头孢噻肟钠和氯霉素与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱分析

在pH=7.40 Tris-HCl缓冲溶液中,应用荧光光谱法分别研究了298,303,308 K时,头孢噻肟钠(CTX)、氯霉素(CHL)对牛血清白蛋白(BSA)荧光的猝灭反应。结果表明:药物与BSA的结合稳定常数Ka随温度增加而降低,两种药物对BSA的荧光猝灭皆为静态猝灭过程。标记竞争实验表明CTX、CHL在BSA中的结合位置主要位于亚域ⅡA的位点Ⅰ。在BSA-CTX(BSA-CHL)体系中再加入CHL(CTX)时,可使BSA的荧光进一步猝灭,Ka减小,三元体系的Hill系数均小于1,表明一种药物的存在将影响另一种药物与BSA的结合,两种药物之间具有负协同作用。用热力学参数确定了药物与BSA的作用力类型。

头孢呋辛酯与牛血清白蛋白相互作用特征研究

采用荧光光谱、三维荧光光谱、同步荧光光谱和紫外吸收光谱法,研究了不同温度下头孢呋辛酯(CFA)的浓度在1.959×10-6至13.71×10-6mol·L-1范围内,牛血清白蛋白(BSA)的浓度为2.0×10-6mol·L-1时两者之间的相互作用,按照Sterm-Volmer方程、Lineweaver-Burk方程和热力学方程分析和处理实验数据,计算了表观作用常数(KLB:3.907×106L·mol-1),热力学参数的平均值(焓变ΔH:-13.43kJ·mol-1,熵变ΔS:81.90J·K-1和标准吉布斯自由能变化ΔGθ:-38.34kJ·mol-1),测定了作用位点数(n:1.042),讨论了CFA对BSA的荧光猝灭作用机理。BSA和CFA作用可能形成了一种新的复合物,猝灭作用主要属于静态猝灭。认可热力学参数ΔH≈0,ΔS>0和ΔGθ<0,反应力主要是熵驱动力和静电作用力。在同步荧光光谱中色氨酸和酪氨酸的峰波长明显红移;在三维荧光光谱中,在加入CFA后二峰的发射波长蓝移;在紫外-可见吸收光谱图中,三体系的最大吸收明显不同,这些均显现色氨酸和酪氨酸所处的微环境的变化,同时说明了加入CFA后BSA的构象发生了变化。这为讨论BSA的构象变化,阐明CFA的药理作用和在生物体内的生物学效应等提供重要信息。

氯霉素与牛血清蛋白质结合反应热力学特征研究

用荧光光谱和紫外可见吸收光谱法研究了氯霉素与牛血清白蛋白结合反应的光谱特征,试验证实氯霉素对BSA有较强的荧光猝灭作用,按照S tern-V o lm er方程和L inew eaver-Burk双倒数方程分析和处理试验数据,得到反应的结合常量和结合过程的热力学参数等,探讨了猝灭作用的性质和结合反应的机理.

荧光光谱法研究头孢呋辛酯与牛血清白蛋白的相互作用

用荧光光谱法研究了头孢呋辛酯(Cefuroximeaxetil)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制。结果表明在人体生理条件下头孢呋辛酯对牛血清白蛋白具有荧光猝灭作用且为动态猝灭过程,根据Stern-Volmer方程求出了两者的猝灭常数,并依据Foster能量转移理论确定了药物与蛋白的结合距离。

脱镁叶绿酸-a甲酯的合成及对牛血清白蛋白的结合作用

用荧光光谱和UV Vis光谱研究了脱镁叶绿酸a甲酯(Methylpheo phorbide a)与牛血清白蛋白(BovineSeriumAlbumin,BSA)的相互结合反应。实验表明叶绿酸a甲酯与牛血清白蛋白的相互结合作用为单一的静态猝灭过程。在水溶液中脱镁叶绿酸a甲酯发生自聚,它与蛋白质以表观摩尔比2∶1牢固结合,其结合常数KB=6.7×104L·mol-1。而在四氢呋喃与水的混合溶液中脱镁叶绿酸a甲酯以单分子状存在,其与BSA的结合摩尔比为1∶1。BSA分子与叶绿酸a甲酯的结合点位为1。根据F rster非辐射能量转移机理,求算了给体(BSA)与受体(脱镁叶绿酸a甲酯)间距离r=3.50nm和能量转移效率E=0.39。

