UPLC法测定广西莪术、醋莪术及其水提药渣中莪术烯醇含量

采用Waters ACQUITY UPLC BEH Shield RP C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液(44∶56,体积比)为流动相,等度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长262 nm,建立了莪术烯醇含量测定的UPLC法,比较了广西莪术、醋莪术及其水提药渣中莪术烯醇含量的差异性。结果表明,广西莪术和醋莪术水提药渣中莪术烯醇含量分别是广西莪术和醋莪术饮片中莪术烯醇含量的50%、44%,水提药渣中莪术烯醇含量仍然很高,具有较大利用价值,可根据需求进行二次开发与利用;不同干燥温度对水提药渣中莪术烯醇含量的影响较小。莪术烯醇含量测定的UPLC法稳定、准确、灵敏,可用于莪术及炮制品的质量控制,为水提药渣的资源化利用提供科学依据。

羌活饮片及其水提药渣的指纹图谱和抗氧化活性的谱效关系评价

目的:建立羌活饮片及其水提药渣的UPLC指纹图谱,评价其与抗氧化活性之间的谱效关系,为羌活资源开发利用提供依据。方法:采用UPLC法测定10批羌活饮片和相应水提药渣的指纹图谱,分析样品之间相似度,结合聚类分析(HCA)和正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA),评价两者化学成分差异;采用DPPH法和ABTS法测定抗氧化指标,借助灰色关联度(Grey)和偏最小二乘回归法(PLSR)建立羌活谱-效模型。结果:对羌活饮片和药渣指纹图谱共标定18个共有峰,HCA与OPLS-DA结果一致,将饮片和药渣明显区分。所有样品具有良好的抗氧化活性,且饮片高于药渣的活性,并筛选出10个与抗氧化关联性较大的正相关峰:峰1、2、3、6、11(羌活醇)、12、13(异欧前胡素)、14、15、16峰。结论:本研究建立了基于化学成分和活性的羌活质量评价模式,并为饮片和水提药渣的质量控制和资源利用提供较为全面的参考。

补骨脂水提药渣大鼠三个月长期毒性试验研究

目的研究补骨脂水提药渣大鼠ig给药的长期毒性。方法 SD大鼠70只,按体质量、性别随机分为5组:对照组、补骨脂生药粉高、低剂量组,补骨脂水提药渣高、低剂量组(各组高、低剂量均相当于生药6、3 g/kg,分别为临床等效剂量的11.11、5.56倍),每组14只,雌雄各半,每日ig给药1次,连续给药12周。每周称大鼠体质量,药结束后,取心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胸腺,称质量并计算脏器系数;血细胞分析仪检测血液学指标;全自动生化仪血清生化学指标;试剂盒法检测大鼠肝脏中氧化应激指标;做肝脏和肾脏组织病理学检查。结果与对照组比较,生药粉和药渣高剂量组雄性大鼠体质量均显著下降(P<0.05),而药渣组雌性大鼠体质量随给药时间延长无显著性变化;补骨脂生药粉和水提药渣雌性、雄性大鼠的肝系数均显著升高(P<0.01);雄性大鼠生药粉和药渣高剂量组、雌性大鼠生药粉组和药渣高剂量组肾系数显著升高(P<0.05、0.01、0.001);雄性大鼠生药粉高剂量组血小板(PLT)水平,药渣低剂量组红细胞(RBC)水平显著升高,生药粉低剂量组和药渣低剂量组白细胞(WBC)水平,药渣高剂量组PLT水平显著下降,雌性大鼠各给药组PLT均显著下降(P<0.05);雄性大鼠生药粉组碱性磷酸酶(ALP)和三酰甘油(TG)水平均显著下降,总蛋白(TP)水平显著升高,生药粉低剂量组尿素氨(BUN)水平显著下降(P<0.05、0.01、0.001);药渣高剂量组TP和白蛋白(ALB)、药渣低剂量组天冬氨酸转氨酶(AST)显著升高,丙氨酸转氨酶(ALT)和ALP显著下降(P<0.05、0.01、0.001);雄性大鼠生药粉高剂量组和药渣组丙二醛(MDA)显著升高(P<0.05),雌性大鼠生药粉组MDA和总抗氧化能力(T-AOC)、药渣组MDA均显著下降(P<0.05、0.01)。结论长时间给予大剂量补骨脂水提药渣,对大鼠肝脏和肾脏功能均造成一定损害。

