胰岛素分泌量、细胞内胰岛素表达率明显减少(P<0.05);凋亡细胞明显增多,人B细胞淋巴瘤/白血病因子-2(Bcl-2)表达率明显减少(P<0.05);细胞核碎裂固缩多,核仁消失核膜变形分泌颗粒减少可见淀粉样物质沉积。与对照组及高糖组比较,IGF-1组胰岛素分泌量、胰岛素表达率均明显升高(P<0.05);胰岛细胞凋亡率低于高糖组但高于对照组(P<0.05)、Bcl-2表达率高于高糖组但低于对照组(P<0.05);核碎裂、核固缩少,细胞核形态结构正常及分泌颗粒数量相对增加。结论 IGF-1可以直接作用于胰岛,有促进胰岛素分泌及抗细胞凋亡作用,这种功能可能与诱导抗凋亡因子Bcl-2高表达有关。

新确诊的2型糖尿病患者血清总胆红素水平与胰岛β细胞早时相分泌功能相关性分析

目的 分析新确诊的2型糖尿病患者血清总胆红素(TBIL)与胰岛β细胞早时相分泌功能的相关性。方法 新确诊的2型糖尿病患者171例,检测空腹血清总胆红素(TBIL),根据TBIL水平将患者分为低胆红素组(TBIL≤8.4mmol/L,59例)、中胆红素组(8.4mmol/L<TBIL≤12.36mmol/L,55例)、高胆红素组(TBIL>12.36mmol/L,57例)。采用精氨酸刺激试验测算三组患者的胰岛β细胞早时相分泌功能评价指标精氨酸指数(AIR)、稳态模型胰岛素分泌指数(HOMA-β);空腹测量患者的身高、体质量,计算BMI;采用葡萄糖氧化酶法测空腹血糖(FPG);采用高效液相法检测糖化血红蛋白(HbA1c)。Pearson相关分析法分析AIR、HOMA-β与TBIL、BMI、FPG、HbA1c的相关性。以AIR、HOMA-β为因变量,以TBIL、BMI、FPG、HbA1c为自变量,多元线性回归分析法分析胰岛β细胞早时相分泌功能的影响因素。结果 与低胆红素组和中胆红素组相比,高胆红素组AIR、HOMA-β、BMI均升高(P均<0.05),FPG、HbA1c均降低(P均<0.05);与低胆红素组相比,中胆红素组AIR、HOMA-β均升高(P均<0.05),FPG降低(P<0.05)。AIR与TBIL、BMI呈正相关(r分别为0.251、0.364,P均<0.05),与HbA1c呈负相关(r为-0.233,P<0.05);HOMA-β与TBIL、BMI呈正相关(r分别为0.309、0.475,P均<0.05),与HbA1c呈负相关(r为-0.341,P<0.05)。TBIL、BMI、HbA1c是AIR(偏回归系数β分别为0.156、0.330、-0.225,P均<0.05)以及HOMA-β(偏回归系数β分别为0.242、0.208、-0.188,P均<0.05)的主要影响因素。结论 新确诊的2型糖尿病患者TBIL与胰岛β细胞早时相分泌功能指标AIR、HOMA-β呈正相关,TBIL是胰岛β细胞早时相分泌功能的主要影响因素之一。