含喹唑啉酮的4-(4-氟苯基)哌嗪二硫代甲酸酯与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究

用荧光光谱法研究了具有抑制人肿瘤细胞活性的含喹唑啉酮的4-(4-氟苯基)哌嗪二硫代甲酸酯与牛血清白蛋白的相互作用。结果表明:在生理条件下,它对牛血清白蛋白的荧光有较强的猝灭作用。根据猝灭结果,求得了不同温度下反应的结合位点数、结合常数及反应热力学参数,并据此确定了它们相互作用的主要形式。

分子对接模拟与光谱法研究没食子酸丙酯和牛血清白蛋白的相互作用

运用荧光光谱法、紫外吸收光谱法等方法对没食子酸丙酯(PG)与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用进行了研究。荧光猝灭计算结果表明PG与BSA间的结合作用较强,猝灭机制为静态猝灭,测得其299 K时的结合常数KA为1.03×105L·mol-1,两者的作用距离为1.71 nm。热力学参数计算结果表明PG与BSA相互作用力主要为范德华力与氢键作用力。通过探针分子取代反应确定了PG在BSA上的结合位点是亚级结构域IIA。圆二色谱的测定结果表明PG的结合导致了蛋白中α-螺旋结构的减少以及无规则卷曲的增加。本文最后通过计算机模拟分子Dock的方法模拟出了PG与BSA的结合构象,所得到的结合参数与之前的计算结果相符。

化学计量学-荧光光谱法研究贝诺酯和双氯芬酸钠与牛血清白蛋白的相互作用

血清白蛋白是血浆中含量最丰富的蛋白质，具有储运内源性代谢产物和外源性药物小分子等重要生理功能。药物与血清蛋白的结合是非特异性的，具有饱和性和竞争抑制性。因此研究药物与蛋白质之间的相互作用是药物代谢动力学及药理学的重要内容。多种药物同时与血清白蛋白的相互作用十分复杂，化学计量学是解决此类复杂体系光谱问题的有力工具。

Z／E-焦脱镁叶绿酸-a甲酯13^1-酮肟与牛血清白蛋白的相互结合作用研究

以荧光光谱法和分光光度法研究了水溶液中具有Z 型和E 型结构的焦脱镁叶绿酸a甲酯131 酮肟异构体(Z/E KMPA)与牛血清白蛋白(BovineSerumAlbumin,BSA)的相互结合反应。研究表明,在水溶液中,Z/E KMPA与BSA以摩尔比1∶1牢固结合,其结合常数K0Z=1. 1×105L/mol,K0E=5. 0×105L/mol。根据F rster非辐射能量转移机理,求算了给体(BSA)与受体(Z/E KMPA)间距离rZ=4. 05nm,rE=4. 40nm和能量转移效率EZ=0.175,EE=0. 140。实验表明:Z/E KMPA与BSA的相互结合作用为单一的静态荧光猝灭过程。

贝诺酯与牛血清白蛋白位点选择性结合的分子光谱研究(英文)

得了焓变(ΔH)、熵变(ΔS)和自由能变(ΔG)等热力学参数。同步荧光和三维荧光光谱的结果表明,BEN使BSA的构象发生改变。利用荧光特异性位点探针DA和DP,通过竞争结合实验,监测BEN与BSA的结合位点,测得了位点Ⅰ和位点Ⅱ的表观结合常数分别为4 300 L·mol-1和21 200 L·mol-1,表明BEN与BSA优先在位点Ⅱ结合。采用荧光光谱、紫外可见光谱、同步荧光光谱及三维荧光光谱等分子光谱方法,研究了生理条件下贝诺酯(BEN)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。结果表明,BEN对BSA的内源荧光有显著的猝灭作用,猝灭机理为动态猝灭,二者之间的作用力类型以疏水作用为主,BEN与BSA发生反应后,使BSA的疏水环境极性增强,疏水性减弱,荧光强度降低。测得的表观结合常数和结合位点数分别是1 050 L·mol-1和0.88。

