微量热法研究PCMB对精氨酸酶的抑制作用

利用微量热法研究了对－氯汞苯甲酸（ＰＣＭＢ）对精氨酸的酶促水解反应的抑制作用，确定它属于竞争性不可逆抑制剂，在２９８．１５Ｋ和ｐＨ为９．４时ＰＣＭＢ与精氨酸酶作用的二级速度常数ｋ＋０＝９２．１７Ｌ／（ｍｏｌ·ｓ）．同时用ＰＣＭＢ作为修饰剂探讨了精氨酸酶的活性中心性质，推测该水解酶至多含有３个与酶活性有关的半胱氨酸残基，但这些残基不属于精氨酸酶的活性中心。

合成Hg-DADPA柱分离含硒或硫化合物的研究

[目的]通过化学方法合成一种新颖的Hg-DADPA柱,用于分离和富集植物及微生物体中硫硒修饰的化合物。[方法]使用二氨基二异丙基琼脂糖(DADPA)与对氯汞苯甲酸进行反应,得到Hg-DADPA色谱柱,用不同浓度的盐酸洗脱不同位置取代的硫或硒化合物;然后,通过Hg-DADPA色谱富集大肠杆菌(E.coli)的tRNA中含硫、含硒化合物,并且鉴定。同时,测试Hg-DADPA色谱柱分离后样品回收率。[结果]合成的Hg-DADPA柱通过0.002、0.005、0.5 mol/L HCl洗脱,可以分离尿苷三磷酸(UTP)、2-硫代尿嘧啶(2-SU)、2-硒代尿嘧啶(2-Se U)和4-硒代尿苷三磷酸(4-Se UTP)混合物,回收率均在90%以上。Hg-DADPA柱从大肠杆菌K12中选择性地富集到3个含硫修饰的核苷酸,经ESI和HR-MS鉴定为鸟嘌呤-2-硫代尿嘧啶核苷酸、腺嘌呤-3-硫代尿嘧啶核苷酸和鸟嘌呤-5-甲酰-2-尿嘧啶核苷酸。[结论]合成的Hg-DADPA柱对含硒、含硫化合物有很好的分离效果,且可反复使用,从而为植物、微生物中含硒或硫有机化合物的富集、分离提供一个简便的分离材料。