铜绿假单胞菌氯已定—磺胺耐药基因型研究

目的探讨临床分离的铜绿假单胞菌耐药性和氯已定—磺胺耐药基因存在状况。方法测定临床分离的66株铜绿假单胞菌对6种抗菌药物的敏感性,采用PCR检测qacE△1-sulⅠ基因。结果66株PA菌对6种抗菌药物的不敏感率在12.5%~87.5%之间。qacE△1-sulⅠ基因阳性菌33株(阳性率50.0%)。结论铜绿假单胞菌具明显的多重耐药特征。qacE△1-sulⅠ基因携带率很高。

阴沟肠杆菌耐药性、氯己定-磺胺耐药基因型研究

目的探讨临床分离的阴沟肠杆菌耐药性和氯己定-磺胺耐药基因存在状况。方法采用ATB药敏试验板微量肉汤法测定临床分离的74株阴沟肠杆菌对20种抗菌药物的敏感性，采用PCR检测qacE△1-sull基因。结果74株菌对亚胺培南和美罗培南均敏感，对其他抗菌药物的耐药率在44．6％～94．6％之间，qacE△1-sull基因阳性有54株，阳性率74．3％。结论阴沟肠杆菌具明显的多重耐药特征，qacE△1-sull基因携带率很高。

二重PCR检测猪、鸡源致病性大肠杆菌、沙门氏菌磺胺类耐药基因(Sul1、Sul2、Sul3)的研究

利用二重PCR对临床分离的猪、鸡源致病性大肠杆菌103株和沙门氏菌33株的3个磺胺类药主要耐药基因Sul1、Sul2、Sul3进行了检测。结果表明,在19株耐SD的沙门氏菌中有17株检测出Sul1或Sul2基因,检出率为89.47%,与药敏试验的结果相比,符合率为89.47%;在56株耐SD的大肠杆菌中有53株检出耐药基因,与药敏试验的符合率为94.64%。二重PCR方法与常规PCR的结果符合率为98.5%,具有很高的一致性;与药敏试验也有很好的符合率,具有较高的特异性。整个试验过程只需7 h,比常规PCR节约7 h,检测速度有了较大的提高。

猪和野生动物源大肠杆菌及沙门菌中磺胺类药物耐药基因的检测

对从四川省10个规模化猪场和16种野生动物的粪样中分离鉴定出的67株大肠杆菌、57株沙门菌进行了药敏试验。结果,猪源和野生动物源分离菌对磺胺类药物的耐药率分别为72.0%(72/100)和29.2%(7/24)。根据GenBank中登录的序列,设计了3对特异性引物,对磺胺类药物的耐药基因Sul1、Sul2、Sul3进行了三重PCR检测。在这124株细菌中,Sul1基因的检出率最高,为47.6%(59/124),Sul2基因的检出率为17.7%(22/124),Sul3基因的检出率为18.5%(23/124)。药敏试验结果与基因检测结果的符合率为89.9%。

烧伤患者铜绿假单胞菌感染株的消毒剂-磺胺耐药基因、Ⅰ类整合酶基因研究

目的铜绿假单胞菌(PAE)感染株的消毒剂-磺胺耐药相关基因qacE△1-sul1和Ⅰ类整合酶基因(intⅠ1)存在状况。方法对分离自天津第四医院烧伤住院患者创面20株PAE菌的qacE△1-sul1i、ntⅠ1基因进行检测。结果20株PAE菌qacE△1-sul1i、ntⅠ1基因均阳性。结论PAE菌全部携带消毒剂-磺胺耐药基因、Ⅰ类整合酶基因。

国内9家医院铜绿假单胞菌消毒剂-磺胺耐药基因的研究

目的调查临床分离铜绿假单胞菌消毒剂-磺胺耐药基因qacE△1-sulI的存在情况。方法收集国内9家医院临床分离的311株铜绿假单胞菌,采用PCR法检测qacE△1-sulI基因。结果311株铜绿假单胞菌196株检出qacE△1-sulI基因,总检出率为63.0%。9家医院铜绿假单胞菌qacE△1-sulI基因检出率有较大差异。结论9家医院临床分离铜绿假单胞消毒剂-磺胺耐药基因qacE△1-sulI携带率高。

