利用半干技术进行水平板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的同工酶分析

采用滤纸条半干技术进行水平板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的同工酶分析,提高了电泳的分辨率,缩短了电泳时间(从10-12h缩短到4-5h),简化了操作,节省了试验药品费用.

垂直板式聚丙烯酰胺凝胶电泳分离尿蛋白

本文介绍了垂直板式聚丙烯酰胺凝胶电泳分离尿蛋白的实验方法,并对正常人生理状态和运动后的尿蛋白进行了分析。由于聚丙烯酰胺凝胶电泳具有分子筛和电荷效应的双重作用,故检出率和分辨率极高,与常用的园盘电泳相比,其可比性更强,对研究尿蛋白的组分及其与血浆蛋白质的关系具有一定的实用价值。采用这一分析方法,正常人尿蛋白可分出1-2条区带,多为小分子蛋白质,而运动后尿蛋白则可分出2—4条区带,除小分子蛋白质外,还有中分子至大分子蛋白质。运动后尿蛋白组成变化的原因尚不完全明确,但目前认为与运动引起肾小球及肾小管缺氧有关。这项研究工作对了解运动员训练中的运动负荷及指导运动员的科学训练有一定意义。

轮状病毒性腹泻的快速诊断——聚丙烯酰胺凝胶电泳检测病毒核酸方法的改进

作者对 Herring 氏等(1982)和江杰元等(1985)报道的聚丙烯酰胺凝胶垂直板连续电泳作轮状病毒感染快速诊断方法加以改进。把聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳改为聚丙烯酰胺凝胶柱圆盘电泳;把电极缓冲液由 Tris--磷酸缓冲液改为Tris—甘氨酸缓冲液,使电泳时间由17小时缩短至70分钟,银染时间由2小时缩短至30分钟;又制备聚丙烯酰胺凝胶柱比制备凝胶垂直板方法简单,且可节约胶料一半。结果,除保持诊断的正确性和检出率外,核酸线条更为清晰,我们用改进的方法和 Herring 氏等报道的方法同时检测了42份仔猪腹泻粪样,12份犊牛腹泻粪样,28份婴儿腹泻粪样和4株猪轮状病毒的细胞培养毒,两者阳、阴性的符合率达100%。

全血LDH同功酶聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳

LDH（乳酸脱氢酶）在糖类的同化和异化过程中都起着重要的作用。近些年,在运动医学方面,关于LDH的研究日渐增多。用电泳法可将正常人LDH分成多条区带（LDH1—LDH5）。其中LDH1起乳酸脱氢酶而LDH5起丙酮酸还原酶作用。通常,医学临床上多采用血清或血浆样品进行同功酶分析。这样,即使采用微量毛细管取血技术,一次满意的分析也需要取血100微升左右。故在运动生化检验中普遍应用有一定局限。为此,我们以全血样品代替血清或血浆样品进行LDH同功酶聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果良好。

一种改进的蛋白质超薄凝胶电泳方法

介绍了一种将聚丙烯酰胺凝胶固定在电泳夹板上的蛋白质电泳方法.通过此方法蛋白质电泳可以在04mm厚的聚丙烯酰胺凝胶上进行.实验证明,经此方法处理的玻板结合凝胶非常牢固,在电泳后的所有处理步骤中都不会发生凝胶脱落现象.

聚丙烯酰胺凝胶干板制作的改进方法

聚丙烯酰胺凝胶电泳的垂直板型电泳法是近年来用途较广的一种相对含量的测定方法。它的优点是在同一条件下可以电泳多个样品,便于相互比较;另外还可以制成干板便于扫描、携带和保存。本文拟就干板制作方法的改进和体会作一介绍。

鲁西黄牛遗传多样性及其系统地位的研究

以中心产区简单随机抽样在山东省鄄城县和梁山县共抽取鲁西黄牛87头,用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和水平淀粉凝胶电泳技术检测21个编码血液蛋白(酶)的结构基因座的基因频率,同时引用国内外13个群体7个相同座位的研究资料,进行聚类分析。结果表明,在所检测的21个基因座中,有9个存在多型,多态位点百分比为42.86%,群体内遗传变异水平相对较高,平均杂合度为0.1416;鲁西牛与东南亚牛种亲缘关系较近,证实了鲁西牛是由北方蒙古利亚牛系和南方瘤牛的混血种,但不可能含有巴厘牛的血统。目前应扩大保种群的数量,以维持群体内的遗传多样性。

鲁西黄牛血液蛋白多态性及表型特征的研究

以中产区简单随机抽样在山东省鄄城县和梁山县共抽取鲁西黄牛90头,用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和水平淀粉凝胶电泳技术检测21个编码血液蛋白(酶)的结构基因座,并观察其外形特征,结果表明:在所检测的21个基因座中,有9个存在多型,多态位点百分比为42.86%,群体内遗传变异水平相对较高,平均杂合度为0.1416;证实了鲁西黄牛是北方牛和南方牛的混血种,同时可能还含有巴厘牛的血统;但目前应扩大保种群的数量,以维持群体内的遗传多样性。

