水杨酸甲酯糖苷抗大鼠急性胸膜炎的作用研究

目的水杨酸甲酯糖苷(DL0309)是来源于民族药滇白珠的新型非甾体抗炎药,本实验的主要目的是评价其对角叉菜胶致大鼠胸膜炎模型的抗炎作用及其可能的机制。方法将48只♂SD大鼠按体重随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组(地塞米松)、DL0309低、中、高剂量组。通过注射角叉菜胶,建立大鼠急性胸膜炎模型。造模后5 h处死大鼠,通过测定胸腔渗出液的体积,对渗出液中的白细胞计数,并测定渗出液中蛋白质的含量来观察药物对该模型的抗炎作用;通过测定渗出液中一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)和前列腺素E2(PGE2)以及血浆中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量,来考察DL0309对该模型的抗炎作用机制。结果结果显示地塞米松和DL0309均可明显降低胸膜炎大鼠胸腔炎性渗出液的体积以及渗出液中的白细胞数量和蛋白质含量,同时对于胸腔炎性渗出液中的NO、TNF-α、IL-1β和PGE2的含量均有不同程度的抑制,能不同程度地降低血浆中MDA含量,升高SOD活力。结论 DL0309具有抗角叉菜胶诱导的大鼠急性胸膜炎作用。

水杨酸甲酯糖苷对阿尔茨海默病模型鼠学习记忆的影响

目的水杨酸甲酯糖苷是来源于中药滇白珠的具有明确抗炎作用的新型非甾体天然化合物,该研究探讨其通过抗炎对APP/PS1模型鼠学习记忆改善的作用。方法建立APP/PS1老年痴呆小鼠模型,应用Morris水迷宫评价水杨酸甲酯糖苷对学习记忆的影响,并对脑组织病理组织进行尼氏染色、硫磺素T染色和电镜技术观察神经细胞的功能变化。结果水杨酸甲酯糖苷能够提高AD小鼠空间学习记忆能力,表现为缩短APP/PS1小鼠的潜伏期,增加其在目标区域的停留时间和穿越次数;其次能够部分减少APP/PS1小鼠脑内Aβ沉积、缓解神经细胞的损伤、改善神经毡超微结构病变。结论水杨酸甲酯糖苷可能通过抗炎作用,减少了Aβ沉积和保护神经细胞,从而提高了AD小鼠的学习记忆能力。

新型非甾体抗炎药水杨酸甲酯糖苷抗神经小胶质细胞炎症作用的研究

目的：以脂多糖（LPS）刺激小神经胶质细胞BV-2，体外模拟神经退行性疾病的炎症模型，探讨新型非甾体抗炎药水杨酸甲酯糖苷（MSL）的抗炎作用。方法：采用LPS1μg·mL-1刺激小神经胶质细胞建立炎症模型，MTT法检测MSL对BV-2细胞的毒性作用；Griess法检测MSL对LPS刺激BV-2细胞一氧化氮（NO）释放量的影响；ELISA方法检测MSL对LPS刺激BV-2细胞产生炎性因子TNF-α，IL-6的影响；WesternBlot法检测MSL对LPS刺激BV-2细胞iNOS，COX-1，COX-2蛋白表达的影响。结果：MSL在0．1～100μmol·L-1浓度范围内对BV．2细胞没有细胞毒性。MSL（2，10，50μmol·L-1）能够剂量依赖性抑制LPS诱导的BV-2细胞NO，炎性因子IL-6的释放，对TNF-α也有一定的抑制作用。MSL（2，10，50μmol·L-1）能够不同程度地抑制iNOS，COX-1，COX-2蛋白的表达。结论：MSL能够抑制小神经胶质细胞炎性相关因子的产生，以及抑制COX-1／2的表达，发挥抗炎作用。

