UPLC-MS/MS法测定土壤中氯霉素类抗生素及其代谢物

针对土壤中抗生素污染日益严重的问题,为了促进土壤中抗生素监测技术体系及相关标准的完善,建立了一种QuEChERS结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)的分析方法。土壤样品用10 mL 3%(体积分数,下同)氨化乙腈提取,0.2 g PSA和0.2 g无水MgSO4净化,流动相为甲醇-水(1∶1,体积比,下同),ZORBAX SB-Aq(2.1 mm×150 mm,3.5μm)色谱柱,质谱条件为电喷雾离子源(ESI)、正/负离子扫描、多反应监测(MRM)。结果表明,4种分析物在0.1~200 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数(r)>0.999,检出限(LOD)为0.01~0.06μg/kg,定量限(LOQ)为0.05~0.19μg/kg,在3个加标水平(0.4,8.0,40.0μg/kg)下,平均回收率为87.23%~108.57%,相对标准偏差(RSD,n=5)为0.36%~6.55%。该方法准确、简便、高效、灵敏,适用于土壤中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺的同步检测,可为相关部门制定相关行业标准、规范提供数据依据。

超高效液相色谱串联质谱法测定畜产品中硝基呋喃类抗生素代谢物残留的研究

建立和发展了畜产品4种硝基呋喃类抗生素代谢物残留的超高效液相色谱串联质谱法（UPLC—MS／MS）快速检测方法。样品中与蛋白结合的代谢物经0．125moL盐酸水解，2-硝基苯甲醛（2-NBA）37℃衍生16h。上清液调节pH=7．4，用乙酸乙酯提取，正己烷净化，流动相定容。采用电喷雾电离，正离子扫描，多反应检测模式（MRM）。外标法定量，在添加浓度为0．1～2．0μg／kg范围内，4种代谢物的平均回收率在67．3％～85．0％之间，10次测定结果的RSD平均值在2．0％～9．7％之间。最低检出限均达到0．15μg／kg，在0．10～20．00ng／mL的线性范围内，相关系数r均大于0．99，实现了样品检测的快速、高灵敏和高的选择性，适用于畜产品猪肉和猪肝中硝基呋喃类代谢物残留的检测。

液相色谱-串联质谱联用法测定蜂蜜及水产品中硝基呋喃类抗生素代谢物残留量

采用微量化样品前处理技术,以邻硝基苯甲醛为衍生剂,电喷雾正离子多反应监测方式建立了蜂蜜及水产品中四种硝基呋喃类抗生素代谢物残留量同时测定的液相色谱-串联质谱联用法.方法的检出限为0.02～0.3 ng/g,线性范围均＞102,线性方程的相关系数＞0.997,回收率为79.0%～95.6%.

基于高效液相色谱–串联质谱法同时测定沉积物中磺胺类抗生素及其代谢物

建立了一种同时快速提取并检测沉积物中多种磺胺类抗生素及其典型代谢产物的方法,沉积物样品经冷冻干燥后,经萃取液(纯水,乙腈)萃取、净化盐(硫酸镁,C18)净化后,利用高效液相色谱–串联质谱仪(LC-MS/MS)进行测定。和常用的加速溶剂萃取法相比,该方法使用的有机溶剂量降低了57%,提取时间减少了40%。此外,该方法在低浓度下的回收率都相对较高,范围在为80%~121%,相对标准偏差小于9%。该方法可应用于水体沉积物中磺胺类抗生素及其代谢物的同时检测,且检测过程相对快速。

代谢组学方法研究奶牛注射氯霉素后牛奶中的生物标志物

建立了高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)技术研究牛奶代谢组学的方法。样品用乙腈提取,经浓缩富集,采用HPLC-MS技术研究了注射氯霉素后牛奶中内源性代谢物随时间的变化情况。结果表明,注射氯霉素后,牛奶的代谢指纹图谱中8个谱峰的变化随给药及休药时间呈现一定升降规律;采用偏最小二乘判别分析法(PLS-DA)可将给药组与空白组样品完全分开;鉴定了对组间差异贡献较大的化合物为单羟基十八碳二烯酸(HODE),HODE可以作为注射氯霉素后奶牛体内代谢应激产生的内源性生物标志物。

青霉素类抗生素分析研究进展及其应用

青霉素类抗生素具有杀菌活性强、毒副作用小等特点,在临床、动物饲养中应用非常广泛。但使用此类抗生素可能会对某些个体引起过敏反应甚至死亡,同时该类药物的β-内酰胺环不稳定,易受pH值、温度和β-内酰胺酶的影响而开环,原体进入生物体后极易分解,代谢快,检测时限短,因此寻找稳定性好和检测时限长的代谢产物对青霉素类抗生素的检测显得十分重要。本文就近年来青霉素类抗生素的检测方法、稳定性研究、代谢物检测及其在食品中的残留检测、法医学领域中的应用等内容进行了综述。

