糖性白内障大鼠晶状体水不溶性蛋白的改变

用D一半乳糖诱发了大鼠白内障,分析了其膜固有蛋白和尿素溶蛋白的改变。对正常大鼠晶状体纤维细胞膜蛋白电泳图谱的分析表明,其26KDa的主要膜固有蛋白(MIP26)约占膜固有蛋白总量的42.9％,22KDa的膜固有蛋白约占6.4％。糖性白内障大鼠晶状体纤维细胞膜固有蛋白以22KDa为主,约占30.5％,MIP26几乎消失。并在24KDa处有一深染区带。在白内障发病过程中18KDa的膜蛋白的相对含量无明显改变。这些结果提示在糖性白内障发病过程中MIP26发生了降解,产生了22KDa的降介产物。 以每克湿重计,白内障晶状体尿素溶蛋白降低约22.5％。但白内障晶状体尿素溶蛋白占总蛋白的比例升高。正常大鼠尿素溶蛋白电泳图谱主要显示四条区带,其近似分子量分别为22.5KDa、22.4KDa、20.6KDa和19.2KDa。白内障晶状体20.6KDa和19.2KDa的二条区带所占的比例明显减小。这个结果提示正常晶状体尿素溶蛋白主要含有α—和β—晶体蛋白,而且白内障晶状体尿素溶蛋白则主要含有β—晶体蛋白。

Alcalase降解水不溶性鸡肉蛋白规律及其产物清除DPPH活性研究

研究了Alcalase降解水不溶性鸡肉蛋白的规律及其产物清除DPPH自由基活性。结果表明,随酶解时间延长,可溶性蛋白质、氨基酸含量不断增加,而肽含量则在水解前8h达到最大,随后不断降低;肽的分子量分布趋势总体表现为大分子量的肽逐渐减少,小分子量肽的含量逐渐增多,肽分子量分布图中肽峰值不断向后推移;Alcalase对分子量在3000～15000Da间的肽段降解能力较弱,水解24h后,这部分肽占总肽量的比值仍为89.93%。水不溶性鸡肉蛋白Alcalase酶解产物有明显的清除DPPH活性,其清除DPPH活性在酶解4h时达到最大,随后不断下降;对于同一酶解时间的产物,浓度越大,其清除DPPH活性越强,但其清除DPPH能力并不与酶解液浓度成倍数关系。

水溶性及水不溶性晶状体蛋白质的研究

目的 用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PACE)的方法对水溶性及水不溶性晶状体蛋白质进行分离分析,以完善晶状体蛋白质组的研究。方法 用12%分离胶对晶状体水溶性蛋白(WSF)及脲溶性蛋白(USF),碱溶性蛋白(ASF)及超声溶性蛋白(SF)进行SDS－PAGE。用8%及3%－8%的梯度分离胶对WSF及USF进行SDS-PAGE。结果USF,ASF,SF和 WSF相比有明显差异。WSF及 USF在相对分子质量＞100000处可显示出数条清晰的蛋白谱带。结论水溶性高相对分子质量晶状体蛋白及水不溶性晶状体蛋白在双向凝胶电泳中不能很好地分离,而在单向电泳中可分离出特异性蛋白谱带,此结果是对晶状体蛋白质组研究的一种有效补充。