白果仁35%乙醇-水洗脱部位多糖及多肽的含量测定

目的对白果仁止咳有效部位35%乙醇-水洗脱部位中多糖及多肽的含量进行测定,为白果仁的综合开发和质量控制提供科学依据。方法采用苯酚-硫酸法、双缩脲法,建立标准曲线,并进行精密度、稳定性、重复性、加样回收率的考察。结果白果仁35%乙醇-水洗脱部位中多糖和多肽均在浓度范围内有良好的线性关系,方法学验证RSD值均小于2%,加样回收率分别为97.96%、97.94%,多糖含量为13.99%,多肽含量为31.41%。结论本研究建立的白果仁35%乙醇-水洗脱部位多糖和多肽含量测定方法简单可行,稳定性和重现性好。

六味地黄汤醇提水洗脱部位对小鼠阴虚模型的影响

目的观察六味地黄汤醇提水洗脱部位对阴虚小鼠体质量、免疫功能、肝组织氧化指标和cAMP、cGMP、T3、T4含量的影响,评价其滋阴作用。方法将小鼠每日灌胃给予甲状腺片(150 mg·kg-1)和利血平(1 mg·kg-1)致阴虚模型,同时给予治疗药物,7 d后检测小鼠体质量增长率、胸腺、脾指数及血浆中cAMP、cGMP、T3、T4,肝匀浆SOD、GSH-Px和MDA等,观察六味地黄汤醇提水洗脱部位对阴虚型小鼠的影响。结果六味地黄汤醇提水洗脱部位能提高阴虚小鼠体质量增长率、胸腺和脾脏指数,降低阴虚小鼠肝组织中SOD和GSH-Px活性,升高MDA含量,降低血清cAMP、T3、T4含量和cAMP/cGMP比值,高剂量组与模型组比较有统计学意义(P<0.05,P<0.01);六味地黄汤亦可改善以上各项指标,但与模型组相比无统计学意义。结论六味地黄汤醇提水洗脱部位具有显著滋阴作用,优于传统六味地黄汤煎剂。

六味地黄醇提水洗脱部位对D-半乳糖所致小鼠衰老模型的影响

目的:探讨六味地黄醇提水洗脱部位对D-半乳糖所致小鼠衰老模型的影响,评价其延缓脑衰老的作用。方法:ICR小鼠随机分为5组:空白组、模型组、维生素E组、六味地黄醇提水洗脱部位低、高剂量组。皮下注射D-半乳糖0.14 g.kg-1.d-1制备小鼠亚急性衰老模型。用跳台和Morris水迷宫法检测各组小鼠的学习记忆能力。用酶标法测定各组小鼠血清和脑组织匀浆中衰老相关指标。结果:六味地黄醇提水洗脱部位能使衰老小鼠跳台实验反应时间缩短,错误次数显著减少;水迷宫试验逃避潜伏期时间缩短,穿越次数增多(P<0.05或P<0.01),提高衰老模型小鼠血清SOD、GSH-Px及脑组织Na+-K+-ATP酶活性,并升高GSH/GSSG比值,减少血清MDA和脑组织NO含量,降低NOS活性(P<0.05或P<0.01);减少脑内Aβ含量,但与模型组比较无显著性差异。结论:六味地黄醇提水洗脱部位能够改善D-半乳糖衰老模型小鼠的学习记忆障碍,提高脑组织的抗氧化能力,具有一定延缓脑衰老的作用。

豨莶草水洗脱部位对人冠状病毒hCoV-229E致染小鼠的药效作用

目的:观察豨莶草水洗脱部位(SWES)以延迟给药方式经口灌胃给药后的体内抗人冠状病毒hCoV-229E的药效作用。方法:以BALB/c小鼠为研究对象,随机分为空白对照组、模型对照组、连花清瘟胶囊组、阿比多尔片组、SWES组(0.24 g/kg),每组10只。各组经腹腔注射环磷酰胺进行免疫抑制后,空白对照组经鼻滴入0.9%氯化钠注射液,其余各组均经鼻滴入等体积的hCoV-229E冠状病毒液进行呼吸道感染,感染2次后24 h各组连续给予相应药物7 d。检测小鼠体质重,采用ELISA法检测小鼠肺脏中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,采用鸡血凝集抑制试验检测肺组织中病毒滴度,并对肺脏组织进行病理学检查。结果:与模型对照组比较,SWES(0.24 g/kg)能明显抑制hCoV-229E感染小鼠体质量减轻(P<0.01),并能显著降低感染小鼠肺脏中炎性因子的含量(P<0.05),降低感染小鼠肺脏中hCoV-229E病毒的血凝效价,明显减轻小鼠感染冠状病毒后的肺组织病理学改变。结论:采用延迟给药方式经口灌服SWES具有明显抗人冠状病毒hCoV-229E体内药效作用,该作用与连花清瘟胶囊药效作用大致相当。