酶联免疫法快速检测水产品中硝基呋喃类代谢物、氯霉素及氟苯尼考

应用特异性强的间接酶联免疫法,同时检测4种硝基呋喃类代谢物、氯霉素(CAP)和氟苯尼考(FF),建立快速分析水产品中6种药物残留量的方法。样品用盐酸进行消化,再由乙酸乙酯提取,使用酶联免疫试剂盒进行检测。实验结果显示,6种分析物均在其线性范围内,线性系数均大于0.995。在加标浓度为0.1、0.5和1.5μg/kg的加标水平下,组织样中CAP的加标回收率为60.00%~126.26%;在加标浓度为0.5、2.0和8.0μg/kg的加标水平下,组织样中FF的加标回收率为60.83%~68.37%;在加标浓度为0.1、0.5和2.0μg/kg的加标水平下,组织样中呋喃西林代谢物(SEM)的加标回收率为65.66%~148.16%;在加标浓度为0.2、1.0和4.0μg/kg的加标水平下,组织样中呋喃它酮代谢物(AMOZ)的加标回收率为69.18%~140.50%;在加标浓度为0.2、1.0和4.0μg/kg的加标水平下,组织样中呋喃妥因代谢物(AHD)的加标回收率为62.50%~131.00%;在加标水平为0.1、0.5和2.0μg/kg的加标水平下,组织样中呋喃唑酮代谢物(AOZ)的加标回收率为83.1%~144.0%。研究结果说明6种分析物的相对标准偏差均在0~7.5%之间,本方法灵敏度高、快速简便,适用于水产品中硝基呋喃类代谢物、氯霉素和氟苯尼考的快速批量检测。

水产品中氯霉素及四种硝基呋喃代谢物残留快速检测方法研究

建立了水产品中氯霉素及四种硝基呋喃代谢物残留的快速检测方法,通过对样品的提取和净化,借助胶体金层析条颜色变化判断样品中被检物残留状况,整个过程简单方便且成本低廉,非常适合基层水产品药物残留大规模筛选排查。

UPLC-MS/MS同时测定水产品中硝基呋喃类药物代谢物、孔雀石绿类化合物和氯霉素

研究建立同时测定水产品中硝基呋喃类药物代谢物、孔雀石绿类和氯霉素等9种化合物的方法。向试样加入邻硝基苯甲醛,在酸性条件下衍生,利用乙腈提取,EMR-Lipid净化,用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱洗脱分离,采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS),正和负离子MRM模式采集检测。结果显示,9种化合物在相应范围内线性良好,相关系数均>0.99,定量限为0.01~0.50μg/kg。4种水产品在添加量为1、4和10μg/kg的加标回收和精密度试验中,回收率为79.7%~127.1%,相对标准偏差(RSD)为0.9%~17.1%。结果表明,该方法简单、高效,可以同时前处理并快速准确测定水产品中9种禁用兽药残留。

液相质谱法同时测定水产品中氯霉素和硝基呋喃类代谢物残留量的研究

本文研究建立了同时测定水产品中氯霉素和硝基呋喃类药物代谢产物的方法。先将与蛋白质结合的硝基呋喃类药物代谢物在酸性条件下水解，用2-硝基苯甲醛衍生后，以乙酸乙酯提取，经净化浓缩，用液相色谱质谱联用仪测定，内标法定量。样品中硝基呋喃类代谢物和氯霉素残留量检测的线性范围分别在0．25μg/kg～100μg／kg和0．1μg／kg～100μg／kg之间，最低检出限分别为0．25μg／kg和0．1μg／kg。添加回收率均在80％～110％之间。结果表明，该方法具有简单、快速、灵敏等特点，适用于水产品中硝基呋喃类代谢物和氯霉素残留量的同时分析。

超高效液相色谱-质谱法同时测定水产品中硝基呋喃类代谢物、孔雀石绿及氯霉素残留量的方法验证

为提高检测效率,本实验室验证了北京六角体科技发展有限公司生产的水产品中孔雀石绿、硝基呋喃类代谢物、氯霉素前处理试剂盒的适用性。本文主要从产品适用范围、标准曲线、线性相关系数、检测灵敏度、精密度及方法回收率进行验证。通过验证发现,本产品的适用范围、标准曲线、线性相关系数、检测灵敏度、检测精密度及方法回收率均满足对应检测标准的要求,并用该产品检测了有证质控样品,检测结果符合要求。