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌磺胺类药物耐药基因的检测

为了解河南省及周边地区规模化猪场猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)对磺胺类药物的耐药情况,本研究从河南省及周边地区49个规模化猪场的肺脏和气管中分离出79株疑似APP菌株,血清型鉴定结果显示,分离菌株为1、2、3、5、7、8、9、10型APP,采用纸片扩散法对分离株进行了耐药表型鉴定,同时采用PCR方法对磺胺类药物耐药基因进行了检测。药敏试验结果显示,APP对磺胺类药物的耐药率为100%(79/79)。根据Gen Bank中登录的序列,设计了3对特异性引物,对磺胺类药物的耐药基因Sul1、Sul2、Sul3进行扩增检测。耐药基因检测结果显示,分离的79株细菌中,Sul2基因检出率为100%(79/79),Sul1基因的检出率为79.75%(63/79),Sul3基因的检出率为89.87%(71/79),Sul1和Sul2基因同时检出率为70.89%(56/79),Sul1和Sul3同时检出率为62.03%(49/79),Sul2和Sul3基因同时检出率为77.22%(61/79)。

多药耐药铜绿假单胞菌消毒剂—磺胺耐药基因检测与临床意义

目的了解多药耐药铜绿假单胞菌消毒剂-磺胺耐药基因（qacE△1-sull）的存在状况。方法采用纸片扩散（K—B）法测定某院临床标本分离的30株铜绿假单胞菌对15种抗菌药物的敏感性；以聚合酶链反应（PCR）法检测qacE△1-sull基因。结果30株多药耐药铜绿假单胞菌中，qacE△1-sull基因阳性13株，阳性率43．33％。结论临床分离的铜绿假单胞菌qacE△1-sull基因携带率较高，应引起高度重视。本结果为山东地区首次报道。

冷鲜鸡污染微生物磺胺类和喹诺酮类耐药基因分析

动物养殖业的发展过程中抗生素的长期使用,导致耐药菌的快速发展。这些耐药菌在动物养殖过程中逐渐被抗生素筛选,在动物性食品生产链中容易被携带传播,对人类食品安全产生很大的威胁。试验选取浙江省绍兴市8个大型超市和11个农贸市场销售的冷鲜鸡为检测对象,采用PCR和测序验证的技术手段,对冷鲜鸡表面微生物中的2种磺胺类耐药基因sulⅠ、sulⅡ和8种喹诺酮类基因qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、qepA、oqxA与oqxB进行检测。在所检测的样品中,检测出sulⅠ、sulⅡ、qnrD、qnrS、qepA和oqxB基因,检出率分别为100%、100%、100%、89.5%、100%和89.5%。并对所检出的耐药基因进行测序和NCBI收录的耐药基因序列进行Blast比对验证,比对结果同源性分别为100%、99.44%、100%、92.74%、99.82%和100%。试验结果将为冷鲜鸡中耐药基因的风险评估提供有力支持。

铜绿假单胞菌耐消毒剂-磺胺基因及β-内酰胺类抗生素耐药相关基因研究

目的了解临床分离的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)耐消毒剂-磺胺基因(qacE△1-sulⅠ)及β-内酰胺类抗生素耐药相关基因存在状况。方法自临床分离40株Pa,采用聚合酶链反应(PCR)检测qacE△1-sulⅠ基因及12种β-内酰胺类抗生素耐药相关基因(TEM、SHV、OXA-10群、CTX-M-1群、PER、VEB、GES、CARB、IMP、VIM、DHA和oprD2)。结果40株中qacE△1-sulⅠ基因阳性19株(47.5%),CARB基因阳性18株(45.0%),oprD2基因缺失35株(87.5%),其余基因均阴性。结论临床分离的铜绿假单胞菌多重耐药严重,qacE△1-sulⅠ基因及CARB基因携带率高,oprD2基因缺失严重。