滇白珠抗炎镇痛活性部位的化学成分研究

目的对滇白珠Gaultheria leucocarpa var.yunnanensis抗炎镇痛活性部位(ARF)的化学成分进行研究。方法利用MCI-Gel CHP、AB-8大孔吸附树脂、薄层色谱等方法进行分离和纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果从滇白珠30%乙醇提取物即ARF中分离得到16个化合物,其中水杨酸甲酯糖苷类化合物4个:水杨酸甲酯-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、冬绿苷(2)、水杨酸甲酯-2-O-β-D-吡喃木糖基(1→2)[O-β-D-吡喃木糖基(1→6)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、水杨酸甲酯-2-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)[O-β-D-吡喃木糖基(1→6)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4);醇苷类化合物3个:乙基-O-β-D-吡喃木糖苷(5)、乙基-O-β-D-吡喃木糖基(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、甲基-O-β-D-吡喃木糖基(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7);单萜苷类化合物2个:长寿花糖苷(8)、芍药苷(9);苯甲酸类化合物5个:香草酸(10)、2,5-二羟基苯甲酸(11)、3,4-二甲氧基肉桂酸(12)、阿魏酸(13)、绿原酸(14);其他成分2个:4-羟基-2,6-二甲氧基苯基-O-β-D-葡萄糖苷(15)和3-甲氧基-1H-吡咯(16)。结论化合物5~9、12、15、16是首次从该植物中分离得到,其中化合物7为首次从白珠树属植物中分离得到,化合物8、9、12、15是首次从杜鹃花科植物中分离得到。

基于离体外翻肠囊法研究滇白珠抗炎镇痛活性部位的肠吸收特性

目的考察滇白珠抗炎镇痛活性部位(ARF)的肠吸收特性。方法采用大鼠右后足足底注射完全弗氏佐剂方法建立佐剂诱导关节炎(AIA)动物模型,造模成功后将模型大鼠随机分为3组(ARF高、中、低浓度),每组3只,另取9只正常大鼠随机分为3组(ARF高、中、低浓度),每组3只;实验前12 h禁食不禁水,收集大鼠肠系的小肠部分10 cm左右,采用大鼠离体外翻肠囊法,考察滇白珠ARF高、中、低浓度给药后正常大鼠和AIA模型大鼠不同时间点的肠吸收差异。通过HPLC检测肠囊液样品中3个水杨酸甲酯糖苷类成分methyl benzoate-2-O-β-D-xylopyranosyl(1-2)[O-β-D-xylopyranosyl(1-6)]-O-β-D-glucopyranoside(MSTG-A)、methyl benzoate-2-O-β-D-glucopyranosyl(1-2)[O-β-D-xylopyranosyl(1-6)]-O-β-D-glucopyranoside(MSTG-B)及2-[(6-O-β-D-xylopyranosyl-β-D-glucopyranosyl)oxy]benzoic acid methyl ester(冬绿苷)的含量,计算累积吸收量,吸收速率常数及表观渗透系数,比较3个成分在正常大鼠及AIA模型大鼠的肠吸收情况。结果滇白珠ARF中的3个活性水杨酸甲酯糖苷类成分在正常大鼠及AIA模型大鼠中均为线性吸收(均r>0.9),符合零级吸收速率。各成分吸收速率常数与给药浓度及机体状态有关,在生理状态下,其吸收速率常数均随ARF浓度的增加而增加,说明3个指标成分属于被动扩散;而在病理状态下,其吸收速率常数均随浓度的增加先减小后增加。各成分在生理及病理状态下均吸收良好,表观渗透系数均大于1×10^(-6)cm/s,且在病理状态下吸收强于生理状态。结论滇白珠ARF中MSTG-A,MSTG-B和冬绿苷在正常及AIA模型大鼠离体小肠中的吸收均符合零级动力学过程,且病理状态对活性成分的吸收具有影响;选择外翻肠囊法可评价滇白珠ARF中3个水杨酸甲酯糖苷类成分的肠吸收特性。