人结肠癌HCT-116细胞传代培养的简易方法

目的:针对人结肠癌HCT-116细胞在体外培养时常出现部分细胞聚团生长的特性,建立一种简易的细胞传代培养方法———水平震荡法。方法:采用简单高效的水平震荡方法替代胰酶消化法对HCT-116细胞进行传代培养。结果:利用水平震荡方法传代后的细胞在新瓶中可以正常贴壁。24h和48h观察到胰酶消化法传代的细胞生长情况与水平震荡法传代的细胞未见明显差异。结论:该方法无需使用胰蛋白酶,避免了胰酶对细胞的损伤作用,而且操作简便,降低了实验成本和污染的风险。水平震荡传代法可以替代胰酶消化法作为HCT-116细胞的简易传代方法。

丝状真菌质谱鉴定前处理方法及应用

目的 建立并评价实验室自行研发的丝状真菌质谱鉴定前处理方法的可行性.方法复苏2014年1月至2016年12月北京同仁医院菌库中380株丝状真菌菌株,沙保弱葡萄糖琼脂平板（SDA）28 ℃培养至成熟状态,同时使用Bruker仪器推荐的垂直旋转法培养和本实验室研发的＂水平震荡法＂培养至足量菌落.3种方法培养菌株均采用＂改良磁珠提取法＂提取蛋白行质谱鉴定.结果380株真菌菌株,使用SDA培养时间需要3~10 d,鉴定到种和属的比率分别是47%和81%;使用Bruker仪器推荐方法培养时间需要5~7 d,鉴定到种和属的比率分别是76%和94%;＂水平震荡法＂培养时间只需1~2 d,鉴定到种和属的比率分别是96%和99%.＂水平震荡法＂和SDA培养法比较,差异有统计学意义（χ2=39.026,P〈0.01）,和仪器推荐的方法比较,差异有统计学意义（χ2=11.310,P〈0.01）.结论 本实验室研发的＂水平震荡法＂和＂改良磁珠提取法＂优于仪器推荐的方法和SDA培养鉴定方法,可以应用到临床.