豨莶草水洗脱部位对H_(3)N_(2)型甲流病毒感染小鼠的作用及机制

目的:探讨豨莶草水洗脱部位(SWES)对BALB/c小鼠H_(3)N_(2)型甲流病毒所致呼吸道感染的作用及机制。方法:以50只BALB/c小鼠为研究对象,其中42只采用限食法(100 g饲料/kg^(-1)·d^(-1))进行小鼠气虚模型建立;另取8只小鼠,正常饲喂,作为正常对照组。选择模型显著40只随机分为模型对照组,奥司他韦胶囊组,连花清瘟胶囊组,SWES低、高剂量组,每组8只。各组小鼠连续灌胃相应药物7 d,除正常对照组外,各组小鼠于给药第4天给药前2 h经鼻滴入H_(3)N_(2)型甲型流感病毒原液(60μL/只)进行感染,感染后72 h,检测各组小鼠肺脏、胸腺、脾指数,光镜观察各组小鼠肺组织病理变化,采用ELISA法检测各组小鼠肺脏中白介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,采用半定量PCR检测各组小鼠肺组织病毒载量;采用免疫组化法检测肺脏组织α7nAchR表达量;采用Western blot法检测肺脏组织P65、p-P65蛋白表达量。结果:与模型对照组比较,SWES高剂量组能显著减轻小鼠感染甲流病毒后的肺组织病理学改变,降低肺组织评分(P<0.05),显著降低感染小鼠肺组织病毒载量(P<0.01),以及小鼠肺脏中IL-6、IL-1β、TNF-α的含量(P<0.01);SWES低、高剂量组能显著升高甲流病毒感染肺α7nAchR的表达(P<0.05),显著降低甲流病毒感染肺组织p-P65蛋白的表达(P<0.05)。结论:SWES具有抗甲流病毒的药效作用,其抗甲流病毒感染的作用机制可能与其调节肺组织a7nAchR/P65信号通路,减少肺组织炎症因子(IL-6、IL-1β)的分泌有关。

基于1H-NMR代谢组学的豨莶草水洗脱部位致大鼠肺损伤作用机制分析

目的:应用代谢组学分析豨莶草水洗脱部位(SWES)致大鼠血清和肺脏中内源性代谢产物的动态变化,探讨其造成肺损伤的可能作用机制,寻找肺损伤的敏感标志物。方法:将SD大鼠随机分为3组,即正常组(生理盐水)和SWES高、低剂量组(给药剂量分别为0.500,0.125 g·kg^-1·d^-1),给药4周,停药2周,检测大鼠体质量,并对肺脏组织进行病理学检查。采用血清和肺脏样本进行核磁共振氢谱(1 H-NMR)检测,运用偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对大鼠体内代谢产物的变化进行分析。结果:SWES高剂量组大鼠出现肺脏炎症,停药2周后呈可逆性改变。SWES高剂量组与正常组代谢谱差异区分显著。血清和肺脏中共鉴定出11个差异性代谢产物,其中血清4个(乙酸、氧化三甲胺、甘氨酸、肌肉肌醇),肺脏9个(乳酸、乙酸、磷脂酰胆碱、丙酮酸、二甲胺、谷氨酸、甘油磷酸胆碱、甘氨酸、黄嘌呤)。肺损伤涉及丙酮酸代谢、谷氨酸代谢等通路的紊乱。停药后肺脏中大多数差异代谢产物水平显著回调,与病理检测相一致。结论:SWES造成的损伤器官之一为肺脏,肺损伤呈可逆性改变,肺损伤机制与能量代谢和氧化应激反应有关。

豨莶草水洗脱部位对人肺纤维细胞的毒性与药效作用

目的:检测不同浓度豨莶草水洗脱部位(SWEF)对MRC-5人肺纤维细胞的毒性作用及对MRC-5细胞α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)表达与炎症因子的影响,从而发现豨莶草毒效与药效作用物质基础。方法:以MRC-5细胞为研究对象,采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法结合流式细胞术、台盼蓝染色判定SWEF(1,6,10,20,50 g·L^(-1))对MRC-5细胞的毒效作用;通过测定沉默基因前后α7nAChR的表达及炎症因子水平的变化探讨SWEF对MRC-5细胞的药效作用。结果:SWEF(≥6 g·L^(-1))显著降低MRC-5细胞的存活率(P<0.01),促进MRC-5细胞凋亡与坏死(P<0.01),其半数抑制浓度(IC50)为6.03 g·L^(-1);MRC-5细胞α7nAChR表达与炎症因子检测显示SWEF含有α7nAChR激动剂样物质,该物质可增高α7nAChR基因和蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),降低炎症因子水平(P<0.05,P<0.01),SWEF下调炎症因子的作用可能与其上调α7nAChR mRNA表达有关,二者呈负相关(P<0.01)。结论:SWEF(≥6 g·L^(-1))对MRC-5细胞具有显著的毒性作用,药效作用研究证实SWEF含有α7nAChR激动剂样物质,该物质可增高α7nAChR的表达,降低炎症因子水平,推测过量的α7nAChR激动剂样物质可能为豨莶草的毒性成分之一。

六味地黄汤有效部位对糖尿病脑病大鼠海马组织病理改变的影响

目的:通过观察六味地黄醇提水洗脱部位对糖尿病脑病模型大鼠海马组织氧化应激及神经营养因子表达的影响,评价其对模型大鼠的脑保护作用。方法:雄性SD大鼠,除空白组外其余高糖高脂饲料喂养两个月,腹腔注射STZ 40mg/kg建立糖尿病脑病模型,模型成功后随机分成模型组,六味地黄醇提水洗脱部位低(2.33 g/kg)、高剂量组(9.32 g/kg)、罗格列酮组(5mg/kg),给药一个月后,大鼠称重、眼眶静脉取血,检测血糖。部分动物处死取脑制备海马组织匀浆检测CAT、LPO、iNOS、Na+-K+-ATP酶;其余动物灌注取脑做脑组织病理切片,进行BDNF、IGF-1免疫组化染色,观察海马组织神经营养因子表达情况。结果:六味地黄醇提水洗脱部位可使模型大鼠体重增加,血糖降低(p<0.05或p<0.01);增强CAT、Na+-K+-ATP酶活力,降低iNOS及LPO水平;免疫组化染色显示海马DG颗粒细胞层神经营养因子BDNF和IGF-1表达增多。结论:六味地黄醇提水洗脱部位可通过降血糖,抗氧化,增强神经营养因子表达等途径改善糖尿病模型大鼠海马组织病变,具有一定脑保护作用。