垂直流-水平潜流组合湿地对磺胺类抗生素的去除

利用垂直流串联水平潜流的组合人工湿地处理污水处理厂尾水，比较有植物和无植物组合湿地对磺胺类抗生素母体及N 4 乙酰代谢物的去除效果。结果表明：有植物组合湿地的去除效率为72.31%，高于无植物组合湿地的59.71%；不同种类湿地植物对磺胺类抗生素的吸收累积能力存在差异，美人蕉积累量最大，其次为风车草，花叶芦竹最低；植物各部位对磺胺类抗生素的积累为地下组织（根）大于地上组织（叶和茎）；基质对磺胺类抗生素的吸附能力表现为有植物基质吸附量大于无植物基质，变化范围为0.34-1.59 ng/g dw，表明湿地植物的存在更有利于磺胺类抗生素的降解。垂直流-潜流组合湿地能较好地降解磺胺类抗生素，但其降解机理及植物在其中的作用有待进一步研究。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定畜禽肉中林可胺类和大环内酯类抗生素及其代谢物残留

建立了畜禽肉中林可胺类(林可霉素、吡唎霉素)、大环内酯类抗生素(螺旋霉素、替米考星、竹桃霉素、红霉素、泰乐菌素、吉他霉素、克拉霉素、罗红霉素、交沙霉素、泰万菌素)及其2种代谢物(新螺旋霉素、3-O-乙酰泰乐菌素)残留量的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)分析方法。试样采用70%(V/V)乙腈水超声提取,磷酸盐缓冲溶液(pH 9.0)稀释,C18固相萃取柱净化;采用BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,以乙腈和0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱;采用电喷雾串联质谱仪,在多离子反应监测(MRM)模式下,外标法定量。结果表明,14种药物在0.25~50.0 ng/mL范围内线性关系良好(r>0.999),定量限(LOQ)为1.0μg/kg。在1,10,100μg/kg加标水平下,不同基质中平均回收率为76.6%~111.5%,相对标准偏差小于13%,满足兽药残留实验室质量控制规范要求,可实现GB 31650-2019中涵盖的林可胺类、大环内酯类及其代谢物的同时测定。

大连市区水产品中硝基呋喃代谢物、孔雀石绿及氯霉素残留情况监测与评价

目的:了解大连市辖区市售水产品中禁用兽药残留情况,为进一步食品安全风险评估提供可靠依据。方法:采用《2017年国家食品污染和有害因素风险监测工作手册》对应项目监测方法结合国家标准方法,运用固相萃取(SPE)结合液-质联用(LC-MS)技术检测海参中呋喃唑酮(AOZ)、呋喃它酮(AMOZ)、呋喃西林(SEM)和呋喃妥因(AHD)4种硝基呋喃代谢物(2-NP-AOZ、2-NP-AMOZ、2-NP-SEM、2-NP-AHD)残留量,以及大菱鲆、乌鳢和鳜鱼3种主要养殖鱼中4种硝基呋喃代谢物、氯霉素(CAP)、孔雀石绿(MG)及其代谢产物隐色孔雀石绿(LMG)共7项残留量。结果显示,15份海参中有1份呋喃唑酮(AOZ)代谢物(2-NP-AOZ)有检出,检出率为6.7%,40份养殖鱼中1份大菱鲆及1份乌鳢隐色孔雀石绿(LMG)有检出,检出率为5%,其他成分无检出。结论:目前大连市售水产品仍存在禁用兽药残留污染风险,应该引起人们的重视,需有关部门进一步加强监管力度,必要时可加大抽样量定期监测。

EMR-Lipid QuEChERS UPLC-MS/MS法测定动物源性食品中残留氯霉素及4种硝基呋喃代谢物

目的建立EMR-Lipid QuEChERS超高效液相色谱/串联质谱法测定动物源性食品中氯霉素及4种硝基呋喃代谢物残留量的检测方法。方法采用EMR-Lipid前处理方法、UPLC-MS/MS分析技术,测定动物源性食品中氯霉素及4种硝基呋喃代谢物残留量。结果不同空白基质样品中分别添加0.5、1.0、5.0、10.0μg/kg的氯霉素、4种硝基呋喃代谢产物的混合标准溶液,不同基质的加标回收率皆在52.6%~85.2%范围,相对标准偏差(RSD)在3.6%~17.2%范围。动物组织空白基质中线性回归方程的相关系数r分别为0.905~0.999、表明经过EMR-Lipid QuEChERs方法处理过的氯霉素、4种硝基呋喃代谢产物在0.5~50.0μg/L范围内线性关系良好。以3倍信噪比计算得到检出限为0.02~0.05μg/kg,10倍信噪比算得定量限为0.06~1.50μg/kg。结论用EMR-Lipid QuEChERs快速方法净化,能将目标物有效提取,过程简单,节约试剂和时间成本,各项指标也均满足相关法规的要求,可以作为研究动物源性食品中氯霉素及4种硝基呋喃代谢产物残留量的检测方法。