酸碱复合处理和酶浓度对药渣纤维素水解效率的影响

为了研究酸碱复合处理对药渣木质纤维素水解效率的作用效果,探究药渣纤维素转化酶解转化乙醇的可行性,以水提药渣为原料,用NaOH-PAA进行预处理,在不同反应体系下用纤维素酶进行水解。实验结果表明,预处理后药渣酶解的葡萄糖浓度比预处理前提高3～4倍;在酶总量不变的情况下,增加底物数量和酶浓度能显著提高反应体系中的葡萄糖浓度。83～116 mg/mL的底物浓度和5.8 U/mL的酶浓度可使反应体系中的葡萄糖浓度达到12 mg/mL以上。在83 mg/mL的底物浓度和5.8 U/mL的酶浓度下,对预处理后的丹参药渣、甘草药渣及混合药渣进行纤维素酶解,60 h时,其糖产率分别为29.07 g/kg、49.31 g/kg、52.83 g/kg。结论:预处理能显著提高纤维素的酶解效率,药渣的葡萄糖产率主要取决于其纤维素含量,与药渣类型没有密切关系。

SFE-CO_2和超声法提取丹参药渣的对比研究

目的探讨不同提取工艺提取丹参药渣中丹参酮ⅡA成分含量,以便对丹参药渣综合利用。方法采用超临界二氧化碳(SFE-CO2)萃取丹参酮ⅡA,并与超声提取法相比较。结果SFE-CO2萃取的最佳工艺为萃取压力35MPa,夹带剂乙醇用量为100%,萃取温度40℃,萃取时间2h,含量高达3.87mg;而超声提取法只有2.89mg。结论用SFE-CO2萃取丹参药渣中丹参酮ⅡA,其提取率及纯度均高于超声提取法,且丹参药渣可以综合利用。

正交试验优选水提后丹参药渣中丹参酮Ⅱ_A的提取工艺

目的:探讨水提后丹参药渣中丹参酮ⅡA的最佳提取工艺条件。方法:以丹参酮ⅡA提取率为定量考察指标,采用L9(34)正交试验,考察了提取时间、提取次数、乙醇倍量及乙醇体积分数对丹参酮ⅡA提取率的影响。结果:丹参药渣中丹参酮ⅡA的最佳提取工艺条件为:8倍量90%乙醇浸泡30 min,回流提取2次(85℃),每次0.5 h,高效液相色谱法检测,水提后丹参药渣中丹参酮ⅡA的提取率约为91%。结论:优化的提取条件效率高,水提后丹参药渣中丹参酮ⅡA的含量较高,提示其可以作为一种丹参酮资源,具有开发利用的价值。

丹参饮不同提取工艺样品对急性心肌缺血模型小鼠的保护作用

目的:观察丹参饮不同提取工艺样品对急性心肌缺血模型小鼠的保护作用。方法:取96只小鼠随机分为空白对照(生理盐水)组、模型(生理盐水)组、阳性药物[复方丹参片,4.6 mg(生药)/(kg·d)]组和水提液、超临界CO2萃取物及超临界CO2萃取物+药渣水提液的高、中、低剂量[24、12、6 mg(生药)/(kg·d)]组,共12组,每组8只,ig给药,每天1次。第6天给药30 min后,除空白对照组外其余各组小鼠均按20 mg/kg ih异丙肾上腺素复制急性心肌缺血模型,每天1次,连续3 d。观察各组小鼠心电图ST段的变化,快速断头后观察各组小鼠张口呼吸次数及呼吸持续时间,测定血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠心电图ST段和血清中CK、LDH活性升高,断头后张口呼吸次数减少、呼吸持续时间缩短(P<0.01);与模型组比较,各给药组上述指标均得到改善(P<0.01),且与药物质量浓度呈正相关;超临界CO2萃取物+药渣水提液组各指标与空白对照组小鼠最为接近。结论:丹参饮不同提取工艺的样品对急性心肌缺血小鼠均具有一定的保护作用,且以超临界CO2萃取物+药渣水提液样品的保护作用最强。