第一代树枝状聚(胺-酯)与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱法研究

在生理条件下用荧光光谱法研究了第一代树枝状聚(胺-酯)[PAE(NH2)8]与牛血清白蛋白(BSA)间的相互作用。结果表明,加入PAE(NH2)8后,BSA发生荧光猝灭,其猝灭机制属于静态猝灭,通过计算得到PAE(NH2)8与BSA作用的动态消光常数为1.64L/mmol。通过同步荧光、红边激发荧光位移法等方法的研究发现,PAE(NH2)8的存在会改变BSA的构象,使色氨酸残基周围变得更加疏水。此外还考察了体系的pH值和离子强度对PAE(NH2)8与BSA相互作用的影响,发现静电作用是两者结合的主要作用机制。研究了金属离子Cu2+、Fe3+对PAE(NH2)8与BSA之间相互作用的影响。研究表明不同的金属离子对PAE(NH2)8与BSA相互作用的影响不同,Fe3+降低了PAE(NH2)8与BSA的结合能力,而Cu2+对PAE(NH2)8与BSA之间相互作用几乎没有影响。而金属离子的存在并不改变两者的结合位点数,BSA和PAE(NH2)8之间的结合位点数均近似为1.27。

聚乙二醇修饰树枝状聚(胺-酯)与牛血清白蛋白结合作用的研究

以端基为8个伯氨基的树枝状化合物[PAE(NH2)8]和聚乙二醇-600(PEG-600)为原料合成了聚乙二醇修饰的树枝状聚(胺-酯)(PAE-PEG).通过正交实验讨论了反应温度、反应时间及原料配比对产物产率的影响.用荧光光谱法研究了PAE-PEG与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用.实验结果表明,PAE-PEG的加入使BSA发生荧光猝灭,其猝灭机制属于静态猝灭,通过计算得到PAE-PEG与BSA作用的动态猝灭常数为18.55 L/mmol.通过同步荧光研究发现,PAE-PEG的存在会改变BSA的构象.此外还考察了体系的p H值和离子强度对PAE-PEG与BSA相互作用的影响,发现两者结合的主要作用机制是静电作用.研究了金属离子Cu2+、Fe3+对PAE-PEG与BSA之间相互作用的影响,发现金属离子的存在并不改变两者的结合位点数,BSA和PAE-PEG之间的结合位点数均近似为0.7.

牛血清白蛋白荧光猝灭法测定药物中的头孢他美酯

[目的]应用牛血清白蛋白荧光猝灭法建立一种测定药物中头孢他美酯含量的新方法。[方法]牛血清白蛋白(BSA)具有很强的内源荧光性,而头孢他美酯溶液本身不产生荧光。当头孢他美酯与BSA结合后,会导致其荧光强度下降。BSA在λex=342nm处的荧光猝灭程度与头孢他美酯的量在一定浓度范围内呈良好的线性关系,据此建立测定药品中头孢他美酯含量的新方法。[结果]该结合物的最大发射波长为λmax=342nm,与头孢他美酯摩尔浓度在2.07×10-6-2.58×10-5mol·L-1范围内线性关系良好。其线性回归方程为ΔF=1.9684×107Ccp+25.6288,相关系数r=0.9958,检出限为1.01×10-7 mol·L-1,RSD为0.66%,加标回收率为85.0%-100.9%。[结论]本方法操作简便、快速,用于实际样本的测定,结果满意。

头孢他美酯与牛血清白蛋白的相互作用

在最佳实验条件下,光谱法研究牛血清白蛋白(BSA)和头孢他美酯(CP)结合反应的特征。结果表明:CP对BSA的荧光有猝灭作用,属于静态猝灭。BSA能运输CP,其作用力类型主要为氢键和范德华力。BSA的亚螺旋域ⅡA是主要结合位置,有弱的负协同作用。CP对BSA构象几乎不产生影响,结合位点更接近于酪氨酸。

全硫取代三苯甲基自由基酯基衍生物与牛血清白蛋白的相互作用

采用荧光光谱、电子顺磁共振(EPR)波谱、紫外-可见吸收光谱和分子对接等技术研究了全硫取代三苯甲基(TAM)自由基酯基衍生物——ET-03与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用,发现ET-03与BSA能自发发生结合作用;主要以疏水作用力结合在BSA亚结构域ⅡA(位点Ⅰ)和亚结构域ⅢA(位点Ⅱ)上;ET-03对BSA的荧光猝灭效应为动态、静态混合猝灭机制,且可能存在非辐射能量转移.研究结果表明,酯基衍生化TAM自由基与白蛋白能自发结合,有望用于蛋白构效关系研究;同时也提示将TAM自由基酯基衍生物用于活体成像或自旋标记物时应考虑其与蛋白相互作用的影响.