动物源性食品中头孢菌素及代谢物残留分析方法研究进展

在畜禽养殖过程中大量使用广谱、高效的头孢菌素类抗生素以防治疾病,由此引发的食品安全风险得到科研工作者的广泛关注。然而,进行动物源性食品中头孢菌素残留的市场风险筛查时发现,基本无法检出残留量。头孢菌素可能以代谢物的形式存在于食品中,而部分代谢物具有杀菌活性、致敏性及细菌耐药性,一旦为人体摄入,甚至可能产生肝肾毒性,由此引发食品安全风险。动物源性食品基质复杂,且其中残留的头孢菌素类抗生素及代谢物含量甚微,因此,开展新型、快速的复杂基质样品前处理,以及灵敏、准确、高通量的头孢菌素类抗生素及代谢物的仪器分析方法的研究非常必要。本文对国内外动物源性食品中头孢菌素类抗生素及代谢物残留分析检测现状进行了阐述,详细介绍了样品前处理和分析检测方法的研究进展,为深入持续相关研究、科学有效保障食品安全提供重要的理论基础。

化学发光免疫分析与酶联免疫分析法检测水产品药物残留的比较研究

对检测水产品中呋喃唑酮代谢物（AOZ）和氯霉素（CAP）药物残留的两种方法——化学发光免疫分析（CLEIA）和酶联免疫分析（ELISA）法进行了比较研究。结果表明：两种药物残留检测中,CLEIA分析方法的线性范围和检出限均优于ELISA法,且两种免疫分析法的添加回收率均具有很好的相关性;用CLEIA法检测AOZ的检出限为0.01μg/kg,线性范围为0.01~2.56μg/kg,检测CAP的检出限为0.016μg/kg,线性范围为0.025~6.400μg/kg;用ELISA法检测AOZ的检出限为0.1μg/kg,线性范围为0.10~1.62μg/kg,检测CAP的检出限为0.05μg/kg,线性范围为0.05~4.05μg/kg;用CLEIA法检测CAP的批内变异系数（RSD）为5.5%~11.3%,批间RSD为12.3%~20.9%,检测AOZ的批内RSD为6.6%~11.1%,批间RSD为15.6%~18.3%。研究表明,用CLEIA法检测水产品药物残留较ELISA法检出限低、线性范围宽,虽然检出CAP和AOZ的变异系数均高于ELISA法,但仍符合《兽药残留酶联免疫试剂（盒）备案参考评判标准》的规定。

高效液相色谱-质谱串联法测定鱼类中兽药残留的研究

本文通过高效液相色谱-质谱方法检测氯霉素、硝基呋喃类代谢物、孔雀石绿三种药物的残留情况,对改进后的前处理方法与国标中给出的前处理方法进行了检测比较。通过比较得出改进后的前处理方法具有节省时间、节省实验成本、简化步骤、提取效果好的优势。

稳定同位素内标-超高压液相色谱-串联质谱法同时测定动物源性食品中8种抗生素残留

目的建立超高压液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）测定动物源性食品中8种抗生素药物残留的方法。方法待测物经乙酸乙酯提取,采用电喷雾电离,正负离子扫描,多反应监测模式（MRM）,基质匹配内标标准曲线法定量。结果在最佳试验条件下,8种抗生素残留物在0.05-50.0μg/kg的浓度范围内线性良好,相关系数r2均大于0.995,检出限范围为0.05-0.1μg/kg,平均回收率为56.8%-108.2%,相对标准偏差（RSD）小于15.4%。结论本方法的样品前处理过程简单,净化效果好,灵敏度高,有效解决了基质效应问题,适用于大批量食品中抗生素残留的快速定量分析。

糖肽类抗生素市场发展新动向

糖肽类抗生素的研制时间始于上世纪50年代末，最早系从一种学名为Norcardia orientalis（东方诺卡菌）的微生物的次生代谢物中提取所得的一种抑菌物质，当时由于抗生素发酵技术和提取手段落后等多种因素，故从诺卡菌发酵液中提取的这种新型抗生素（后被命名为万古霉素）因存在先天性缺点（如产品纯度不高以及具有一定毒性等等）故一直未被正式用于临床治疗。