耐复方新诺明香港海鸥型菌中Ⅰ类整合子、磺胺类耐药基因(sul1、sul2)的检测

目的了解香港海鸥型菌淡水鱼与蛙来源分离株磺胺类耐药性以及Ⅰ类整合子介导耐药的情况。方法采用K-B纸片扩散法检测香港海鸥菌耐复方新诺明药物菌株,PCR方法扩增耐药菌株sul1、sul2和Ⅰ类整合子基因。结果 128株香港海鸥菌中共有20株耐复方新诺明药物,耐药率15.6%;20株耐药菌株中sul1阳性率90%,sul2阳性率50%,Ⅰ类整合子携带率80%。结论淡水鱼与蛙来源香港海鸥型菌菌耐磺胺的机制可能与Ⅰ类整合子、sul1、sul2基因有关。

大肠埃希菌连续分离株对消毒剂-磺胺耐药基因的研究

目的了解大肠埃希菌连续分离株对消毒剂-磺胺耐药基因存在情况和耐药性。方法应用聚合酶链反应法对大肠埃希菌耐药株对消毒剂和磺胺耐药基因进行检测与分析。结果经对连续分离的68株大肠埃希菌中,检测出消毒剂-磺胺耐药基因(qacE△1与sulⅠ)阳性41株,检出率为60.3%。结论临床连续分离大肠埃希菌耐药株消毒剂-磺胺耐药基因检出率较高,提示临床抗药菌株可能同时对消毒剂存在抗药性。

20株阴沟肠杆菌耐药性及耐复方磺胺甲口恶唑相关基因研究

目的探讨临床分离的阴沟肠杆菌耐药性和耐复方磺胺甲口恶唑(SMZ/TMP)相关基因存在状况。方法采用ATB药敏试验板微量肉汤法测定临床分离的20株阴沟肠杆菌对20种抗菌药物的敏感性,采用PCR检测耐复方磺胺甲口恶唑相关基因sulI、dfrA1和dfrA17。结果20株菌对亚胺培南和美罗培南均敏感,对其他抗菌药物的不敏感率在25.0%～100%之间。sulI、dfrA1和dfrA17基因阳性率为85.0%(17/20)、5.0%(1/21)、60.0%(12/20)。结论阴沟肠杆菌具明显的多重耐药特征。耐复方磺胺甲口恶唑相关基因携带率很高。

铜绿假单胞菌消毒剂-磺胺耐药基因检测及对消毒剂的抗性研究

目的了解铜绿假单胞菌Ⅰ类整合子消毒剂-磺胺耐药基因(qacE△1-sull)的携带情况以及阳性菌株对碘伏、戊二醛、氯己定、"84"消毒液的抗性。方法对某院2007年12月-2008年1月连续分离的20株铜绿假单胞菌以聚合酶链反应(PCR)法检测qacE△l-sull基因,测定其阳性菌株对上述4种消毒剂的最低抑菌浓度(MIC)。结果 20株铜绿假单胞菌中检出qacE△1-sull阳性株10株(50.00%)。碘伏、戊二醛、氯己定、"84"消毒液对qacE△1-sull阳性菌株的MIC范围分别为:8.0～128.0μg/mL、16.0～256.0μg/mL、1.0～16.0μg/mL、4.0～64.0μg/mL。结论 qacE△1-sul1基因普遍存在于临床分离的铜绿假单胞菌中,阳性菌株对碘伏、戊二醛、氯己定、"84"消毒液存在抗性差异,应合理使用消毒剂并增加作用时间,以有效控制铜绿假单胞菌的播散。