矮慈姑一个自然居群的遗传多样性

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和等位酶分析方法 ,研究了矮慈姑一个自然居群的遗传多样性。根据 9个酶系统 16个等位酶位点的检测结果 ,表明矮慈姑的遗传多样性属中等水平。矮慈姑自然居群的多态位点百分率P =2 5 .0 ,平均每位点等位基因数A =1.4 375 ,平均多态位点等位基因数Ap =2 .5 0 0 ,等位基因有效数Ae=1.30 93,平均预期杂合度He=0 .132 7,平均观察杂合度Ho =0 .194 8,固定指数F =- 0 .4 6 84。实际观察到的杂合体比率高于理论预期杂合体比率 ,居群表现为杂合体过量。

利用SDS-PAGE鉴定转基因小麦HMW-GS的表达类型和后代遗传

采用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE)在蛋白质水平上对T2～T5代小麦转基因株系高分子量谷蛋白亚基(HMW GS)的遗传表达及其分离进行了鉴定和分析。结果发现,外源1Dx5和1Dy10基因在T2代部分株系中表达;在有的株系中出现了原亚基(8亚基)的缺失或沉默和新亚基(暂定8 )的产生,因而检测出2+5+10+12,2+5+7+8 +10+12,5+7+10,2+7+10+12的多种类型。对2+5+10+12型株系进行了多代跟踪分析,发现其在T2～T5代陆续发生分离,存在于不同单株、不同单穗的子粒和同一单粒后代之间。经筛选,获得了天然不存在的亚基类型为2+5+10+12,2+10+12,2+5+12等稳定表达的种质创新株系。

国外引种肉羊与宁夏本地品种羊血液蛋白(酶)多态性的比较研究

为了研究滩羊的遗传特性,试验采用非连续性聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳(PAGE)对6个品种羊的8个蛋白(酶)位点进行遗传性检测。结果表明:除萨福克羊外,滩羊、特克赛尔羊、无角陶赛特羊、杜×泊F1代、杜×寒F1代血红蛋白(Hb)、转铁蛋白(Tf)基因座上存在丰富的多态性,而只有滩羊、萨福克羊、特克赛尔羊在酯酶(Es)基因座上存在多态性。其中Hb和Es位点受1对等位基因控制,构成3种基因型;而白蛋白(Alb)、前白蛋白(Pr)和淀粉酶(AMY)基因座上均呈现单态。Tf位点上滩羊受6个等位基因控制,构成12种基因型;从8个蛋白(酶)位点的Nei氏预期平均基因杂合度(H)所估计的群体内遗传变异及与研究中其他群体结果对比来看,6个被测品种中,滩羊的品种内遗传变异最大,其H为0.242 7,滩羊与特克赛尔羊的遗传距离最远,与杜×泊F1代的遗传距离较近;这些群体的聚类结果与其生存的地理环境及育成历史基本相符。萨福克羊的Nei氏预期H为0.131 4,相对变异较小。

甘肃黑猪血浆蛋白质多态性与眼肌面积关系的研究

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)技术对甘肃黑猪合成系 37头猪的转铁蛋白 (Tf)、淀粉酶 1(Am1)、淀粉酶 2 (Am2 )、酯酶 (Es)、前白蛋白 (Pa) 5个蛋白质基因座的多态性进行了检测 ,并应用通用线性模型分析了这 5个基因座共 17种基因型对眼肌面积的相关效应。结果表明 ,TfBB型猪的眼肌面积显著小于其他基因型猪的眼肌面积 (P <0 0 5 ) 。

塞北兔耳型与血液蛋白多态型关系研究

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳对不同耳型的塞北兔血液中的红细胞酯酶(Es-1,Es-3)、红细胞碳酸酐酶(CA)、前转铁蛋白(Prt)、后白蛋白(Po)和血清碱性磷酸酶(AKP)5个蛋白位点进行了检测分析.结果表明,不同耳型的塞北免群体,多态蛋白位点的基因型比例不同.

苯并(a)芘作用下的A549细胞株热休克蛋白70家族多态性表达

目的 研究不同浓度苯并(a)芘(BaP)作用下A549细胞株热休克蛋白70家族(HSP70)多态性表达规律及其可能的意义。方法 利用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)技术分析A549细胞株中HSP70家族多态性表达。结果 A549细胞接受不同浓度BaP(0.1、1.0、5.0、10.0μmol/L)染毒24、48 h后,随着染毒剂量的逐步增加,HSP70家族中HSP72亚型的表达水平呈现逐渐下降的趋势(染毒24 h后积分光密度值分别为:150.36±26.03、98.57±1.3.34、64.92±15.03、34.65±19.10、32.92.±18.71;染毒48 h后分别为:126.85±17.41、106.19±15.32、73.64±21.02、35.18 ±11.95、16.27±9.35),而HSP73亚型的表达水平在不同浓度BaP染毒作用下无明显变化(染毒24 h后积分光密度值分别为:102.29±21.24、87.71±18.70、71.19±14.08、71.87±15.16、72.78±17.31;染毒48 h后分别为:86.66±16.86、75.67±10.61、66.83±12.63、67.29±10.26、91.37±13.68)。结论BaP对于HSP72表达有抑制作用,并且具有一定的剂量-效应关系,而对HSP73表达未见明显影响。