邻苯二甲酸二环己酯与牛血清白蛋白相互作用研究

本文利用光谱法和分子对接技术,研究邻苯二甲酸二环己酯(DCHP)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制。荧光光谱结果表明,DCHP可以诱导BSA的内源性荧光猝灭,且猝灭机制为静态猝灭;随着DCHP浓度增大,BSA最大发射波长发生蓝移。不同温度下的热力学常数表明,DCHP主要靠氢键和范德华力与BSA相结合;同时DCHP与BSA只有1个结合位点。位点实验结果显示DCHP与BSA在位点Ⅰ结合。同步荧光光谱、三维荧光和圆二色谱结果进一步证实DCHP改变了BSA的构象。通过分子对接技术模拟DCHP与BSA在分子水平上的相互作用机制,结果与光谱学研究结果一致。

牛血清白蛋白荧光猝灭测定药物中的头孢孟多酯

应用牛血清白蛋白（BSA）荧光猝灭法建立了一种测定药物中头孢孟多酯（CEF）含量的新方法。牛血清白蛋白具有很强的内源荧光性,而头孢孟多酯溶液本身不产生荧光。当头孢孟多酯与BSA结合后,会导致其荧光强度下降。牛血清蛋白在λex=340 nm处的荧光猝灭程度与头孢孟多酯的量在一定浓度范围内呈良好的线性关系,据此建立测定药品中头孢孟多酯含量的新方法。该结合物的最大发射波长为λmax=340 nm,与头孢孟多酯物质的量浓度在2.18×10^-6~2.62×10^-5 mol·L-1范围内线性关系良好。其线性回归方程为ΔF=2.42×10^7CCEF-35.155,相关系数r=0.996 9,检出限为8.582 58×10-7 mol·L-1,RSD为0.16%,加标回收率为94.67%~98.43%。本方法操作简便、快速,用于实际样本的测定,结果满意。

荧光光谱法研究头孢孟多脂与牛血清白蛋白的相互作用

模拟生理条件下,用荧光光谱法和紫外-可见吸收光谱法研究头孢孟多酯和牛血清白蛋白(BSA)结合反应的特征。研究表明:头孢孟多酯与BSA形成复合物,从而猝灭BSA的内源性荧光,该过程为静态猝灭过程。根据SternVolmer方程得出不同温度下结合位点数n和结合常数Ka;结合位点位于BSA的亚结构IIA中。通过计算相应的热力学参数,确定头孢孟多酯与BSA之间的作用力主要为静电作用力。利用同步荧光光谱探讨了头孢孟多酯与BSA作用前后白蛋白的构型变化。Hill系数nH<1,表明头孢孟多酯有弱的负协同作用。此研究不仅对于揭示体内药物动力学问题和指导临床合理用药具有一定意义,而且对药物分子设计及新药开发等也具有重要指导意义。

司班80与牛血清白蛋白相互作用的光谱研究

运用荧光光谱和紫外吸收光谱研究了失水山梨醇单油酸酯(Span80)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。实验表明猝灭机理主要为静态猝灭和非辐射能量转移,得到了不同温度下该反应的结合常数和热力学参数,并根据热力学参数确定了Span80与BSA之间的作用力类型主要为疏水作用。依据F rster能量转移理论,测得供体与受体间的结合距离r=4.95 nm和能量转移效率E=0.01;并用同步荧光和三维荧光技术考察了Span80对BSA构象的影响。

热变性牛血清白蛋白对三种活性物质的复合和保护作用

本文通过竞争实验证明热变性牛血清白蛋白(hBSA)同时结合α-生育酚、白藜芦醇和表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的可能性,通过结构稳定性和抗氧化稳定性实验表征蛋白对活性物质的保护情况。结果表明hBSA能同时结合三种物质,并且在复合物的形成过程中不存在竞争行为。储藏48 h后,游离态α-生育酚、白藜芦醇、EGCG残留率分别为48%、68%、0%,hBSA-EGCG-α-生育酚-白藜芦醇复合物中残留率分别为91%、90%、15%;储藏288 h后,游离态的α-生育酚、白藜芦醇、EGCG对ABTS自由基的清除能力分别减少了6%、10%、31%,hBSA-EGCG-α-生育酚-白藜芦醇复合物仅减少了13%。因此,hBSA是同时负载三种活性物质的良好载体。研究结果将为蛋白类共包埋载体的开发提供更多参考依据。