大肠杆菌磺胺类抗生素耐药基因二重PCR技术的建立

为建立一种一次性检测多个磺胺类抗生素耐药基因的检测方法,用磺胺类抗生素耐药大肠杆菌作为受试生物,根据磺胺类抗生素耐药基因Sul1和dfrA1设计一对引物进行二重PCR检测。结果发现:本方法能有效检测出大肠杆菌Sul1和dfrA1两种磺胺类抗生素耐药基因,检出限为4.5 cfu/μL,对于Sul1和dfrA1两种磺胺类抗生素耐药基因具有较强的检出特异性。此方法对检测大肠杆菌磺胺类抗生素耐药基因提供了有力的技术支撑。

河南省鸭源大肠杆菌四环素类及磺胺类耐药基因的分子检测

近年来，随着我国养鸭业的迅速发展，规模化、集约化程度不断提高。有关鸭病尤其是鸭大肠杆菌病日益增多，给养殖户造成巨大的经济损失。鸭大肠杆菌（Escherichia coli，E．coli）是对养鸭业危害严重的条件致病菌之一，该病易发生、难治疗、

大肠埃希菌连续分离株耐药表型及复方磺胺甲噁唑耐药相关基因研究

目的了解临床分离的大肠埃希菌耐药性和复方磺胺甲噁唑(SMZ/TMP)耐药相关基因存在状况。方法测定临床连续分离的60株大肠埃希菌对19种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)检测SMZ/TMP耐药相关基因(sul1、dfrA1、dfrA17)。结果60株中sul1、dfrA1、dfrA17基因阳性分别为34株(56.7%)、1株(1.7%)、35株(58.3%)。结论临床分离的大肠埃希菌多重耐药严重;复方磺胺甲噁唑耐药相关基因携带率高。

巴氏杆菌磺胺耐药基因SulⅡ的克隆及其表达

根据巴氏杆菌磺胺耐药基因 Sul 序列设计引物 ,以临床分离的禽源巴氏杆菌磺胺耐药菌株为模板 ,扩增出禽源巴氏杆菌 Sul 的全长基因序列。经 T载体克隆和核苷酸序列测定 ,克隆的 Sul 基因与文献报道的同源性为98.9% ,有 9个碱基的差异 ,但所编码的氨基酸没有改变。将 Sul 基因按正向的阅读框架与表达载体 p ET- 2 8c(+)连接 ,重组质粒经酶切鉴定正确后 ,经 IPTG诱导 ,SDS- PAGE检测 ,融合蛋白的表达产物占菌体总蛋白的 11% 。

猪源大肠埃希菌磺胺类药物主要耐药基因的检测与分析

为查明辽宁地区猪源大肠埃希菌磺胺类耐药菌株中sul1、sul2及dfrA1 3种基因型的流行及分布情况,科学指导兽医临床合理用药,为猪大肠埃希菌病的防控提供科学依据,利用PCR技术对磺胺类耐药菌株进行了3种耐药基因型的检测。通过对耐药基因的检测发现,27株磺胺类耐药菌株中sul2的检出率最高,为74.07%(20/27);其次为sul1、dfrA1,检出率分别为33.33%(9/27)、22.22%(6/27),同时携带sul1、sul2和sul2、dfrA1两种基因型的菌株均占11.11%(3/27),同时携带sul1、sul2及dfrA1 3种基因型的菌株占14.81%(4/27)。表明辽宁地区猪源大肠埃希菌磺胺类耐药菌株中sul2为主要流行的基因型,并且在辽宁不同地区普遍存在,是介导猪源大肠埃希菌对磺胺类药物耐药性的主要基因型,其次为sul1、dfrA1。

产ESBLs大肠埃希菌磺胺耐药基因sulⅠ的检测与分析

产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum b-eta-lactamases,ESBLs)是由质粒介导的能赋予细菌水解青霉素类、头孢菌素类和单酰胺类抗生素的一类β-内酰胺酶,其水解活性能被β-内酰胺酶抑制剂所抑制.大肠埃希菌是医院感染常见的病原菌,而产ESBLs大肠埃希菌在临床分离率逐年升高,其对β-内酰胺酶类、氨基糖苷类和磺胺类等常用抗菌药物表现出多重耐药.